茶多酚对酒精诱导的小鼠肝脂质过氧化和血清ALT活性变化的影响

目的 :研究茶多酚 (TP)对酒精性肝损伤的防治作用。方法 :通过离体和整体实验 ,采用分光光度法和血清生化检测法 ,检测肝组织脂质过氧化产物丙二醛 (MDA)水平和血清谷丙转氨酶 (ALT)的活性。结果 :离体实验中 ,TP +酒精组肝MDA水平明显低于生理盐水 +酒精组 (P <0 0 1 )。整体实验中 ,TP +酒精组小鼠肝脏MDA水平和血清中ALT活性均显著低于生理盐水 +酒精组 (P <0 0 5)。此外 ,灌酒精 1h后再给TP组 ,小鼠肝脏MDA含量也明显低于酒精 +生理盐水组 (P <0 0 1 )。结论 :茶多酚能抑制酒精引起的小鼠肝组织MDA水平和血清ALT活性的升高 。

人参对高脂血症小鼠肝脂质代谢紊乱的影响

目的:观察人参对高脂血症小鼠的治疗作用。方法:以高脂饲料复制小鼠高脂血症模型,观测人参对高脂血症小鼠血脂、肝功能及肝脏组织病理学的影响。结果:人参低、中、高剂量能显著降低高脂血症小鼠肝系数(P<0.05);人参低、高剂量能显著降低高脂血症小鼠血清ALT含量(P<0.05);人参中剂量能显著降低高脂血症小鼠LDL-C含量(P<0.05);人参低剂量能显著降低高脂血症小鼠血清TG含量,人参低、中剂量能显著升高高脂血症小鼠HDL-C含量(P<0.05);人参各剂量均能使肝组织中脂变肝细胞数目明显减少,胞浆内脂滴数目减少或消失,无明显炎细胞坏死或浸润。结论:人参具有降血脂及改善肝功能的作用,对脂质代谢紊乱有良好的调节作用。

土鳖虫粉预防给药对高脂血症大鼠血脂、肝脂质及全血粘度的影响

土鳖虫（Eupolyphage sinensis）是活血化瘀中药,临床用其单方或复方治疗血瘀型高脂血症有一定的疗效。本实验研究土鳖虫粉预防给药对实验性高脂血症大鼠血脂、肝脏脂质以及血液流变学指标的影响,现报告如下。材料和方法1 材料1.1 动物及分组从中国科学院动物所购入雄性 Wistar 大鼠,体重为129.6±14.3g（±s）。按体重随机分为5组,每组动物14～16只。正常对照组喂普通饲料,诱发对照组喂诱发饲料。土鳖虫大、小剂量组在喂诱发饲料同时。分别以4.5g·kg-1·d-1

肝脂质代谢与动脉粥样硬化治疗

动脉粥样硬化是一种涉及脂质代谢紊乱和慢性炎症状态的复杂的病理过程。作为人体最大的脂质代谢器官,肝通过影响脂肪生成、分解以及血清脂蛋白的摄取和分泌在脂质代谢中起着重要的作用。进一步的研究集中在以改善肝脂质代谢为基础,开发具有降脂、抗炎和抗氧化活性的新的策略上。在本综述中,探讨了以调控肝脂质代谢为靶点的动脉粥样硬化治疗新措施,包括新的生物标志物、治疗靶点、中药和天然膳食补充剂。

风柜斗草提取物通过调控脂质代谢改善小鼠肝脂质沉积症

旨在探究风柜斗草提取物(Sarcopyramis napalensis Wall extract,SNE)对蛋氨酸胆碱缺乏(MCD)饮食诱导的肝脏脂质沉积的作用与机制。本研究将60只雄性C57BL/6小鼠随机分为6组,每组10只,设置MCS组(MCD饲料的对照饲料组)、MCS+风柜斗草提取物组(400 mg·(kg·bw)^(-1))、MCD组、MCD+风柜斗草提取物低、中、高剂量组(100、200、400 mg·(kg·bw)^(-1)),造模及药物干预6周。进行肝组织切片HE染色、天狼猩红染色,检测血清碱性磷酸酶(AKP)、谷草转氨酶(AST)、谷丙转氨酶(ALT),肝组织谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)、超氧化物歧化酶(SOD)活力水平及丙二醛(MDA)含量以评估肝脂质沉积、肝纤维化以及肝抗氧化情况。使用Western blot技术检测腺苷酸激活蛋白激酶(AMPK)蛋白的激活情况,使用qRT-PCR技术检测固醇调节元件结合蛋白-1C(SREBP-1c)、肝型脂肪酸结合蛋白(L-FABP)、脂肪酸转运蛋白-3(FATP-3)、脂肪酸转运蛋白-4(FATP-4)、细胞间黏附分子-l(ICAM-1)、血管细胞黏附分子-l(VCAM-1)、基质金属蛋白酶-2(MMP-2)、组织金属蛋白酶抑制剂-2(TIMP-2)mRNA表达水平,同时采用LC-MS/MS技术进行肝组织非靶向脂质组学分析。结果表明,给予200、400 mg·(kg·bw)^(-1)剂量的风柜斗草提取物时均可显著改善MCD饲料饲喂的小鼠肝脂肪变性,减少炎症簇以及肝纤维化程度。给予风柜斗草提取物100、200、400 mg·(kg·bw)^(-1)时均可显著降低MCD饲料饲喂的小鼠血清中ALT和AKP的活力以及肝组织中MDA的含量,显著提高小鼠肝中GSH-Px的活力。Western blot及qRT-PCR检测结果显示,风柜斗草提取物显著激活MCD饲料饲喂的小鼠肝组织AMPK;显著抑制MCD饲料饲喂的小鼠肝组织SREBP-1c、L-FABP、FATP-3、FATP-4、ICAM-1、VCAM-1、MMP-2、TIMP-2的mRNA表达水平。肝脂质组学检测结果显示,风柜斗草提取物显著降低MCD饲料饲喂的小鼠肝中甘油三酯(TG)、磷脂酰甘油(PG)以及神经酰胺(Cer)的相对含量;显著提高鞘磷脂(SM)以及辅酶Q9相对含量。结果提示,风柜斗草提取物可通过AMPK/SREBP-1c途径抑制TG合成,以及通过抑制FATP与L-FABP表达来减少肝对脂肪酸的摄取,从而改善MCD饲料饲喂的小鼠肝脂肪变性;通过提高MCD饲料饲喂的小鼠肝组织中SM和辅酶Q9相对含量以及降低Cer相对含量,改善肝细胞氧化应激损伤情况,进而改善MCD饮食诱导的小鼠肝炎症和纤维化,最终达到改善肝脂质沉积症的作用。

测量方法对脂肪肝动物模型肝脂质测量结果的影响及其肝脂质沉积成分分析

目的找出合理的肝脂质测量方法并分析大鼠肝脂质沉积的主要成分。方法雄性W istar大鼠分为对照组、高脂配方1(HFD1:加25%猪油)组,高脂配方2(HFD2:加25%猪油及2%胆固醇)组,12周后测血及肝脂质并切片观察肝脂质沉积。两种方法测肝脂质:(1)肝匀浆,离心,取上清液按试剂盒说明分光光度法测量;(2)肝匀浆,加反应液,离心,分光光度法测量。结果两模型组血液及肝总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)及低密度脂质蛋白胆固醇明显升高,高密度脂蛋白胆固醇明显降低;两模型组血脂成分无差异,方法一中两组间肝脂质成分也无差异;方法二中HFD2组肝TC含量明显高于HFD1组,并与切片观察肝脂质沉积程度相一致;方法二测得肝TC、TG含量明显高于方法一。结论方法二是肝TC、TG测量合理的方法,大鼠脂肪肝中脂质沉积的主要成分是TC不是TG。

浓香型白酒和酒精差异性影响肝脂质水平研究

酒是一种与人们生活密切相关的嗜好性发酵食品,然而长期大量饮酒,容易造成肝内脂肪的聚积并导致脂肪肝等酒精性肝病的发生.基于小鼠肝实质细胞(AML12)的脂质聚集模型比较3种四川浓香型白酒和纯酒精对肝细胞脂质水平的影响,应用顶空固相微萃取气质联用分析3种浓香型白酒的风味物质,并用统计学方法对主要挥发性成分差异进行比较.结果显示:白酒B(含0.5%酒精)亚组脂质水平显著低于对照组、纯酒精亚组和白酒A亚组.白酒A和B中主要挥发性风味物质差异的统计学分析显示:白酒B处理的脂质水平与白酒A的差异可能是由两种或以上主要风味物质组合(可能也包括相对浓度较高的非挥发性物质)造成的.

槲皮素通过上调脂解和脂噬途径改善肝细胞脂质蓄积

目的 明确槲皮素(quercetin, QUE)通过调控脂解及脂噬途径改善肝细胞脂质蓄积的效应及作用机制。方法 利用棕榈酸(palmitic acid, PA)诱导人正常HHL-5肝细胞株(human hepatocyte cell line 5, HHL-5)建立脂肪变性肝细胞模型,使用不同浓度槲皮素(5、10、20和40μmol/L)干预脂肪变性的HHL-5细胞24 h,实验分为(n=3):对照组、PA组、PA+QUE5组、PA+QUE10组、PA+QUE20组、PA+QUE40组。为明确自噬对QUE作用的影响,利用3-甲基腺嘌呤(3-methyladenine, 3-MA)阻断自噬,将HHL-5细胞分为(n=3):对照组、PA组、PA+QUE40组、3-MA组、PA+3-MA组和PA+3-MA+QUE40组。2种不同实验分组均检测细胞内甘油三酯含量、脂滴蓄积情况、脂解和脂噬相关分子表达情况及共定位水平、自噬底物P62的表达水平。结果 与对照组比较,PA组肝细胞的甘油三酯含量和脂质蓄积程度明显升高,脂解相关分子脂肪甘油三酯脂肪酶(adipose triglycerides lipase, ATGL)和比较基因识别因子58(comparative gene identification-58,CGI58),以及脂噬相关分子Ras相关蛋白7(Ras-related protein 7, RAB7)和微管相关蛋白1B轻链3(microtubule-associated protein 1 light chain 3, LC3β)的蛋白表达水平、平均荧光强度及共定位程度均明显降低,而P62表达增强(P<0.05)。与PA组相比,PA+QUE40组的甘油三酯含量和脂质蓄积程度显著降低,脂解和脂噬相关分子的蛋白表达水平、平均荧光强度及共定位程度也明显增加,而P62明显降低(P<0.05)。在脂肪变性肝细胞中加入3-MA抑制自噬后,QUE对脂肪变性肝细胞的脂质蓄积的改善作用以及对脂解和脂噬相关分子的调控作用基本被抵消。结论 槲皮素可促进脂解和脂噬途径相关分子的表达及相互作用,从而减轻脂肪变性HHL-5细胞内的脂质蓄积,但以上作用可被自噬阻断剂3-MA削弱。

α-硫辛酸对镉致大鼠肝脏脂质过氧化损伤保护作用试验

探讨α-硫辛酸(α-LA)对镉致肝组织脂质过氧化损伤的保护作用。将25只雄性大鼠随机平分成5组:对照组,单纯染镉组(1.5mg CdCl2/kg),低、中、高剂量α-LA干预组饲喂(25、50、100mgα-LA/kg+1.5mg CdCl2/kg)。每天1次,连续染毒7d后,测定血清丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天门冬氨酸氨基转移酶(AST)和碱性磷酸酶(ALP)活性及肝组织中丙二醛(MDA)含量、超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)和过氧化氢酶(CAT)活性。结果表明,单纯染镉组的血清ALT、AST及ALP活性极显著高于对照组(P<0.01),各剂量α-LA干预组低于单纯染镉组,以高剂量干预组效果最好(P<0.01);单纯染镉组肝组织MDA量高于对照组,而SOD、GSH-Px及CAT活性极显著低于对照组(P<0.01),与单纯染镉组相比,各剂量α-LA干预组MDA量明显降低,而SOD、GSH-Px及CAT活性升高,以高剂量干预组效果最好(P<0.01),且均呈剂量-效应关系。表明α-LA对镉致大鼠肝脏脂质过氧化损伤具有一定的保护作用。

内质网应激与非酒精性脂肪性肝病

经典的非酒精性脂肪性肝病(NAFLD)的发病机制是"二次打击"学说,但已不能完全解释由肝细胞脂质堆积发展为脂肪性肝炎、肝纤维化等NAFLD进程。近年来提出的"多次打击"学说强调了内质网应激(ERS)在NAFLD发生发展中的重要作用。内质网是细胞内蛋白质、脂质合成的主要场所,内质网功能失衡会引发ERS,造成肝脂质代谢紊乱和肝细胞凋亡,最终导致NAFLD的发生发展。本文综述了ERS及其与非酒精性肝脂质堆积、脂肪性肝炎和肝细胞凋亡的相关性研究进展。

槲皮素改善肝细胞脂质堆积作用的实验研究

目的探讨槲皮素(quercetin,Que)对肝细胞脂质堆积细胞模型的作用。方法将培养细胞分为空白对照组、模型组、阳性药小檗碱(10-5mol.L-1)、槲皮素高(10-4mol.L-1)、中(10-5mol.L-1)、低(10-6mol.L-1)组。正常对照组细胞仅用培养液培养;模型对照组在吸弃旧培养液后,换上脂质堆积诱导液诱导;阳性药及给药组分别换上脂质堆积诱导液,同时给予阳性药小檗碱(10-5mol.L-1)、槲皮素高(10-4mol.L-1)、中(10-5mol.L-1)、低(10-6mol.L-1)剂量;上述各组细胞继续培养48 h,进行油红染色,并在光镜下观察脂质堆积细胞病理变化;测定各组细胞吸光度的变化,计算抑制率。为了验证油红O实验的结果,同时测定了细胞内甘油三酯的水平。在诱导48 h后,收集细胞,裂解细胞,并测定细胞内的甘油三酯水平。结果模型对照组与空白对照组比较,其抑制率具有非常显著性差异(P<0.001),小檗碱及槲皮素高、中剂量与模型组比较具有非常显著性差异(P<0.001),槲皮素高、中剂量对脂质细胞的抑制率与阳性药相当,分别为60.7%、58.3%及55.2%,低剂量组与对照组比较不具有显著性差异(P>0.05)。经过诱导后,模型对照组细胞中的甘油三酯含量为正常对照组细胞的3倍。而在给予小檗碱和槲皮素处理后,可明显减少肝细胞中堆积的甘油三酯(P<0.05)。肝细胞中甘油三酯的变化与油红O染色实验的结果一致。结论槲皮素对非酒精性脂肪肝细胞模型具有降脂作用,并呈剂量依赖性。

血管紧张素Ⅱ灌注在脂质肝损伤中的作用研究

目的:通过制备血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)灌注模型,观察AngⅡ在脂质肝损伤中的作用及其可能的机制。方法:将C57BL/6小鼠随机分为对照组、AngⅡ灌注组及AngⅡ灌注加AngⅡ1型受体(AT1R)基因敲除组。采用HE、菲律宾、油红0染色以及胞内胆固醇定量测定法观察肝细胞内脂质沉积情况;免疫组化、蛋白质印迹法检测低密度脂蛋白受体(LDLR)、固醇调节元件结合蛋白2(SREBP-2)及其裂解激活蛋白(SCAP)表达水平。结果:AngⅡ刺激增加C57BL/6小鼠肝细胞内脂质沉积,且上调LDLR、SREBP-2和SCAP的表达。而AT1R基因敲除组C57BL/6小鼠肝细胞内脂质沉积明显减少,LDLR通路的相关蛋白表达也显著下调。结论:AngⅡ通过AT1R诱导LDLR负反馈调节失调,进而增加胆固醇内流、肝细胞内脂质过度沉积,介导脂质肝损伤的发生。

口服水飞蓟素固体脂质纳米粒（SM-SLN）肝靶向性的动物实验研究

采用冷却-匀质法制备了平均粒径为170nm的水飞蓟素固体脂质纳米粒(SM-SLN),用其给小鼠灌胃后,采用高效液相法(HPLC)测定小鼠血浆和各脏器中的药物浓度,以相对摄取率(re)、靶向效率(te)和峰浓度比(Ce)三个指标定量地评价了SM-SLN的肝靶向性.结果表明,SM-SLN组中的肝脏相对于血浆和其它脏器的te值均大于1,且肝脏中的re值(7.50)、Ce值(8.12)均为最大值,说明SM-SLN具有良好的肝靶向性.SLN可以作为治疗肝脏疾病药物的良好肝靶向载体.

中医补益方剂对小鼠肝的抗脂质过氧化作用观察

许多学者认为,能降低体内自由基或抑制体内脂质过氧化作用的药品或食品均有抗衰老作用。但自由基不稳定,直接测定相当困难,一般以测定脂质过氧化物生成的丙二醛间接反映自由基水平较为方便。我们通过实验证明中医补肾健脾方剂有显著降低肝脂质过氧化作用,现报告如下。一、材料和方法从中医典藉“普济方”和“圣济总录”中选长生不老丹,黄精地黄丸及益肾抗老方3种补益方剂,按传统煎煮法熬成不同浓度的汤药,供小鼠饮用。

肝靶向十六酸拉咪呋啶酯固体脂质纳米粒抗乙肝病毒的研究

目的:探讨肝靶向十六酸拉咪呋啶酯固体脂质纳米粒抗HBV的作用.方法:以半乳糖苷为载体,构建十六酸拉咪呋啶酯固体脂质纳米粒(PLN-LAGS),将其靶向导入2.2.15细胞,共同温育10d后,观察对细胞的毒性作用;同时将LAP-GSLN尾静脉注入小鼠体内,RP-HPLC测定拉米呋定(lamivudine,LA)在血清、肝、肾、肺及脾中的分布,用ELISA和荧光定量PCR检测多个时期培养上清中HBsAg,HBeAg和HBVDNA.结果:LAP-GSLN在肝脏中具有靶向性,LAP-GSLN组肝脏的含药量为LA组的3.3倍;导向后4d出现对HBV-DNA的抑制,在药物浓度10.0mg/L时LAP-GSLN组HBVDNA<1.11×107拷贝/L,而单纯LA组则为5.06×109拷贝/L;6d出现对HBsAg,HBeAg抑制,在药物浓度0.01mg/L时,LAP-GSLN,LA组对HBsAg,HBeAg抑制率分别为52.9%,53.9%;32.2%,31.1%;在药物浓度10.0mg/L时,LAP-GSLN,LA组对HBsAg,HBeAg抑制率分别为67.2%,69.0%;45.1%,41.0%.未发现对2.2.15细胞的毒性作用.结论:小剂量半乳糖介导十六酸拉米呋定脂质纳米粒能快速有效的抑制HBV抗原表达和DNA复制.

溶酶体相关膜蛋白3过表达促进肝细胞脂质沉积

目的探讨溶酶体相关膜蛋白3(lysosome associated membrane protein 3,LAMP3)对肝细胞脂质代谢的作用。方法以肝癌细胞系Huh7为研究对象,利用qRT-PCR及Western blot法检测游离脂肪酸(free fatty acids,FFAs)0.4 mmol/L处理后肝细胞LAMP3表达变化;过表达LAMP3后,分别使用油红染色及甘油三酯检测试剂盒检测肝细胞内脂滴及甘油三酯沉积情况;采用ATP及β-羟基丁酸检测试剂盒检测细胞内ATP及β-羟基丁酸含量变化;过表达LAMP3,使用qRT-PCR、Western blot法检测脂质合成相关基因PPARγ与SCD-1及脂质分解相关基因CPT1A与PGC-1α表达变化。结果 FFAs处理后肝细胞Huh7中LAMP3表达显著上调(P<0.05);过表达LAMP3可显著促进肝细胞内脂滴和甘油三酯的沉积(P<0.05);过表达LAMP3对肝细胞内ATP及β-羟基丁酸含量的影响差异无统计学意义(P>0.05);过表达LAMP3可促进PPARγ及SCD-1表达(P<0.05),但对CPT1A、PGC-1α表达的影响差异无统计学意义(P>0.05)。结论 LAMP3可通过调控脂肪合成促进肝细胞内脂质沉积。

不同植物油与猪油搭配食用对肝功能、肝脏抗氧化能力及肝脂的影响

目的:模拟观察我国居民将植物油与猪油搭配食用的习惯,探讨玉米与猪油调和油,大豆与猪油调和油在两种不同摄入水平下对肝功能、肝脏抗氧化能力及肝脂的影响。方法:将40只8周龄雄性C67BL/6J小鼠随机均分为4组,按人均理想用油25g/d和目前中国居民实际人均用油42g/d两个水平,分别在其基础日粮下添加3.8%玉米油与猪油的调和油(CR)、6.5%玉米油与猪油的调和油(CA)、3.8%大豆油与猪油的调和油(SR)、6.5%大豆油与猪油的调和油(SA)。8周后进行称重,取血,采集肝脏。结果:CR与SR比较,肝指数、谷草转氨酶(AST)、谷丙转氨酶(ALT)、碱性磷酸酶(ALP)活性显著降低;SA相比CA显著上升AST活性;无论在推荐摄入水平还是实际摄入水平,玉米调和油相比大豆调和油能有效降低肝脏中甘油三酯(TG)水平,并显著提升肝脏抗氧化酶活性,降低丙二醛(MDA)的含量。结论:与大豆调和油比较,玉米调和油有明显的保护肝功能,增强肝脏抗氧化能力,降低过氧化损伤,并能降低肝脂质沉积。