兔肝脏保存─再灌注损伤模型的建立及评价

作者应用导管将受体腹主动脉血液分流至供肝，建立了兔肝脏保存一再灌注损伤模型。并对再灌注前、后供肝及受体肝脏的组织结构及功能、再灌注后供肝血流量及受体血流动力学变化进行了动态观察。结果表明，该模型具有良好的稳定性及重复性，且能准确地反映肝移植时供肝保存一再灌注损伤的病理生理过程。

SX-1液对肝脏保存效果的形态学观察

目的探讨新研制的肝脏灌注保存液SX-1液对保存肝脏的形态学影响。方法 使用SX-1液、威斯康星大学保存液(UW液)和高渗枸橼酸盐腺嘌呤液(HC-A液)保存大鼠肝脏2h、8h、24h后行大鼠原位肝移植(OLT),于移植后6h处死大鼠提取肝脏组织在光镜进行形态学观察,比较各组保存液对肝脏的保存效果。另外,取SX-1液组保存的肝脏置透射电镜下进行形态学观察。结果 2h组中,3种不同保存液组间比较无明显差别;8h组中,SX-1液组在肝细胞形态学改变的程度和范围上稍比UW液组明显,但明显轻于HC-A液组;24h组中,3组间无明显差别。透射电镜观察SX-1液所保存的肝脏超微结构,显示保存8h范围内肝脏的基本结构形态未见明显毁灭性的改变。结论 在8h保存范围内,SX-1液可以代替UW液和HC-A液。

药物在肝脏保存中的作用

药物在肝脏保存中的作用彭兵樊萍综述沈文律吴言涛审校华西医科大学附属第一医院外科随着对肝脏保存／再灌注损伤发生机制认识的深入研究，逐步认识到许多药物通过各自不同的药理机制有效地防止或减轻肝脏保存／再灌注损伤，改善移植后肝功能，提高存活率。药物在肝脏的保...

他罗利姆对肝脏保存再灌注损伤中氧自由基作用的影响

目的 探讨氧自由基在肝脏保存再灌注损伤 (HPRI)中的作用及FK5 0 6的保护作用。方法 应用离体大鼠肝脏保存再灌注模型 ,观察肝组织超氧化物歧化酶 (SOD)活性 ,丙二醛 (MDA)含量 ,灌注液天冬氨酸转氨酶 (AST)活性 ,肝细胞形态学变化以及他罗利姆 (FK5 0 6 )对上述指标的影响。结果 HPRI时 ,SOD活性显著下降 (P <0 0 5 ) ,AST活性和MDA含量明显升高 (均P <0 0 5 ) ,肝细胞形态发生异常变化 ;使用FK5 0 6后 ,上述指标的异常变化均明显减轻 ,其差异有显著性 (P <0 0 5 )。结论 氧自由基是导致HPRI的重要因素 ,FK5 0 6能清除氧自由基 ,可以减轻HPRI。

他克莫司在大鼠肝脏保存中的作用

目的了解他克莫司对肝脏缺血再灌注损伤的保护作用。方法在供肝保存期间向保存液中加入他克莫司,检测保存12 h后的肝脏能量物质负荷、肝移植术后受体大鼠血清中的肝酶浓度以及胆汁分泌情况。结果保存液中加入他克莫司后,肝组织在保存期间的能量物质消耗明显小于对照组,移植术后受体大鼠血清中ALT和LDH含量明显较对照组为低,胆汁分泌量则明显高于对照组,差异均具有显著性(P<0.05)。结论他克莫司用于肝脏保存能够有效地减轻缺血再灌注损伤,提高肝细胞能荷,改善移植术后的肝脏功能。

氧自由基在肝脏保存再灌注损伤中的作用

目的 探讨氧自由基在肝脏保存再灌注损伤 (HPRI)中的作用。方法 应用离体大鼠肝脏保存再灌注模型 ,观察超氧化物歧化酶 (SOD)、丙二醛 (MDA) ,谷草转氨酶 (AST)含量以及肝细胞形态学态化。结果 HPRI时 ,SOD活性显著下降 (P <0 0 5 ) ,MDA含量和AST活性明显升高 (P <0 0 5 ,P <0 0 5 ) ,肝细胞形态发生异常变化。

FK506对肝脏保存再灌注中Bcl-2mRNA、BaxmRNA表达及肝细胞凋亡的影响

目的探讨肝脏保存再灌注中Bcl-2mRNA、BaxmRNA表达，肝细胞凋亡以及FK506的作用。方法建立离体大鼠肝脏保存再灌注模型，采用逆转录一多聚酶链反应(RT-PCR)和细胞凋亡原住末端标记技术(TUNEL)，检测不同保存时间Bcl-2mRNA、BaxnRNA表达，肝细胞凋亡以及FK506对上述指标的影响。结果FK506保存组16、24、32h Bcl-2mRNA表达明显高于对照组(P<0．05)；BaxmRNA表达明显低于对照组(P<0．05)；FK506保存组肝细胞凋亡指数明显低于对照组(P<0．05)。结论FK506能使肝脏保存再灌注中Bcl-2mRNA表达增强，BaxmRNA表达减低，肝细胞凋亡减少。FK506对肝脏保存再灌注损伤具有防治作用。

肝脏保存装置

英国牛津大学研制成功一种能模拟肝脏体内生存环境以保存离体肝脏存活的装置，它为肝移植手术赢得更多时间，有助于提高移植成功率。此前，肝移植时，对离体肝脏需低温冷藏以减缓其新陈代谢，不仅易造成肝脏损伤，而且保存时间相对较短，只有几个小时。由于待移植的肝脏须经过种种检查测试，对接受移植的患者还要实施若干处理，使其进入接纳新肝脏的状态，因此在肝脏取出后需尽量延长保存时间，它对于成功移植十分重要。

氧自由基在肝脏保存再灌注损伤中的作用及丹参的保护作用

目的 探讨氧自由基在肝脏保存再灌注损伤 (hepaticpreservationreperfusioninjury ,HPRI)中的作用及丹参的保护作用。方法 建立大鼠肝脏保存再灌注模型 ,分别检测肝脏保存 0、8、1 6、2 4、32h组在不同灌注时间点组织超氧化物歧化酶 (SOD)、丙二醛 (MDA)和灌注液谷草转氨酸(AST)的变化 ,并观察肝细胞形态学的改变。结果 与正常组 (保存 0h组 )比较 ,保存 1 6、2 4、32h组不同再灌注时点SOD显著降低 (P <0 .0 5) ,而MDA和AST均明显升高 (P <0 .0 5) ,肝细胞形态也发生异常改变 ;应用丹参组 ,SOD则明显升高 ,MDA和AST明显下降 ,与对照组比较 ,差异均有显著性(P <0 .0 5)。结论 氧自由基是导致HPRI的重要因素 ,丹参能清除氧自由基 。

大鼠肝脏保存再灌注时羟自由基与细胞凋亡、Bcl-2蛋白表达的关系及丹参的保护作用

目的 阐明羟自由基 (·OH)与细胞凋亡、Bcl 2蛋白表达在大鼠肝脏不同保存时相再灌注过程中的变化规律及相互关系 ,探讨丹参对肝脏保存再灌注损伤的影响。方法 以大鼠肝脏非循环灌注为模型 ,用高效液相色谱 (HPLC)紫外检测法测定·OH生成物二羟苯甲酸 (DHBA)含量 ,用原位末端标记法及电子显微镜观察细胞凋亡 ,用免疫组织化学法检测Bcl 2蛋白表达 ,观察了正常组 (未保存 )、对照组 (乳酸林格液即LR液 )及丹参组 (LR液 +丹参 )保存鼠肝不同时相的效果。结果 随着保存时间延长 (18h内 ) ,·OH水平及细胞凋亡指数 (AI)呈进行性升高 ,且两者呈显著正相关 (r =0 81) ,相同保存时间丹参组明显低于对照组 (P =0 0 4) ;而Bcl 2蛋白表达指数 (BI)呈进行性降低 ,BI与·OH水平及AI呈显著负相关 (r =- 0 84) ,相同保存时间丹参组BI显著高于对照组 (P =0 0 3)。结论 ·OH及细胞凋亡同时参与肝脏保存再灌注损伤 ,丹参对该损伤具有明显的保护作用 ,其作用机理可能主要与抗氧自由基、抑制细胞凋亡及提高Bcl 2蛋白表达作用有关。

FK506对肝脏保存再灌注中Bcl-2mRNA、Bax mRNA表达及肝细胞凋亡的影响

目的 探讨肝脏保存再灌注中Bcl 2mRNA、BaxmRNA表达 ,肝细胞凋亡以及FK50 6的作用。方法 建立离体大鼠肝脏保存再灌注模型 ,采用逆转录 多聚酶链反应 (RT PCR)和细胞凋亡原位末端标记技术 (TUNEL) ,分别检测肝脏保存 0、8、1 6、2 4、32h组Bcl 2mRNA、BaxmRNA表达 ,肝细胞凋亡以及FK50 6对上述指标的影响。结果 FK50 6保存组 1 6、2 4、32hBcl 2mRNA表达明显高于对照组 (P <0 .0 5) ;BaxmRNA表达明显低于对照组 (P <0 .0 5) ;FK50 6保存组肝细胞凋亡指数明显低于对照组 (P <0 .0 5)。结论 FK50 6能使肝脏保存再灌注中Bcl 2mRNA表达增强 ,BaxmRNA表达减低 ,肝细胞凋亡减少。FK50 6对肝脏保存再灌注损伤具有防治作用。

自制KYL液和UW液保存大鼠肝脏效果的比较

目的比较自制的KYL液和UW液对大鼠肝脏的保存效果。方法采用大鼠肝脏非循环离体灌注模型(noncirculatedisolatedperfusionofratliver),随机以KYL液和UW液对大鼠肝脏保存0、4、8、16、24和48h,记录胆汁流出量,测定灌注流出液天冬氨酸转氨酶(AST)、丙氨酸转氨酶(ALT)、乳酸脱氢酶(LDH)和氧自由基代谢产物丙二醛(MDA)及超氧化物歧化酶(SOD)含量,检测肝细胞内钙离子浓度,观察肝脏组织形态学变化。同时设生理盐水保存阴性对照组,了解器官保存液对大鼠肝脏有无保护作用。结果KYL液保存的大鼠肝脏在保存16h以内各时相胆汁流出量均较UW液保存者高(P<0.01),灌注流出液AST、ALT和LDH含量与UW液保存者相近,肝细胞内钙离子浓度较UW液保存者低(P<0.01);KYL组保存24及48h时,MDA含量低于UW组,SOD含量高于UW组(P<0.01);光、电镜观察两者形态学变化基本一致。两组所有指标均较生理盐水保存组好,提示KYL保存与UW液一样对大鼠肝脏具有保护作用。结论自制的KYL液对大鼠肝脏的保存效果总体上与UW液相当,在再灌注后肝细胞胆汁分泌方面和钙拮抗方面略优于UW液,而在防止细胞水肿方面较UW液稍差。

大鼠离体肝脏保存再灌注后肝脏中ICAM-1mRNA的表达及丹参对其表达的影响

目的探讨大鼠离体肝脏保存再灌注后肝脏组织中细胞间黏附分子-1(ICAM-1)mRNA的表达变化及丹参对其表达的影响。方法选取健康Wistar雄性大鼠54只,用完全随机方法选6只大鼠作为正常组,切除肝脏后立即灌注;随机选24只大鼠作为对照组,切除肝脏后置入4℃UW液中分别保存8、16、24、32 h后再行肝脏循环再灌注;余下的24只作为实验组,切除肝脏后置入含丹参的4℃UW液中分别保存8、16、24、32 h后再行肝脏循环再灌注。应用RT-PCR方法检测各组大鼠离体肝脏保存再灌注后肝脏组织中ICAM-1 mRNA表达。结果正常组肝脏中的ICAM-1 mRNA表达为3.61±1.56,对照组和实验组8、16、24、32 h时肝脏中ICAM-1 mRNA表达分别为15.71±1.78、33.70±3.35、45.83±4.37、66.98±5.89和11.69±1.25、16.55±1.37、24.73±2.74、32.65±3.39,对照组和实验组各时相均分别明显低于正常组(P<0.05),且均随保存时间延长,ICAM-1 mRNA表达逐渐增加(P<0.05),实验组16 h后ICAM-1 mRNA表达均分别明显低于对照组相应时相(P<0.05)。结论丹参能够降低离体肝脏保存再灌注后肝脏组织中ICAM-1 mRNA表达,对肝脏保存再灌注损伤可能具有防护作用。

FK506对大鼠离体肝脏保存再灌注IL-10mRNA表达的影响

IL-10是一种抗炎细胞例子，在肝脏缺血再灌注损伤中的保护作用越来越多的引起重视。我们建立大鼠离体肝脏保存再灌注模型，观察肝脏保存再灌注中IL-10 mRNA表达，

大鼠肝脏保存再灌注时OH与细胞凋亡及Bcl-2蛋白表达的关系

目的 阐明羟自由基 ( OH)、细胞凋亡及Bcl 2蛋白表达在大鼠肝脏不同保存时相再灌注过程中的变化规律及相互关系。方法 以大鼠肝脏离体非循环灌注为模型 ,用高效液相色谱(HPLC)紫外检测法 ,测定 OH与水杨酸的生成物二羟苯甲酸 (DHBA)含量 ,用原位末端标记法及电镜观察细胞凋亡 ,用免疫组织化学法检测Bcl 2蛋白表达。结果 随着保存时间延长 (18h内 ) , OH水平及细胞凋亡指数 (AI)进行性升高 ,且两者呈显著正相关 ;而Bcl 2蛋白表达指数 (BI)则进行性降低 ,BI与 OH水平及AI呈显著负相关。结论 OH及细胞凋亡同时参与肝脏保存再灌注损伤 ,Bcl 2蛋白对细胞凋亡具有抑制作用。