铁皮石斛多糖调控JAK2/STAT5通路抑制非酒精性脂肪肝小鼠肝脏内质网应激作用分析

目的 探讨分析铁皮石斛多糖调控JAK2/STAT5通路抑制非酒精性脂肪肝小鼠肝脏内质网应激作用。方法 将50只小鼠随机分为对照组、模型组、低剂量组(20μg/mL)、中剂量组(40μg/mL)及高剂量组(80μg/mL),每组10只,除对照组外,其余小鼠使用高脂饲料诱发脂肪肝模型,低、中、高剂量组小鼠分别使用不同剂量铁皮石斛灌胃。连续给药8周后,取各组小鼠肝组织样本进行HE染色,检测各组小鼠血清肝功能及血脂指标,并采用RT-qPCR法检测小鼠肝组织中JAK2、STAT5、GRP78、CHOP、Caspase 12、Bcl-2、Bax基因表达情况。结果 模型组及给药组小鼠体质量、肝脏重量以及肝脏指数均较对照组显著升高(P<0.05),而给药组小鼠体质量、肝脏重量以及肝脏指数均较模型组降低(P<0.05),且呈剂量依赖关系。模型组及给药组AST、ALT、TC、TG、LDL-C均较对照组显著升高(P<0.05),HDL-C较对照组显著降低(P<0.05),而给药组小鼠AST、ALT、TC、TG、LDL-C均较模型组降低(P<0.05),HDL-C较模型组升高(P<0.05),且呈剂量依赖关系。肝组织HE染色结果显示,模型组肝小叶结构出现严重破坏,可见大量脂肪空泡聚集,铁皮石斛多糖各组小鼠肝细胞可见明显地排列不整齐,脂肪空泡汇聚,较模型组有不同程度的改善。模型组及给药组小鼠肝组织JAK2、STAT5以及Bcl-2基因相对表达量显著降低(P<0.05),GRP78、CHOP、Caspase 12以及Bax基因相对表达量显著升高(P<0.05),各铁皮石斛多糖药物干预组JAK2、STAT5以及Bcl-2基因相对表达量显著升高(P<0.05),GRP78、CHOP、Caspase 12以及Bax基因相对表达量显著降低(P<0.05),且呈明显的剂量依赖性。结论 铁皮石斛多糖可有效改善非酒精性脂肪肝小鼠肝损伤,且疗效呈显著的剂量依赖,其机制可能与激活JAK2/STAT5通路抑制内质网应激有关。

十二指肠空肠旁路术对糖尿病大鼠肠道激素及肝脏内质网应激的影响

目的建立糖尿病大鼠模型,并实施十二指肠空肠旁路术(DJB),观察DJB对糖尿病大鼠肠道激素及肝脏内质网应激的影响。方法选购清洁级SD成年雄性大鼠58只,以高脂饮食喂养联合腹腔注射小剂量链脲佐菌素建立糖尿病大鼠模型,对建模成功的大鼠实施DJB(DJB组)及假手术(假手术组),以普通大鼠作为空白对照(空白对照组)。分别检测3组大鼠肠道激素、胰岛素。两组术后大鼠肝脏内质网应激指标[p-双链RNA依赖性蛋白激酶样内质网蛋白激酶(p-PERK)、肌醇需求激酶-1(IRE-1)、p-IRE-1]、肝脏组织中[总c-Jun氨基末端激酶(JNK)蛋白、p-JNK蛋白]、肝脏组织中胰岛素受体底物-1(IRS-1)蛋白以及p-IRS-1ser307蛋白的表达变化。结果灌胃前,3组大鼠胰高血糖素样肽-1(GLP-1)、抑胃肽(GIP)、胰岛素(INS)水平比较,差异无统计学意义(F=0.04、2.708、0.002,P=0.996、0.079、0.998);灌胃30min后,DJB组及对照组GLP-1、GIP、INS水平均高于假手术组,差异有统计学意义(F=33.692、18.657、16.393,P=0.000)。术后16周DJB组小鼠p-PERK、p-IRE-1、p-JNK、p-IRS-1ser307与术前比较,差异有统计学意义(t=10.507、12.606、9.163、14.603,P=0.000);IRE-1、JNK、IRS-1与术前比较,差异无统计学意义(t=1.295、1.863、1.675,P=0.205、0.072、0.104);相对于假手术组来说,DJB组改善良好。结论DJB能够有效改善高脂饮食喂养联合腹腔注射小剂量链脲佐菌素诱导的糖尿病大鼠肠道激素及胰岛素水平,缓解内质网应激。

应用斑马鱼研究酒精性肝病相关内质网应激

目的该实验旨在探讨斑马鱼在研究酒精性肝病相关内质网应激的可行性。方法显微观察胚胎肝脏大小及卵黄吸收情况,病理组织学方法检测酒精对肝脏的影响,RT-PCR法检测内质网应激标记物和脂代谢相关基因的表达水平。结果研究结果发现,急性酒精处理引起斑马鱼胚胎的肝肿大及卵黄吸收变慢。成鱼慢性酒精处理显示,肝细胞肿胀,呈气球样变性,大泡性脂肪变性,小叶炎性浸润。成鱼急性酒精处理显示内质网应激分子标记物bip、chop和gp78的表达上调,伴随肝脏脂代谢相关基因ACC1,Fasn,Fads以及胆固醇代谢相关的基因HMGCS1、HMGCRb的表达上调。结论通过上述研究表明酒精引起斑马鱼急、慢性肝损伤,这种肝损伤可能和内质网应激及脂肪和胆固醇代谢的紊乱密切相关。