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用SDSL-EPR技术测量LSECtin-CRD与甘露糖结合过程中的位点运动性变化
1
作者
马蕾
董国福
+6 位作者
丛建波
杨俊涛
邹洁芮
郭俊旺
张成岗
王长振
吴可
《生物技术通讯》
CAS
2016年第3期381-385,共5页
目的:应用定点自旋标记-电子顺磁共振(SDSL-EPR)技术检测肝脏及淋巴结窦内皮细胞C型凝集素(LSECtin)的糖基识别结构域CRD上不同位点氨基酸的运动特性及其与甘露糖结合过程中的构象变化。方法:通过SOE-PCR方法对LSECtin-CRD引入半胱氨酸...
目的:应用定点自旋标记-电子顺磁共振(SDSL-EPR)技术检测肝脏及淋巴结窦内皮细胞C型凝集素(LSECtin)的糖基识别结构域CRD上不同位点氨基酸的运动特性及其与甘露糖结合过程中的构象变化。方法:通过SOE-PCR方法对LSECtin-CRD引入半胱氨酸点突变,构建p ET28b-Tat-LSECtin-CRD载体,可溶性表达LSECtin-CRD突变体蛋白;对突变位点进行自旋标记;EPR检测标记后样品的EPR波谱;用SS-FDDM软件对EPR波谱进行模拟和解析,获得旋转相关时间τc,研究其构象特点及变化。结果:在CRD的Ca^(2+)结合位点和配体结合功能区构建了5个突变体蛋白;LSECtin-CRD与Ca^(2+)和甘露糖结合后,4个位点的τc值明显升高,表明CRD结构域整体运动性降低;5个突变位点运动性差异较大,其中A258位点运动性变化最大,可能是参与糖基结合的关键位点。结论:SDSL-EPR技术能够有效研究LSECtin-CRD参与糖基结合过程中的构象运动性,研究结果证明了LSECtin-CRD在与糖基结合后整体运动性受限。
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关键词
定点自旋标记-电子顺磁共振技术(SDSL-EPR)
肝脏
及淋巴结
窦
内皮
细胞
c
型
凝集
素
(
lsectin
)
糖基识别结构域(
c
RD)
运动性
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职称材料
肝脏中清除炎症细胞的“功臣”现身
2
《中国动物保健》
2009年第9期107-108,共2页
由军事医学科学院院长、中国科学院院士贺福初领导的蛋白质组学国家重点实验室,在肝脏中发现了一种重要的免疫调控蛋白LSECtin(肝窦内皮细胞C型凝集素)。
关键词
肝
窦
内皮
细胞
肝脏
中国科学院院士
国家重点实验室
炎症
清除
蛋白质组学
c
型
凝集
素
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职称材料
题名
用SDSL-EPR技术测量LSECtin-CRD与甘露糖结合过程中的位点运动性变化
1
作者
马蕾
董国福
丛建波
杨俊涛
邹洁芮
郭俊旺
张成岗
王长振
吴可
机构
军事医学科学院放射与辐射医学研究所
出处
《生物技术通讯》
CAS
2016年第3期381-385,共5页
基金
国家自然科学基金(31170714
30970693)
北京市自然科学基金(7132134)
文摘
目的:应用定点自旋标记-电子顺磁共振(SDSL-EPR)技术检测肝脏及淋巴结窦内皮细胞C型凝集素(LSECtin)的糖基识别结构域CRD上不同位点氨基酸的运动特性及其与甘露糖结合过程中的构象变化。方法:通过SOE-PCR方法对LSECtin-CRD引入半胱氨酸点突变,构建p ET28b-Tat-LSECtin-CRD载体,可溶性表达LSECtin-CRD突变体蛋白;对突变位点进行自旋标记;EPR检测标记后样品的EPR波谱;用SS-FDDM软件对EPR波谱进行模拟和解析,获得旋转相关时间τc,研究其构象特点及变化。结果:在CRD的Ca^(2+)结合位点和配体结合功能区构建了5个突变体蛋白;LSECtin-CRD与Ca^(2+)和甘露糖结合后,4个位点的τc值明显升高,表明CRD结构域整体运动性降低;5个突变位点运动性差异较大,其中A258位点运动性变化最大,可能是参与糖基结合的关键位点。结论:SDSL-EPR技术能够有效研究LSECtin-CRD参与糖基结合过程中的构象运动性,研究结果证明了LSECtin-CRD在与糖基结合后整体运动性受限。
关键词
定点自旋标记-电子顺磁共振技术(SDSL-EPR)
肝脏
及淋巴结
窦
内皮
细胞
c
型
凝集
素
(
lsectin
)
糖基识别结构域(
c
RD)
运动性
Keywords
site dire
c
ted spin labeling ele
c
tron paramagneti
c
resonan
c
e(SDSL-EPR)
liver and lymph node sinusoidal endothelial
c
ell
c
-type le
c
tin(
lsectin
)
c
arbohydrate re
c
ognition domain(
c
RD)
mobility
分类号
Q503 [生物学—生物化学]
Q789 [生物学—分子生物学]
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职称材料
题名
肝脏中清除炎症细胞的“功臣”现身
2
出处
《中国动物保健》
2009年第9期107-108,共2页
文摘
由军事医学科学院院长、中国科学院院士贺福初领导的蛋白质组学国家重点实验室,在肝脏中发现了一种重要的免疫调控蛋白LSECtin(肝窦内皮细胞C型凝集素)。
关键词
肝
窦
内皮
细胞
肝脏
中国科学院院士
国家重点实验室
炎症
清除
蛋白质组学
c
型
凝集
素
分类号
S858.31 [农业科学—临床兽医学]
Q522.2 [生物学—生物化学]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
用SDSL-EPR技术测量LSECtin-CRD与甘露糖结合过程中的位点运动性变化
马蕾
董国福
丛建波
杨俊涛
邹洁芮
郭俊旺
张成岗
王长振
吴可
《生物技术通讯》
CAS
2016
0
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职称材料
2
肝脏中清除炎症细胞的“功臣”现身
《中国动物保健》
2009
0
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职称材料
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