肝郁脾虚方对失眠大鼠血浆和下丘脑胆囊收缩素-8的影响

目的:观察肝郁脾虚方对失眠大鼠血浆和下丘脑胆囊收缩素-8(Cholecystokinin-8,CCK-8)的影响。方法:40只SD雄性大鼠随机取分成5组,正常对照组8只(不参与造模),其余4组均采用睡眠研究领域常用的大鼠慢性夹尾刺激+对氯苯丙氨酸(Para-chlorophenylalanine,PCPA)腹腔注射复合因子+不规则饮食法(逢单日禁食,饮水正常)制造肝郁脾虚失眠模型,造模成功后分为模型组8只、肝郁脾虚方加减颗粒剂高、中、低剂量组各8只,连续灌胃14 d后,使用酶联免疫吸附测定法(ELISA)检测血浆和CCK-8的含量。结果:与正常对照组比较,模型组血浆和下丘脑CCK-8含量均下降,2组比较差异有统计学意义(P<0.05)。与模型组比较,给药中剂量组和低剂量组血浆中CCK-8含量增加,给药高剂量组、中剂量组和低剂量组下丘脑CCK-8含量均增加,比较差异有统计学意义(P<0.05)。结论:肝郁脾虚方具有增加失眠大鼠血浆和下丘脑CCK-8含量的作用。

分析疏肝健脾和胃方在肝郁脾虚型慢性胃炎治疗中的作用效果

分析疏肝健脾和胃方在肝郁脾虚型慢性胃炎治疗中的作用效果。方法 本研究挑选了2021年9月至2022年9月期间,我院共收治的一群患有肝郁脾虚特征的慢性胃炎患者,共计142例,作为研究的核心样本。随机分为两组,对照组采取西药治疗,观察组在此基础上应用疏肝健脾和胃方,对比治疗应用效果。结果 经过治疗后发现,观察组治疗效率高于对照组,观察组的CRP、IL-8、sIgA水平优于对照组,观察组胃动力水平优于对照组,P<0.05,差异具有统计学意义。结论 对于肝郁脾虚型慢性胃炎治疗中采取疏肝健脾和胃方,能够有效提升治疗效果,值得进行临床推广。

肝郁脾虚方对抑郁失眠模型大鼠结肠组织GABA能信号系统及肠道菌群的影响

目的探究肝郁脾虚方治疗抑郁共病失眠的可能作用机制。方法24只SD大鼠随机分为空白组,模型组及肝郁脾虚方低、高剂量组,每组6只。除空白组外,其余各组均采用慢性不可预知温和应激方法(CUMS)干预21天构建抑郁模型,再注射4-氯-DL-苯丙氨酸(PCPA)3天构建抑郁失眠大鼠模型。造模后肝郁脾虚方低、高剂量组分别予以肝郁脾虚方8、32 g/(kg·d)灌胃,空白组及模型组以蒸馏水20 ml/(kg·d)灌胃,共灌胃14天。采用实时荧光定量PCR检测大鼠结肠组织γ-氨基丁酸A型受体(GABAA)、γ-氨基丁酸B型受体(GABAB)、γ-氨基丁酸转运蛋白(GAT)、谷氨酸脱羧酶(GAD)mRNA表达,Western blot法检测大鼠结肠组织中GABAA、GABAB、GAT、GAD蛋白表达。通过16SRNA基因测序技术分析大鼠肠道菌群物种多样性及物种组成。Pearson相关性分析γ-氨基丁酸(GABA)能信号系统与优势菌门的相关性。结果与空白组比较,模型组大鼠结肠组织GABAA、GABAB蛋白及mRNA表达降低,GAD蛋白及mRNA、GAT蛋白表达升高(P<0.05)。与模型组比较,肝郁脾虚方高、低剂量组GABAA蛋白及mRNA表达升高,GABAB mRNA表达升高、蛋白表达下降,GAD mRNA表达降低,GAT蛋白表达下降(P<0.05)。与肝郁脾虚方低剂量组比较,肝郁脾虚方高剂量组GABAA、GAD mRNA表达升高,GABAB蛋白表达降低(P<0.05)。各组均未检测到GAT mRNA表达。Alpha多样性结果显示,与模型组比较,肝郁脾虚方低、高剂量组Shannoneve指数升高,Simpson指数降低(P<0.05)。Beta多样性结果显示,肝郁脾虚方低剂量组菌群结构更接近空白组。物种组成结果显示,各组均存在的优势菌门为厚壁菌门、拟杆菌门。Pearson相关分析显示,厚壁菌门丰度与GAD mRNA表达呈负相关(r=-0.65,P=0.02),与GABAA蛋白表达呈负相关(r=-0.80,P=0.02),拟杆菌门丰度与GAD mRNA(r=0.79,P=0.02)、GABAB mRNA呈正相关(r=0.69,P=0.01),与GABAA蛋白表达呈正相关(r=0.63,P=0.02)。结论肝郁脾虚方治疗抑郁共病失眠可能是通过调节肠道微生物分布,同时上调GABAA蛋白,下调GABAB、GAT蛋白实现的,且低剂量较高剂量更佳。

肝郁脾虚失眠方对失眠模型大鼠GABA的影响

目的 观察肝郁脾虚失眠方对失眠大鼠GABA的影响。方法 选用PF级SD大鼠60只,随机分为6组每组10只,分别为A.空白对照组,B.肝郁脾虚失眠方组,C.肝郁脾虚失眠方+GABA受体激动剂Eto组,D.肝郁脾虚失眠方+GABA受体激动剂Aca组,E.肝郁脾虚失眠方+GABA受体抑制剂Bac组,F.肝郁脾虚失眠方+GABA受体抑制剂Phac组,除A组外均采用复合造模法(夹尾刺激和PCPA腹腔注射)制造肝郁失眠模型,分组给药14 d。并观察大鼠生理状态,通过QRT-PCR技术获取GABAA、GABAB mRNA表达量,通过Western-blot检测脑组织GABAA、GABAB蛋白质的表达。结果 模型组大鼠造模后与正常组相比可见大鼠饮食饮水减少,睡眠时间减少,便溏,皮毛无光泽,爪甲冰凉。给药干预后,与模型组比较,肝郁脾虚失眠方组大鼠白天活动减少,喜卧,睡眠时间增加,昼夜节律开始恢复,饮食二便接近正常组,皮毛逐渐顺滑有光泽。干预后,QRT-PCR:GABAA-RNA表达量:肝郁脾虚失眠方组GABAA-RNA表达量显著优于空白对照组,差异具有统计学意义(P<0.05),Aca组、Bac组、Eto组、Phac组GABAA-RNA表达量均低于肝郁脾虚失眠方组,差异具有统计学意义(P<0.05);干预后,GABAB-RNA表达量:肝郁脾虚失眠方组GABAB-RNA表达量显著优于空白对照组,差异具有统计学意义(P<0.05),Aca组、Bac组、Eto组、Phac组GABAB-RNA表达量均低于肝郁脾虚失眠方组,差异具有统计学意义(P<0.05)。干预后,WB:脑组织GABAA、GABAB的表达:以目的蛋白GABAA、GABAB与内参GAPDH的比值比较各组蛋白的表达量,空白组GABAA、GABAB的表达量明显优于造模组,肝郁脾虚失眠方组GABAA表达量稍低于Aca组,高于Bac组、Eto组、Phac组,肝郁脾虚失眠方组GABAB表达量优于Aca组、Bac组、Eto组、Phac组。结论 肝郁脾虚失眠方可改善失眠模型大鼠睡眠及饮食可能与促进GABAA、GABAB mRNA表达,增加GABAA、GABAB蛋白的翻译有关。GABA可能是疏肝健脾调神的重要物质。