从脑肠轴探讨黄芪建中汤对胃溃疡大鼠肝细胞生长因子及ERK1/2和TFF3蛋白表达的影响

目的观察黄芪建中汤对脾胃虚寒型胃溃疡大鼠胃组织中肝细胞生长因子(HGF)及下丘脑和海马区中磷酸化细胞外信号调节激酶1/2(p-ERK1/2)及肠三叶因子3(TFF3)蛋白表达的影响,探究黄芪建中汤治疗脾胃虚寒型胃溃疡的作用及可能机制。方法用随机数字表法将60只大鼠分为正常组、模型组、奥美拉唑组和黄芪建中汤组,每组15只。正常组隔日蒸馏水灌胃,每日不限饮食;其余组大鼠先以小承气汤结合饥饱失常法复制脾胃虚寒证模型,实验第11天采用冰醋酸法建立胃溃疡模型。之后模型组继续隔日上午给予小承气汤并当日禁食,次日恢复饮食,共持续20 d;奥美拉唑组和黄芪建中汤组大鼠除同模型组的每日处理外,每日下午分别给予4.2 mg/(kg·d)奥美拉唑和6.8 g/(kg·d)黄芪建中汤灌胃;正常组隔日上午及每日下午给予蒸馏水灌胃。实验结束后摘取各组大鼠胃,记录溃疡大小并计算胃溃疡指数,HE染色观察胃组织病理形态,免疫组化染色检测胃组织中HGF及下丘脑和海马区中p-ERK1/2、TFF3蛋白阳性表达情况。结果正常组大鼠胃黏膜正常,未见溃疡点及糜烂斑等;模型组大鼠胃黏膜皱襞存在中断,有点状溃疡、糜烂及大量炎性细胞浸润;黄芪建中汤组与奥美拉唑组胃黏膜损伤较模型组轻,有少量炎性细胞浸润,未见明显溃疡。奥美拉唑组和黄芪建中汤组大鼠的胃溃疡指数均明显低于模型组(P均<0.05),胃组织中HGF及下丘脑和海马区中p-ERK1/2、TFF3蛋白表达平均光密度均明显高于模型组(P均<0.05)。结论黄芪建中汤能促进脾胃虚寒型胃溃疡大鼠溃疡愈合,上调HGF、ERK1/2及TFF3的表达可能是其基于脑肠轴治疗脾胃虚寒型胃溃疡的作用机制之一。

安肠愈疡汤对溃疡性结肠炎大鼠结肠组织中TFF3、MUC2和TLR4基因表达的影响

背景:TLR4可介导免疫和炎症反应,TFF3、MUC2为肠黏膜保护因子,维持肠黏膜屏障功能。目的:观察安肠愈疡汤对溃疡性结肠炎大鼠结肠组织中TFF3、MUC2和TLR4基因表达的影响。方法:应用TNBS制备溃疡性结肠炎大鼠模型。将90只Wistar大鼠随机分为空白对照组、模型组、安肠愈疡汤低、中、高剂量组和美沙拉嗪组,分别给予蒸馏水、不同剂量安肠愈疡汤和美沙拉嗪。21 d后处死大鼠,行结肠黏膜组织病理学评分,采用RT-PCR法检测结肠组织中TFF3、MUC2和TLR4基因表达。结果:与模型组相比,安肠愈疡汤中、高剂量组和美沙拉嗪组组织病理学评分、TLR4表达均显著降低(P<0.05),TFF3、MUC2表达均显著升高(P<0.05)。与安肠愈疡汤中剂量组相比,安肠愈疡汤高剂量组和美沙拉嗪组组织病理学评分显著降低(P<0.05),TFF3表达显著升高(P<0.01)。与安肠愈疡汤中剂量组和美沙拉嗪组相比,安肠愈疡汤高剂量组MUC2表达显著升高(P<0.01),TLR4表达显著降低(P<0.01)。结论:安肠愈疡汤可明显促进溃疡性结肠炎大鼠结肠黏膜修复,其作用机制可能与上调TFF3和MUC2基因表达以及下调TLR4基因表达有关。

三叶因子3的中枢功能研究进展

神经肽是生物体内重要的生物活性分子，广泛参与机体生理病理过程，成为诸多疾病的潜在治疗靶点。三叶因子（trefoilfactor，TFF）属神经肽家族，是一类富含半胱氨酸的小分子肽。因其分子构象都有一个或多个“三叶草形结构”，又称三叶肽（trefoilpeptide）。TFFs主要包括乳腺癌相关肽（TFF1／PS2）、解痉多肽（TFF2／SP）和肠三叶因子（TFF3／ITF）[233个家族成品。

肠三叶因子对坏死性小肠结肠炎新生鼠肠组织中P-ATK及P-BAD的影响及意义

目的观察肠三叶因子(ITF)对新生鼠坏死性小肠结肠炎(NEC)模型磷酸化丝氨酸-苏氨酸蛋白激酶(p-AKT)及磷酸化BAD(p-BAD)蛋白水平的影响,探讨ITF对NEC的保护作用。方法新生鼠50只,随机分为5组,每组10只。建立NEC模型,A组腹腔注射生理盐水0.2 ml;B组腹腔注射ITF 0.2 mg;C组腹腔内注射渥漫青霉素0.1 mg/kg;D组腹腔内注射ITF 0.2 mg+渥漫青霉素0.1 mg/kg;E组为正常对照组。实验第4天断头处死大鼠,取近回盲部肠道组织做病理学检查,分别采用免疫组化方法及免疫印迹法检测肠组织中p-AKT及p-BAD蛋白表达水平。结果 5组肠组织中p-AKT及p-BAD蛋白表达水平比较,差异有统计学意义(P均<0.05),B组p-AKT、p-BAD蛋白表达水平高于其他4组(P均<0.05),A组高于E组(P均<0.05),C组p-AKT最低(P<0.05)。各组大鼠肠损伤病理评分比较,差异有统计学意义(P<0.05),A、C、D组肠损伤病理评分高于B组(P<0.05)。结论 ITF可减轻新生鼠NEC的肠道炎症反应,其机制可能是使AKT活化为p-AKT,其作用于下游靶点p-BAD,抑制BAD的促凋亡作用。

肠三叶因子对胃黏膜上皮细胞增殖的影响及其信号转导机制的研究

目的肠三叶因子(intestinal trefoil factor,ITF)对胃黏膜具有保护作用,但其机制尚不明确。文中探讨重组ITF对胃黏膜上皮细胞增殖能力的影响及其可能作用的分子机制。方法将体外培养的GES-1细胞分为3组,其中1组作为细胞增殖活力实验空白对照组,其他2组分别加入浓度为100和500 ng/m L的人重组ITF形成低浓度ITF组和高浓度ITF组。光镜下观察细胞形态,并采用CCK-8试剂盒检测GES-1细胞的增殖活力。体外培养的GES-1细胞株分别用100 ng/m L的ITF和浓度为15μmol/L的PI3K/Akt信号通路抑制剂LY294002进行处理,分为信号通路蛋白表达实验空白对照组、ITF组、LY294002组和ITF+LY294002组,光镜下观察细胞形态。随后采用CCK-8试剂盒检测GES-1细胞处理后的增殖活力,采用Western blot检测PI3K/Akt信号通路中p-Akt和Akt蛋白的表达情况。结果与空白对照组相比,ITF刺激下GES-1细胞增殖活力明显增强,且ITF浓度越高、增殖活力越强。使用LY294002处理后,能够显著抑制ITF刺激的细胞增殖。Western blot检测结果表明,ITF提高了p-Akt蛋白的表达水平,激活PI3K/Akt信号通路。结论 ITF促进GES-1细胞的增殖,推测其分子作用机制主要是通过激活PI3K/Akt信号通路促进细胞增殖。

甲状腺乳头状癌患者血清与组织中三叶因子3的表达及意义

目的:研究三叶因子3(TFF3)在人甲状腺乳头状癌组织中的表达,探讨TFF3在甲状腺乳头状癌发生、发展中的作用。方法:采用RT-PCR、免疫组织化学法检测TFF3在75例甲状腺乳头状癌和10例结节性甲状腺肿组织中的表达,并进行分析。结果:甲状腺乳头状癌组织中TFF3mRNA水平高于结节性甲状腺肿,差异有统计学意义(P<0.05);血清中TFF3差异不明显。Western blot检测结果显示,TFF3蛋白在结节性甲状腺肿基本不表达,在甲状腺乳头状癌组织高表达(P<0.05);且甲状腺癌染成棕色的区域主要位于肿瘤边缘。TFF3的表达与甲状腺乳头状癌患者的年龄、性别、肿瘤个数无关,与肿瘤直径、淋巴结转移以及TNM分期相关。结论:TFF3在甲状腺乳头状癌中表达增高,TFF3可能通过影响多种细胞因子以及炎症细胞参与甲状腺癌的发生和发展。

血清ITF3、HMGB1水平对结直肠癌患者根治术后早期炎性肠梗阻的诊断价值

目的探讨血清肠三叶因子3(ITF3)和高迁移率族蛋白B1(HMGB1)水平对结直肠癌患者根治术后早期炎性肠梗阻(EPISBO)的诊断价值。方法选取2020年2月至2023年2月在我院确诊结直肠癌并进行手术的277例患者作为研究对象,选取同期在我院体检健康者277例为对照组。检测并分析两组患者血清ITF3、HMGB1水平。采用Logistic回归分析影响结直肠癌患者发生EPISBO的因素。采用Pearson分析EPISBO患者血清ITF3、HMGB1的相关性。受试者工作特征(ROC)曲线分析ITF3、HMGB1水平对结直肠癌患者EPISBO的诊断效能。结果研究组患者血清ITF3水平显著低于对照组(P<0.05),HMGB1水平显著高于对照组(P<0.05);Pearson等级相关分析显示,EPISBO患者血清ITF3、HMGB1水平呈现负相关性(r=-0.671,P<0.001)。Logistic回归结果显示,ITF3是结直肠癌患者术后发生EPISBO的独立保护因素(P<0.05),HMGB1是导致EPISBO的独立危险因素(P<0.05)。ROC曲线显示,血清ITF3、HMGB1联合应用诊断EPISBO的临床价值优于ITF3、HMGB1单独检测(Z_(二者联合-ITF3)=3.112、P=0.002,Z_(二者联合-HMGB1)=2.000、P=0.046)。结论结直肠癌术后发生EPISBO患者血清ITF3水平显著降低,HMGB1表达水平显著升高,二者对EPISBO的临床诊断预测具有重要意义。

TFF3作为肿瘤生物标志物的研究

三叶因子3(trefoil factor 3,TFF3)为三叶因子多肽家族成员之一,与肿瘤的发生发展密切相关,可促进肿瘤的侵袭、转移与血管生成。作为肿瘤生物标志物,TFF3对胃癌诊断具有较高的敏感度和特异性,优于胃蛋白酶原(Pepsinogen,PG)标志物,是胃癌非侵入性筛查潜在的理想标志物,并可应用于胃肠道肿瘤化疗药效与预后的评价,同时,TFF3应用于子宫内膜样腺癌及甲状腺微小浸润性滤泡癌的病理诊断也具有重大临床价值。TFF3作为新型肿瘤生物标志物,在肿瘤分子诊断与靶向、个体化治疗领域倍受临床关注。

清肠化湿方对TNBS大鼠结肠组织PPAR-γ/p38 MAPK的影响

目的 :观察清肠化湿方(QHD)对三硝基苯磺酸(TNBS)诱导的大鼠结肠炎结肠组织中过氧化物酶体增殖物激活受体(PPAR-γ)和p38丝裂原活化蛋白激酶(p38 MAPK)表达的影响,探讨其治疗溃疡性结肠炎(UC)的可能作用机制。方法:采用80只Wistar大鼠建立UC大鼠模型,随机分为8组,分别为空白对照组、模型对照组、QHD低剂量组、QHD中剂量组、QHD高剂量组、柳氮磺胺吡啶(SASP)组、柳氮磺胺吡啶+双酚A-二甘氨酸醚(SASP+BADGE)组及中药中剂量+BADGE组,每组10只。除空白对照组以生理盐水灌肠外,其余组采用TNBS/乙醇灌肠造UC大鼠模型。以柳氮磺胺吡啶(SASP)为阳性对照,同时联合使用PPAR-γ抑制剂双酚A-二甘氨酸醚(BADGE),给药7 d后病理检测各组大鼠结肠组织的损伤情况,并通过蛋白质印迹法(Western blot)和实时荧光定量多聚核苷酸链式反应(Real-time PCR)实验分别检测大鼠结肠组织中PPAR-γ、p38 MAPK的蛋白和基因表达,同时检测各组大鼠结肠组织中黏蛋白2(MUC2)和三叶因子3(TFF3)的表达情况。结果:清肠化湿方可上调TNBS大鼠结肠组织PPAR-γ的表达(P<0.01),同时抑制p38 MAPK的活性(P<0.01),并促进结肠组织中MUC2和TFF3表达(P<0.01),当联用PPAR-γ抑制剂BADGE后其对p38 MAPK的抑制作用减弱(P<0.05)。结论:清肠化湿方对TNBS大鼠结肠炎有明显的保护作用,其作用机制可能与激活PPAR-γ信号通路、抑制p38 MAPK的激活、减轻炎症反应、升高结肠组织中MUC2与TFF3的表达水平、参与肠黏膜的修复有关。

TFF3、COX-2、HIF-1α在不同胃黏膜病变中的表达意义及与MVD值的相关性研究

目的研究三叶因子3(TFF3)、环氧合酶-2(COX-2)、缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)在不同胃黏膜病变中的表达意义及胃癌患者TFF3、COX-2、HIF-1α表达、微血管密度(MVD)的相关性比较。方法选取医院存储的行胃镜活检或胃癌根治术后蜡块标本150例,根据胃癌前不同病变期分为胃腺瘤组(B组,30例)、萎缩性胃炎伴肠化生组(C组,30例)、非典型增生组(D组,30例)、胃癌组(E组,30例),同期选取正常胃黏膜组(A组,30例)进行比较。结果无浆膜浸润、无淋巴转移、胃癌早期患者MVD值和TFF3、COX-2、HIF-1α表达阳性比率低于有浆膜浸润、有淋巴转移、胃癌进展期患者(P<0.05);高中分化癌患者MVD值和TFF3、COX-2、HIF-1α表达阳性比率与低分化癌患者无显著差异(P>0.05);TFF3、COX-2、HIF-1α表达阳性患者的MVD值显著高于TFF3、COX-2、HIF-1α表达阴性患者(P<0.05)。结论TFF3、COX-2、HIF-1α参与胃癌及癌前各期变化过程,TFF3、COX-2、HIF-1α、MVD对胃癌早期诊断具有重要意义,也是作为防治治疗胃癌的一个突破点,能否通过TFF3、COX-2、HIF-1α检测值对早期胃癌进行对应治疗,仍需临床医师深入研究。

人肠三叶肽在大肠杆菌中的表达

目的构建三叶肽(TFF)原核重组质粒pET32a-TFF3,实现TFF3融合蛋白在大肠杆菌中的高效表达并鉴定表达产物。方法用TRIzol试剂提取人结肠组织mRNA,逆转录后经PCR扩增得到不含信号肽的TFF3编码序列,插入原核表达载体pET32a,构建pET32a-TFF3重组质粒,转化大肠杆菌BL-21(DE3),异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(IPTG)诱导重组蛋白表达,用SDS-PAGE和Western blot检测表达蛋白。结果酶切和测序证实pET32a-TFF3重组质粒构建成功。SDS-PAGE分析表明在IPTG浓度为1 mmol/L时,诱导6 h后蛋白表达量最大。Western blot分析表明,TFF3融合蛋白相对分子质量约为24×103,其能与兔源TFF3抗体特异性结合。结论成功构建了pET32a-TFF3重组质粒,实现了该基因在大肠杆菌中的高效表达,为后续深入研究TFF3奠定了基础。

心肺复苏后受损肠黏膜修复的影响因素

目的探讨大鼠心肺复苏（CPR）后受损肠黏膜修复的影响因素。方法28只麻醉成功的雄性sD大鼠随机分为两组，即CPR组和假复苏对照组（sham组），sham组大鼠只进行麻醉和外科手术操作，不进行心脏骤停和CPR（n=7）；CPR组按照复苏后的时间点分为三个亚组，即12、24、48h组，每个亚组7只。评估肠黏膜的损伤程度、杯状细胞计数，检测肿瘤坏死因子一仪（TNF—α）、白细胞介素-1β（IL-1β）浓度及肠三叶因子（TFF3）和半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-3（caspase-3）的表达。结果CPR后12、24、48h组肠黏膜损伤明显较sham组严重（P〈0．01），损伤评分分别为3．15、3．03、2．22分，而sham组为0．55分，24、48h组可见小部分的肠黏膜重建现象，即杯状细胞和其他细胞爬行到肠黏膜受损区覆盖肠黏膜的裸露区域。与sham组比较，CPR组杯状细胞数量明显减少（P〈0．01），IL-1β、TNF-α和caspase-3表达明显增加（P〈0．01），尽管TFF3在12h组表达较sham组有所增高，但在24、48h组表达明显低于sham组（P〈0．05）。结论肠黏膜持续的高炎症状态和上皮细胞凋亡可能是CPR组受损肠黏膜重建的重要影响因素，另外，杯状细胞数量的减少也影响肠黏膜的修复。

乌司他丁对脓毒症大鼠肠黏膜上皮防御屏障的影响

目的探讨乌司他丁（UTI）对脓毒症大鼠肠黏膜上皮防御屏障的影响。方法50只SD大鼠被随机分为对照组、模型组、UTI预处理组及UTI治疗组，后3组再按盲肠结扎穿孔术（CLP）后3、6和12h分为3个亚组，每个亚组5只。采用改良的CLP制备大鼠脓毒症模型，预处理组在CLP前2h经尾静脉注射UTI25kU／kg，治疗组在CLP后2h经尾静脉注射UTI50kU／kg。分别于CLP后3、6和12h活杀大鼠，取回肠黏膜光镜下观察组织病理学变化，用逆转录-聚合酶链反应（RT—PcR）检测肠黏膜防御素-5（RD-5）和肠三叶因子家族3（TFF3）的mRNA表达水平。结果模型组小肠绒毛顶端上皮脱落，固有层崩解，毛细血管出血和溃疡形成，UTI治疗组和预处理组能显著减轻上述改变。模型组RD-5和TFF3的mRNA表达水平较对照组显著降低，UTI治疗组和预处理组能显著升高其表达水平（P〈0．05或P〈0．01）；预处理组CLP后12h较治疗组升高最为显著，差异有统计学意义（P均〈0．05）。结论脓毒症时肠黏膜上皮屏障功能受损，UTI对其有保护作用，从而遏制脓毒症的发生发展。

基因重组人三叶因子3治疗烧伤小鼠肠黏膜损伤的实验研究

目的观察基因重组hTFF3对严重烧伤所致肠黏膜损害的治疗作用。方法采用30%体表面积Ⅲ度烧伤小鼠模型,随机分成对照组、烧伤组和烧伤后hTFF3治疗(TFF3)组,TFF3组伤后1 h开始hTFF3灌胃,剂量为1 mg/kg,烧伤组和对照组灌胃等量生理盐水,各组每天灌胃1次,连续5 d。观察烧伤后肠组织病理学改变,肠黏膜肠绒毛高度、隐窝深度及病死率。结果烧伤小鼠每天给予1 mg/kg的hTFF3灌胃,显著降低肠黏膜受损程度,肠黏膜病理改变明显减轻,烧伤组以出血、坏死和溃疡为主,TFF3组以充血、水肿为主,同时肠黏膜厚度、绒毛高度、隐窝深度明显增加,小鼠5 d病死率有所下降(27.3%vs 45.6%)。结论重组hTFF3对烧伤后肠道损伤具有明显的治疗作用,能促进受损黏膜屏障的重建。

ITF通过JAK-STAT3途径上调自身启动子的活性

目的:研究肠三叶因子(intestinal trefoil factor,ITF)对自身启动子活性的影响及Janus激酶/信号转导和转录激活因子(Janus kinase/signal transducers and activators of transcription,JAK/STAT)信号通路对其的调控作用。方法:以人全血基因组DNA为模板,PCR获取ITF基因5'侧翼序列,插入p GL3-Basic载体,构建ITF启动子重组载体;以不同浓度的ITF刺激,检测双荧光素酶的活性;运用JAK-STAT3通路特异性抑制剂AG490阻断JAKSTAT3信号通路,观察AG490对ITF启动子活性的影响。结果:酶切和直接测序法证实包含ITF启动子的重组质粒构建成功;瞬时转染实验显示,ITF能显著提高ITF启动子的活性(P<0.05);加入AG490后ITF启动子活性显著下降(P<0.05)。结论:ITF通过JAK-STAT3途径上调自身启动子的活性。

基于“寒毒”理论探讨温阳益气解毒方治疗溃疡性结肠炎临床研究

目的:观察温阳益气解毒方治疗溃疡性结肠炎(UC)临床疗效,探讨修复肠黏膜的可能机制。方法:选择120例UC患者,按随机数字表法分为观察组和对照组各60例。对照组给予双歧杆菌三联活菌胶囊、谷氨酰胺肠溶胶囊、美沙拉嗪肠溶片治疗,观察组在对照组基础上加用温阳益气解毒方口服。治疗后比较2组中医证候积分、临床疗效、白细胞介素-1(IL-1β)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、三叶因子3(TFF3)、黏蛋白2(MUC2)及肠黏膜评分。结果:观察组总有效率为90.0%,显著高于对照组76.7%(P<0.05)。治疗前,2组单个中医症状积分比较,差异无统计学意义(P>0.05)。治疗后,2组腹痛、腹泻、脓血便、里急后重等症状评分低于治疗前,且观察组各个症状评分低于对照组,差异均有统计学意义(P<0.05)。治疗前,2组IL-1β、TNF-α、TFF3、MUC2水平比较,差异无统计学意义(P>0.05)。治疗后,2组IL-1β、TNF-α水平较治疗前降低,TFF3、MUC2水平较治疗前升高;且观察组IL-1β、TNF-α水平低于对照组,TFF3、MUC2水平高于对照组;差异均有统计学意义(P<0.05)。治疗前,2组肠黏膜评分比较,差异无统计学意义(P>0.05)。治疗后,2组肠黏膜评分较治疗前降低,且观察组肠黏膜评分低于对照组,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论:温阳益气解毒方可以提高UC治疗效果,且可以降低IL-1β、TNF-α表达,减轻炎性反应,增加TFF3、MUC2表达量,保护肠黏膜。

肠三叶因子介导PI3K/Akt信号通路保护胃黏膜上皮细胞紧密连接

目的:探讨肠三叶因子对胃黏膜上皮细胞紧密连接的保护作用,并研究PI3K/Akt信号通路在其中的作用机制。方法:体外培养GES-1细胞,分别设正常对照组,LPS组,ITF组,LPS+ITF组,LPS+ITF+LY294002组,ITF+LY294002组。正常对照组:正常培养;LPS组:加入浓度为10mg/L的LPS;ITF组:加入浓度为100μg/L的ITF;LPS+ITF组:加入浓度为10mg/L的LPS,同时加入100μg/L的ITF;LPS+ITF+LY294002组:加入浓度为10mg/L的LPS、100μg/L的ITF,同时加入PI3K/Akt信号通路的抑制剂LY294002(15μM);ITF+LY294002组:加入100μg/L的ITF,同时加入15μM的LY294002。培养48h,采用Western blot检测ITF对PI3K/Akt信号通路的作用,采用免疫荧光和Western blot检测细胞紧密连接蛋白Occludin和ZO-1的变化情况。结果:Western blot检测结果说明,与对照组相比,ITF提高了pAkt蛋白的表达水平,而LY294002抑制了ITF激活的pAkt蛋白的表达,说明ITF可以通过激活PI3K/Akt信号通路来调控GES-1细胞的生理活动。免疫荧光和Western blot结果显示LPS导致GES-1细胞的紧密连接遭到破坏,降低紧密连接蛋白Occludin和ZO-1的表达水平,而ITF可以通过激活PI3K/Akt信号通路来保护GES-1细胞的紧密连接的完整性。结论:ITF保护胃黏膜上皮细胞紧密连接的完整性,提高紧密连接蛋白的表达水平,其发挥作用的主要分子机制是通过激活PI3K/Akt信号通路来实现的。

清肠化湿方对溃疡性结肠炎大鼠结肠组织PPAR-γ,NF-κB及MUC2,TFF3的影响

目的:观察清肠化湿方对三硝基苯磺酸(TNBS)诱导的大鼠溃疡性结肠炎(UC)的治疗效果,以过氧化物酶体增殖物激活受体-γ(PPAR-γ)和核因子(NF)-κB为中心探讨其作用机制。方法:将雄性Wistar大鼠80只,随机分为8组,分别为正常组灌胃(ig)生理盐水2 m L·d-1],模型组(ig生理盐水2 m L·d-1),清肠化湿方低、中、高剂量组(ig清肠化湿方8,16,32 g·kg-1),柳氮磺胺吡啶(SASP)组(ig SASP 0.67 g·kg-1),SASP+双酚A-二甘氨酸醚(BADGE)组(ig SASP 0.67 g·kg-1+腹腔注射BADGE 20 mg·kg-1)及清肠化湿方中剂量+BADGE组(ig清肠化湿方16 g·kg-1+腹腔注射BADGE 20 mg·kg-1),每组10只。除正常组以生理盐水灌肠外,其余组采用TNBS/乙醇灌肠造UC大鼠模型。以柳氮磺胺吡啶(SASP)为阳性药物,同时联合使用PPAR-γ抑制剂双酚A-二甘氨酸醚(BADGE),观察大鼠疾病活动指数及结肠病理评分,蛋白质免疫印迹(Western blot)和实时荧光定量PCR(Real-time PCR)法分别检测大鼠结肠组织中PPAR-γ,NF-κB的蛋白和基因表达酶联免疫吸附测定(ELISA)法检测肠组织分泌蛋白黏蛋白2(MUC2)和三叶因子3(TFF3)的表达情况。结果:模型组大鼠结肠出现明显炎症和溃疡,提示造模成功。模型组PPAR-γ蛋白和基因表达较正常组显著降低(P<0.01);与模型组比较,清肠化湿方组和SASP组PPAR-γ表达均有所增加(P<0.05);联用PPAR-γ抑制剂BADGE后两组PPAR-γ表达又显著降低(P<0.05)。同时,模型组NF-κB的蛋白和基因表达显著升高(P<0.01),清肠化湿方各剂量组均能降低NF-κB的表达(P<0.05),而清肠化湿方中剂量+BADGE组较清肠化湿方中剂量组NF-κB的表达又显著增高(P<0.05)。此外,清肠化湿方组和SASP组能有效升高大鼠肠组织中MUC2和TFF3的表达,而当清肠化湿方或SASP联合使用BADGE时这一作用被减弱。结论:清肠化湿方能有效改善溃疡性结肠炎大鼠的病变程度,其作用机制与抑制NF-κB的激活,减轻炎症反应,并通过促进肠道黏膜MUC2与TFF3的分泌修复肠粘膜屏障有关,而这些作用可能主要是通过激活PPAR-γ信号通路完成的。

血清三叶因子3在胃癌及癌前病变筛查中的作用

目的探讨血清三叶因子3(TFF3)在胃癌及癌前病变筛查中的作用。方法选择2011年1月至2011年12月行内镜检查及活检的患者326例,根据病理检查结果分为慢性萎缩性胃炎(CAG)组125例,上皮内瘤变组33例,肠型胃癌组66例,慢性非萎缩性胃炎(对照组)102例。采用ELISA法定量检测血清TFF3浓度。截点的选择用ROC曲线获得并得到相应的灵敏度、特异度;比较ROC曲线下面积(AUC)以判断血清TFF3诊断胃癌及癌前病变的有效性。结果 CAG组、肠型胃癌组血清TFF3水平均明显高于对照组(P<0.01,P<0.05)。血清TFF3诊断CAG及胃癌的ROC曲线下面积分别为分别0.725±0.029,0.548±0.038。根据ROC曲线得到诊断CAG的血清TFF3最佳临界值为28.10 ng/ml,其诊断的灵敏度为66.4%,特异度为74.1%。结论血清TFF3是筛选胃癌前病变的有效指标,但尚需进一步进行大宗病例、多中心研究。