基于非靶向代谢组学挖掘两种日粮模式下蛋鸡回肠代谢物的差异

为探究饲喂基础日粮(CON)和含5.0%益生菌发酵饲料(PFF)2种日粮条件下蛋鸡回肠内容物代谢物差异,采用液相色谱-质谱和非靶向代谢组学相结合的方法,检测2种日粮条件下蛋鸡回肠中代谢产物,通过差异代谢物筛选和KEGG富集分析,筛选出蛋鸡回肠中的差异代谢物及代谢通路。结果表明,与CON组相比,PFF组中胆酸、牛磺鹅去氧胆酸、鹅去氧胆酸等胆汁酸含量显著降低,异亮氨酸-亮氨酸-甘氨酸-丙氨酸、苯丙氨酸-谷氨酸-缬氨酸-谷氨酸、亮氨酸-酪氨酸-苏氨酸-赖氨酸等小肽含量显著增加;KEGG通路富集分析表明,代谢物主要与胆汁分泌、初级胆汁酸生物合成等通路相关,初级胆汁酸在宿主脂质和脂溶性物质的消化代谢、抗氧化状态、胆固醇代谢和宿主-微生物相互作用中发挥重要作用。蛋鸡日粮中添加益生菌发酵饲料可通过改变肠道代谢产物来改善肠道吸收功能。

药物肠代谢研究方法与中药肠代谢的研究进展

介绍药物肠代谢研究方法以及中药肠代谢的研究进展。小肠在药物的首关代谢中日益受到重视,其研究的方法学也在不断改进,主要有体外法和在体法。体外法中重点介绍了肠微粒体法、完整组织系统法、Caco-2细胞模型法及肠组织切片法,从肠道内的Ⅰ相、Ⅱ相代谢酶对中药的作用提出肠道代谢的重要性。

肉桂药材粉末中桂皮醛与单体桂皮醛肠代谢差异比较

目的:考察并比较桂皮醛单体及肉桂药材粉末中桂皮醛在大鼠小肠黏膜匀浆液中的代谢特性。方法:采用体外温孵法,以HPLC测定桂皮醛和肉桂酸的含量,考察桂皮醛随时间和浓度代谢变化的动力学特征。HPLC条件:采用Diamonsil C18(150 mm×4.6 mm,5μm),以0.1%磷酸-乙腈(70∶30)为流动相,流速1.0 mL.min-1,检测波长280 nm,柱温25℃。结果:桂皮醛在大鼠小肠匀浆液中很不稳定,含量很快降低,主要代谢产物为肉桂酸。随着桂皮醛浓度的增加,桂皮醛降解达到稳定的时间逐渐延长;其降解速率随着桂皮醛浓度的增大而增加,当桂皮醛浓度达到0.4 mg.mL-1之后,降解速率趋稳。对6个浓度桂皮醛的代谢观察,当单体桂皮醛和肉桂粉末供试品溶液中桂皮醛含量相同时,单体桂皮醛较药材粉末的代谢速率快得多,二者差异明显,肉桂酸的生成也具有同样的趋势。而桂皮醛单体在经加热使代谢酶失活的肠匀浆液中随时间和浓度变化较小。结论:肉桂中主要成分桂皮醛很易在大鼠小肠中受酶代谢降解,主要代谢产物是肉桂酸,药材中的桂皮醛因释放缓慢及与代谢酶接触机会少而受到保护,延缓了其在肠中代谢速率。

口服葛根的肠代谢特征分析

目的 利用中药多成分吸收代谢评价方法,考察其对同植物不同药用部位多成分吸收及其吸收代谢差异的适用性.方法 利用大鼠肠吸收代谢实验方法,对葛根素、葛根水提液、葛花水提液进行体外温孵代谢实验,并运用高效液相色谱法进行分析.结果 葛根素单一成分代谢与葛根水提液、葛花水提液多成分共同代谢的对比结果显示,葛根水提液中葛根素代谢率低于葛根素对照品溶液,酶平均浓度可能是造成此差异的原因.此外,研究发现相同植物不同药用部位的葛根与葛花的化学成分指纹图谱存在很大差异,揭示二者所含成分差异较大.结论 采用S9实验进行多成分肠吸收时的并发肠壁代谢研究,可揭示多成分的肠代谢总体特征.

淫羊藿苷及其肠菌代谢产物对THP-1细胞分泌细胞因子的影响

目的 :比较淫羊藿苷及其肠菌代谢产物对人组织细胞瘤THP 1细胞分泌 4种细胞因子的影响。方法 :放射免疫测定方法 (RIA)。结果 :在LPS和PMA存在下 ,淫羊藿苷及其肠菌代谢产物 (宝藿苷I和淫羊藿苷元 )对IL 6的产生有促进作用 ,代谢物的作用更强 ,对IL 8的产生有一定的抑制作用。当LPS和PMA不存在时 ,对IL 6的产生无明显影响 ,而对IL 8的产生则有促进作用。不论LPS和PMA存在与否 ,原苷对TNFα的产生有抑制作用 ,原苷及其肠菌代谢产物对IL 1α的产生均有明显抑制作用。结论 :在不同的实验条件下 ,淫羊藿苷及其肠菌代谢产物对各种炎症性细胞因子的产生均有特异的调节作用。

香加皮强心成分杠柳毒苷肠菌代谢研究

[目的]检测杠柳毒苷在大鼠和人体肠菌作用下含量与成分的变化。[方法]采用离体粪便温孵法,利用高效液相—紫外法对温孵不同时间的杠柳毒苷及其代谢产物含量进行测定,并利用高效液相—质谱联用法对代谢物进行鉴定。[结果]杠柳毒苷含量随温孵时间的延长呈快速下降的趋势,温孵5h含量降低约75%,与此同时有代谢物生成,并随温孵时间的延长呈上升趋势。[结论]杠柳毒苷在肠菌(大鼠/人体)作用下,代谢迅速,生成了代谢产物杠柳次苷。

人参皂苷Rg_1的肠内菌代谢及其代谢产物吸收入血的研究

目的 :研究人参皂苷Rg1(Rg1)在人及大鼠体内经肠内菌代谢后的变化及吸收入血代谢物的确定。方法 :生物样品 (血、尿、粪便 )经处理后分别做TLC ,ESI MS及HPLC检测分析。结果 :在大鼠尿和血中有代谢物Rh1/F1存在 ;在人的尿中有Rh1存在。结论 :在大鼠和人的血内 ,Rg1主要以其代谢产物形式存在。

淫羊藿苷的肠菌代谢研究Ⅰ.肠内细菌对淫羊藿苷的代谢转化

目的 :在考察淫羊藿苷 (icariin)于人工胃液中稳定性的基础上 ,研究了肠道内细菌对淫羊藿苷的代谢作用。方法 :于人工胃液或肠内菌培养液中 ,加入淫羊藿苷温孵培养一定时间后 ,以薄板层析、高效液相色谱仪和电喷雾质谱仪 ,对培养物成分做定性分析检查。结果 :淫羊藿苷在人工胃液中有较高的稳定性。离体培养人肠道内细菌可代谢淫羊藿苷 ,且其主要代谢产物为淫羊藿苷的苷元 (icaritin)及其苷元的异戊烯基位置异构体。在大鼠整体实验中 ,从粪便和尿液中均检出一主要代谢产物 ,并初步确定此代谢产物为宝藿苷 (baoliuoside )。结论 :在离体条件下 ,淫羊藿苷可被人肠内菌代谢 ,主要代谢产物为淫羊藿苷的苷元。大鼠灌服淫羊藿苷后 ,吸收入血的主要代谢物为宝藿苷 。

人参皂甙Rb_1的肠内菌代谢

目的：通过离体及整体实验观察了人和大鼠肠内菌对人参皂甙Ｒｂ１（ＧＲｂ１）的代谢。方法：采用薄层色谱（ＴＬＣ）和电喷雾质谱（ＥＳＩＭＳ）检测ＧＲｂ１及其代谢产物。结果：离体实验表明，ＧＲｂ１容易被大鼠和人消化道菌群代谢，随着代谢时间的延长，相继出现Ｒｄ，Ｒｇ３／Ｆ２，Ｒｈ２／ＣＫ和Ｐｐｄ４种代谢产物。给大鼠ｉｇＧＲｂ１５００ｍｇ·ｋｇ－１后收集４ｈ和６ｈ粪，提取ＧＲｂ１的代谢产物，证明粪中存在Ｒｄ和Ｒｇ３／Ｆ２两种代谢产物。结论：ＧＲｂ１可被人和大鼠肠内菌代谢，其代谢模式为ＧＲｂ１→Ｒｄ→Ｆ２→ｃｏｍｐｏｕｎｄＫ（ＣＫ）→２０（Ｓ）ｐｒｏｔｏｐａｎａｘａｄｉｏｌ（Ｐｐｄ）。

氧化苦参碱肠内菌代谢及吸收入血活性成分的研究

目的 :通过离体和整体实验观察人肠内菌对氧化苦参碱的代谢 ,并确定吸收入血的代谢物。方法 :通过薄层色谱和高效液相色谱仪定性检测氧化苦参碱及其代谢产物。并通过UV ,IR ,NMR及MS等光谱学方法确定代谢物的结构。结果 :离体实验结果表明 ,氧化苦参碱可被人肠内菌代谢成苦参碱。给大鼠按 10 0mg·kg-1灌胃氧化苦参碱 3h后 ,剪头处死取血 ,以TLC和HPLC检测血清中代谢产物。证明氧化苦参碱和苦参碱均能被吸收入血。结论 :人肠内菌可将氧化苦参碱代谢成苦参碱 ,上述两种生物碱均可被吸收入血。

大鼠肠内菌对麦冬皂苷D′代谢的研究

目的:通过大鼠肠内菌代谢转化麦冬皂苷D′的离体、在体实验,探索麦冬皂苷D'口服后吸收入血成分。方法:采用HPLC ELSD定量检测离体实验的代谢产物及原形药含量;采用TLC ,HPLC -MS法分别鉴定、监测在体实验大鼠尿、血中的代谢产物。结果:麦冬皂苷D′可被大鼠肠内菌群代谢,且随着时间的延长,代谢产物之一薯蓣皂苷元含量增加。结论:薯蓣皂苷元为麦冬皂苷D′经肠内菌代谢后的吸收入血成分之一。

人参皂苷Rb_1在大鼠肠内菌代谢物吸收入血成分的研究

目的：研究口服人参皂苷Ｒｂ１（ＧＲｂ１）被吸收入血的成分。方法：给大鼠ｉｇＧＲｂ１５００ｍｇ·ｋｇ－１后，于不同时间采集粪、尿及血清样品，用电喷雾质谱（ＥＳＩＭＳ）检测吸收入血成分。结果：在血与尿中发现分子量为１１０８，９４６及７８４ａｍｕ的代谢产物。经ＥＳＩＭＳ２级质谱分析，上述分子量的化合物分别为ＧＲｂ１，Ｒｄ和Ｆ２。结论：ＧＲｂ１给大鼠ｉｇ后，原形及中间代谢产物Ｒｄ及Ｆ２被吸收入血。

小肠CYP450酶在药物代谢中的作用

小肠是口服药物的主要吸收器官,同时也是进行药物代谢的重要场所。小肠黏膜上皮细胞含有大量Ⅰ、Ⅱ药物代谢酶,其中以CYP450酶最为重要,参与众多药物的生物转化。小肠CYP450主要有CYP1A1、CYP2C9、CYP2C19、CYP2J2、CYP2D6、CYP3A6种同工酶,其中CYP3A和CYP2C在小肠中表达最高,分别约占CYP450总含量80%和16%。与肝脏相比,小肠CYP450酶活性及其表达更易受到外源性化合物影响。本文重点讨论小肠CYP450s活性与表达及其在药物代谢中的作用以及由CYP450s的诱导或抑制引起的药物相互作用。

龙胆苦甙的人肠内菌代谢实验观察

目的 :通过离体实验观察人肠内菌对龙胆苦甙的代谢。方法 :采用人新鲜粪便厌氧培养 ,HPL C法定量测定代谢产物。结果 :龙胆苦甙经人肠内菌代谢生成龙胆碱和龙胆醛等主要产物。结论 :龙胆苦甙易被人肠内菌代谢 ,其代谢模式可能为龙胆苦甙→龙胆碱→龙胆醛。

ESI-MS研究反药配伍对乌头汤肠内菌代谢的影响

目的:利用ESI-MS技术对乌头汤及其分别与半夏、浙贝母、川贝母配伍的煎煮液经肠内菌代谢前后的样品进行检测。方法:根据各药液中生物碱成分经肠内菌代谢前后相对丰度比的变化,分析反药配伍对乌头汤中生物碱成分肠内菌代谢的影响。结果:半夏、浙贝母、川贝母均抑制了乌头汤中双酯型生物碱的肠内菌生物转化,说明以上3种中药与乌头汤配伍均有增毒作用。结论:从肠内菌代谢的角度揭示中药"十八反"的科学内涵。

UPLC-MS/MS联用法分析灯盏花乙素在胃肠道的代谢物

目的:研究灯盏花乙素在胃肠道的代谢物。方法:分别用盐酸、β-葡糖醛酸苷酶水解灯盏花乙素,并用健康志愿者的肠内菌对灯盏花乙素进行转化,用超高效液相-串联质谱联用法分析代谢物。结果:灯盏花乙素可被盐酸、β-葡糖醛酸苷酶水解为苷元,可被肠内菌群转化为苷元。健康受试者口服灯盏花乙素后,血浆中能检测到灯盏花乙素苷元。结论:健康受试者口服灯盏花乙素后,在吸收进入血液之前,胃肠道内灯盏花乙素与其苷元并存,而苷元更易于吸收,以总苷元为检测对象研究灯盏花乙素药代动力学是合理的。

黄山药总皂苷肠内菌代谢及代谢产物吸收的研究

目的 :本文离体和整体观察人和大鼠肠内菌对黄山药总皂苷(DX)的代谢作用及整体给予DX后吸收入血的有效成分。方法 :用薄层色谱(TLC)及电喷雾质谱(ESI -MS)法检测粪中DX及其代谢产物。整体给予大鼠灌服DX900mg/kg ,于给药后不同时间采集尿及血清样品 ,用ESI -MS检测吸收入血成分。结果 :DX容易被人和大鼠消化道菌群代谢 ,随着代谢时间的延长 ,出现了各种甾体皂苷的降解产物及终产物薯蓣皂苷元 (Dio)。整体实验表明 ,在大鼠血及尿中均发现分子量为415 3的代谢产物 ,经ESI -MS二级质谱分析 ,上述分子量的化合物为Dio。结论 :DX可被人和大鼠肠内菌代谢 ,DX经口服后Dio被吸收入血。

龙胆苦苷的肠内菌群代谢研究

目的 :研究体外培养的大鼠肠内菌对龙胆苦苷的代谢及大鼠灌服龙胆苦苷经体内肠菌代谢后血清中的药物成分变化。方法 :用HPLC法测定肠内菌培养液中和大鼠灌服龙胆苦苷后血清中的龙胆苦苷及其代谢产物龙胆碱、龙胆醛的含量。结果 :血清中第 2天检测到龙胆碱和龙胆醛 ,而龙胆苦苷的含量在第 3天呈下降趋势 ;肠内菌体外培养液中龙胆苦苷含量的下降和龙胆碱与龙胆醛含量的上升呈同步变化。结论 :龙胆碱和龙胆醛是龙胆苦苷体内代谢的重要生物活性产物。

中药多糖类化合物肠内转运与代谢研究的思考

通过研究分析国内外有关中药多糖类化合物现状,提出:中药多糖类化合物在小肠难吸收,推进至大肠后在肠道微生态的作用下,代谢生成小分子寡糖类等,这些寡糖类代谢产物部分被吸收产生类似于多糖的药理作用,而剩余部分经大肠排泄,药材中的多糖是前药等观点,并就中药多糖类化合物肠内转运与代谢的研究方法提出的设想。