AITC调控肠嗜铬细胞中血清素的代谢及其生物学功能

为探讨异硫氰酸烯丙酯(Allylisothiocyanate,AITC)调控肠嗜铬细胞(Enterochromaffin cells,EC)中血清素(5-hydroxytryptamine,5-HT)的合成及其对EC生物学功能的影响,使用食用级AITC对RIN-14B细胞(大鼠胰腺内分泌细胞系)进行干预处理,采用FLUO-8 AM检测RIN-14B细胞内钙离子浓度,qRT-PCR分析5-HT合成相关基因表达,UPLC测定5-HT含量,以及RNA-seq检测AITC处理后的RIN-14B细胞转录组,并对其结果进行生物信息学分析。结果表明,AITC通过激活离子通道TRPA1使胞内钙离子浓度升高,上调Tph1(色氨酸羟化酶)和Ddc(5-羟色氨酸脱羧酶)的表达,从而促进5-HT合成及分泌。此外,GO和KEGG功能富集分析AITC处理后的RIN-14B细胞差异表达基因发现,AITC主要调控谷胱甘肽代谢和抗氧化、炎症调节等相关通路,提示AITC可能通过刺激EC促进谷胱甘肽代谢来调节肠道稳态,同时参与肠道的炎症调节。以上结果为研究AITC影响EC及肠道更深入的生物学功能提供实验数据与研究思路。

肠嗜铬细胞驱动内脏疼痛和焦虑机制

胃肠不适是大多数肠道疾病的表现,也是慢性内脏疼痛的重要成分之一。越来越多的肠易激综合征(irritable bowel syndrome,IBS)病人,即使组织损伤已经修复,其胃肠道高敏和疼痛也会长期存在。该研究聚焦于肠嗜铬(enterochromaffin,EC)细胞,EC细胞是一类存在于肠道上皮中数量较少的可兴奋的5-羟色胺(5-HT)能神经内分泌细胞。已知EC细胞能够检测和传导有害刺激至邻近黏膜神经末梢,但这一信号通路是否参与调节内脏疼痛及其性别差异尚待研究。该研究通过在体增强或抑制EC细胞功能,阐明了EC细胞的激活足以引起对肠扩张的高敏反应,且EC细胞是异戊酸(一种源于细菌的与胃肠道炎症相关的短链脂肪酸)的致敏作用所必需的。即使在缺少炎症反应的条件下,EC细胞的长期激活会引起持续的内脏高敏状态。此外,干扰EC细胞活动会促进焦虑样行为,而阻断5-HT信号可使其恢复正常。该研究在一系列研究范式中均观察到显著的性别差异,表现为EC细胞-黏膜神经传入环路在雌性中处于紧张性操控状态。该研究证实了EC细胞-黏膜神经传入信号在急性和持续性胃肠道疼痛中的关键作用,还提供了研究内脏高敏和肠道疼痛的性别差异的遗传学模型。

便秘大鼠肠壁内一氧化氮合酶表达和肠嗜铬细胞改变的可复性研究

目的观察便秘模型大鼠回肠和结肠一氧化氮合酶和肠嗜铬细胞的变化及自然恢复情况,了解大黄所致便秘的可恢复性。方法Wistar大鼠60只,按照完全随机的方法分为便秘组、恢复组、对照组,便秘组和恢复组给予大黄建立便秘大鼠模型,恢复组于建立模型完成后任其自然恢复6周。以放射免疫方法和免疫组织化学方法测定比较各组大鼠回肠和结肠一氧化氮合酶和肠嗜铬细胞的变化。结果便秘组和恢复组大鼠的回肠、结肠NOS含量均明显升高(P<0.05),恢复组回肠NOS含量明显低于便秘组(P<0.05),恢复组结肠NOS含量与便秘组比较无差别(P>0.05)。便秘组大鼠肠道5-HT免疫反应阳性的肠嗜铬细胞密度高于对照组,(回肠、横结肠P<0.05)。恢复组大鼠肠道5-HT免疫反应阳性的肠嗜铬细胞密度低于便秘组(回肠、横结肠P<0.05)但高于对照组(回肠、横结肠P<0.05)。结论长期应用大黄等蒽醌类泻剂对肠道神经系统有明显的损害作用,回肠和结肠NOS含量和肠嗜铬细胞密度升高,停用大黄恢复性饲养6周后肠道神经递质部分恢复。

大鼠胃肠嗜铬细胞5-羟色胺合成和分泌与胃黏膜内分泌和腔分泌心房钠尿肽的关系(英文)

背景:作者前期研究证实心房钠尿肽和5-羟色胺共同存在于胃肠嗜铬细胞的同一分泌颗粒中,那么心房钠尿肽对5-羟色胺的合成与分泌是促进还是抑制,目前仍处于研究阶段。目的:通过模拟胃黏膜内分泌和腔分泌心房钠尿肽来证实对胃肠嗜铬细胞中5-羟色胺合成与分泌的影响。设计:随机对照动物实验。单位:承德医学院免疫学实验室。材料:实验于2004-10/2007-07在省级重点实验室承德医学院免疫学实验室完成。选用40只雄性成年Wistar大鼠,由承德医学院实验动物科提供,实验过程中对动物的处置符合动物伦理学标准。实验用心房钠尿肽、5-羟色胺抗体为美国Santa Cruz Biotechnology公司产品。方法:随机将40只大鼠均分至内分泌和外分泌2个平行实验中,各分为对照组10只和实验组10只。通过胃腔直接注射心房钠尿肽(28μg14mg/L)模拟外分泌产生的心房钠尿肽,通过舌下静脉注射心房钠尿肽14μg,14mg/L)模拟内分泌产生的心房钠尿肽;并以免疫组织化学,透射电镜的超微结构的测量学的方法和高压液相色谱电化学检测的方法对心房钠尿肽刺激后胃内5-羟色胺免疫反应细胞和内分泌颗粒的数量及血清中的5-羟色胺含量,与注射生理盐水的对照组进行对比。主要观察指标:模拟胃黏膜内分泌和腔分泌心房钠尿肽对胃内5-羟色胺免疫反应阳性细胞密度、分泌颗粒的数密度及血清中的5-羟色胺的影响。结果:模拟心房钠尿肽外分泌和内分泌对大鼠胃内5-羟色胺分泌的影响:与对照组相比,胃内5-羟色胺免疫反应阳性细胞密度及分泌颗粒的数密度显著增多(P<0.05),血清中的5-羟色胺含量显著减少(P<0.05)。结论:外分泌和内分泌的心房钠尿肽对5-羟色胺的释放均有明显的抑制作用。

感染后功能性消化不良患者胃黏膜肠嗜铬细胞的改变

背景:已证实肠嗜铬细胞(EC细胞)在感染后肠易激综合征(PI-IBS)的发生中起重要作用。功能性消化不良(FD)与IBS同属功能性胃肠病范畴,推测感染后FD(PI-FD)与PI-IBS可能存在相似的发病机制。目的:观察PI-FD患者胃黏膜EC细胞数量、功能的改变,初步探讨PI-FD的可能发生机制。方法:纳入35例PI-FD患者、30例非PI-FD患者和20名健康志愿者。35例PI-FD患者中,14例粪便培养致病菌阳性(PI-FD-A组),21例粪便培养阴性,根据临床表现确诊(PI-FD-B组)。以5-羟色胺(5-HT)免疫组化染色计数胃黏膜EC细胞,高效液相色谱电化学法检测胃黏膜5-HT浓度,透射电子显微镜观察EC细胞超微结构及其与神经纤维的毗邻关系。结果:PI-FD组胃黏膜EC细胞数和5-HT浓度显著高于非PI-FD组和健康对照组(P<0.05),且EC细胞数量与黏膜炎症程度呈正相关(P<0.05)。电子显微镜下,EC细胞内细胞器较多,部分胞质内可见特异性分泌颗粒,PI-FD组距神经纤维5μm范围内EC细胞数显著高于非PI-FD组和健康对照组(P<0.05)。PI-FD-A组与PI-FD-B组的EC细胞数量和5-HT浓度均无明显差异。结论:PI-FD患者胃黏膜EC细胞显著增殖、活化,EC细胞激活途径可能在PI-FD的发病过程中起重要作用。

太行山猕猴胃窦粘膜肠嗜铬细胞的定量研究

以Grimelius嗜银法显示太行山猕猴鲁窦部肠嗜铬细胞.并用Weibel体视学方法对其进行了定量分析.结果:从胃大弯、胃侧壁至胃小弯,细胞的密度依次减小;大多数肠嗜铬细胞分布在粘膜深段,而粘膜浅段细胞密度极低.一些细胞的嗜银颗粒释放到腺腔面,有时见细胞伸出细长突起伸至其它种类细胞.提示肠嗜铬细胞在胃窦部的分布有明显的区域性差异.并可能有外分泌或旁分泌功能.

肥大细胞及肠嗜铬细胞在人胃消化性溃疡发病中的作用

目的探讨肥大细胞与肠嗜铬细胞在人胃溃疡发病中的作用。方法收集胃溃疡标本90例,正常胃组织30例。采用甲苯胺兰检测肥大细胞的数量、分布,免疫组化染色检测类胰蛋白酶、5-羟色胺表达,另取5例新鲜胃溃疡组织进行电镜检测。结果溃疡组与对照组比较肥大细胞及肠嗜铬细胞数量均明显增加(P<0.05),肥大细胞在溃疡组脱颗粒现象明显,线性相关分析显示肥大细胞与肠嗜铬细胞数量呈正相关,相关系数为0.741。结论肥大细胞与肠嗜铬细胞在人胃溃疡发病中均发挥了作用。

肥大细胞及肠嗜铬细胞在肠易激综合征患者肠道的表达及意义初探

目的:研究肠易激综合征(IBS)患者肠黏膜肥大细胞(MC)及肠嗜铬细胞(EC)的变化及其相互关系,探讨其在IBS内脏高敏感性中的作用和临床意义。方法:符合罗马Ⅲ诊断标准的IBS患者56例,对照组25例。肠道黏膜标本取自回盲部、升结肠、降结肠、乙状结肠和直肠,应用甲苯胺蓝改良染色法和免疫组织化学染色法分别对MC和EC进行染色,并应用彩色病理图像分析软件及免疫组化分析软件进行分析。结果:IBS患者回盲部、升结肠、降结肠、乙状结肠MC明显增多(P<0.05),直肠MC无明显变化;IBS患者MC存在显著变异;IBS患者肠黏膜EC阳性细胞表达增强(P<0.05),其含量较正常对照组显著升高(P<0.05)。结论:MC和EC的相互作用在IBS内脏高敏感的病理生理过程中可能具有重要作用。

肠嗜铬细胞与胃肠道疾病的研究进展

肠嗜铬细胞(Enterochromaffin cell, EC)由肠上皮基底干细胞分化而来,由于其特殊的组织化学染色特性而得名. EC主要分泌5-羟色胺,并产生机体95%的5-羟色胺(5-hydroxytryptamine,5-HT).EC作为化学感受器通过肠-脑回路与神经细胞建立直接突触联系,感受胃肠道摄入的食物以及相关化学因子,并以此调控胃肠道吸收营养物质.另外, EC还参与肠道免疫调节功能.值得注意的是EC数量以及其分泌的5-HT浓度的变化与多种肠道疾病密切相关.总之,EC对胃肠道健康的作用不容小觑.

Bmal1通过肠嗜铬细胞及其TPH1-5-HT信号通路参与肠易激综合征的作用机制研究

背景:肠易激综合征(IBS)的发生与生物钟节律紊乱有关,IBS症状常具有昼夜波动等节律紊乱特征。肠嗜铬细胞(EC细胞)及其色氨酸羟化酶-1(TPH1)-5-羟色胺(5-HT)信号通路是目前公认的参与IBS发生的关键病理生理学机制。目的:探讨生物钟核心基因Bmal1是否通过调控EC细胞及其TPH1-5-HT信号通路参与IBS的发生。方法:采用IBS模型和对照Sprague-Dawley大鼠以及Bmal1肠道特异性敲除(Bmal1△IEC)和野生型(WT)C57BL/6小鼠进行研究。以连续单一刺激方法建立IBS模型。以免疫荧光染色检测结肠Bmal1、EC细胞嗜铬粒蛋白A(Cg A)、TPH1和5-HT表达。结果:大鼠实验:Bmal1主要表达于结肠上皮细胞,在EC细胞中亦有表达。与对照组相比,授时因子时间点(ZT)ZT8:00和ZT24:00时,IBS模型组结肠Bmal1表达明显增高,且模型组ZT8:00的Bmal1表达明显高于ZT16:00和ZT24:00,差异均有统计学意义(P均<0.05)。小鼠实验:与WT组相比,Bmal1△IEC组结肠EC细胞数量明显减少,TPH1、5-HT表达明显降低,差异均有统计学意义(P均<0.05)。结论:IBS模型大鼠结肠生物钟基因Bmal1的表达存在昼夜异常波动,Bmal1表达的昼夜紊乱可通过EC细胞及其TPH1-5-HT信号通路参与IBS的发生。

免疫金银法观察人胎胃肠嗜铬细胞及胃泌素细胞

10例人胎胃粘膜,受精龄为13.5～30周,用A蛋白金银法研究EC细胞及G细胞的分布与形态。结果胃底EC细胞形态多种多样,其中多数为闭合型,但发现有开放型细胞。胃窦G细胞较大,圆形为主,常聚集成群。

肠易激综合征患者分泌5-羟色胺的肠嗜铬细胞形态及功能的改变

目的 研究肠易激综合征 (IBS)患者的肠嗜铬 (EC)细胞及其合成和储存 5 羟色胺 (5 HT)的功能变化。方法 按罗马Ⅱ标准诊断的 5 0例IBS患者 ,依其分型标准区分为腹泻型及便秘型。取IBS患者肠镜活检标本行Envision法免疫组化染色。部分活检标本电镜下观察EC细胞形态及功能。免疫组化染色及电镜观察均设正常对照组。结果 腹泻型、便秘型IBS与对照组比较 ,分泌 5 HT的EC细胞数量明显增多 ,分别为 15 .90± 5 .0 9,14 .73± 2 .73和 7.2 7± 2 .5 0 ,差异有显著性 (P <0 .0 1)。免疫组化染色显示IBS组EC细胞内合成的 5 HT增加 ,电镜显示肠道EC细胞功能活跃。结论 IBS患者肠黏膜EC细胞功能活跃 ,提示其大量合成并分泌的 5 HT可能在IBS的发病中起重要作用。

功能性消化不良患者肠嗜铬细胞数量及功能改变

目的探讨作为5-羟色胺(5-HT)重要来源的肠嗜铬细胞(EC细胞)在功能性消化不良(FD)患者胃黏膜中的改变。方法对15例健康志愿者和33例FD患者进行研究,免疫组化法染色并计数EC细胞。电镜观察EC细胞超微结构。结果FD患者近端胃黏膜EC细胞数显著高于对照组(12．5±2．1比8．3±1．4,t=2．353,P＜0．05)。FD患者EC细胞染色强度较对照组明显增强(3．72±0．42比2．61±0．57,t=2．078,P＜0．05)。随胃黏膜炎症程度的加重,EC细胞数量增加,染色强度增强。电子显微镜下EC细胞内高尔基体、线粒体及内质网较多,胞质内有特异性分泌颗粒。结论EC细胞可能参与FD发病,EC细胞数量与胃黏膜炎症程度有关。

眼针疗法对IBS模型大鼠结肠组织嗜铬细胞表达的影响

目的:研究眼针对肠易激综合征(IBS)模型大鼠远端结肠组织嗜铬细胞(EC)表达的影响,探讨眼针治疗IBS的可能机制。方法:实验动物分成对照组、IBS模型组、眼针组,采用束缚刺激与应激刺激相结合的方法建立IBS动物模型并进行眼针干预。各组采用免疫组化方法检测远端结肠组织中EC细胞并进行分析。结果:与对照组比较,IBS模型组EC细胞数量明显增多,细胞免疫组化染色强度显著增强;与IBS模型组比较,眼针组EC细胞数量、免疫组化染色强度显著降低。结论:IBS模型大鼠结肠EC细胞的表达上调,眼针干预可有效降低EC细胞的表达。

肠易激综合征患者分泌5-HT的肠嗜铬细胞实验研究

目的观察肠易激综合征(IBS)患者结肠黏膜肠嗜铬细胞(EC 细胞)的分布特点及其合成和储存5-羟色胺(5-HT)的功能变化,探讨其在 IBS 发病中的作用。方法符合 RomeⅡ诊断标准的 IBS 患者51例,以其分型标准区分为腹泻型和便秘型。经肠镜活检 IBS 患者结肠黏膜标本行 S-P 法免疫组化染色。部分活检标本电镜下观察 EC 细胞功能状态。免疫组化染色及电镜观察均设正常对照组。结果 IBS 组与正常对照组比较:(1)光镜下 IBS 组 EC 细胞形态饱满,体积较大,提示 EC 细胞合成5-HT增加。电镜下可见 IBS 组 EC 细胞内分泌颗粒多。(2)IBS 组回盲部 EC 细胞数量与正常对照组无差异(P>0.05),IBS 患者组直肠-乙状结肠交界处 EC 细胞数量较正常对照组显著增加(P<0.05)。结论 IBS 病人结肠黏膜 EC 细胞数量增加与功能活跃,5-HT 分泌增高,提示5-HT 可能在 IBS 发病中起到重要作用。

蜘蛛香成分11-ethoxyviburtinal对肠易激综合征大鼠肠嗜铬细胞及肥大细胞表达的影响

目的探讨蜘蛛香成分11-ethoxyviburtinal对肠易激综合征(IBS)大鼠肠嗜铬细胞(EC)及肥大细胞(MC)表达的影响。方法 SD雄性大鼠随机分为空白对照组、模型组、匹维溴铵(25 mg/kg)组和蜘蛛香成分11-ethoxyviburtinal大、中、小剂量(1.2、0.6、0.3 mg/kg)组。采用孤养复合慢性不可预见性应激法建立IBS大鼠模型,免疫组化法检测大鼠结肠5-羟色胺(5-HT)免疫反应阳性细胞EC数量的变化,甲苯胺蓝染色法检测大鼠结肠MC数量的变化。结果孤养复合慢性不可预见性应激可造成大鼠结肠5-HT免疫反应阳性细胞EC数量显著增加(P<0.01),结肠MC数量显著增多(P<0.05)。蜘蛛香成分11-ethoxyviburtinal大剂量可显著减少结肠5-HT免疫反应阳性细胞EC和MC数量(P<0.05)。结论蜘蛛香成分11-ethoxyviburtinal可抑制IBS大鼠结肠EC和MC的表达。

人胚胎胃肠及胰腺D细胞发生的研究

用免疫细胞化学方法研究人胚胎各时期胃肠胰的Ｄ细胞发生及其形态与功能的关系。结果发现：Ｄ细胞最早出现于６周零５天胚的十二指肠，７周零３天胚的胰、胃、空肠，７周零６天胚的回肠，８周零４天胎的结肠及１０周零５天胎的阑尾；细胞密度在胚期低，胎期逐增，至胎晚期又依次在胰、胃窦、十二指肠、胃体、空肠、回肠、升结肠及阑尾中降低，且肠绒毛顶端可见衰老的Ｄ细胞。提示胚胎Ｄ细胞的发生与胃肠胰的发育有关。

肠易激综合征与肠道内分泌细胞

肠易激综合征(irritable bowel syndrome,IBS)是指腹痛或腹部不适,同时伴有排便习惯异常或大便性状异常的一组功能性肠病[1].目前一般认为IBS缺乏形态学或实验检查异常.