草鱼肠型点状气单胞菌的分离和鉴定

从发病草鱼中分离出1株细菌。经形态学、染色特性、溶血性和理化特性鉴定为肠型点状气单胞菌。致病性试验中小白鼠和草鱼分别于48h和72h内全部死亡,并从小白鼠和草鱼中回收到分离菌。药敏试验表明,该菌对常用抗生素呈不同程度的敏感性。

肠型点状气单胞菌和鱼害粘球菌融合子的构建

为探索鱼类病原菌融合疫苗制备的可行性,以肠型点状气单细胞菌58-20-9菌株和鱼害粘球菌G4菌株作为初发菌株进行原生质体融合,构建融合子.在酶解温度37℃下,筛选出最适酶解时间为40min,最适溶菌酶质量浓度为4mg/mL.以PEG为促融剂的条件下,58-20-9菌株与G4菌株的原生质体进行了融合,58-20-9菌株的原生质体形成率为54.7%,原生质体再生率为18.2%,G4菌株的原生质体形成率为50.8%,原生质体再生率为12.2%,初筛的原生质体融合率为4‰.点种500个初筛融合子菌落在双抗培养基上连续传代12次,得到1个稳定的融合子菌落,其稳定率为0.2%.

肠型点状气单胞菌和鱼害粘球菌的融合子特性研究

为了探索病原菌融合疫苗制备的可行性及其理论基础,查明鱼类病原菌融合子的遗传规律,本研究对草鱼肠炎病和烂鳃病病原的融合子特性进行了研究,结果表明:筛选的融合子菌株菌体大小、酶类性状及生理生化指标介于两亲本菌株之间;融合子菌株具有致病性,用融合菌株制成灭活抗原进行抗原性研究,免疫保护率达74．9％和75．5％,抗体效价于第4周达到峰值,分别为1:322．5和1:435．5。

肠型点状气单胞菌口服疫苗微粒的制备及体外释放研究

采用复乳溶剂挥发法,以聚丙烯酸树脂Ⅲ为材料制备肠型点状产气单胞菌疫苗微球,进行了条件优化。研究结果显示,制备得到的口服疫苗微粒形态良好,平均粒径(6.78±0.07)μm,载药量和包封率分别为(6.04±0.07)%和(63.52±0.06)%,19 d时的累积体外释放百分率为65%。复乳溶剂挥发法置备的肠型点状产气单胞菌疫苗微球工艺可行,重复性良好,有一定的缓释特性。

肠型点状产气单胞菌口服疫苗对草鱼的免疫保护效应研究

采用生物可降解材料聚丙烯酸树脂制备含肠型点状产气单胞菌的微粒疫苗,口服免疫草鱼,测定实验鱼血清抗体及其对活菌攻击的保护率.实验结果显示,用肠型点状产气单胞菌微粒疫苗进行口服免疫或用全菌疫苗、佐剂疫苗进行注射免疫均可诱导草鱼的血清抗体应答,对肠型点状产气单胞菌攻击的草鱼具有一定的保护作用,保护率分别为52.4%、66.7%及71.4%,对照组仅有16.0%的存活率.可见,口服微粒疫苗对草鱼有显著免疫保护效应,可作为预防肠型点状产气单胞菌感染的疫苗.

兴国红鲤血细胞对肠型点状产气单胞菌免疫反应的研究

用肠型点状产气单胞菌 (Aeromonaspunctataf.intedtinalis)福尔马林灭活菌苗免疫兴国红鲤 ,于免疫后 2 0d和 4 0d对其脾、胸腺、头肾和体肾中的淋巴细胞、中性粒细胞和单核细胞的总值 (含原始型、未成熟和成熟型细胞的百分比值 )进行了测定。结果显示 :免疫后 2 0d和 4 0d ,脾中淋巴细胞总值显著增加 ,中性粒细胞和单核细胞总值则显著减少。头肾中淋巴细胞总值稍有增加 ,中性粒细胞和单核细胞的总值在免疫后 2 0d减少 ,免疫 4 0d增加。体肾中淋巴细胞和单核细胞总值在 2 0d和 4 0d均为增加。胸腺中淋巴细胞总值在 2 0d无变化 ,4

草鱼肠型点状产气单胞菌McAb制备及鉴定

为获得草鱼肠型点状产气单胞菌McAb,从患细菌性肠炎的草鱼机体上分离肠型点状产气单胞菌制成免疫原,免疫BALB/c小鼠,利用淋巴细胞杂交瘤技术,获得1株特异的针对肠型点状产气单胞菌的单克隆抗体杂交瘤细胞株,命名为AM,用吉姆萨染色,其染色体条数平均在90-100条。小鼠腹腔扩大培养,其腹水单克隆抗体的ELISA效价为1∶16000,与其他细菌无明显的交叉反应,抗体类型为IgG1。证明实验制备的抗体为高特异性的针对肠型点状产气单胞菌的单克隆抗体,可以用于患细菌性肠炎病草鱼的快速诊断。

草鱼肠型点状产气单胞菌双抗夹心ELISA试剂盒的研制

通过对包被单抗和酶标单抗以及抗原最佳工作浓度的优化,建立草鱼肠型点状产气单胞菌双抗夹心ELISA试剂盒检测体系。用分光光度法对检测体系的特异性、稳定性和灵敏度进行测定;用脱脂奶平板法对试剂盒的临床应用进行检测。结果表明,单抗最适稀释液为pH9.4的碳酸盐缓冲液,洗涤液为含φ=0.05%Tween-20的PBS,包被单抗最适体积稀释倍数为1∶800,酶标单抗最适体积稀释倍数为1∶6 000,抗原最佳工作浓度为3×104cfu/mL。试剂盒与肠型点状产气单胞菌有特异性反应,脱脂奶平板法与试剂盒法对草鱼患病检出率基本一致,符合率达90%;试剂盒有很好的储存稳定性,检测灵敏度为7×103cfu/mL。

七种中草药对柱状屈挠杆菌和肠型点状产气单胞菌的体外抑菌试验

试验采用试管!倍稀释法对引起淡水鱼类细菌性烂鳃病和肠炎病的柱状屈挠杆菌和肠型点状产气单胞菌进行了大黄、黄芩等7种中草药的体外抑菌试验。结果表明:%种中草药对这两种菌都具抑菌作用,MIC在7.8-250mg/ml之间。黄芩的抑菌效果最好,对肠型点状产气单胞菌MIC为7.8-mg/ml连翘抑菌效果较差。

草鱼肠炎病病原菌的分离鉴定

根据患病草鱼(Ctenopharyngodon idellus)的临床症状,解剖分析,初步判断为草鱼肠炎病。为确诊该病,从患病草鱼采集组织进行实验室检查,分离得到病原菌CQWL001,按常规方法进行形态特征、培养特性、主要生化及动物试验,确定该病的病原菌为肠型点状气单胞菌。

大鲵肠炎病原菌的分离鉴定与药敏试验

为了确定大鲵(Andrias davidianus)肠炎的病原菌,试验采用微生物学方法从重庆奉节疑似大鲵肠炎的病鲵体内分离到1株细菌,命名为CQWL008,对患病大鲵的临床症状和分离株的形态特征、培养特性进行观察,并进行生化鉴定、人工感染等试验。结果表明:大鲵肠炎的病原菌为肠型点状气单胞菌;该分离株对大黄、黄芩均具有敏感性,对五倍子高度敏感。

鱼细菌性肠炎病的防治

鱼细菌性肠炎病是由肠型点状气单胞菌引起的我国养殖鱼类中危害严重的疾病之一。一、流行情况鱼细菌性肠炎病是鱼类一种常见病,主要危害草鱼、青鱼、鲤鱼。水温在18℃以上时,就开始流行,水温在25—30℃时,是本病流行高峰期。

肠型点状产气单胞菌和鱼害粘球菌的药敏试验报告

笔者使用纸片扩散法测定引起鱼类疾病的肠型点状产气单胞菌和鱼害粘球菌对12种不同抗菌药物的敏感性,以选择出有效药物用于预防和治疗。试验表明,肠型点状产气单胞菌对卡纳霉素、痢特灵、复方新诺明、新霉素、链霉素、氯霉素、庆大霉素、呋喃妥因、诺氟沙星高度敏感;对四环素中度敏感;对红霉素、青霉素耐药。鱼害粘球菌对红霉素、卡纳霉素、痢特灵、复方新诺明、新霉素、链霉素、氯霉素、庆大霉素氯霉素、呋喃妥因、诺氟沙星高度敏感;对四环素中度敏感;对青霉素耐药。

七彩神仙鱼肠炎病原菌的分离鉴定及药敏试验

为确定七彩神仙鱼(Symphysodon aequifasciatus)肠炎的致病菌并筛选敏感药物,利用传统培养法,从该鱼的肠道组织中分离出优势菌,通过生理生化试验及16S rDNA序列测序比对确定菌种信息,并使用药敏纸片法筛选致病菌的敏感药物。试验结果表明:优势菌株QC3为肠型点状气单胞菌(Aeromonas punctata),是七彩神仙鱼肠炎的致病菌株,此菌对氟苯尼考、强力霉素、庆大霉素、诺氟沙星高度敏感,对链霉素中度敏感,对土霉素、红霉素、青霉素、头孢唑林、氨苄西林表现出耐药性。根据研究结果,建议使用氟苯尼考、诺氟沙星、强力霉素、庆大霉素等药物对七彩神仙鱼肠炎病进行治疗。

常见鱼病防治新技术(4) 细菌性肠炎病

病原细菌性肠炎病又称烂肠瘟、乌头瘟，病原体为肠型点状产气单胞菌，为条件致病菌，鱼类的肠道中都存在此类病菌。但在健康的鱼体中，该菌处于弱势，不会引发疾病。但当受到水质环境恶化、溶氧降低、投喂变质的饲料以及投饵不定时、不定量等原因影响时，引起鱼体的抵抗力下降，从而病原菌随鱼的粪便排到水体中污染水质及饲料，经鱼嘴传染到其他鱼类。因此，这类疾病在整个养殖周期中都有可能发生和发展。

渔业生产中肠炎病的防治技术

细菌性肠炎病又称为烂肠瘟，该病的病原体为肠型点状产气单胞菌。当水质环境变化、投喂变质饲料或不正常投饲时易引起此病。该病一直以来都是池塘养鱼生产中常见病害病害之一，此病死亡率很高，一般为30％-60％，严重的可达95％以上，如果得不到及时治疗，会造成鱼类大量死亡，给养殖户带来重大经济损失。现将养鱼生产实践中的细菌性肠炎病的防治方法介绍如下，供养殖生产者参考：

草鱼三元病原菌融合子的构建及生物学特性

采用细胞融合技术首次将肠型点状产气单胞菌菌株和鱼害粘球菌菌株融合,构建二元融合菌株AM-1,再将AM-1与荧光假单胞菌菌株融合,构建三元融合菌株AM-2。对AM-1和AM-2菌株的形态结构、生理生化特性、致病性、抗原性、抗体效价进行分析。结果表明,AM-1活菌椭圆形,无鞭毛,死菌短杆状,AM-2菌株短杆状,有鞭毛,它们的生理生化性状介于3原始亲本菌株之间;用AM-2菌株对当年健康草鱼种进行人工感染攻毒,被攻毒草鱼种具有烂鳃病、赤皮病及肠炎病的部分症状;AM-2菌株抗原的受免草鱼种对荧光假单胞菌、鱼害粘球菌和肠型点状产气单胞菌菌株的免疫保护率分别达64.90%、68.00%、67.00%,抗体效价最高达1∶256、1∶256、1∶512。测定了AM-1和AM-2菌株及亲本DNA含量并进行了琼脂糖凝胶电泳分析,AM-1和AM-2菌株DNA含量明显高于任一原始亲本。

草鱼“老三病”防治及病例分析

在常规的草鱼养殖过程中,草鱼"老三病"一直困扰着大家,那么今天和大家探讨一下如今草鱼养殖中的"老三病"。一、草鱼"老三病"及病原草鱼细菌性烂鳃、细菌性肠炎、赤皮病称为草鱼"老三病"。草鱼细菌性烂鳃,病原为柱状嗜纤维菌;细菌性肠炎,病原为肠型点状气单胞菌;赤皮病,病原为荧光假单胞菌。

夏季黄鳝常见病害及其防治(下)

4．肠炎病（又称烂肠病、乌头瘟病等）【病因】由黄鳝感染肠型点状产气单胞菌引起。当鳝体处在良好状态、体质健康时并不发病，环境恶化、鳝体健康水平下降、抵抗力低下时，该菌在肠内大量繁殖，导致疾病暴发。环境条件恶化是综合性的，包括水质恶化、溶氧量低、饲料变质、摄食不均等诸多方面，都可引发此病。

泥鳅养殖过程常见疾病防治

一、肠炎症状:食欲减退或不吃,肛门部分红肿外突,稍压腹部有血水或黄色液体流出。病因:由肠型点状产气单胞菌感染引起的细菌性肠炎,属于条件致病菌,当水质恶化、溶氧低、摄食变质饵料等引起抵抗力下降时,容易爆发此病。预防:每千克饲料添加整肠生10克+黄芪多糖10克,进行周期性预防。