航空食品生产环境中肠杆菌科细菌的分离鉴定及多位点序列分型研究

目的对航空食品生产环境中肠杆菌科细菌进行分离鉴定和多位点序列分型研究,了解生产环境中肠杆菌科细菌的污染状况和来源。方法采集航空食品生产车间的操作台、推车和地面等32份环境涂抹样品,从中分离肠杆菌科细菌,采用生化实验和16S rDNA测序方法鉴定细菌种类,并进行多位点序列分型。结果从32份环境涂抹样品中分离出7株肠杆菌科细菌,包括3株产酸克雷伯菌、2株肺炎克雷伯菌、1株阴沟肠杆菌、1株河生肠杆菌。3株产酸克雷伯菌多位点序列分型的型别为ST126、ST160和ST277。结论本研究未从航空食品生产环境中分离到致病菌,但分离到肺炎克雷伯菌和产酸克雷伯菌、阴沟肠杆菌、河生肠杆菌等条件致病菌,这些条件致病菌对食品的污染风险也应引起重视。

碳青霉烯类耐药肠杆菌科细菌基因型检测及耐药性探讨

进一步分析探讨碳青霉烯类耐药肠杆菌科细菌(CRE)基因型检测与耐药性。方法 收集2022年1月-2023年10月本院300例病人非呼吸道标本(胆汁、静脉血、引流液、尿液)中分离出的613株肠杆菌科菌株进行全方位研讨,依托MIC法进行药敏试验,基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱设备鉴定,针对CRE基因型以及耐药性实施观察与比对。结果 随机选取613株CRE中的 68 株实施 PCR 扩增,其中 blaKPC-2为 58 株,blaNDM-1以及blaIMP-1为 5 株 , blaOXA-48以及 blaVIM-2目的基因未检出。且,CRE 对复方磺胺甲噁唑49.10%(301/613)、阿米卡 星50.60%(310/613)的整体耐药性不及 50%,而对氟喹诺酮类、庆大霉素90.40%(554/613)、哌拉西林/ 他唑 巴坦98.00%(613/613)以及头孢菌素类等整体耐药率超过 90%,而替加环 素中无耐药菌株。结论 本院CRE经常表现出多重耐药性,有时甚至达到泛耐药的程度。细菌耐药性已成为医院感染最主要因素之一,而抗生素治疗效果也与病原菌耐药有关。CRE的主要基因型是blaKPC-2型,这提示需要加强对院内感染的监控,以控制、预防CRE菌株在医院内的大面积传播以及扩散。

耐碳青霉烯肠杆菌科细菌耐药基因及整合子研究

目的:了解临床分离的耐碳青霉烯肠杆菌科细菌(CRE)耐药性和分布特点及其携带的整合子和碳青霉烯基因情况。方法:收集2021年1月至2021年12月郑州大学第一附属医院郑东院区住院患者临床分离的非重复CRE共659株,使用VITEK 2-Compact全自动微生物鉴定及药敏分析系统进行细菌鉴定及药敏试验,头孢曲松、头孢呋辛和氨苄西林/舒巴坦药敏试验采用纸片扩散法(K-B法)检测,采用聚合酶链式反应(PCR)检测碳青霉烯基因基因及Ⅰ类整合酶基因。结果:659株CRE主要分布在重症监护室(45.22%)、呼吸重症监护室(13.96%)、急诊重症监护室(9.26%)、泌尿外科(7.74%)、呼吸内科(4.10%),对β–内酰胺类和喹诺酮类抗菌药物耐药率大于90%,bla_(KPC)、bla_(NDM)、bla_(IMP)基因的检出率分别为81.33%、10.93%、0.30%,5株耐碳青霉烯肺炎克雷伯(CRKP)中同时携带bla_(KPC)和bla_(IMP)基因。CRKP、耐碳青霉烯大肠埃希菌(CREC)中Ⅰ类整合酶阳性率分别为90.94%、74.07%。结论:659株CRE中,CRKP分离率较高,耐药基因以bla_(KPC)、bla_(NDM)为主,Ⅰ类整合子检出率较高,应加强院内感染防控措施,有效控制此类菌的播散。

耐碳青霉烯类肠杆菌科细菌耐药基因及分子特征研究

目的:探讨临床分离的耐碳青霉烯类抗菌药物肠杆菌科细菌的耐药基因和分子流行病学情况。方法:收集2018年1月—2019年3月临床分离的耐碳青霉烯类肠杆菌科细菌(CRE),采用VITEK-2 compact微生物鉴定仪进行菌种鉴定和药敏检测;改良Hodge和碳青霉烯酶灭活(mCIM)试验对菌株进行碳青霉烯酶表型检测;PCR检测β内酰类胺类(碳青霉烯酶、ESBL、Amp C酶)和喹诺酮类(PMQR)共19种耐药基因;多位点序列分析(MLST)对耐碳青霉烯类肺炎克雷伯菌(CRKP)进行分子分型及同源性分析。结果:共收集CRE 134株,其中肺炎克雷伯菌125株,阴沟肠杆菌4株,大肠埃希菌3株,普罗威登菌2株;改良Hodge试验示114株阳性,碳青霉烯酶灭活(mCIM)试验示125株阳性;所有检测菌株均携带碳青霉烯类耐药基因;125株肺炎克雷伯菌中有118株携带blaKPC-2基因,另有5株携带blaNDM基因(4株携带blaNDM-1、1株携带blaNDM-5)和4株携带blaIMP-4基因,4株阴沟肠杆菌中3株携带blaNDM基因(2株携blaNDM-1、1株携带blaNDM-5),1株携带blaIMP基因,3株大肠埃希菌携带blaNDM基因(2株携带blaNDM-1、1株携带blaNDM-3),2株普罗威登斯菌均携带blaNDM-1基因;所有菌株呈多重耐药现象,耐药谱复杂多样,以blaCTX-M、blaSHV、blaTEM和qnr共同携带最为多见。肺炎克雷伯菌MLST分型以ST11为主(114株)。结论:携带碳青霉烯酶基因是CRE的主要耐药机制,不同菌种携带基因型明显不同,其中肺炎克雷伯菌主要携带blaKPC-2基因,而大肠埃希菌、阴沟肠杆菌及普罗威登菌以携带blaNDM基因为主,表明blaNDM亚型出现并分布于不同菌种间,显示blaNDM进化过程较快,可能成为其广泛传播的重要原因。ST11型是肺炎克雷伯菌的优势流行型别,尤其集中于ICU病区,必须加以重视。

应用肠杆菌科基因间重复序列聚合酶链反应对鲍曼不动杆菌进行同源性分析

目的了解临床不同来源的鲍曼不动杆菌是否存在同源性,判断其是否存在耐药菌株的克隆播散,追踪其在医院交叉感染的可能途径,以便有效防控鲍曼不动杆菌在医院中传播。方法收集2012年10月至2013年6月临床分离的73株多重耐药鲍曼不动杆菌,用肠杆菌科基因间重复序列-聚合酶链反应(enterobacterial repetitive intergenic consensus-polymerase chain reaction,ERIC-PCR)对菌株进行同源性分析。结果 73株多重耐药鲍曼不动杆菌经ERIC-PCR分型分为8个基因型,分别用A、B、C、D、E、F、G、H表示,其中A型31株,B型15株,C型12株,D型8株,E型3株,F型2株,G和H型各为1株。A型为主要的流行株,分布在多个不同的科室。重症监护室(intensive care unit,ICU)分离的菌株存在6个基因型;骨科系统病区存在4个基因型;急诊科有5个基因型;内科发现有6个基因型;外科发现3个基因型。ICU病房环境物体表面共分离出4株鲍曼不动杆菌,其中9号和10号菌株来自于不同患者的床旁,12号和13号来自于护理站电脑键盘。结论临床分离的多重耐药鲍曼不动杆菌存在多个基因型。多重耐药鲍曼不动杆菌存在时间和空间的聚集性。

耐碳青霉烯类肠杆菌血流感染患者耐药基因分析

目的 调查耐碳青霉烯类肠杆菌目细菌血流感染(CRE-BSI)的临床科室分布及耐药情况,分析其耐药基因型、毒力因子,以指导临床诊疗中抗菌药物的合理使用,预防耐药菌株的传播。方法 收集2021—2022年济宁市第一人民医院分离的21株临床CRE-BSI菌株,分析菌株的药敏结果;检测菌株的碳青霉烯酶基因(KPC、OXA-48、VIM、IMP、NDM);提取菌株DNA,并进行多位点序列分型(MLST)。结果 21株CRE-BSI菌株中,12株源于重症医学科,除对替加环素、多黏菌素/黏菌素、阿米卡星、米诺环素敏感性较好,部分菌株抗菌药物耐药率为100.00%。21株菌株中,肺炎克雷伯菌10株,大肠埃希菌10株,均以bla_(NDM)为主要产酶基因型;MLST结果显示,肺炎克雷伯菌主要流行ST11,大肠埃希菌主要流行ST361、ST410。毒力因子均有不同数量的检出,其中iroN、fimH检出率最高,分别为100.00%(20/20)、85.00%(17/20)。结论 济宁市第一人民医院分离的临床CRE-BSI菌株肺炎克雷伯菌中bla_(KPC-2)为主要产酶基因,大肠埃希菌中bla_(NDM-5)为主要产酶基因型,可能存在克隆流行和水平传播,临床需加强抗菌药物应用的监管,预防CRE院内爆发。

产超广谱β-内酰胺酶肠杆菌科细菌耐药性及基因型检测

目的 调查我院产超广谱 β 内酰胺酶 (ESBL)菌株对临床常用抗生素的耐药情况及其ESBLs基因型。方法 对 2 0 0 1年 4月～ 2 0 0 2年 5月我院临床分离的 40株产ESBL肠杆菌科细菌采用NCCLS推荐的琼脂平皿对倍稀释法测定对不同抗生素的MIC值 ,用针对TEM、SHV、CTX M基因的特异性引物进行PCR扩增确定ESBL基因型。结果 40株产ESBL菌株对第三代头孢菌素耐药率高 ,对头孢噻肟的耐药程度高于头孢他啶。对头孢哌酮 /舒巴坦、头孢吡肟、环丙沙星、阿米卡星的耐药率分别为 37 5 %、5 7 5 %、90 %、5 2 5 %。除 2株菌外 ,其它 38株菌对亚胺培南敏感。 40株菌中携带SHV、TEM、CTX M型ESBLs的比率分别为 87 5 %、5 0 %、40 %。结论 我院产ESBL菌多重耐药现象严重 ,临床上需慎用酶抑制剂复合物及第四代头孢菌素 ,亚胺培南仍是治疗产ESBL菌感染的首选药物。我院存在CTX M酶的流行 ,产ESBL菌绝大多数产SHV型酶 ,有 2 4株菌同时产 2种或 3种酶。

某院耐碳青霉烯类肠杆菌科细菌耐药基因分析

目的研究某院耐碳青霉烯类肠杆菌科细菌(CRE)在细菌耐药方面的分子流行病学特征,为CRE的防控提供依据。方法收集某院2013-2017年细菌室保存的CRE,对其进行多位点序列分型(MLST)、药敏试验、全基因序列测定,选取部分CRE中携带的碳青霉烯耐药基因进行基因环境分析。结果共收集62株CRE,成功复活51株;其中耐碳青霉烯类肺炎克雷伯菌(CRKP)30株,耐碳青霉烯类大肠埃希菌(CREC)9株,耐碳青霉烯类阴沟肠杆菌(CRECL)6株,耐碳青霉烯类其他肠杆菌6株。CRKP MLST主要包括3株ST147、2株ST11;CREC MLST主要包括3株ST167;CRECL MLST主要包括3株ST93、2株ST88。51株CRE对氨苄西林、头孢噻肟的耐药率最高,均为100%。耐碳青霉烯类耐药基因分布:1株携带blaKPC-2,14株携带blaIMP-4,18株携带blaNDM-1,22株携带blaNDM-5,2株携带blaNDM-9,10株携带blaOXA-1,10株携带blaOXA-10,2株携带blaOXA-23,2株携带blaOXA-66。分析blaNDM-1、blaNDM-5、blaNDM-9、blaIMP-4不同菌种的基因环境,发现几种耐药基因各自的基因环境都与已报道的基因环境相似,无明显的菌种间差异性。结论耐药基因通过水平传播能稳定存在于不同的CRE菌株中,对医院感染防控造成一定的威胁。

海南耐碳青霉烯类肠杆菌科细菌的耐药基因分析

目的检测海南省5家综合医院临床送检微生物标本中的耐碳青霉烯类肠杆菌科细菌,了解其耐药基因及流行现状。方法收集2014年6月—2016年6月期间住院患者各种培养标本中耐碳青霉烯类肠杆菌科细菌菌株,对其进行菌种鉴定和药敏分析试验;然后对筛选出的菌株进行bla_(KPC-2)、bla_(NDM-1)和bla_(IMP)耐药基因PCR特异性扩增,扩增产物进行琼脂糖凝胶电泳和测序分析,经BLAST比对,确定耐药基因的基因型。结果从5家医院的临床各种标本中,收集到75株耐碳青霉烯类肠杆菌科细菌(CRE),主要为肺炎克雷伯菌45株占60.0%,阴沟肠杆菌13株占17.3%;科室分布主要为ICU占43.9%,儿科占10.7%;通过药敏实验表明75株CRE除对替加环素(10.6%)、阿米卡星(23.3%)、左氧氟沙星(37.3%)、环丙沙星(40.0%)的耐药率较低外,第一到第三代头孢及氨苄西林、氨苄西林/舒巴坦的耐药率均为100%;第四代头孢头孢吡肟也达到89.3%,复方磺胺甲噁唑的耐药率78.7%,哌拉西林/三唑巴坦耐药率也达到64%;75株CRE细菌中11株bla_(KPC-2)基因阳性占14.6%;25株为bla_(NDM-1)基因阳性占33.3%和12株bla_(IMP)基因阳性占16%。结论 NDM-1型金属酶为海南省CRE菌株的主要耐药基因型,KPC-2型为首次发现占12%。未检测出目的基因的CRE菌株的耐药机制有待于进一步的研究。

23株耐碳青霉烯类肠杆菌科细菌耐药基因分析

目的分析耐碳青霉烯类肠杆菌科细菌(CRE)的耐药情况及其耐药基因,为临床防治CRE感染提供依据。方法收集23株CRE,采用全自动微生物分析系统行菌株鉴定和药敏试验,采用改良Hodge试验检测碳青霉烯酶表型,PCR扩增和基因测序技术检测其耐药相关基因(包括bla KPC、bla NDM、bla OXA、bla VIM、bla IMP)及分布。结果 23株CRE中,肺炎克雷伯菌11株,大肠埃希菌7株,阴沟肠杆菌2株,产酸克雷伯杆菌2株,枸橼酸杆菌1株。药敏试验结果显示,对碳青霉烯类抗生素亚胺培南的耐药率为95.65%,对美罗培南的耐药率为86.95%;23株菌株均对哌拉西林、哌拉西林/他唑巴坦、头孢哌酮/舒巴坦耐药,耐药率为100%;对阿米卡星的耐药率为65.21%,对环丙沙星的耐药率为86.96%,对氨曲南的耐药率为91.30%。改良Hodge试验阳性16株、阴性7株。PCR法检出bla KPC型基因6株、bla NDM型基因6株、bla OXA型基因9株、bla VIM型基因2株,未检出bla IMP型基因。结论 23株CRE对多种抗生素耐药率均较高,其主要耐药基因型为OXA、KPC、NDM、VIM型碳青霉烯酶基因。

山东某院耐碳青霉烯类肠杆菌科细菌临床感染特征及耐药基因分析

目的了解济宁医学院附属医院耐碳青霉烯类肠杆菌科细菌(CRE)临床感染特征、药物敏感性及耐药基因分型,为预防和治疗CRE感染及医院多重耐药菌管理提供参考。方法收集CRE临床分离株93株,采用全自动微生物鉴定系统进行细菌鉴定及体外药物敏感性试验,并通过全自动快速微生物质谱检测系统确证菌株。采用简易碳青霉烯类灭活法(sCIM)试验进行碳青霉烯酶表型确证,采用Xpert Carba-R检测并鉴别碳青霉烯酶分型,通过聚合酶链反应(PCR)扩增碳青霉烯酶耐药基因并进行测序分型。结果济宁医学院附属医院CRE主要分离自痰液样本,其次是血液和尿液样本,科室来源主要为重症监护病房。CRE对临床常用的24种抗菌药物均耐药,对替加环素均敏感。sCIM试验检出79株产碳青霉烯酶;Xpert Carba-R检出KPC基因阳性38株、NDM基因阳性31株、IMP基因阳性6株、NDM+KPC基因阳性4株。PCR扩增结果显示,有38株携带KPC耐药基因,31株携带NDM耐药基因,6株携带IMP耐药基因,4株同时携带KPC和NDM耐药基因,未检出VIM及OXA-48耐药基因。结论济宁医学院附属医院CRE临床分离株对多种临床常用抗菌药物耐药,但对替加环素具有良好的体外敏感性;肺炎克雷伯菌碳青霉烯类耐药基因主要为KPC型,大肠埃希菌主要为NDM型;应加强对CRE的监控,防范其在院内的暴发流行。

碳青霉烯类耐药肠杆菌科细菌基因型检测及耐药性分析

目的了解本院碳青霉烯类耐药肠杆菌科细菌(carbapenem resistant Enterobacteriaceae,CRE)的基因型分布及耐药情况。方法收集本院临床标本分离的613株CRE,用基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱仪进行鉴定,MIC法进行药敏试验。随机选取68株CRE进行PCR扩增,检测bla_(KPC)、bla_(IMP-1)、bla_(VIM-1)、bla_(OXA-48)及bla_(NDM-1)等碳青霉烯酶基因;PCR阳性结果进行DNA测序和BLAST比对,确定其基因型。结果检出的613株CRE中,对临床常用抗菌药物如青霉素类、氟喹诺酮类、头孢菌素类及酶抑制剂的耐药率超过90%,仅对复方磺胺甲噁唑和阿米卡星的耐药率较低,为50%左右。68株CRE经PCR扩增和DNA测序,bla_(KPC-2)检出58株、bla_(NDM-15)株和bla_(IMP-15)株,但未检出bla_(VIM-2)和bla_(OXA-48)耐药基因。结论本院CRE常呈现为多重耐药,甚至是泛耐药。CRE的基因型以bla_(KPC-2)型为主,提示须加强院感监测,预防和控制CRE菌株在院内扩散传播流行。

产超广谱β-内酰胺酶肠杆菌科细菌的基因型研究

目的明确台州地区产超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)肠杆菌科细菌的表型和基因型的流行特征以及医院感染的发生率。方法对87株肠杆菌科细菌采用美国临床实验室标准化委员会(NCCLS)规定的标准进行ESBLs表型筛选和确定,并用聚合酶链反应(PCR)和序列分析确定ESBLs的基因型。结果肠杆菌科细菌产ESBLs菌株头胞噻肟的耐药率明显高于头胞他啶;经序列分析后ESBLs基因型别确定为CTX-M-9、CTX-M-1,而CTX-M-2测序结果不理想。结论产ESBLs的肠杆菌科细菌在台州地区较普遍,以CTX-M-9最为常见。

耐碳青霉烯类肠杆菌科细菌的耐药性分析及基因型研究

目的探讨本院耐碳青霉烯类抗菌药物肠杆菌科细菌(CRE)的耐药性及基因型。方法收集临床分离的30株CRE,用改良Hodge试验检测碳青霉烯酶表型,PCR检测碳青霉烯酶blaKPC、blaIMP、blaVIM、blaOXA-48及blaNDM-1基因,阳性结果进行DNA测序,BLAST比对确定基因型。结果 30株CRE以肺炎克雷伯菌为主,占80%;感染患者主要来自ICU;感染部位以下呼吸道为主,占93.3%;对常用抗菌药物呈多重耐药;其中25株改良Hodge试验阳性;PCR扩增和DNA测序显示11株为blaIMP-4,12株为blaIMP-8,未检出blaKPC、blaVIM、blaOXA-48及blaNDM-1目的基因。结论 blaIMP-4型和blaIMP-8型碳青霉烯酶是本院肠杆菌科细菌产碳青霉烯酶的主要型别,且已在ICU中局部流行。

碳青霉烯类药物非敏感肠杆菌科细菌基因型研究

目的探讨临床分离的碳青霉烯类药物非敏感肠杆菌科细菌的基因型。方法收集2010年1月至2013年6月临床标本中分离的碳青霉烯类药物非敏感肠杆菌科细菌110株,K-B纸片扩散法检测细菌对临床常用药物的敏感性,纸片扩散表型确证试验检测超广谱β-内酰胺酶(ESBLs),改良Hodge试验(MHT)检测碳青霉烯酶表型,PCR、DNA测序及BLAST比对等方法确定菌株耐药基因型。结果 110株碳青霉烯类非敏感肠杆菌科细菌中,MHT阳性77株(70.0%)。31株大肠埃希菌、1株产气肠杆菌和1株黏质沙雷菌检出bla KPC-2基因,5株阴沟肠杆菌和1株产气肠杆菌分别检出bla IMP-26和bla VIM-2基因。36株32.7%菌株ESBLs表型试验阳性,主要检出bla CTX-M-15、bla SHV-12和bla CTX-M-33种ESBLs基因型。结论本项研究碳青霉烯类非敏感肠杆菌科细菌以bla KPC-2基因型为主,其次为bla IMP-26和bla VIM-2基因型。

携带bla_(NDM-1)基因的肠杆菌科细菌耐药流行特征分析

目的了解昆明医科大学第一附属医院携带bla_(NDM-1)基因的肠杆菌科细菌的分子流行特征。方法收集昆明医科大学第一附属医院2011年12月—2014年10月临床送检的非重复标本,通过VITEK-2系统鉴定耐碳青酶烯类肠杆菌科细菌(CRE),EDTA协同纸片法进行金属酶表型确证,PCR技术检测bla_(NDM-1)基因的携带情况,最后采用ERIC-PCR技术分析菌株的同源性,明确待测菌株的耐药流行特征;结果 (1)共收集到206株CRE菌株,产bla_(NDM-1)的有42株(20.0%),其中以弗氏柠檬酸杆菌(43.0%)为主,主要分离自移植中心的尿液标本中;(2)药敏结果显示实验菌株均为多重耐药株,但磷霉素(5.4%)、阿米卡星(12.0%)和呋喃妥因(18.7%)等抗菌药物的耐药率相对较低;(3)金属酶表型确证的阳性率为95.0%;(4)ERIC-PCR结果显示弗氏柠檬酸杆菌、阴沟肠杆菌和大肠埃希菌在本院移植中心存在局部克隆播散;另外有4株分离自儿科的肺炎克雷伯菌电泳图谱相同。结论本院携带bla_(NDM-1)基因的肠杆菌科细菌高度流行,尤其是移植中心存在不同菌种的克隆播散型,应引起我们高度重视。

西安地区肠杆菌科细菌的超广谱β-内酰胺酶基因型的研究

目的测定西安地区肠杆菌科细菌中的超广谱β-内酰胺酶(extended-spectrum β-lactamases,ESBL)的基因型。方法在西安市的5所医院中随机选取产ESBL的肠杆菌科细菌25株(共125株),采用PCR方法特异性扩增TEM、SHV和CTX-M型酶的基因片段。结果在125株产ESBL菌中,有33株扩增出TEM型酶基因片段;有27株扩增出特异性SHV型酶基因片段;有49株扩增出特异性的CTX-M型酶基因片段;共有22株细菌同时扩增出两种以上的酶基因片段。结论在西安地区的ESBL肠杆菌科细菌中CTX-M型酶较为流行。

肠杆菌科产CTX-M酶细菌耐药性与β内酰胺酶基因型的关系

目的 了解我院肠杆菌科产 CTX -M酶细菌耐药性与β内酰胺酶基因型的关系。方法 采用琼脂 2 倍稀释法测定 8种β内酰胺类抗生素的最低抑菌浓度;用针对SHV、TEM、CTX -M基因的特异性引物进行PCR扩增确定β内酰胺酶基因型;对扩增的CTX M基因进行DNA序列分析。结果 16株产CTX M酶菌中有15株产2种或2种以上β内酰胺酶。产 CTX- M酶菌对头孢噻肟、头孢吡肟、头孢他啶和头孢哌酮 舒巴坦的耐药率分别为 81.3%、75.0%、31.3%和 31.3%。结论 产CTX -M酶菌株绝大多数产多种β内酰胺酶,其对头孢噻肟、头孢吡肟的耐药水平高于不产 CTX -M型 ESBLs株,耐药表型呈多样性,临床中不推荐使用头孢他啶治疗产CTX M酶菌株感染。

肠杆菌科细菌碳青霉烯酶耐药基因分析

目的研究耐碳青霉烯类抗生素的肠杆菌科细菌所产碳青霉烯酶的型别及其流行情况。方法收集重庆医科大学附属第一医院2009年11月～2010年4月临床分离的肠杆菌科细菌,用Vitek 2 Compact进行细菌鉴定、药敏试验,从中筛选出11株对碳青霉烯类抗生素耐药或中介的菌株。PCR检测blaKPC、blaIMP、blaVIM基因,阳性结果用DNA测序和BLAST比对确定基因型。结果 11株对碳青霉烯类抗生素耐药或中介的菌株均为多重耐药,除1株来自眼科外均来自ICU。PCR结果3株肺炎克雷伯菌和3株阴沟肠杆菌携带blaIMP,DNA测序比对均为blaIMP-8,未扩出blaKPC、blaVIM基因条带。结论本次筛检的11株肠杆菌科细菌产碳青霉烯酶的主要型别IMP-8,且已在外科ICU中局部流行。

广州地区临床分离多重耐药肠杆菌科细菌的耐药基因检测

目的检测临床分离的低产碳青霉烯酶肠杆菌科细菌的耐药基因，探讨其存在特点。方法肠杆菌科细菌的鉴定和药敏采用法国生物梅里埃公司的VITEK－2系统进行药物的最低抑菌浓度（MIC）检测；EDTA双纸片增效法检测金属p_内酰胺酶（MBL）；采用聚合酶链反应（PCR）方法检测碳青霉烯酶基因、qacE△1-sull消毒剂耐药基因、qnr喹诺酮类耐药基因及Ⅰ，Ⅱ，Ⅲ类整合酶基因等相关耐药基因。结果115株肠杆菌科细菌94．8％（109／115）Ⅰ类整合酶基因阳性，未检出携带Ⅰ，Ⅲ类整合酶基因的细菌；93．0％（107／115）消毒剂基因（qacEAl-sull）阳性；qnrA基因阳性率53．9％（62／115），qnrS基因阳性率12．2％（14／115）．qnrB基因阳性率5．2％（6／115）．有9株菌EDTA增效试验阳性，检出金属p内酰胺酶基因型，且同时携带qnrA，qnrS，intll和qacEAl-sull基因，金属β-内酰胺酶基因型别确定为IMP-4（blalMP-4）和IMP-1（blaIMP-1）型。结论多重耐药肠杆菌科细菌的多重耐药与整合子相关，且携带多种耐药基因，尤其产金属β-内酰胺酶的细菌多种抗菌药物呈现高度的多重耐药。