结肠癌相关转录因子1表达在结直肠癌早期筛查及预后评估中的作用

目的 :分析结肠癌相关转录因子1(CCAT-1)m RNA在结直肠癌患者外周血中的表达水平与临床病理特征及预后生存的关联,探讨CCAT-1在结直肠癌早期筛查及病程预后评估中的作用。方法:采用实时定量PCR法(q PCR)检测结直肠癌(60例)、结直肠腺瘤(30例)及健康志愿者(30例)外周血中CCAT-1 m RNA表达,采用ROC曲线判断CCAT-1对结直肠癌的诊断价值,计算Youden指数确定CCAT-1对结直肠癌的诊断阈值;采用双变量相关(bivariate correlation)Pearson检验分析CCAT-1m RNA表达水平与结直肠癌患者临床病理特征;采用Kaplan-Meier生存分析(Log-rank检验)分析CCAT-1 m RNA表达与结直肠癌患者3年生存率的相关性,绘制生存曲线。结果:结直肠癌患者外周血CCAT-1 m RNA水平相对于结直肠腺瘤患者(P<0.01)、健康志愿者(P<0.01)显著高表达,CCAT-1 m RNA在健康志愿者、结直肠腺瘤及结直肠癌患者外周血中的表达量呈逐渐递增趋势;结直肠癌患者外周血CCAT-1 m RNA表达量与肿瘤直径(P<0.05)、分化程度(P<0.01)、原发灶浸润深度(P<0.01)、淋巴结转移数(P<0.01)、远处转移(P<0.05)及TNM分期(P<0.05)呈显著正相关,与3年生存率呈负相关(P<0.05);CCAT-1 m RNA高表达组生存时间显著低于低表达组(P<0.01)。结论:CCAT-1可作为一种有价值的结直肠癌早期筛查及预后评估的标志物。

长链非编码RNA结肠癌相关转录因子1对肺腺癌细胞增殖和凋亡的调控作用及其机制

目的分析长链非编码RNA(LncRNA)结肠癌相关转录因子1(CCAT1)对肺腺癌细胞增殖和凋亡的影响,并基于锌指E盒同源结合蛋白1(ZEB1)探讨其潜在作用机制。方法取对数生长期的肺腺癌A549细胞,分为对照组、si-NC组、si-CCAT1组、CCAT1-NC组和CCAT1组。除对照组外,其余组分别转染si-NC、si-CCAT1、CCAT1 mimic NC以及CCAT1 mimic,转染48 h后,检测细胞中LncRNA CCAT1表达量、细胞存活率、细胞凋亡率,以及ZEB1、上皮钙黏蛋白(E-cad)和神经钙黏蛋白(N-cad)表达量。通过Starbase软件预测LncRNA CCAT1与ZEB1之间的靶向关系,并应用双荧光素酶报告基因法验证LncRNA CCAT1与ZEB1的靶向关系。结果(1)与对照组和si-NC组比较,si-CCAT1组LncRNA CCAT1表达量、细胞存活率、ZEB1和N-cad蛋白表达量降低,细胞凋亡率、E-cad蛋白表达量升高(均P<0.05)。与对照组、CCAT1-NC组、si-CCAT1组比较,CCAT1组LncRNA CCAT1表达量、ZEB1和N-cad蛋白表达量升高,细胞凋亡率、E-cad蛋白表达量降低(均P<0.05);此外,CCAT1组细胞存活率高于si-CCAT1组(P<0.05)。(2)ZEB1与CCAT1存在高度互补序列;转染CCAT1 mimic可明显降低ZEB1野生型质粒的相对荧光素酶活性,对ZEB1突变型质粒的相对荧光素酶活性无影响。结论LncRNA CCAT1可以促进肺腺癌细胞增殖、抑制细胞凋亡,其可能是通过上调ZEB1蛋白表达发挥作用。

长链非编码RNA结肠癌相关转录因子1与胃癌的研究进展

目的了解长链非编码RNA(lncRNA)结肠癌相关转录因子1(CCAT1)的功能并总结其与胃癌发生及发展的关系。方法对近年来发表的关于lncRNA CCAT1的功能研究及其与胃癌关系研究的文献进行综述与分析。结果lncRNA CCAT1通过作为竞争性内源性RNA与微小RNAs(microRNAs,miR)结合对基因产生负调控作用,介导c-MYC启动子与其上游增强子之间的染色质循环并促进c-MYC基因的表达,新近研究发现CCAT1可与miR-219-1、miR-490结合从而促进胃癌的进展。lncRNA CCAT1在胃癌组织中表达增高,与癌旁组织、正常组织中的表达存在明显差异,其高表达与肿瘤的大小、淋巴结转移和TNM分期有关。结论CCAT1参与胃癌进展的具体机制、胞内信号转导途径、与其他分子的相互作用机制仍需进一步探索,随着对lncRNA特别是CCAT1的深入研究,可能为CCAT1作为靶标用于胃癌的诊断及治疗提供更加广阔的前景。

结肠癌相关转录因子1在非小细胞肺癌组织的表达及其对细胞增殖和迁移的影响

目的观察结肠癌相关转录因子1(CCAT1)在非小细胞肺癌中的表达及其对细胞增殖和迁移的影响。方法收集2017年8月至2019年8月河南省人民医院手术摘除的102例非小细胞肺癌组织和对应的癌旁组织作为研究对象。采用荧光定量聚合酶链反应(PCR)分析非小细胞肺癌组织和癌旁组织中CCAT1表达水平。采用RNA干扰技术在A549细胞(购自中国科学院上海细胞库)建立CCAT1敲降稳定细胞株和对照细胞株,命名为CCAT1 KD组和对照组。采用细胞计数试剂盒(CCK-8)和5-乙炔基-2’脱氧尿嘧啶核苷(EdU)测定两组细胞增殖;采用Transwell分析两组细胞迁移;采用蛋白质印迹法(Western blot)分析细胞增殖和迁移相关蛋白的表达水平。组间比较采用t检验。结果与癌旁组织CCAT1水平(1.26±0.28)比较,非小细胞肺癌组织中CCAT1水平(3.47±0.31)显著增加,差异有统计学意义(t=3.091,P<0.05)。与对照组A549细胞CCAT1表达水平(1.09±0.15)比较,CCAT1 KD组细胞CCAT1表达水平(0.37±0.09)显著下调,差异有统计学意义(t=4.100,P<0.05)。与对照组细胞吸光度(A)值(1.84±0.26)比较,CCAT1 KD组细胞A值(0.98±0.14)显著下降,差异有统计学意义(t=3.719,P<0.05)。与对照组细胞EdU阳性率[(70.26±8.92)%]比较,CCAT1 KD组细胞EdU阳性率[(30.41±5.89)%]显著下降,差异有统计学意义(t=3.201,P<0.05)。与对照组细胞迁移数量[(128.44±9.17)个]比较,CCAT1 KD组细胞迁移数量[(59.19±8.01)个]显著下降,差异有统计学意义(t=3.172,P<0.05)。与对照组细胞细胞核增殖抗原(Ki-67)、增殖细胞核抗原(PCNA)和黏着斑激酶(FAK)表达水平(1.18±0.16、1.21±0.20、1.08±0.19)比较,CCAT1 KD组细胞Ki-67、PCNA和FAK表达水平(0.25±0.14、0.38±0.09、0.31±0.13)显著下降,差异有统计学意义(t=3.207、3.801、3.510,P<0.05)。结论CCAT1在非小细胞肺癌组织中呈高表达,并参与非小细胞肺癌的增殖和迁移。

CCAT1靶向抑制miR-375-3p通过线粒体途径诱导的人口腔癌SAS细胞凋亡

目的:探究长链非编码RNA(lncRNA)结肠癌相关转录因子1(CCAT1)靶向miR-375-3p通过线粒体途径诱导人口腔癌SAS细胞凋亡的作用。方法:人口腔癌SAS细胞随机分为空白组、CCAT1下调组、CCAT1上调组、CCAT1下调对照组、CCAT1上调对照组、miR-375-3p下调组、miR-375-3p上调组、miR-375-3p下调对照组和miR-375-3p上调对照组。转染48 h后,流式细胞术检测细胞凋亡;RT-qPCR检测miR-375-3p表达、线粒体凋亡通路相关的基因半胱氨酰天冬氨酸特异性蛋白酶3(caspase-3)、半胱氨酰天冬氨酸特异性蛋白酶9(caspase-9)、B淋巴细胞瘤-2(Bcl-2)和Bcl-2相关X蛋白(Bax)的mRNA表达;免疫印迹检测caspase-3、caspase-9、Bcl-2、Bax蛋白表达;双荧光素酶报告实验分析CCAT1与miR-375-3p的靶向关系。结果:与空白组和CCAT1下调对照组比较,CCAT1下调组细胞凋亡率、miR-375-3p表达、caspase-3、caspase-9、Bax mRNA及蛋白表达升高,Bcl-2 mRNA及蛋白表达降低;与空白组和CCAT1上调对照组比,CCAT1上调组细胞凋亡率、miR-375-3p表达、caspase-3、caspase-9、Bax mRNA及蛋白表达降低,Bcl-2 mRNA及蛋白表达升高;与空白组和miR-375-3p下调对照组比较,miR-375-3p下调组细胞凋亡率、miR-375-3p表达、caspase-3、caspase-9、Bax mRNA及蛋白表达降低,Bcl-2 mRNA及蛋白表达升高;与空白组和miR-375-3p上调对照组比较,miR-375-3p上调组细胞凋亡率、miR-375-3p表达、caspase-3、caspase-9、Bax mRNA及蛋白表达升高,Bcl-2 mRNA及蛋白表达降低。双荧光素酶实验结果提示CCAT1可靶向调控miR-375-3p。结论:CCAT1可抑制人口腔癌SAS细胞凋亡,推测是通过靶向抑制miR-375-3p的表达,调控线粒体凋亡通路相关基因及蛋白的表达来实现的。

胃癌患者癌组织和血清外泌体中LncRNA CCAT1、miR-140-3p表达及其临床意义

目的观察胃癌患者癌组织和血清外泌体中LncRNA结肠癌相关转录因子1(CCAT1)、微小核糖核酸-140-3p(miR-140-3p)表达情况并分析其临床意义。方法选取93例行胃癌根治术的胃癌患者为胃癌组,47例胃部良性病变患者为良性病变组,47例健康体检者为健康对照组。采集所有研究对象静脉血,提取血清外泌体,于胃癌患者行胃癌根治术过程中留取患者肿瘤组织样本及癌旁组织样本,采用RT-qPCR法检测血清外泌体及胃癌、癌旁组织中的LncRNA CCAT1、miR-140-3p。对胃癌患者随访5年,记录患者生存时间并计算5年生存率。采用Pearson相关分析法分析患者癌组织及血清外泌体中LncRNA CCAT1与miR-140-3p的相关性;比较不同病理特征胃癌患者癌组织及血清外泌体LncRNA CCAT1、miR-140-3p表达,以胃癌患者癌组织LncRNA CCAT1、miR-140-3p表达的平均值为界限,将患者分为高、低LncRNA CCAT1、miR-140-3p者,采用K-M生存曲线比较高、低LncRNA CCAT1、miR-140-3p患者5年总生存率;采用受试者工作特征(ROC)曲线分析血清外泌体LncRNA CCAT1、miR-140-3p对胃癌的诊断价值。结果患者胃癌组织LncRNA CCAT1表达高于癌旁组织,miR-140-3p表达低于癌旁组织(P均<0.05)。血清外泌体LncRNA CCAT1表达健康对照组<良性病变组<胃癌组,miR-140-3p表达健康对照组>良性病变组>胃癌组(P均<0.05)。Pearson相关分析显示,胃癌患者癌组织及血清外泌体中LncRNA CCAT1表达与miR-140-3p表达均呈负相关(r分别为-0.726、-0.639,P均<0.05)。不同肿瘤分化程度、浸润深度、临床分期及淋巴结转移情况的胃癌患者癌组织及血清外泌体中LncRNA CCAT1、miR-140-3p表达比较差异具有统计学意义(P均<0.05)。癌组织及血清外泌体LncRNA CCAT1高表达的胃癌患者5年总生存率低于LncRNA CCAT1低表达患者,miR-140-3p高表达的胃癌患者5年总生存率高于miR-140-3p低表达患者(P均<0.01)。ROC分析结果显示,血清外泌体LncRNA CCAT1、miR-140-3p预测胃癌的曲线下面积(AUC)分别为0.712、0.766,两者联合诊断胃癌的AUC为0.845。结论胃癌患者癌组织及血清外泌体中LncRNA CCAT1表达上调、miR-140-3p表达下调,其表达与患者肿瘤分化程度、浸润深度、临床分期及淋巴结转移情况及预后有关,血清外泌体LncRNA CCAT1、miR-140-3p联合对胃癌具有较高的诊断价值。

血清长链非编码RNA CCAT1对非酒精性脂肪性肝病患者肝纤维化及其程度的诊断价值

目的探究血清长链非编码RNA(lncRNA)结肠癌相关转录因子1(CCAT1)对非酒精性脂肪性肝病(NAFLD)患者肝纤维化及其程度的诊断价值。方法选择2018年2月至2021年12月在树兰(杭州)医院住院治疗的256例NAFLD患者作为研究对象,按照有无肝纤维化将其分为肝纤维化组(156例)和无肝纤维化组(100例),将肝纤维化组患者按照肝纤维化程度分为轻中度肝纤维化组(112例)和重度肝纤维化组(44例)。收集患者的临床资料,采用实时荧光定量PCR法检测各组的血清lncRNA CCAT1(以下简称为CCAT1)水平并比较组间差异;采用Pearson相关性分析法探讨血清CCAT1与肝纤维化指标的相关性;采用ROC曲线分析血清CCAT1对NAFLD患者肝纤维化及其程度的诊断价值。结果肝纤维化组的血清CCAT1水平显著高于无肝纤维化组(P<0.05),重度肝纤维化组的血清CCAT1水平显著高于轻中度肝纤维化组(P<0.05)。血清CCAT1与肝纤维化指标Ⅲ型前胶原(PCⅢ)、Ⅳ型胶原(CⅣ)、层粘连蛋白(LN)均呈正相关(P均<0.05)。血清CCAT1诊断NAFLD患者肝纤维化的ROC曲线下面积(AUC)为0.742,最佳截断值为1.37,敏感度和特异度分别为55.57%和83.00%。血清CCAT1诊断NAFLD患者重度肝纤维化的AUC为0.795,最佳截断值为1.43,敏感度和特异度分别为84.09%和63.39%。结论NAFLD患者中,有肝纤维化患者的血清CCAT1水平高于无肝纤维化患者,且血清CCAT1水平随肝纤维化程度的加重而升高。血清CCAT1对于NAFLD患者肝纤维化及其程度的诊断具有一定价值。

lncRNA-CCAT1与消化道肿瘤关系的研究进展

结肠癌相关转录因子1(CCAT1)是结直肠癌组织中新近发现的一种异常高表达的长链非编码RNA(lncRNA),具有促进肿瘤细胞增殖及侵袭转移等作用。CCAT1通过内源竞争等机制与微小RNA(miRNA)或蛋白相互作用参与调控机体的诸多生理病理过程,尤其是消化道肿瘤的形成与发展,它有望成为有价值的肿瘤标志物和治疗靶点。

宫颈癌组织及细胞株中长链非编码RNA CCAT1的表达水平及意义

目的:研究宫颈癌组织及细胞株中长链非编码RNA肠癌相关转录因子1(CCAT1)的表达水平及意义。方法:采用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测2015年1月至2017年6月接受宫颈癌根治术的48例宫颈癌患者的癌组织、对应癌旁正常组织(距癌<3 cm)以及人正常宫颈鳞状细胞系ECT1/E6E7、宫颈癌细胞系Hela、C33A中CCAT1的表达,并分析其临床意义;应用小分子RNA(siRNA)分别转染人宫颈癌细胞系Hela、C33A,构建CCAT1低表达细胞系,采用细胞计数试剂盒(CCK-8)法检测CCAT1对人宫颈癌细胞增殖的影响,流式细胞仪检测各组细胞周期,蛋白印迹(Western blot)法检测CCAT1对人宫颈癌细胞中RAS相关区域家族1A蛋白(RASSF1A)、细胞周期蛋白D1(Cyclin D1)表达的影响。结果:与癌旁正常组织相比,人宫颈癌组织中CCAT1的表达显著升高(P<0.05);与正常宫颈细胞ECT1/E6E7相比,宫颈癌细胞系Hela、C33A中CCAT1的表达显著升高(P<0.05);TMN分期较晚、肿瘤大、有淋巴结转移的宫颈癌患者宫颈癌组织中CCAT1相对表达量更高(P<0.05);不同年龄、分化程度患者中CCAT1的表达无显著性差异(P>0.05);与siRNA-NC组相比,转染siRNA-CCAT1的Hela、C33A细胞中CCAT1、细胞增殖活性、cyclin D1蛋白的表达显著降低,RASSF1A蛋白的表达显著升高。结论:CCAT1的表达上调与宫颈癌发生发展密切相关,沉默CCAT1的表达会抑制宫颈癌细胞的增殖,可能与上调RASSF1A的表达、下调cyclin D1的表达有关。

非小细胞肺癌患者血清外泌体miR-181a-5p和lncRNA CCAT1表达变化及其临床意义

目的探讨非小细胞肺癌(NSCLC)患者血清外泌体微小RNA-181a-5p(miR-181a-5p)、长链非编码RNA(lncRNA)结肠癌相关转录因子1(CCAT1)表达变化及其与患者临床病理特征和预后的关系。方法选择NSCLC患者103例(观察组)、体检健康的志愿者27例(对照组),采集两组外周静脉血,离心留取血清,提取血清外泌体。采用实时荧光定量PCR法检测两组血清外泌体miR-181a-5p、lncRNA CCAT1表达。比较两组外泌体miR-181a-5p、lncRNA CCAT1表达,分析NSCLC患者血清外泌体miR-181a-5p表达与lncRNA CCAT1表达的关系以及二者表达与患者临床病理特征的关系。采用Kaplan-Meier法分析血清外泌体miR-181a-5p、lncRNA CCAT1表达与NSCLC患者5年总体生存率的关系。采用Cox比例风险回归模型分析NSCLC患者预后不良的危险因素。结果观察组血清外泌体miR-181a-5p相对表达量明显低于对照组,血清外泌体lncRNA CCAT1相对表达量明显高于对照组(P均<0.01)。Pearson相关分析显示,NSCLC患者血清外泌体miR-181a-5p相对表达量与lncRNA CCAT1相对表达量呈负相关关系(P<0.01)。NSCLC患者血清外泌体miR-181a-5p、lncRNA CCAT1表达均与肿瘤临床分期、淋巴结转移有关(P均<0.05),而与性别、年龄、吸烟史、肿瘤直径、病理类型、组织分化程度无关(P均>0.05)。103例NSCLC患者治疗后随访2~60个月,无失访病例,随访期间死亡56例,5年总体生存率为45.63%(47/103)。分别以miR-181a-5p、lncRNA CCAT1相对表达量的均数为临界值,将NSCLC患者分为miR-181a-5p低表达者50例与miR-181a-5p高表达者53例、lncRNA CCAT1低表达者54例与lncRNA CCAT1高表达者49例。miR-181a-5p低表达者5年总体生存率明显低于其高表达者,而lncRNA CCAT1低表达者5年总体生存率明显高于其高表达者(P均<0.05)。多因素Cox比例风险回归分析显示,临床分期Ⅲ、Ⅳ期及伴淋巴结转移、血清外泌体miR-181a-5p低表达、血清外泌体lncRNA CCAT1高表达是NSCLC患者预后不良的独立危险因素(P均<0.05)。结论NSCLC患者血清外泌体miR-181a-5p表达下调、lncRNA CCAT1表达上调,二者表达呈负相关关系且与肿瘤临床分期、淋巴结转移和患者预后密切相关。

长链非编码RNA CCAT1与肿瘤关系的研究进展

长链非编码RNA(long non-coding RNA,lncRNA)是最近新发现的一组RNA,它的转录长度超过200个核苷酸,缺少完整的开放阅读框架,无法编码蛋白质。近年来,越来越多的研究证实它参与多种疾病的病理过程,尤其是恶性肿瘤的形成与发展。结肠癌相关转录因子1(colon cancer associated transcript 1,CCAT1)首先在结肠癌中被发现,并一度被认为是结直肠癌特异性表达的lncRNA。然而随着研究的深入,CCAT1被证实在结直肠癌、胃癌、肝癌、胆囊癌、肺癌、急性髓系白血病、乳腺癌、卵巢癌多种恶性肿瘤中高度表达,并在这些肿瘤发生发展中扮演着重要的角色。在本文中,我们对CCAT1与肿瘤的研究现状做一个简要的总结概述,以便大家对CCAT1有进一步系统全面的了解。

LncRNA CCAT1对H_(2)O_(2)诱导的PC12细胞增殖、凋亡和氧化应激的影响及机制

目的探讨结肠癌相关转录因子(CCAT)1对过氧化氢(H_(2)O_(2))诱导的PC12细胞增殖、凋亡和氧化应激的影响及其作用机制。方法用浓度分别为0、100、200、400μmol/L的H_(2)O_(2)处理PC12细胞24 h作为不同浓度处理组,以未经任何处理的细胞作为对照(control)组;将pcDNA-control、pcDNA-CCAT1质粒转染至PC12细胞中后再用200μmol/L的H_(2)O_(2)处理PC12细胞,计为H_(2)O_(2)+pcDNA-control组、H_(2)O_(2)+pcDNA-CCAT1组;pcDNA-CCAT1质粒转染至PC12细胞中后用200μmol/L的H_(2)O_(2)处理PC12细胞后再用雷帕霉素(RAPA)处理作为H_(2)O_(2)+pcDNA-CCAT1+RAPA组。噻唑蓝(MTT)法测定细胞活力;实时荧光定量聚合酶链反应(RT-qPCR)检测CCAT1表达水平;流式细胞术检测细胞凋亡;Western印迹检测蛋白表达;丙二醛(MDA)试剂盒检测MDA含量;超氧化物歧化酶(SOD)试剂盒、过氧化氢酶(CAT)试剂盒、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)试剂盒分别检测SOD、CAT、GSH-Px活力。结果H_(2)O_(2)处理PC12细胞中细胞活力显著降低,CCAT1表达水平显著降低,凋亡率显著升高,MDA含量显著升高,SOD、CAT、GSH-Px活力显著降低,丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶(Akt)、磷酸化Akt(p-Akt)、RAPA靶蛋白(mTOR)、磷酸化mTOR(p-mTOR)、信号转导和转录激活因子(STAT)3、磷酸化STAT(p-STAT)3表达水平显著降低(P<0.05);CCAT1过表达提高了细胞活力,降低了MDA含量,提高了SOD、CAT、GSH-Px活力,降低了H_(2)O_(2)诱导的细胞凋亡,提高了Akt/mTOR/STAT3信号通路Akt、p-Akt、mTOR、p-mTOR、STAT3、p-STAT3蛋白的表达(P<0.05)。抑制Akt/mTOR/STAT3信号通路逆转CCAT1过表达对H_(2)O_(2)诱导的PC12细胞增殖促进和凋亡、氧化应激水平的抑制作用。结论CCAT1可促进PC12细胞的增殖、抑制H_(2)O_(2)诱导的细胞凋亡和氧化应激,其机制可能与Akt/mTOR/STAT3信号通路相关。

敲低IncRNA-CCAT1表达对胶质瘤细胞凋亡影响

目的探讨敲低长链非编码RNA-结肠癌相关转录因子1(IncRNA-CCAT1)表达对胶质瘤细胞活力、凋亡的影响及机制。方法将人脑胶质瘤U251细胞随机分为空白组(未转染的细胞)、阴性对照IncRNACCAT1-NC组(NC组)和IncRNA-CCAT1-小干扰RNA(siRNA)组(CCAT1-siRNA组),CCAT1-siRNA转染U251细胞48h,应用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)、流式细胞术及Western blotting分别检测转染效果、细胞凋亡率及β-catenin、cyclinD1和Survivin蛋白表达。采用MTT法检测CCAT1-siRNA转染U251细胞24～96h的细胞活力。结果 CCAT1-siRNA组和空白组间CCAT1mRNA表达差异具有统计学意义(F=472.885,P<0.05),而NC组和空白组间CCAT1mRNA表达差异无统计学意义(P>0.05)。CCAT1-siRNA组和空白组相比较,细胞活力降低,凋亡率升高,β-catenin、cyclinD1和Survivin蛋白表达降低,差异具有统计学意义(F=13.372～100.869,P<0.05)。结论敲低IncRNA-CCAT1表达可抑制胶质瘤细胞活力、诱导凋亡,其机制可能与下调Wnt/β-catenin信号通路β-catenin、cyclinD1和Survivin表达有关。

lncRNA CCAT1在子宫内膜癌组织中的表达及其与病理参数的关系

目的探讨长链非编码RNA结肠癌相关转录因子1(lncRNA CCAT1)在子宫内膜癌组织中的表达及其与病理参数的关系。方法回顾性选取2021年1月至2022年1月郑州人民医院收治的105例子宫内膜癌行手术治疗的患者为研究对象,收集患者术后切除的子宫内膜癌组织标本及相应癌旁距肿瘤边缘约5 cm以上的组织标本。患者年龄30~73(55.37±3.46)岁,肿瘤长径≤2 cm 52例、>2 cm 53例。使用实时荧光定量聚合酶链反应(PCR)技术检测并分析lncRNA CCAT1在子宫内膜癌组织与癌旁组织中、不同病理分期、不同组织分级、不同分化程度、不同肌层浸润程度、有无淋巴结转移中的表达情况及其关系。采用t检验、方差分析、Spearman相关性分析。结果lncRNA CCAT1在子宫内膜癌组织、病理Ⅲ+Ⅳ期、肌层浸润≥1/2、有淋巴结转移中的水平高于癌旁组织、病理Ⅰ+Ⅱ期、肌层浸润<1/2、无淋巴结转移,同时lncRNA CCAT1在G1级、G2级、G3级与高分化、中分化、低分化中的表达水平呈逐渐升高趋势,差异均有统计学意义(均P<0.05)。经Spearman相关系数分析,lncRNA CCAT1表达水平与病理分期、组织分级、肌层浸润程度、淋巴结转移呈正相关(r=0.458,0.425,0.472,0.436;均P<0.05),lncRNA CCAT1表达水平与分化程度呈负相关(r=-0.423,P<0.05)。结论lncRNA CCAT1在子宫内膜癌组织中呈现较高表达,与组织分级、分化程度、肌层浸润程度、淋巴结转移呈正相关,其水平变化可为子宫内膜癌的临床诊疗提供参考。

长链非编码RNA CCAT1对前列腺癌PC-3细胞增殖、迁移及凋亡的影响

目的:探讨长链非编码RNA结肠癌相关转录因子1(CCAT1)对前列腺癌PC-3细胞增殖、迁移及凋亡的影响。方法:采用荧光定量PCR检测CCAT1 siRNA在PC-3细胞中的敲低效率;通过CCK-8法、transwell迁移实验、流式细胞仪(FACS)检测低表达CCAT1对PC-3细胞增殖、迁移及凋亡的影响。结果:PC-3细胞转染CCAT1 siRNA后,qPCR检测细胞中CCAT1表达量明显降低;低表达CCAT1能显著抑制细胞增殖,减弱迁移能力,促进细胞凋亡。结论:CCAT1可能通过对细胞增殖、迁移及凋亡的调控促进前列腺癌发生、发展。

长链非编码RNA CCAT1在支气管哮喘中的表达及对气道平滑肌细胞的影响

目的探究长链非编码RNA(lncRNA)结肠癌相关转录因子1(CCAT1)对气道平滑肌细胞的影响。方法选取2016年10月至2018年10月邯郸市中心医院收治的56例支气管哮喘急性发作期患儿,及56例同期健康体检儿童。实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测支气管哮喘患儿和健康儿童血浆lncRNA CCAT1表达水平。Lipofectamine 2000^(TM)法构建lncRNA CCAT1过表达、低表达人气管平滑肌细胞系(分别记为pc-CCAT1组、si-CCAT1组),同时设置相应阴性对照(分别为pc-NC组、si-NC组),使用qRT-PCR进行验证;CCK-8实验、BrdU实验分别检测细胞活力、增殖能力,划痕实验检测细胞迁移能力,Western blot检测细胞中B细胞淋巴瘤2(Bcl-2)和Bcl-2相关X蛋白(Bax)表达。结果哮喘组儿童血浆lncRNA CCAT1表达高于健康组(P<0.001),pc-CCAT1组细胞中lncRNA CCAT1表达水平高于pc-NC组(P<0.001),si-CCAT1组细胞中lncRNA CCAT1的表达水平低于si-NC组(P<0.05)。48、72、96小时,pc-CCAT1组细胞的OD值高于pc-NC组(P<0.001),si-CCAT1组细胞的OD值低于si-NC组(P<0.001)。与pc-NC组相比,pc-CCAT1组BrdU阳性细胞百分比、细胞迁移率、Bcl-2蛋白表达升高(P<0.05),Bax蛋白表达降低(P<0.05);与si-NC组相比,si-CCAT1组BrdU阳性细胞百分比、细胞迁移率、Bcl-2蛋白表达降低(P<0.05),Bax蛋白表达升高(P<0.001)。结论支气管哮喘患儿血浆CCAT1表达上调,lncRNA CCAT1参与气道平滑肌细胞的增殖、迁移和凋亡过程。

非小细胞肺癌患者血浆lncRNA-GAS5、lncRNA-CCAT1表达变化及意义

目的探讨非小细胞肺癌(NSCLC)患者血浆长链非编码RNA-生长阻滞特异度转录因子5(lncRNA-GAS5)、长链非编码RNA-结肠癌相关转录因子1(lncRNA-CCAT1)表达变化及临床意义。方法选择80例NSCLC患者作为NSCLC组,同期选择肺部良性疾病患者50例作为对照组。用荧光定量PCR法检测两组血浆lncRNA-GAS5、lncRNA-CCAT1表达,并分析二者表达与NSCLC患者临床病理特征的关系,用受试者工作特征(ROC)曲线分析血浆lncRNA-GAS5、lncRNA-CCAT1对NSCLC的诊断价值。结果与对照组比较,NSCLC组血浆lncRNA-GAS5表达低,血浆lncRNA-CCAT1表达高(P均<0.05)。血浆lncRNA-GAS5表达与NSCLC组织分化程度、TNM分期有关(P均<0.05),血浆lncRNA-CCAT1表达与NSCLC淋巴结转移、TNM分期有关(P均<0.05)。血浆lncRNA-GAS5诊断NSCLC的ROC曲线下面积(AUC)为0.756(95%CI:0.673~0.840),最佳截断值为26.71,此时灵敏度、特异度分别为0.81、0.79,准确度为0.77。血浆lncRNA-CCAT1诊断NSCLC的AUC为0.819(95%:CI 0.747~0.890),最佳截断值为13.11,此时灵敏度、特异度分别为0.85、0.82,准确度为0.81。血浆lncRNA-GAS5联合lncRNA-CCAT1诊断NSCLC的AUC为0.896(95%CI:0.841~0.951),此时灵敏度、特异度分别为0.89、0.92,准确度为0.86。结论NSCLC患者血浆lncRNA-GAS5表达低,血浆lncRNA-CCAT1表达高,二者均参与NSCLC的发生发展,且二者联合检测有助于早期诊断NSCLC。

老年克罗恩病患者肠组织中lncRNA CCAT1的表达与预后的关系

目的检测老年克罗恩病(CD)患者肠组织中结肠癌相关转录因子1(CCAT1)的表达水平,并分析其与患者预后的关系。方法选择2017年3月至2019年3月在空军军医大学第一附属医院确诊的93例老年CD患者作为研究对象。根据患者的预后情况将其分为预后良好组(n=52)和预后不良组(n=41)。采用实时荧光定量PCR法检测CD患者肠道炎性组织及正常组织中CCAT1的表达水平。采用ROC曲线评估CCAT1判断CD患者预后的效能。采用多因素logistic回归法分析影响患者预后的危险因素。结果CD患者炎性组织中CCAT1的表达水平显著高于正常组织,差异有统计学意义(P<0.05)。预后不良组的炎性组织中CCAT1的表达水平显著高于预后良好组,差异有统计学意义(P<0.05)。CCAT1判断CD患者预后的ROC曲线下面积(AUC)、敏感度和特异度分别为0.932、0.902和0.923。多因素logistic回归分析结果显示,疾病行为、肛周病变、首次治疗时使用糖皮质激素及CCAT1均为影响CD患者预后的独立危险因素(P均<0.05)。结论检测CD患者炎性组织中CCAT1的表达水平有助于判断患者的预后情况。

蒲公英多糖通过下调LncRNA CCAT1表达抑制MDA-MB-231细胞增殖、迁移和侵袭

目的通过观察蒲公英多糖(dandelion polysaccharide,DP)联合小干扰RNA(small interfering RNA,siRNA)靶向沉默长链非编码RNA(LncRNA)结肠癌相关转录因子1(colon cancer-associated transcript 1,CCAT1)对三阴性乳腺癌MDA-MB-231细胞增殖、迁移、侵袭和上皮间质转化(epithelial-mesenchymal transition,EMT)的影响,探究DP抗乳腺癌可能的分子机制。方法在线数据工具分析CCAT1在乳腺癌组织中的差异表达,qRT-PCR分别检测CCAT1在乳腺癌细胞系中的差异表达、DP(100、200μg/mL)对MCF-10A、MCF-7、MDA-MB-231细胞中CCAT1表达的影响以及siCCAT1对MDA-MB-231细胞中CCAT1表达的影响;CCK-8实验、划痕实验和Transwell实验分别检测DP联合siCCAT1对MDA-MB-231细胞活力、迁移和侵袭能力的影响;在线数据工具预测CCAT1下游靶基因及靶基因富集的信号通路;Western blotting检测DP联合siCCAT1对MDA-MB-231细胞EMT相关蛋白及蛋白激酶B(protein kinase B,Akt)/糖原合成激酶-3β(glycogen synthase kinase-3β,GSK-3β)/细胞周期蛋白D1(Cyclin D1)/周期蛋白依赖性激酶6(cyclin-dependent kinases 6,CDK6)信号通路中关键蛋白表达的影响。结果与癌旁正常组织及正常乳腺上皮细胞MCF-10A相比,CCAT1在人乳腺癌组织和细胞中高表达(P<0.01);与对照组比较,DP呈剂量和时间相关性地抑制MDA-MB-231及MCF-7细胞活力(P<0.05、0.01),但对MCF-10A细胞活力无明显影响;与MCF-10A及MCF-7细胞相比,DP可显著下调MDA-MB-231细胞中CCAT1表达水平(P<0.01);与siNC组比较,siRNA可显著降低CCAT1在MDA-MB-231细胞中的表达(P<0.01),且DP(200μg/mL)联合siCCAT1更加显著降低了MDA-MB-231细胞中CCAT1的表达水平(P<0.01);与对照组及siNC组比较,DP(200μg/mL)和siCCAT1均能抑制MDA-MB-231细胞活力(P<0.01),且DP(200μg/mL)联合siCCAT1对MDA-MB-231细胞活力的抑制作用更为明显(P<0.01);与对照组及siNC组比较,DP(200μg/mL)和siCCAT1均能抑制MDA-MB-231细胞的迁移和侵袭(P<0.01),且DP(200μg/mL)联合siCCAT1抑制MDA-MB-231细胞迁移和侵袭能力的作用更为明显(P<0.01);与单独用DP或siCCAT1相比,DP联合siCCAT1处理MDA-MB-231细胞中EMT进程相关蛋白E-cadherin表达上调更为显著(P<0.01),N-cadherin和Vimentin蛋白表达下调更为显著(P<0.01);在线生物工具预测出CCAT1靶基因共1929个,这些靶基因主要富集在RNA聚合酶II启动子转录调控、信号转导、转录调控等关键生物过程;富集的通路主要有癌症、磷脂酰肌醇3-激酶(phosphatidylinositol 3-kinase,PI3K)/Akt信号通路;与对照组及siNC组比较,DP(200μg/mL)和siCCAT1均能下调MDA-MB-231细胞中Akt/GSK-3β/Cyclin D1/CDK6信号通路关键蛋白p-PI3K、p-Akt、p-GSK-3β、Cyclin D1、CDK6蛋白表达水平(P<0.05、0.01),且DP(200μg/mL)联合siCCAT1应用时对其关键蛋白下调作用更为显著(P<0.01)。结论DP联合siCCAT1显著抑制MDA-MB-231细胞增殖、迁移、侵袭和EMT进程,其机制可能与下调MDA-MB-231细胞中CCAT1表达进而抑制Akt/GSK-3β/Cyclin D1/CDK6信号通路有关。

长链非编码RNA CCAT1在女性恶性肿瘤中的研究进展

近年来,女性恶性肿瘤的发病率和死亡率不断上升,对女性的生殖健康造成了极大的危害。其中,最常见的四种女性恶性肿瘤是乳腺癌、宫颈癌、子宫内膜癌和卵巢癌,这4种癌症致死率分别为6%~10%、18%~46%、12%~57%、41%~87%(数据来自世界卫生组织网站)。这些肿瘤严重威胁着妇女的健康,给妇女的家庭和社会带来了极大的负担。因此,探索有效的途径来对抗这些致命的癌症变得至关重要。LncRNA是癌症诊断和治疗领域的新星。