肠系膜淋巴管结扎对二次打击大鼠肾小管上皮细胞凋亡的影响

目的探讨结扎肠系膜淋巴管对失血／脂多糖（LPS）二次打击致大鼠肾小管上皮细胞凋亡的拮抗作用。方法雄性Wistar大鼠45只，随机均分为结扎组、未结扎组和假手术组。用右侧颈动脉放血及致伤后6h腹腔注射LPS 4mg／kg复制失血／LPS二次打击动物模型，结扎组行肠系膜淋巴管结扎术致肠淋巴液断流。在手术创伤后24h，选取同一部位肾组织制备病理切片，用原位末端缺刻标记法（TUNEL）检测肾小管上皮细胞凋亡率，免疫组化链酶素-亲合素-生物素-过氧化物酶法（SABC）检测凋亡调控基因bcl-2和促凋亡基因bax的蛋白表达。结果二次打击后，与假手术组比较，未结扎组肾小管上皮细胞凋亡率和bax蛋白表达明显增高，bcl-2蛋白表达显著降低（P均〈0．01）；结扎组大鼠肾小管上皮细胞凋亡率、bax蛋白表达显著低于未结扎组，bcl-2蛋白表达显著高于未结扎组（P均〈0．01）。结论肠系膜淋巴管结扎可减轻失血／LPS导致的大鼠肾小管上皮细胞凋亡，其机制可能与肠系膜淋巴管结扎降低促凋亡基因bax表达、提高bcl-2表达有关。

肠系膜淋巴管结扎对脓毒症相关肺脏损伤及肠道损伤的作用

目的观察肠系膜淋巴管结扎(mesenteric lymph duct ligation,MLDL)对脓毒症大鼠肺脏及肠道功能的影响。方法采用大鼠盲肠结扎穿孔(cecal ligation and puncture,CLP)法制备脓毒症模型。大鼠按随机数字表法分为假手术对照组(Sham组)、脓毒症组(CLP组)及MLDL组(CLP+MLDL组,CLP联合肠系膜淋巴管结扎处理),在脓毒症造模24h后收集各组大鼠的血液、肺脏及小肠组织标本行功能及病理学检查,同时检测血液、肺脏及小肠组织中的细菌负荷水平。结果 CLP造模24h后,血气分析及肺脏组织病理学检测结果显示,MLDL可以显著减轻脓毒症大鼠的肺损伤评分(6.14±0.51 vs.8.12±0.63,P=0.029 9),提升氧分压[(78.67±4.51)mmHg vs.(64.83±2.90)mmHg,P=0.027 3],降低肺脏湿/干比(6.12±0.25 vs.7.63±0.49,P=0.021 2),降低肺泡灌洗液中炎症因子[TNF-α:(828.17±81.89)pg/mL vs.(1 118.17±79.22)pg/mL,P=0.029 1;IL-6:(39.33±5.50)ng/mL vs.(68.67±5.24)ng/mL,P=0.003 4]、蛋白(2.117±0.289 2 vs.3.033±0.164 7,P=0.020 3)及细胞[(30.00±3.587)×10~6/L vs.(43.83±2.358)×10~6/L,P=0.009 1)]的水平。小肠屏障功能及病理学检测结果发现,MLDL未能减轻肠道损伤;MLDL可以明显降低血液及肺脏组织中的细菌负荷水平,但是对于小肠组织中的细菌水平则无明显改变。结论 MLDL能够显著减轻脓毒症大鼠的肺损伤,但是对于肠道损伤则无明显保护作用。这种作用差异可能与MLDL可以抑制脓毒症时细菌从腹腔往其他脏器扩散,但是会导致在腹腔脏器特别是肠道组织内积聚有关。

肠淋巴途径在大鼠重症急性胰腺炎致全身炎症反应中的作用

目的通过肠系膜淋巴管结扎（MLDL）阻断肠淋巴液回流，观察肠淋巴途径在大鼠重症急性胰腺炎（SAP）致全身炎症反应中的作用。方法将24只雄性SD大鼠按随机数字表法分为模型组、结扎组和假手术组，每组8只。采用胰胆管逆行注入牛黄胆酸钠溶液制备SAP合并多器官损伤模型；MLDL于制模前进行。术后24h测定血中二胺氧化酶（DAO）、D-乳酸、肿瘤坏死因子-α（TNF—α）、白细胞介素-6（IL-6）和内毒素水平及胰腺、肺脏、肝脏组织髓过氧化物酶（MP0）活性。处死大鼠取材，光镜下观察小肠组织形态学变化；培养肠系膜淋巴结细菌并计算细菌移位率。结果与假手术组比较，模型组血中DAO、D-乳酸、TNF—α、IL-6和内毒素水平均显著升高[DAO：（0．64士0．17）kU／L比（0．37±0．07）kU／L，D-乳酸：（8．16±1．79）ng／L比（3．24±1．00）ng／L，TNF—α：（65．21±13．38）ng／L比（22．16±5．04）ng／L，IL-6：（7．95±1．83）ng／L比（4．26±1．23）ng／L，内毒素：（O．068±0．019）kEU／L比（0．033±0．009）kEU／L3，肠系膜淋巴结细菌移位率显著提高（75．0％比o），胰腺、肺脏、肝脏MPO活性显著升高[胰腺：（5．14±1．24）U／g比（2．88±0．75）U／g，肺脏：（9．07±2．52）U／g比（4．38±1．29）U／g，肝脏：（6．36±1．63）U／g比（3．19±0．96）U／g，均P〈0．01]；与模型组比较，结扎组血中DAO[（0．50±0．13）kU／L]、D-乳酸[（6．23±1．25）ng／L]、TNF-α（（48．50±13．23）ng／L]、IL-6[（6．06土1．64）ng／L3和内毒素[（0．048±0．014）kEU／L3均显著降低，肠系膜淋巴结细菌移位率（12．5％）显著减少，胰腺、肺脏、肝脏MPO活性[胰腺：（4．01±1．05）U／g，肺脏：（6．58±1．96）U／g，肝脏：（4．64±1．34）U／g3显著下降（P〈0．05或P〈0．01）。结论MLDL可以降低SAP大鼠肠道细菌和内毒素移位，减轻胰腺、肺脏、肝脏组织炎症损伤，保护肠屏障功能。