谷氨酰胺对大鼠肠缺血再灌注损伤的保护作用及相关机制

目的研究谷氨酰胺对肠缺血再灌注损伤(IR)大鼠的作用及相关机制。方法按照体重将大鼠随机分为5组:对照组、实验-A组(术前静脉给谷氨酰胺)、实验-B组(术前灌胃给谷氨酰胺)、实验-C组(术中静脉给谷氨酰胺)和实验-D组(术中肠腔给谷氨酰胺),每组5只。造模前,实验-A组和实验-B组经尾静脉注射和灌胃给予谷氨酰胺1. 5 mg·kg^(-1),于开腹后,实验-C组和实验-D组分别经肠系膜上静脉和肠腔给予谷氨酰胺1. 5 mg·kg^(-1),对照组经尾静脉注射给予0. 9%NaCl 1 mL,1次/天,连续4 d。用血管夹夹闭肠系膜上血管制备大鼠肠IR模型。缺血50 min,再灌注1,12 h后,取肠标本和血标本。用酶联免疫吸附试验检测血中的肿瘤坏死因子-α(TNF-α)含量;用反转录聚合酶链反应法检测肠标本组织中的核因子-κB(NF-κB)和过氧化物酶体增殖物激活受体γ(PPAR-γ) mRNA表达水平;用免疫印迹法检测NF-κB和PPAR-γ蛋白表达水平。结果肠IR 12 h后,对照组、实验-A组、实验-B组、实验-C组和实验-D组的血清中TNF-α含量分别是(419. 04±10. 55),(311. 77±9. 81),(224. 53±3. 36),(318. 77±15. 64)和(436. 20±22. 50)ng·L^(-1),实验-A组和实验-B组与对照组比较,差异均有统计学意义(均P <0. 05);实验-A组和实验-B组与与实验-D组比较,差异均有统计学意义(均P <0. 05)。这5组的NF-κB mRNA含量分别是1,0. 51±0. 03,0. 61±0. 07,0. 62±0. 09和0. 92±0. 05;这5组的PPAR-γmRNA含量分别是1,2. 91±0. 22,2. 52±0. 24,1. 48±0. 12和1. 39±0. 13,实验-A组与对照组和实验-D组比较,NF-κB和PPAR-γmRNA表达量的差异均有统计学意义(均P <0. 05)。NF-κB和PPAR-γ蛋白含量趋势与mRNA一致。IR 1 h的上述指标结果与12 h一致。结论谷氨酰胺通过降低NF-κB活性和增加PPAR-γ活性,对肠IR大鼠起到保护作用。