虾青素调节自噬对肠缺血再灌注损伤大鼠认知功能的影响

目的:评价虾青素(AST)对肠缺血再灌注(I/R)损伤大鼠认知功能的影响及自噬在其中的作用。方法:8周龄SPF级雄性Sprague-Dawley (SD)大鼠随机分为假手术(sham)组、I/R组、AST组和AST+3-甲基腺嘌呤(3-MA)组,每组12只。其中,sham组大鼠仅暴露肠系膜上动脉(SMA)而不夹闭,其余3组夹闭SMA 90 min后开夹再灌注建立肠I/R模型。AST组大鼠造模前3 d给予AST(45 mg·kg^(-1)·d^(-1))腹腔注射,AST+3-MA组大鼠造模前3 d给予AST(45 mg·kg^(-1)·d^(-1))+3-MA(1.5 mg·kg^(-1)·d^(-1))腹腔注射。术后48 h采用Morris水迷宫评估大鼠认知功能;苏木精-伊红(HE)染色评估肠组织损伤;额叶皮质尼氏染色评估神经元损伤;ELISA试剂盒测定额叶皮质和海马组织内白细胞介素6(IL-6)、IL-1β和肿瘤坏死因子α(TNF-α)水平;Western blot检测额叶皮质和海马组织内beclin-1、微管相关蛋白1轻链3(LC3)和P62的表达水平。结果:与sham组相比,I/R组大鼠游泳距离增加,潜伏期延长,Chiu's评分升高,额叶皮质神经元数量减少(P<0.01),额叶皮质和海马组织IL-6、IL-1β和TNF-α含量升高(P<0.01),额叶皮质和海马组织beclin-1表达水平和LC3-II/LC3-I比值均升高(P<0.05或P<0.01);与I/R组对比,AST组大鼠游泳距离和潜伏期缩短,Chiu's评分降低,额叶皮质神经元数量增加(P<0.01),额叶皮质和海马组织IL-6、IL-1β和TNF-α含量降低(P<0.01),额叶皮质和海马组织beclin-1表达水平升高而P62表达水平降低(P<0.05或P<0.01);与AST组相比,AST+3-MA组大鼠游泳距离增加,潜伏期延长,Chiu's评分升高,额叶皮质神经元数量减少(P<0.05),额叶皮质和海马组织IL-6、IL-1β和TNF-α含量升高,额叶皮质和海马beclin-1表达水平和LC3-II/LC3-I比值降低,P62表达水平升高(P<0.01)。结论:AST可通过促进自噬抑制神经炎症,从而缓解大鼠肠I/R引起的认知障碍。

罗伊氏黏液乳杆菌通过抑制ROS依赖性NLRP3炎性通路缓解大鼠肠缺血/再灌注损伤

本研究旨在以ROS/NLRP3炎性小体为切入点,探讨罗伊氏黏液乳杆菌(Limosilactobacillus reuteri,LR)改善肠缺血性再灌注损伤(intestinal ischemia-reperfusion injury,IR)的作用机制。通过缺氧/复氧方法来构建IR细胞模型,以及微动脉夹夹闭/灌注方法来构建大鼠IR模型。细胞试验分为4组,对照组、缺血再灌注细胞模型组、罗伊氏黏液乳杆菌预处理组、罗伊氏黏液乳杆菌组。动物试验分为3组(每组10只大鼠),假手术组、缺血再灌注损伤组、罗伊氏黏液乳杆菌灌胃处理组。检测各组ROS水平,NLRP3炎性小体相关蛋白(NLRP3、ASC、Caspase p10、GSDMD)表达情况,炎性相关指标(TNF-α、IL-1β、IL-6、IL-10)水平,氧化应激相关指标(ROS、SOD、GSH-Px、MDA)含量,并进行病理组织学评价。结果显示,1)罗伊氏黏液乳杆菌可以减弱IR导致的氧化应激以及NLRP3炎性小体的激活。2)罗伊氏黏液乳杆菌通过减弱ROS的表达来缓解NLRP3炎性小体的激活。3)罗伊氏黏液乳杆菌能够缓解IR对肠道组织的损伤,以及炎性因子的表达。综上所述,LR可缓解大鼠肠IR和氧化应激,其作用机制与抑制ROS依赖性NLRP3炎性小体有关,为LR在肠道相关疾病的兽医临床治疗提供试验依据。

烟碱对肠缺血再灌注损伤大鼠凝血功能的影响

目的观察胆碱能激动剂烟碱对大鼠肠缺血再灌注损伤后凝血功能的影响。方法选取32只体质量250~300g雄性健康SD大鼠,采用随机数字表法将它们分为四组(n=8):假手术(sham operation,S)组、肠缺血再灌注(ischemia-reperfusion,IR)组、烟碱(nicotine,NIC)组、α7烟碱型乙酰胆碱受体(α7 nicotinic acetylcholine receptor,α7nAchR)拮抗剂α-银环蛇毒素(α-bungarotoxin,α-BGT)组。大鼠肠缺血再灌注损伤模型采取肠系膜上动脉夹闭45min后恢复再灌注120min的方法建立。α-BGT组在肠系膜上动脉夹闭前45min和30min分别腹腔注射α-BGT 1μg/kg,烟碱400μg/kg;NIC组用等容量生理盐水替代α-BGT,S组和IR组用等容量生理盐水替代α-BGT和烟碱,其余均同α-BGT组。在大鼠恢复再灌注120min后经腹主动脉取血样,检测血浆肿瘤坏死因子-α(plasma tumor necrosis factor,TNF-α)、组织因子(tissue factor,TF)、抗凝血酶(antithrombin,AT)、组织型纤溶酶原激活物(tissue plasminogen activator,tPA)、纤溶酶原激活物抑制物-1(fiber plasminogen activator inhibitor-1,PAI-1)、D-二聚体水平和血小板计数(platelet count,PLT)。取远端回肠采用Chiu评分法评估小肠组织受损程度。结果与S组和NIC组比较,IR组和α-BGT组血浆TNF-α、TF、tPA、PAI-1和D-二聚体水平均出现显剧升高,血浆AT水平下降,血小板计数下降(P<0.05),小肠组织Chiu评分增加(P<0.05)。结论烟碱能够抑制大鼠肠缺血再灌注损伤导致的凝血功能过度激活;其作用机制可能为外周α7烟碱型乙酰胆碱受体结合,引起胆碱能抗炎通路的激活,进而导致促炎性细胞因子的释放减少,从而减轻内皮细胞的损伤。

基于α7nAChR-miRNA124-STAT3通路探讨肠缺血再灌注电针血清对腹腔巨噬细胞的影响

目的:体外研究观察电针治疗肠缺血再灌注小鼠后,小鼠血清的效应物质干预腹腔巨噬细胞株RAW264.7的过程,探讨电针足三里改善肠缺血再灌注损伤(IIRI)的可能机制。方法:取BALB/c小鼠制备IIRI模型,随机分为正常血清组、模型血清组、电针血清组,电针血清组小鼠于足三里电针治疗30 min。各组小鼠制备动物血清后与RAW264.7细胞共培养,共设6组:对照组、正常血清组、模型血清组、电针血清组、电针血清+miRNA124抑制剂组、电针血清+α7nAChR拮抗剂组。实时荧光定量PCR法检测细胞α7nAChR和miRNA 124水平,Western blotting法检测细胞p-STAT3表达,ELISA法检测细胞上清IL-6浓度。结果:模型血清组p-STAT3及IL-6均较对照组和正常血清组显著增高;与模型血清组比较,电针血清组miRNA 124水平明显增高,而p-STAT3表达显著降低;与电针血清组比较,电针血清+α7nAChR拮抗剂组的α7nAChR水平显著下降,电针血清+miRNA 124抑制剂组和电针血清+α7nAChR拮抗剂组的miRNA 124水平显著下降,而p-STAT3和IL-6表达显著升高。结论:电针足三里可能通过促进巨噬细胞α7nAChR诱导miRNA 124,从而抑制STAT3通路改善IIRI。

五味子安五脂素对大鼠肠缺血再灌注致肺损伤的保护作用

目的观察五味子安五脂素对肠缺血再灌注(II/R)损伤大鼠肺组织氧化及炎症指标的影响。方法将32只SD大鼠随机均分成4组:假手术(Sham)组,肠缺血再灌注(II/R)组,假手术+安五脂素(Sham+Anwu)组和II/R+安五脂素(II/R+Anwu)组,连续给药14 d,1次/d。假手术及II/R完成后,取肺组织。苏木素-伊红(HE)染色观察各组肺组织形态学变化;检测肺组织中超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)、还原型谷胱甘肽(GSH)、丙二醛(MDA)的活性或含量及白细胞介素(IL)-1β、IL-6、肿瘤坏死因子(TNF)-α含量。结果病理学观察显示,II/R组肺组织损伤显著,而II/R+Anwu组肺组织损伤显著改善(P<0.05);II/R组肺组织中SOD、CAT与GSH活性较Sham组显著降低,MDA、TNF-α、IL-6与IL-1β含量较Sham组相比显著升高(P<0.05);II/R+Anwu组肺组织SOD、CAT及GSH活性较II/R组显著升高,MDA、TNF-α、IL-6及IL-1β含量较II/R组显著降低(P<0.05)。结论安五脂素能够改善II/R大鼠肺组织损伤。该作用与其在肺组织中发挥抗氧化及抗炎作用有关。

基于脑肠轴探讨益气活血化浊解毒方对脑缺血再灌注损伤大鼠的影响

目的:基于脑肠轴探讨益气活血化浊解毒方(YHHJP)对脑缺血再灌注损伤(CIRI)大鼠脑组织炎症因子、脑和结肠组织紧密连接、肠道菌群及其代谢产物的影响。方法:50只SPF级雄性SD大鼠随机分为假手术组(Sham)、模型组(MCAO)、YHHJP低、中、高剂量组(TCM-L/TCM-M/TCM-H)。采用Zea Longa线栓法制备大鼠大脑中动脉闭塞再灌注模型,治疗3 d后观察神经功能缺损评分,TTC染色计算脑梗死面积,尼氏染色观察脑组织病理形态改变,HE染色观察脑和结肠组织病理形态改变,ELISA检测脑组织IL-1β、IL-6、TNF-α和血清LPS含量,生物化学法检测血清D-乳酸(D-LA)含量,实时荧光定量PCR检测脑组织ZO-1、Claudin-5和结肠组织ZO-1、Claudin-1基因表达,16S rDNA高通量测序检测肠道菌群。结果:与假手术组相比,模型组大鼠脑和结肠组织病理损伤严重,肠道菌群微生态结构存在明显差异,神经功能损伤加重,脑梗死面积增加,脑组织IL-1β、IL-6、TNF-α和血清LPS、D-LA含量升高,脑组织ZO-1、Claudin-5及结肠组织ZO-1、Claudin-1基因表达降低(P<0.05)。与模型组相比,YHHJP低、中、高剂量组大鼠脑组织和结肠组织病理损伤减轻,肠道菌群微生态紊乱得到改善,神经功能损伤减轻,脑梗死面积明显缩小,脑组织IL-1β、IL-6、TNF-α含量显著降低,结肠组织ZO-1、Claudin-1基因表达显著升高(P<0.05);YHHJP中、高剂量组大鼠血清LPS、D-LA含量明显降低,脑组织ZO-1、Claudin-5基因表达显著升高(P<0.05)。结论:YHHJP可改善CIRI,其机制可能与调节肠道菌群多样性,抑制肠道细菌代谢产物LPS、D-LA释放,增加紧密连接蛋白ZO-1、Claudin-5、Claudin-1基因表达,下调炎症因子分泌有关。

丁酸钠预处理通过减轻血脑屏障损伤改善大鼠肠缺血再灌注诱导的认知障碍

目的:探究丁酸钠对大鼠肠缺血/再灌注后血脑屏障和认知功能的影响及其可能存在的机制。方法:将SD大鼠随机分为4组,每组12只,(1)假手术组(Sham组);(2)肠缺血/再灌注组(II/R组);(3)肠缺血/再灌注+丁酸钠组(NaB组):造模前1周NaB 500 mg·kg^(-1)·d^(-1)灌胃;(4)肠缺血/再灌注+丁酸钠+ITSA-1组(ITSA-1组):造模前1周NaB 500 mg·kg^(-1)·d^(-1)灌胃+前5 d、3 d、1 d ITSA-10.5 mg/kg腹腔注射。HE染色评估肠黏膜损伤;Morris水迷宫测试评估大鼠认知功能;透射电镜观察血脑屏障微结构改变;ELISA检测脑组织炎症因子IL-1β、IL-6、TNF-α和紧密连接蛋白Claudin5、ZO-1及基质金属蛋白酶-9(matrix me-talloproteinase-9,MMP-9)含量;Western Blot检测紧密连接蛋白Claudin5、ZO-1及亲环蛋白A(cy-clophilin A,CypA)、MMP-9水平。结果:与Sham组相比,II/R组大鼠Chiu's肠黏膜损伤评分较高(P<0.001);游泳路程增加(P<0.05),非平台象限占比增加(P<0.001),潜伏期延长(P<0.05);透射电镜下血脑屏障微结构改变;脑组织炎症因子IL-1β、IL-6、TNF-α增加(P<0.001),CypA、MMP-9表达增加(P<0.01),紧密连接蛋白Claudin5、ZO-1表达减少(P<0.01,P<0.001);与II/R组相比,NaB组神经炎症、血脑屏障损伤减轻,认知功能改善;ITSA-1组上述损伤与II/R组相似。结论:丁酸钠可通过减轻血脑屏障损伤改善大鼠II/R诱导的神经认知功能障碍,其机制可能与抑制CypA/MMP-9通路有关。

白芍总苷对肠缺血再灌注大鼠Cajal间质细胞凋亡和血清炎症因子的影响

目的探讨白芍总苷对肠缺血再灌注大鼠间质细胞凋亡和血清炎症因子的影响。方法选取40只SD大鼠,雌雄参半,随机分10只为假手术组,假手术组大鼠在21~22℃下,湿度50%的环境下用新鲜干燥的饲料进行随时采食喂养。剩余30只大鼠通过手术建立肠缺血再灌注模型。建模成功后的30只SD大鼠随机分为肠缺血再灌注模型组、大黄素对照组、白芍总苷组,每组10只。假手术组、肠缺血再灌注模型组在再灌注前30 min时经股动脉注射10 mL/kg生理盐水,大黄素对照组在再灌注前30 min时40 mg/kg剂量灌胃,白芍总苷组在再灌注前30 min时50 mg/kg剂量灌胃,连续给药4周。使用HE染色法对大鼠肠组织进行观察分析。采用Western blot法检测C-Kit蛋白,采用RT-PCR检测C-Kit mRNA表达;使用散射比浊法检测血清中炎症因子、一氧化氮(NO)、内毒素水平。结果假手术组大鼠C-Kit蛋白、C-Kit mRNA表达高于肠缺血再灌注模型组、白芍总苷组(P<0.05);肠缺血再灌注模型组大鼠C-Kit蛋白、C-Kit mRNA表达低于假手术组、大黄素对照组、白芍总苷组(P<0.05);大黄素对照组C-Kit蛋白、C-Kit mRNA表达高于肠缺血再灌注模型组,低于假手术组、白芍总苷组(P<0.05);白芍总苷组C-Kit蛋白、C-Kit mRNA表达低于假手术组,高于肠缺血再灌注模型组(P<0.05)。假手术组大鼠NO、内毒素、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白介素-8(IL-8)、白介素-6(IL-6)水平低于肠缺血再灌注模型组、白芍总苷组(P<0.05);肠缺血再灌注模型组大鼠NO、内毒素、TNF-α、IL-8、IL-6水平高于假手术组、白芍总苷组(P<0.05);大黄素对照组NO、内毒素、TNF-α、IL-8、IL-6水平高于假手术组、白芍总苷组,低于肠缺血再灌注模型组(P<0.05);白芍总苷组大鼠NO、内毒素、TNF-α、IL-8、IL-6水平高于于假手术组,低于肠缺血再灌注模型组大鼠(P<0.05);肠缺血再灌注模型组大鼠Cajal间质细胞凋亡率(24、48、72 h)高于假手术组、白芍总苷组大鼠(P<0.05);大黄素对照组大鼠Cajal间质细胞凋亡率(24、48、72 h)高于假手术组、白芍总苷组,低于肠缺血再灌注模型组(P<0.05);假手术组Cajal间质细胞凋亡率(24、48、72 h)高于白芍总苷组大鼠(P<0.05)。结论白芍总苷能够改善肠缺血再灌注大鼠机体炎症情况,抑制Cajal间质细胞凋亡。

动力蛋白相关蛋白1抑制剂对肠黏膜上皮细胞缺血再灌注损伤的干预作用及其机制

目的探讨动力蛋白相关蛋白1(Drp1)抑制剂对肠黏膜上皮细胞缺血再灌注损伤的干预作用并分析其机制。方法将人大肠黏膜上皮细胞系Caco-2分为对照组、模型组、Drp1抑制剂组,对照组正常培养细胞,模型组、Drp1抑制剂组均采用缺氧12 h后复氧2 h的方法构建缺氧复氧模型,Drp1抑制剂组在H/R前给予Drp1抑制剂Mdivi-1干预。采用CCK-8法检测细胞活力,线粒体超氧化物指示剂检测线粒体活性氧(ROS)含量,JC-1法检测线粒体膜电位,流式细胞术检测细胞凋亡率,Western blotting法检测细胞Drp1、线粒体融合蛋白2(Mfn2)蛋白。结果细胞活力对照组>Drp1抑制剂组>模型组(P均<0.05);细胞内线粒体ROS含量模型组>Drp1抑制剂组>对照组,线粒体膜电位对照组>Drp1抑制剂组>模型组(P均<0.05);细胞凋亡率模型组>Drp1抑制剂组>对照组(P均<0.05);细胞Drp1蛋白表达模型组>Drp1抑制剂组>对照组,Mfn2蛋白表达对照组>Drp1抑制剂组>模型组(P均<0.05)。结论Drp1抑制剂可减轻肠黏膜上皮细胞缺血再灌注损伤,其机制可能与改善线粒体功能障碍、减少细胞凋亡有关。

Janus激酶/信号转导与转录激活因子信号通路在肠缺血再灌注损伤中的研究进展

缺血再灌注(I/R)是指组织因各种原因引起缺血,一段时间后恢复血供,引起组织细胞再次损伤的临床症状。肠道是I/R损伤发生的常见器官,其发生具有突然性及多样性,临床难以精准预测及有效预防,因此目前研究多集中于再灌注期的症状缓解及组织保护策略上。多种信号通路参与肠I/R损伤的过程,本研究综述Janus激酶/信号转导与转录激活因子(JAK-STAT)信号通路在肠I/R损伤过程中的作用,以期为肠I/R相关治疗提供思路。

小鼠肠缺血再灌注损伤模型的构建与应用

肠缺血再灌注损伤(IRI)是临床上常见的急危重症,发病率和死亡率均较高.目前对肠IRI的基础研究得到广泛关注,而成功地构建肠IRI动物模型是开展基础研究的基础,夹闭肠系膜上动脉的肠IRI动物模型应用最为广泛.本文详细阐述了夹闭肠系膜上动脉的小鼠肠IRI模型的构建过程及注意事项,将有助于提高小鼠肠IRI模型构建的成功率,从而助推肠IRI的动物体内研究.

线粒体DNA介导先天免疫反应在肠缺血再灌注损伤中的研究进展

肠缺血再灌注损伤是一种常见的组织器官损伤类型,具有高发生率及病死率的特点,其致病因素与机制复杂。研究表明,线粒体DNA(mitochondrial DNA,mtDNA)释放在肠缺血再灌注损伤中起关键作用,由于共同的进化起源,mtDNA具有与细菌DNA相似结构被认为是先天免疫系统激动剂。在外部环境或细胞自身刺激下,受损线粒体可释放mtDNA进入胞质或循环,激活先天免疫多个模式识别受体以触发促炎或Ⅰ型干扰素反应。本文重点讨论了mtDNA的跨膜释放机制以及mtDNA介导先天免疫信号通路在肠缺血再灌注发生、发展中的作用,为缺血再灌注疾病的相关研究提供理论依据。

大鼠脑缺血再灌注损伤后肠道不同节段内褪黑素受体的变化

目的:脑缺血再灌注损伤(CIRI)可通过脑-肠轴对胃肠道等远隔器官造成损害。已知褪黑素可通过激活特定的受体发挥神经保护作用。然而,脑组织缺血后胃肠道中褪黑素受体的变化及其与肠道损伤的关系仍不清楚。方法:将24只成年雄性SD大鼠随机分为假手术(Sham)组和CIRI组,CIRI组采用Zea-Longa线栓法制备脑缺血再灌注模型,缺血2 h,再灌注24 h后收集大鼠空肠、回肠及结肠组织。采用2,3,5-三苯四唑氯(TTC)染色和HE染色观察CIRI后脑组织和肠组织的损伤程度,免疫荧光染色观察肠道封闭蛋白1(ZO-1)和Claudin5的表达,实时荧光定量PCR(RT-qPCR)、免疫荧光染色和Western Blot检测褪黑素受体1(MT1)和褪黑素受体2(MT2)的表达变化。通过一般线性回归分析CIRI后褪黑素受体与肠道紧密连接蛋白的相关性。结果:TTC染色显示,CIRI组大鼠脑梗死面积明显高于Sham组;HE染色显示,CIRI组大鼠肠绒毛断裂、缩短,杯状细胞减少。免疫荧光染色结果显示CIRI组大鼠肠组织内ZO-1^(+)和Claudin5^(+)的表达明显低于Sham组(P<0.05);RT-qPCR显示,CIRI组MT1和MT2 mRNA的表达明显低于Sham组(P<0.05),其中,结肠组织的降低最为明显。免疫荧光染色和Western Blot结果也显示,与Sham组相比,CIRI组MT1和MT2蛋白的表达显著降低(P<0.05);一般线性回归分析显示,Sham组与CIRI组的MT1+和MT2+平均荧光强度的差值与两组间Claudin5+和ZO-1+平均荧光强度的差值均呈正相关。结论:CIRI后空肠、回肠和结肠内MT1和MT2的表达均降低,且结肠组织降低的最为显著,提示脑卒中的愈后不良可能与褪黑素受体的降低有一定相关性。

基于“肺肠同治”论诃子治疗肠缺血再灌注损伤

目的基于“肺肠同治”理论研究诃子对肠缺血再灌注损伤(IIRI)小鼠肠、肺损伤的治疗作用,并初步探讨诃子发挥此作用是否基于减轻IIRI小鼠全身性炎症反应。方法选取30只8周龄健康雄性C57BL/6J小鼠随机分为5组:假手术(Sham)组,模型(IIRI)组,IIRI+诃子低、中、高剂量组,每组6只小鼠。采取夹闭肠系膜上动脉45 min、再灌注90 min的方法建立IIRI模型。诃子给药各组灌胃不同剂量诃子,1次/d,连续7 d;Sham组开腹不造模,仅在同时间点灌胃生理盐水;IIRI组造模后灌胃生理盐水。HE染色法观察小鼠肠、肺组织病理形态变化,TUNEL染色法检测肠道细胞的凋亡情况,ELISA试剂盒检测血清中的TNF-α、IL-1β和IL-6水平。结果与Sham组相比,IIRI组小鼠肠道整体出现水肿、血瘀及黏连现象,肠横切面显示固有层结构破坏,肠黏膜绒毛顶端上皮下间隙明显增宽,绒毛顶端部分脱落,而经诃子给药治疗后整体肠道损伤程度得到显著改善;IIRI组小鼠Chiu s评分升高(P<0.01),而诃子给药组Chiu s评分显著降低(P<0.01);IIRI组小鼠肠道细胞凋亡数量明显增多,而诃子给药组小鼠肠道细胞凋亡数量减少;IIRI组小鼠肺组织切片HE结果出现明显的肺泡壁增厚和大量炎性细胞浸润肺泡间隙的情况,而诃子给药组的肺损伤情况得到明显改善。与Sham组相比,IIRI组小鼠肺损伤评分显著增高(P<0.01),而诃子给药后肺损伤评分降低,差异具有统计学意义(P<0.05,P<0.01);IIRI组小鼠肺湿/干质量比比值增高(P<0.05),而诃子给药组小鼠肺湿/干质量比比值降低(P<0.05),肺水肿程度得到显著改善;IIRI组小鼠血清中促炎因子TNF-α、IL-1β和IL-6水平显著升高(P<0.01),而诃子剂量依赖性地降低小鼠血清中TNF-α、IL-1β和IL-6水平,且差异具有统计学意义(P<0.01)。结论诃子可有效减轻小鼠IIRI,抑制肠道细胞凋亡,同时能减轻小鼠肠缺血再灌注后引起的肺部损伤,发挥肺肠同治作用,该作用与诃子降低血清中TNF-α、IL-1β和IL-6水平,减轻小鼠体内炎症反应有关。

虾青素对肠缺血再灌注的影响及其机制的探讨

缺血可造成可逆性或不可逆性的细胞或组织损伤,缺血后再灌注不仅没有治疗作用,还会加重细胞损伤。值得注意的是,在许多不利的健康状况下,肠道组织极易受到缺血再灌注损伤。肠缺血再灌注(Intestinal ischaemia-reperfusion I/R)是临床外科尤其是普外科常见的病理损伤过程。因此,有必要寻找更好的治疗方法来缓解肠道缺血缺氧状况。虾青素(Astaxanthin AST)是一种由微生物和各种海藻产生的类叶黄素类胡萝卜素,具有抗氧化、保护细胞膜结构、抗衰老的强大机制。AST对减轻II/R有重要作用,受到越来越多的研究者关注。本文综述了缺血-再灌注的发病机制以及通过AST治疗缺血再灌注损伤的研究现状。从临床应用的角度来看,AST的应用对治疗肠缺血再灌注具有重要意义。

大黄对大鼠肠缺血再灌注所致肺损伤过程肿瘤坏死因子、一氧化氮和磷脂酶A_2的影响

目的：观察肿瘤坏死因子（ＴＮＦ）、内源性一氧化氮（ＮＯ）和磷脂酶Ａ２（ＰＬＡ２）在大鼠小肠缺血再灌注（ＩＲ）所致肺损伤发病过程中的作用，及大黄对ＴＮＦ、ＮＯ和ＰＬＡ２的影响，探讨大黄防治肠源性肺损伤的机制。方法：ＳＤ大鼠随机分为肠缺血再灌注组、假手术组、大黄治疗组和安慰剂组。以１２５Ｉ标记小牛血清白蛋白（ＢＳＡ）肺摄取指数作为评价肺损伤的指标，以髓过氧化物酶（ＭＰＯ）作为评价多形核白细胞（ＰＭＮ）在组织中聚集的指标，分别测定各组动物不同时间血浆、肺组织ＴＮＦ含量，血浆（血清）、肺及小肠组织内源性ＮＯ含量及ＰＬＡ２活性。结果：大黄可显著改善ＩＲ导致的低血压状态并明显抑制再灌注导致的肺ＭＰＯ活性升高（Ｐ＜０．０１）；抑制肠缺血和再灌注早期出现的血浆及肺组织ＴＮＦ水平升高（Ｐ＜０．０１）；抑制肠缺血期和再灌注期血清、肺及小肠组织ＰＬＡ２活性升高（Ｐ＜０．０５或Ｐ＜０．０１）及再灌注期的内源性ＮＯ释放（Ｐ＜０．０５或Ｐ＜０．０１）；降低肺毛细血管通透性（Ｐ＜０．０１）。结论：缺血再灌注早期应用大黄能明显防治大鼠ＩＲ所致的肺损伤，这种作用可能是通过抑制ＴＮＦ、内源性ＮＯ及ＰＬＡ２等介质的释放实现的。

犬肠缺血/再灌注时小肠对早期肠内营养耐受能力的实验研究

目的研究肠道低灌注状态下实施早期肠内营养(EEN)时小肠功能指标及耐受能力的变化。方法健康雄性杂种犬24只,夹闭肠系膜上动脉(SM A)1 h后恢复灌注造成肠缺血/再灌注(I/R)损伤,复流后4 h实施EEN,将瑞代营养液(4 m l.k-g 1.-h 1)经肠黏膜张力计管持续滴注3 h,如果动物出现肠道不能耐受症状(如呕吐、腹泻等)则停止,间隔6 h后再次实施EEN,直至动物肠道能够耐受为止。按随机数字表法将动物分成单纯EEN组、单纯I/R组、I/R后EEN组(I/R+EEN组),每组8只。检测小肠黏膜二氧化碳分压(P iCO2)、D木糖吸收量、小肠腔内压力判定小肠灌注和功能变化。结果肠I/R+EEN组肠道不能耐受发生率(87.5%)和严重程度均显著高于单纯EEN组(0)和单纯I/R组(12.5%)。实施EEN后,与单纯I/R组和单纯EEN组相比,I/R+EEN组小肠腔内压力及肠P iCO2均显著升高,而血浆D木糖吸收量显著降低(P均<0.01)。结论肠I/R能显著降低小肠对EEN的耐受能力,肠I/R后过早(<12 h)实施EEN能加重小肠I/R损伤,并进一步抑制小肠吸收和运动功能。

肠缺血／再灌注时卡巴胆碱对肠上皮细胞凋亡的影响

目的研究肠缺血／再灌注（I／R）时卡巴胆碱对肠上皮细胞凋亡的影响及可能机制。方法雄性Wistar大鼠，戊巴比妥钠腹腔麻醉，结扎肠管造成长约8cm肠袋，采用夹闭肠系膜上动脉（SMA）阻断血流45min后恢复血流的方法，制备肠I／R损伤模型。将动物按随机数字表法分为假手术组（n=40）、I／R模型组（n=40）和卡巴胆碱组（n=40）。卡巴胆碱组在阻断血流的同时向肠袋内注射卡巴胆碱（0．1mg／kg），I／R模型组给予等量生理盐水。分别在再灌注0、30、60、120和240min时，采用病理学方法按Chiu’s评分观察肠上皮细胞损伤；原位末端缺刻标记法（TUNEL）检测肠上皮细胞凋亡指数的变化；免疫组化法检测肠上皮细胞凋亡相关半胱氨酸天冬氨酸特异性蛋白酶（caspase-3）和Bcl-2蛋白表达的变化。结果与I／R模型组比较，卡巴胆碱组肠上皮细胞病理学变化较轻，凋亡指数明显降低，caspase-3阳性肠上皮细胞数明显减少，而Bcl-2阳性肠上皮细胞数明显增加（P均〈0．01）。结论卡巴胆碱能抑制I／R时肠上皮细胞caspase-3表达，增加Bcl-2表达，减少肠上皮细胞的凋亡。

缺血后处理对缺血-再灌注大鼠肠黏膜的抗损伤作用

目的探讨缺血后处理对缺血-再灌注大鼠肠黏膜的抗损伤作用。方法复制SD大鼠肠缺血-再灌注损伤模型。实验分为4组(n=8):假手术组(S)、缺血-再灌注组(I/R)、缺血预处理组(IPC)、缺血后处理组(I-post)。比较各组大鼠肠黏膜丙二醛(MDA)含量、超氧化物歧化酶(SOD)和髓过氧化物酶(MPO)的活性变化;末端脱氧核苷酸转移酶介导的dUTP缺口末端标记法(TUNEL)检测肠黏膜细胞凋亡发生率;Chius评分法观察肠黏膜的损伤情况。结果与I/R组相比,IPC组和I-post组大鼠肠黏膜MDA含量和MPO活性均显著降低,而SOD活性明显升高;再灌注后可见明显的肠黏膜细胞凋亡现象,I-post组和IPC组凋亡指数较I/R组显著下降,组织病理损伤亦明显减轻。I-post组和IPC组相比,各项指标无显著性差异。结论缺血后处理可通过抑制再灌注后氧自由基的过量产生,保护抗氧化系统,从而抑制肠黏膜细胞凋亡,减轻肠缺血-再灌注损伤。

卡巴胆碱对缺血-再灌注损伤时肠道局部炎症反应的影响

目的 :研究拟胆碱药卡巴胆碱对缺血再灌注肠道局部炎症反应的影响及意义。方法 :成年雄性Wistar大鼠 ,戊巴比妥钠腹腔麻醉 ,先制作 8cm长的空肠袋 ,后用动脉夹阻断肠系膜上动脉 (SMAO)血流 ,1 h后松夹恢复灌流 ,制成肠道缺血再灌注模型 ,将模型动物随机分为预防组、治疗组和对照组 ,预防组和治疗组分别在夹闭后 30 m in和复流后 30 m in向空肠袋内注射卡巴胆碱 (0 .1 m g/ kg,稀释到 1 m l生理盐水中 ) ,对照组仅注射生理盐水。各组分别于夹闭后 1 .0、2 .5和 6 .0 h分别处死动物 ,测定肠袋组织肿瘤坏死因子 α(TNFα)和髓过氧化物酶 (MPO)含量 ,并观察肠道组织病理形态学改变。结果 :预防组和治疗组肠组织中TNFα和 MPO含量显著低于对照组 (P均 <0 .0 5 ) ;肠道组织炎性损害明显减轻 ;治疗组与预防组之间上述变化差异不显著。结论 :卡巴胆碱能减轻缺血再灌注大鼠肠道局部炎症反应 ,机制可能与其对抗致炎因子的作用有关。