大肠腺瘤癌变过程中核因子-κB表达及其临床意义

目的 :探讨核因子 -κB (nuclearfactorkappabinding ,NF κB)在大肠腺瘤癌变过程中的表达及其临床意义。方法 :采用免疫组化SP法测定 9例大肠腺瘤癌变、16例大肠腺瘤及 8例正常大肠组织中NF κBp65的表达。 结果 :大肠腺瘤组织中NF κB p65的表达 ( 1 3 15± 0 0 14 ,1 2 76± 0 0 2 9)明显高于正常大肠组织( 0 63 2± 0 0 2 5 ,0 5 17± 0 0 70 ) ,P <0 0 5 ;大肠腺瘤癌变组织NF κBp65表达( 2 748± 0 0 72 ,2 697± 0 0 5 5 )强于大肠腺瘤 ,差异有统计学意义 ,P <0 0 5 ;而大肠腺瘤癌变 ( 2 748± 0 0 72 ,2 697±0 0 5 5 )与大肠癌 ( 2 816± 0 0 61,2 743±0 0 12 )组织中NF κBp65的表达差异无统计学意义 ,P =0 0 68.结论 :NF κB可以作为大肠腺瘤癌变的一个预测指标 。

维生素D受体在肠道肿瘤生长中与β-catenin通路之间的关系

目的探讨维生素D受体（VDR）对肠道肿瘤生长的影响以及与β-catenin信号通路之间的关系。方法体外培养的人类结肠癌SW480细胞株经维生素D处理4h，免疫沉淀法检测VDR和t3-catenin蛋白的交互作用，24h后用Westernblot检测细胞E．cadherin蛋白的表达。体内实验比较APCmin／＋VDR-／-与APCmin／＋小鼠，免疫组化法检测两型小鼠肠道肿瘤VDR、β-catenin和Brdu蛋白的表达，Westernblot检测肿瘤和肿瘤旁组织β-catenin蛋白的表达。结果维生素D处理SW480细胞后，VDR和β-catenin蛋白相互结合，随后E-cadherin蛋白表达增高（对照组灰度值145．57±4．21，实验组109．35±3．56，t=32．63，P〈0．05）。缺失VDR的APCmin／＋VDR-／-小鼠肠道肿瘤中β-catenin蛋白表达免疫组化（灰度值140．51±2．57）及Westemblot（灰度值166．47±2．36）检测均高于APCmin／＋肿瘤（分别为145．41±3．62、182．35±3．24，t=2．65，4．36，P〈0．05）。结论维生素D抑制肠道肿瘤增殖的作用可能通过VDR影响β-catenin信号通路来完成。

CDX2和Ki-67在结直肠肿瘤中的表达及意义

目的探讨CDX2与Ki-67在大肠腺癌、大肠腺瘤中的表达和意义及二者的关系。方法采用单克隆抗体免疫组化染色方法，检测CDX2和Ki-67在正常大肠组织及腺癌和腺瘤中的表达强度。结果（1）CDX2表达与腺瘤的增生程度呈负相关（0=-0．38，P=0．02），且与腺癌的分化程度、淋巴结转移、远处转移和Dukes分期均呈负相关（0=-0．49，rs=-0．37，0=-0．38，0=-0．37，P=0．01），而Ki-67则相反；（2）腺瘤与腺癌间CDX2和Ki-67的表达强度差异均有统计学意义（P=0．00，P=0．047），且CDX2与Ki-67的表达均呈负相关（rs=-0．69，P=0．00；0=-0．40，P=0．00）。结论CDX2的表达可作为判断大肠肿瘤恶性程度的评估指标；Ki-67的表达与大肠腺癌的恶性程度及临床分期有关；二者的表达呈负相关，二者的联合检测可较准确的判断大肠肿瘤的生物学行为。

PCNAmRNA和Survivin mRNA在不同大肠肿瘤性病变腺管开口组织中表达关系的研究

目的探讨腺瘤癌变过程中其表面腺管开口变化与PCNA、survivin mRNA在各型腺管开口中表达关系的研究。方法标本分别以腺管开口类型及病理组织学分为6组。采用RT—PCR法检测组织中PCNA mRNA及survivin mRNA的表达。结果PCNAmRNA在大肠黏膜腺管开口Ⅰ型、Ⅱ型、ⅢL型、Ⅳ型、Ⅴ1型、ⅤN型6组中阳性表达率分别为0％（0／13）、12．5％（1／8）、38．9％（7／18）、66．7％（12／18）、75．0％（3／4）、100．0％（9／9），survivin mRNA为0％（0／13）、12．5％（1／8）、22．2％（4／18）、44．4％（8／18）、50．0％（2／4）、77．8％（7／9）。PCNA mRNA阳性表达率在正常大肠黏膜、炎性息肉、管状腺瘤、绒毛状腺瘤、腺瘤伴不典型增生及癌6组中分别为0％（0／10）、16．7％（2／12）、35．3％（6／17）、63．6％（7／11）、75．0％（6／8）、91．7％（11／12），survivin mRNA为0％（0／10）、8．3％（1／12）、23．5％（4／17）、45．5％（5／11）、50．0％（4／8）、和66．7％（8／12），均呈逐渐升高趋势。结论PCNA mRNA及survivin mRNA在腺管开口类型分组其表达强度变化，能较客观反映肿瘤细胞的增殖活性及凋亡状态，并且与病理类型分组得出相同的结果，能即刻将形态学与分子生物学联系起来。

紫草素对大肠癌SW480细胞增殖的影响

目的研究紫草素对大肠癌SW480细胞增殖和表达增殖诱导配体（APRIL）水平的影响，同时与传统化疗药氟尿嘧啶、顺铂进行对比。方法MTT法检测紫草素对大肠癌SW480细胞的增殖抑制作用，采用免疫组化法和实时荧光定量PCR法检测SW480细胞上APRIL的表达，实时荧光定量PCR法检测加入不同终浓度的紫草素、氟尿嘧啶和顺铂后24h，48h和72h SW480细胞表达APRIL mRNA的水平。结果紫草素对SW480细胞有明显的增殖抑制作用，呈时间和剂量依赖性。SW480细胞上有A—PRIL的表达；紫草素与氟尿嘧啶相似，以不同浓度作用SW480细胞后，细胞APRIL mRNA的水平均逐渐升高，至72h表达最高并与空白对照相比，差异有统计学意义（P〈0．05），而顺铂不会引起SW480细胞APRIL mRNA水平的升高甚至有所降低。结论紫草素有抑制大肠癌增殖的作用，有望作为化疗的辅助用药之一；同时，它与氟尿嘧啶或顺铂合用时，在用药同时辅予抗APRIL治疗以对抗残存癌细胞增殖能力升高可能具有潜在的重要作用。

shRNA沉默VEGF—C基因对大肠癌淋巴管生成和淋巴结转移的影响

目的 观察RNA干扰（RNA interference,RNAi）技术抑制大肠癌细胞株Lovo中VEGF-C基因的表达,探讨抑制shRNA-VEGF-C对人大肠癌细胞Lovo生物学特性的影响.方法 构建表达ShRNA-VEGF-C重组质粒转染Lovo细胞,72 h后用实时RT-PCR（real-time polymerase chain recation）检测VEGF-C mRNA表达;建立Lovo细胞皮下移植瘤裸鼠模型,注射shRNA-VEGF-C,动态观察肿瘤体积并于4周后处死裸鼠称取瘤重、计算局部淋巴结转移率,免疫组化法检测大肠癌组织微淋巴管密度（microlymphatic density,MLD）.结果 转染shRNA-VEGF-C后,Lovo细胞VEGF-C mRNA表达下调;体内实验结果显示,4周后shRNA-VEGF-C组移植瘤体积[（324.9±64.8）mm3]明显小于空质粒组[（553.5±90.1）mm3]和生理盐水对照组[（570.1±85.4）mm3]（P〈0.01）;shRNA-VEGF-C组瘤重[（3.01±0.55）g]也低于空质粒组[（4.65±0.65）g]和生理盐水对照组[（4.75±0.55）g]（P〈0.01）;shRNA-VEGF-C组微淋巴管密度LMVD（15.5±6.90）明显低于HK组（24.18±6.45）和生理盐水对照组（29.59±8.21）（P〈0.01）;shRNA-VEGF-C组局部淋巴结转移率（30.1%）明显低于空质粒组（50.2%）和生理盐水组（53.1%）.结论 shRNA-VEGF-C可影响VEGF-C诱导的淋巴管生成并抑制大肠癌淋巴结转移.

Survivin、Smad4/dpc4、APC基因在大肠腺瘤和腺癌中的表达及意义

目的 探讨Survivin、Smad4/dpo4、APC基因在大肠腺瘤、腺癌中的表达及意义.方法 采用免疫组化SP法检测40例正常大肠组织、80例腺瘤、80例腺癌中三种基因表达情况.结果 Survivin基因在正常大肠组织、腺瘤、腺癌中阳性表达率分别为0、35.0%、75.0%;Smad4基因为100%、95.0%、78.8%;APC为100%、80.0%、45.0%.结论 Survivin基因检测可以作为大肠癌早期诊断、观察疗效和监测肿瘤术后复发、转移等生物学行为的一个新指标.Smad4基因突变或缺失不仅诱导大肠癌的发生还促进其发展.检测APC基因突变,有助于对肿瘤病因学、发病机制及早期诊断的研究.

CD105和VEGF在大肠癌中的表达及意义

目的探讨CD105和VEGF与大肠发生、发展的关系及其临床意义。方法采用免疫组化SP法检测92例大肠癌组织中CD105和VEGF表达。结果 CD105和VEGF在无浆膜侵犯、无淋巴结转移组的阳性表达分别为38.09%、23.52%和42.86%、55.88%,在伴有浆膜侵犯、淋巴结转移组的阳性表达分别为78.00%、84.48%和76.00%、87.93%,CD105和VEGF的表达在两组间比较差异均有统计学意义(P<0.05)。结论 CD105和VEGF在大肠癌发生、发展过程中发挥重要作用,联合检测上述基因蛋白对预测大肠癌生物学行为及预后有重要意义。

大肠癌肝转移病人血清白细胞介素-4、6水平变化及其意义

目的探讨大肠癌肝转移病人血清白细胞介素-4、6水平变化及其意义。方法对45例大肠癌患者进行血清中IL-4，IL-6水平含量测定。结果大肠癌肝转移组和大肠癌无肝转移组血清中IL-4，IL-6水平高于正常对照组（P〈0．05），大肠癌肝转移组血清中IL-d，IL-6水平明显高于大肠癌无肝转移组（P〈0．01）。结论联合检测血清中IL-4，IL-6水平变化可对大肠癌肝转移早期诊断可能有筛选作用。