鹿仲健骨汤治疗股骨头坏死模型大鼠:肠道菌群及血清激素变化

背景:股骨头坏死是一种常见的致残性疾病,主要表现为微循环障碍、骨细胞代谢紊乱。鹿仲健骨汤由山东省中医药研究院研制而成,在临床以汤剂形式使用,对股骨头坏死具有良好疗效,然而其作用机制尚未明确。目的:基于16S rDNA技术研究鹿仲健骨汤对股骨头坏死模型大鼠肠道菌群的影响,探究其治疗股骨头坏死的作用机制。方法:采用维甲酸灌胃的方式建立Wistar大鼠股骨头坏死模型,通过股骨头部位骨形态计量学、骨组织病理学和血清激素水平评价鹿仲健骨汤的治疗作用,采用16S rDNA测序技术对空白对照组、模型组及鹿仲健骨汤中剂量组大鼠肠道菌群进行分析,构建相应文库并进行OTU聚类以及微生物群落多样性、丰度等分析,明确肠道菌群的组成及各组间的菌群种类、多样性变化。结果与结论:(1)鹿仲健骨汤可以显著提高骨钙素、骨桥蛋白等成骨相关因子的表达,缓解骨小梁的破坏,增加骨密度,对股骨头坏死具有显著的治疗作用,鹿仲健骨汤中剂量组效果最为显著;(2)肠道菌群测序结果显示,鹿仲健骨汤在一定程度上改善了股骨头坏死大鼠菌群紊乱,共筛选出杆菌门、脱硫弧菌门、脱硫孤菌属、异杆菌属、双歧杆菌属等差异菌落;能上调双歧杆菌等有益菌丰度,下调脱硫弧菌等有害菌丰度,改善肠道菌群结构;(3)通过功能预测分析发现鹿仲健骨汤治疗股骨头坏死可能主要影响氨基酸代谢、能量代谢等;(4)相关性分析显示,鹿仲健骨汤中剂量组的差异菌双歧杆菌属(Bifidobacterium)、肠单胞球菌(Intestinimonas)与维生素D3、雌二醇、降钙素呈正相关,与前列腺素E2呈负相关;模型组的差异菌大肠杆菌-志贺氏菌(Escherichia-Shigella)、脱硫孤菌属(Desulfovibrio)、格鲁比卡氏菌属(Globicatella)、链球菌属(Streptococcus)与前列腺素E2呈正相关,与维生素D3、雌二醇、降钙素呈负相关。结果表明:鹿仲健骨汤可能通过调节肠道菌群结构,上调有益菌丰度,影响维生素D3、雌二醇、降钙素及前列腺素E2激素分泌,起到治疗股骨头坏死的作用。

肠道菌群变化对大鼠激素性股骨头坏死造模效果的影响

目的探究激素性股骨头坏死(GA-ONFH)模型大鼠的肠道菌群变化及其对造模效果的影响。方法40只雄性SD大鼠随机分为空白对照组、抗生素组(ABX组)、激素性股骨头坏死模型组(GA-ONFH模型组)、抗生素+激素性股骨头坏死模型组(ABX+GA-ONFH组),每组10只。ABX组和ABX+GA-ONFH组持续给予抗生素溶液洗脱肠道微生物1周。1周后GA-ONFH模型组和ABX+GA-ONFH组给予脂多糖(LPS)+地塞米松腹腔注射建立早期GA-ONFH模型,空白对照组和ABX组腹腔注射等量生理盐水,连续注射6周。收集大鼠粪便和股骨头样本,基于16S rDNA扩增子测序分析大鼠肠道菌群的构成及丰度,使用micro-CT和HE染色观察早期GA-ONFH造模效果,评估肠道菌群对GA-ONFH造模效果的影响。结果与空白对照组比较,GA-ONFH模型组大鼠肠道菌群丰度发生改变,其中拟杆菌门丰度明显下调,而厚壁菌门丰度明显上调,差异有统计学意义(P<0.05);在科水平上,普雷沃菌科、梭状芽胞杆菌科、消化球菌科、理研菌科和克里斯滕森菌科的丰度明显下调,而葡萄球菌科的丰度明显上调,差异有统计学意义(P<0.05);在属水平上,另枝菌属、UCG-005、梭状芽胞杆菌属、拟普雷沃菌属和普雷沃菌属的丰度明显下调,而葡萄球菌属和Frisingicoccus的丰度明显上调,差异有统计学意义(P<0.05)。Micro-CT断层扫描显示,GA-ONFH模型组和ABX+GAONFH组均出现软骨下骨小梁硬化;HE染色显示,ABX+GA-ONFH组较GA-ONFH模型组更早出现骨小梁断裂,表明抗生素洗脱肠道微生物后,大鼠GA-ONFH造模效果更加显著。结论GA-ONFH模型大鼠的肠道菌群发生了明显变化,且该变化可能影响早期GA-ONFH的发生。

活血通络胶囊对激素性股骨头坏死大鼠肠道菌群影响的研究

背景激素性股骨头坏死(SONFH)是一种常见且致残性高的疾病,活血通络胶囊已被多次证明在防治股骨头坏死上疗效显著,但是治疗是否通过调节肠道菌群目前少见研究。目的建立SONFH大鼠模型并采用活血通络胶囊进行干预,分析比较各组大鼠肠道菌群的多样性,筛选出SONFH特异性改变的菌属并观察活血通络胶囊对肠道菌群的作用。方法2022年4—10月选取雄性SD大鼠24只,采用随机数字表法分为空白组(n=8)、模型组(n=8)、活血通络组(n=8),建造SONFH模型,活血通络组造模第3~28天给予0.63 g·kg^(-1)·d^(-1)活血通络胶囊灌胃,空白组和模型组给予等体积0.9%氯化钠溶液灌胃。药物干预结束后收集大鼠股骨进行HE染色、Micro-CT分析。收集大鼠粪便进行16S rDNA测序。采用α多样性和β多样性分析评估物种组间和组内群落的多样性及差异性,采用线性判别分析(LEfSe)比较三组大鼠肠道菌群差异。采用COG功能预测三组大鼠肠道菌群功能。结果模型组空骨陷窝率高于空白组、活血通络组(P<0.05)。模型组骨体积分数(BV/TV)、骨小梁数量(Tb.N)、骨小梁厚度(Tb.Th)低于空白组,骨小梁分离度(Tb.Sp)高于空白组(P<0.05);活血通络组BV/TV、Tb.N、Tb.Th高于模型组,Tb.Sp低于模型组(P<0.05)。三组大鼠肠道菌群结构存在差异,与空白组相比,模型组肠道菌群ASV数目增加;与模型组比较,活血通络组肠道菌群ASV数目减少。模型组Shannon指数高于空白组(P<0.05)。β多样性分析主坐标分析(PCoA)图显示,三组样本存在部分重叠,但是能区分三组的群落结构。相似性分析结果显示,组间差异大于组内,差异有统计学意义(R=2062,P=0.01)。LEfSe分析结果显示,与空白组比较,模型组脱硫弧菌(Desulfovibrio)、Hafnia-Obesumbacterium、明串珠菌属(Leuconostoc)、葡萄球菌属(Staphylococcus)丰度升高,拟杆菌属(Bacteroides)、普雷沃氏菌属_UCG-001丰度降低(P<0.05);与模型组比较,活血通络组草酸杆菌属(Oxalobacteraceae)、扭链胃球菌属(Ruminococcus_torques_group)丰度升高,理研菌属(Rekenella)、Kineothrix菌属丰度降低(P<0.05)。三组大鼠COG功能预测结果显示,与空白组比较,模型组菌群COG功能主要集中于碳水化合物运输与代谢、无机离子转运和代谢、氨基酸转运和代谢、脂质转运和代谢、细胞壁/膜/包膜生物发生;与模型组比较,活血通络组功能集中于无机离子转运和代谢、碳水化合物运输与代谢,且复制、重组和修复、转录、细胞周期控制、细胞分裂和染色体分裂、细胞运动功能水平升高。结论SONFH大鼠菌群多样性较正常大鼠增加,增加的菌属主要是致病菌属,而相应有益菌属则出现减少。活血通络胶囊可能通过改变肠道菌群的丰度和多样性以及调控Oxalobacteraceae、Ruminococcus_torques_group等菌属丰度而实现治疗SONFH的目的。

活骨冲剂治疗股骨头无菌性坏死的实验研究

本研究是在活骨冲剂治疗股骨头无菌性坏死临床观察基础上进行其药效学及急性毒性试验。结果表明：（１）本品有明确的抗炎镇痛作用，并有促进血清Ｃａ、Ｐ吸收及促进鸡胚股骨生长等补肾壮骨作用。（２）急性毒性试验过程中未测出ＬＤ５０；又进行最大耐量测定，２４ｈ内总给药量为５０ｇ／ｋｇ（相当于成人１次临床用药量的１６６．７倍），亦未测出ＬＤ５０。

经动脉介入治疗股骨头无菌性坏死

为探讨经动脉介入治疗股骨头无菌性坏死的疗效,对15例患者采用Seldinger技术,经对侧股动脉插管和导丝引导,在患侧旋股内、外动脉中灌注溶栓剂、血管扩张剂及骨质生长剂等,其中6例治疗1次,8例治疗2次,1例治疗3次,以治疗后血管计数及疼痛改善程度作为近期观察指标,治疗后血管计数增多10例,疼痛改善11例,有所改善2例;3例术后2月摄x线早片显示有不同程度骨质修复,认为经动脉介入治疗股骨头无菌性坏死,可增加股骨头血供及减轻患者的临床症状,是—种安全有效的治疗方法,但尚需作更长时间随访。

股骨头无菌坏死MRI特征及与平片的对比研究

目的 评价MRI对股骨头无菌坏死的诊断价值。方法 5 3位患者的 84个患病髋关节在拍摄X线平片一周内进行MRI检查。结果 0～Ⅰ期病变共计 2 5个髋关节 ,在MRI的分类中A类 17个 ,C类 8个 ;Ⅱ期病变共计35个 ,其中A类 17个 ,C类 17个 ;Ⅲ～Ⅳ期病变共计 2 4个 ,C类 12个 ,D类 7个。共计 2 2个髋关节出现“双线征” ,其中 0～Ⅰ期 13个 ,Ⅱ期 9个 ,Ⅲ～Ⅳ期未见此征象出现 ;2例病变在常规序列上未见异常 ,而STIR序列表现为小片状高信号影。结论 MRI与其他方法相比能够更早发现病变 ,STIR序列对与发现早期病变 (0～Ⅰ期 )有更高的敏感性。

成人股骨头无菌型坏死塌陷的MRI测量

目的通过对股骨头坏死范围指数的MRI测量,旨在探讨MRI预测股骨头坏死塌陷的价值。方法我们选择43例股骨头坏死病例(57个股骨头),初诊均为ARCO分期的Ⅰ、Ⅱ期。所有病例做冠状定位,SE序列横断位、冠状位、矢状位T1加权,FSE序列横断位及冠状位T2加权,IR序列矢状位扫描。在MRI的中部冠状位和矢状位图像上分别测量坏死角度,根据公式计算坏死范围指数。坏死范围指数分级:A级(指数小于33);B级(33~66);C级(大于66)。随访时间3~46个月。结果经过随访,57个股骨头坏死中有41个发生了塌陷。原Ⅰ期的25个股骨头坏死,有16个股骨头发生了塌陷,5个进展为Ⅱ期,仅有4个停留在Ⅰ期。原Ⅱ期32个股骨头坏死,有25个发生了塌陷,其他7个停留在Ⅱ期。随访后,原Ⅰ期的股骨头坏死进展率为84%。原Ⅱ期的股骨头坏死进展率为78%。坏死范围指数的分组:低危险组(指数小于30)塌陷的危险率为0,无1例塌陷;中等危险组(指数30~42)塌陷的危险率为50%;高危险组(指数大于42)塌陷的危险率为100%。结论MRI测量的坏死范围指数是预测股骨头坏死塌陷的简易可靠的方法。

股骨头无菌性坏死三期辨证论治的临床研究

股骨头无菌性坏死三期辨证论治的临床研究中国中医研究院骨伤科研究所（１００７００）郭效东，陈卫衡，赵永刚，丛英杰本文对１００例股骨头无菌性坏死病人进行三期辨证论治，分析如下。临床资料１．一般资料：本组共１００例，男４２例，女５８例；最小年龄２．５岁，最...

成人股骨头无菌性坏死的分期

成人股骨头无菌性坏死的分期广州中医药大学第一附属医院（５１０４０５）袁浩樊粤光何伟蔡振基张德兴何振辉晋大祥刘少军张庆文桂志红７０年代Ｆｉｃａｔ提出了成人股骨头坏死的四期分型法，由于此分法简单、明了、易记，故很快被全世界学者所接受并沿用至今。国际骨循环...

带旋髂深血管蒂髂骨植骨治疗成人股骨头无菌性坏死

成人股骨头无菌性坏死的治疗至今仍是个难题，尤其是中青年。近年来许多学者设计了多种重建股骨头血运的方法，如带肌蒂骨移植，带血管蒂骨移植及血管束植入等，使其病变逆转或使病变静止或延缓其进展，从而保存股骨头。我院从１９８７年６月～１９９７年５月，采用同侧带...

早期股骨头无菌性坏死CT、MRI诊断的实验研究

目的 :研究早期股骨头无菌性坏死 (ANFH)的CT、MRI诊断价值。材料和方法 :健康成年中国白兔 3 0只 ,随机分成两组。实验组 2 4只 ,每周两次肌注地塞米松磷酸钠 7.5mg·kg-1诱发股骨头坏死模型。在第 3、6、9周采用中场MR及螺旋CT扫描行影像学分期。参照分期处死动物对股骨头标本行病理检查 ,评价影像诊断的准确性。结果 :送检的 0、Ⅰ、Ⅱ期各 12髋股骨头病理证实均存在早期骨坏死表现。中场MRI(T1WI)表现为不同程度局限性低信号改变。相应螺旋CT扫描依次为阴性 ,可疑 ,明确骨质疏松或硬化表现。结论 :中场MR结合螺旋CT扫描既可发现早期病变 ,又可进行分期 ,是研究早期ANFH的可靠手段。

姜宏治疗股骨头无菌性坏死经验总结

股骨头无菌性坏死是骨科常见疾病之一,多见于髋部外伤、长期大量使用皮质类固醇、酗酒、潜水员减压病、系统性红斑狼疮、血红蛋白病等患者,早中期股骨头无菌性坏死进一步发展将导致关节间隙丢失、继发性骨关节炎、塌陷等,引起患髋疼痛强直,一旦发生塌陷,预后较差,治疗也很棘手,

动脉药物灌注治疗股骨头骨骺无菌性坏死及治疗前后动脉造影压力测定比较分析(附19例报告)

目的 :对股骨头骨骺无菌性坏死行髂外动脉溶纤、扩管药物灌注治疗 ,通过血管造影和局部动脉压力监测来评价该治疗对股骨头及关节供血改善程度。资料和方法 :治疗患儿 19例 ,术中应用 4～ 5Fcobra导管分别置于左右髂总动脉、髂内和髂外动脉 ,通过HP 12 90C型多参数监护仪进行动脉压力测量 ,随后行患侧髂外动脉造影同时向髂外动脉灌注尿激酶、低分子右旋糖酐和皮质激素 ,治疗结束后重复监测以上动脉压力变化并再次血管造影 ,同治疗前作比较。结果 :16例 (84% )患儿在治疗后患侧髂总、髂外动脉压力较治疗前升高 3～ 16mmHg ,平均升高 6 .5mmHg。 15例 (78% )治疗后髂外动脉造影显示旋股内、外动脉血管轮廓不同程度增粗并分支数目增加。结论 :通过影像学和血液动力学观察 ,髂外动脉灌注溶纤、扩管药物能有效增加股骨头和关节的供血。

空心钉减压联合介入治疗在早期股骨头无菌性坏死的临床应用

目的回顾性分析空心钉减压联合介入治疗对早期股骨头无菌性坏死(osteonecrosis of the femoral head,ONFH)(塌陷前期)的近期临床疗效。方法从2012年1月至2015年10月,我科共27例(46髋)诊断为ONFH(FicatⅠ、Ⅱ期)的患者接受股骨头空心钉减压联合介入治疗。患者男17例,女10例;年龄27~50岁,平均36.56岁。22例为酒精性ONFH,5例为激素性ONFH。其中19例为双侧ONFH,8例为单侧ONFH。术前术后均采用Harris评分系统进行患髋评分。术后予以对症治疗,定期随访、拍片复查。结果本组24例(43髋)获得随访,随访时间3~28个月,平均19.5个月。酒精性和激素性ONFH患者Harris评分分别由术前73.32分和69.60分提高到末次随访时的82.63分和83.40分。酒精性和激素性ONFH患者之间术前及术后Harris评分无明显差别。X线检查显示:2枚空心钉位置良好;数字减影血管造影机(digital subtraction angioyraphy,DSA)造影显示介入治疗后股骨头的血运明显改善。到末次随访时,无一例接受全髋关节置换治疗。结论近期临床结果显示空心钉减压联合介入治疗是一种治疗早期ONFH简单、可行、有效的方法,但中远期临床效果尚待进一步观察。

股骨头表面置换术治疗年轻股骨头无菌性坏死

目的 探讨股骨头表面置换术治疗年轻股骨头无菌性坏死的方法和疗效影响因素。方法 对FicatⅢ期、早Ⅳ期股骨头缺血性坏死的 9例 1 2个髋关节施行了股骨头表面置换术 ,并进行随访。结果 无一例伤口感染、脱位和神经、血管损伤等手术并发症。随访 9～ 38个月 ,显示全部患者的髋关节功能Harris评分平均从术前的 39分 (2 8～ 62分 )改善至术后的 91分 (85～ 96分 )。结论 股骨头表面置换术作为年轻股骨头缺血性坏死患者的过渡性治疗 ,能有效延缓全髋置换术的手术时间 。

带旋髂深血管髂骨瓣治疗股骨头无菌性坏死

目的 观察带旋髂深血管的髂骨瓣治疗股骨头无菌性坏死的临床效果。方法 1992～ 2 0 0 2年共收治股骨头无菌性坏死患者 2 2 1例 2 4 3髋 ,其中创伤性 5 6例 ,酒精性 4 8例 5 4髋 ,激素性 6 8例 76髋 ,原因不明 4 9例 5 7髋。Ficat分期 :Ⅰ期 6 5髋 ,Ⅱ期 92髋 ,Ⅲ期 75髋 ,Ⅳ期 11髋。全部采用股骨头减压 ,死骨清除 ,带髂深血管的髂骨瓣移植手术。结果 经 2～ 11年 (平均 5 .8年 )随访 ,患者疼痛症状明显缓解 ,有效率98%。Ⅰ～Ⅱ期 15 7髋 ,X线检查患者股骨头外形好 ,关节活动度满意 ;Ⅲ～Ⅳ期患者 ,一部分股骨头外形好 ,关节间隙清晰 ,髋臼没有创伤性改变 ,另一部分股骨头可见进一步塌陷 ,关节活动受限。Harris评分 ,总体优良率 83.6 %。结论 带旋髂深血管的髂骨瓣治疗股骨头无菌性坏死 ,对缓解疼痛有明显的效果 ,在疾病早期可减缓甚至阻止病变的进一步发展。