活血颗粒对肢体缺血灌注再损伤的临床研究

目的:观察活血颗粒对肢体缺血灌注再损伤前后微循环的影响。方法:58例肢体缺血灌注再损伤患者,随机分成治疗组与对照组各29例。对照组采用常规方法加肝素、罂栗碱治疗;治疗组29例在对照组治疗基础上加口服活血颗粒,观测两组微循环及全身相应生化指标的变化。结果:治疗组微循环障碍轻,皮肤等软组织损伤轻,功能恢复满意,与对照组比较,有显著性差异(P<0.05)。结论:活血颗粒通过活血通络行气通经,对肢体缺血灌注再损伤有保护作用。

桃红四物汤通过LncRNA H19对肢体缺血-再灌注损伤中细胞凋亡的影响研究

目的:研究桃红四物汤通过LncRNA H19对肢体缺血-再灌注损伤中细胞凋亡的影响,探讨治疗肢体缺血再灌注损伤的新思路。方法:将78只2月龄雄性SD大鼠随机分为对照组、模型组、H19阻断剂组、桃红四物汤组;对照组正常饲养,剩余各组均造成肢体缺血-再灌注损伤模型;在造模前,H19阻断剂组予以H19阻断剂,通过尾静脉注射进行干预;在造模前,桃红四物汤组予以桃红四物汤进行灌胃处理,余下各组使用相同体积的蒸馏水灌胃处理;所有动物在再灌注损伤后的0、2、4、8 h 4个不同时间点,取大鼠骨骼肌肌肉组织,RT-PCR法检测骨骼肌中H19的mRNA的表达,HE染色法和电镜技术观察骨骼肌形态及病理性改变,DAPI法观察骨骼肌细胞凋亡情况。结果:在相同的时间点与对照组相比,模型组、H19阻断剂组、桃红四物汤组的H19 mRNA水平均升高,差异有统计学意义(P<0.05);在相同的时间与模型组相比,H19阻断剂组、桃红四物汤组的H19 mRNA水平均降低,差异有统计学意义(P<0.05);与对照组相比,模型组、H19阻断剂组和桃红四物汤组骨骼肌细胞凋亡率明显高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);与模型组相比,H19阻断剂组和桃红四物汤组骨骼肌细胞凋亡率明显低于模型组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:LncRNA H19是肢体缺血再灌注损伤中的重要分子,抑制LncRNA H19的表达可以降低骨骼肌细胞的凋亡率,从而治疗肢体缺血再灌注损伤。

桃红四物汤治疗肢体缺血再灌注损伤的作用机制探讨

目的:利用网络药理学与分子对接技术探讨桃红四物汤治疗肢体缺血再灌注损伤的作用机制,为临床治疗肢体缺血再灌注损伤提供一定的理论依据。方法:利用中药系统药理数据库和分析平台(TCMSP)得到桃红四物汤有效成分及其靶点信息,用Cytoscape3.8.2软件构建成分-靶点网络;通过GeneCards、OMIM数据库收集疾病相关靶点;运用STRING平台进行蛋白质相互作用分析,得到PPI网络,然后进行拓扑分析得到核心靶点;通过Metascape数据库进行GO和KEG通路富集分析,最后将主要有效成分与核心靶点进行分子对接。结果:共得到桃红四物汤的有效成分为69个,主要活性成分为槲皮素、木犀草素、山柰酚等,靶点基因240个,肢体缺血再灌注损伤靶点基因有1211个,交集基因133个;PPI网络分析得到ALB、TNF、AKT1、IL6、IL1B、VEGFA、TP53、PTGS2、GASP3、MMP9、EGF是桃红四物汤治疗肢体缺血再灌注损伤的核心靶点;GO分析包含生物过程(Biological Process,BP)1788个,包括对无机物的反应、对细胞运动的正向调节等;细胞组分(Cellular Components,CC)100个,包括膜筏、转录复合物等;分子功能(Molecular Functions,MF)152个,包括蛋白激酶激活、DNA结合转录因子等;KEEG通路分析得到202条信号通路,主要涉及到AGE-RAGE、TNF、IL-17等信号通路等;分子对接结果显示主要有效成分能与核心靶点结合,且具有较强的结合力。结论:桃红四物汤通过多种成分、多种靶点、多种通路作用于肢体缺血-再灌注损伤,为进一步研究桃红四物汤治疗肢体缺血再灌注损伤的机制,提供一定的理论依据。

基于“毒、瘀”病机对桃红四物汤防治肢体缺血-再灌注损伤理论探讨

以“毒、瘀”病机为角度,探讨“毒、瘀”病机与肢体缺血-再灌注损伤复杂的发病机制的关联性及桃红四物汤对肢体缺血-再灌注损伤的重要防护作用,认为“毒、瘀”是引起肢体缺血-再灌注损伤的重要发病因素;桃红四物汤通过化瘀生新,活血减毒在防治肢体缺血-再灌注损伤中发挥保护作用;为肢体缺血-再灌注损伤的中医辨证论治提供新思路。

缺血预处理和丹参对肢体缺血再灌注损伤影响的临床观察

目的 :临床观察缺血预处理和丹参对肢体缺血再灌注损伤的作用。方法 :选择 36例四肢手术需充气止血带加压肢体止血的患者 ,随机分为缺血组、缺血预处理组、丹参组和缺血预处理 +丹参组。缺血预处理措施为阻断术肢血流 5min ,然后松止血带 ,恢复血流灌注 5min ,反复 4次。丹参的用法为患者术前 10min静脉滴注复方丹参液 ( 4 0 0ml/kg)。肢体缺血前、再灌注 0 5h、1 5h、3h、2 4h和 72h分别检测血浆丙二醛 (MDA)、肌酸磷酸激酶(CPK)、AST和LDH的含量以及超氧化物歧化酶 (SOD)活性。结果 :肢体缺血再灌注后各时相点与缺血前比较 ,血浆MDA、CPK、AST和LDH含量升高 ,SOD活性降低。缺血预处理组、丹参组和缺血预处理 +丹参组再灌注后同时相点血浆MDA、CPK、AST和LDH含量明显低于缺血组 ,SOD活性明显高于缺血组。与缺血预处理 +丹参组相比 ,再灌注后 3h、2 4h和 72h ,缺血预处理组和丹参组的血浆MDA、CPK、AST和LDH含量明显升高 ,SOD活性降低。结论 :缺血预处理和丹参对肢体缺血再灌注损伤均具有保护作用 ,联合应用时 。

肝素钠对肢体缺血/再灌注损伤大鼠肠系膜微循环的保护作用

目的:通过观察肝素钠对肢体缺血/再灌注(LI/R)过程中肠系膜微循环的动态变化和血液流变性的影响,探讨肝素减轻LI/R损伤的可能机制,为LI/R损伤的防治提供理论依据。方法:实验采用本室常规方法复制大鼠LI/R模型,正常雄性Wistar大鼠20只,随机分为2组(n=10):肝素组(H组)和单纯缺血/再灌注组(I/R组),两组动物均于再灌注损伤后2h时动态观察肠系膜微血管管径、血流速度、白细胞黏附、白微栓及微血管壁的完整性(管周出血)等情况,同时测定各组动物血液流变学指标和血清中P-选择素和细胞间粘附分子1(ICAM-1)的值。结果:肠系膜微动、静脉管径扩张,血流速度减慢,微血管中大量白细胞贴壁、粘附,白微栓形成增多,与I/R组比较,H组大鼠肠系膜微动脉血流速度(AFV)和微静脉血流速度(VFV)显著下降(P<0.01);血浆黏度(ηp)、全血低切还原黏度(Lηre)、全血高切还原黏度(Hηre)、红细胞压积(Hct)、红细胞聚集指数(EAI)、血沉方程K值(ESRK)、红细胞刚性指数(TK)均显著下降(P<0.01);红细胞变形指数(EDI)显著升高(P<0.01);血清中P-选择素、ICAM-1水平均显著下降(P<0.01)。结论:肝素可能通过降低血清中P-选择素和ICAM-1的水平而改善肢体缺血/再灌注损伤大鼠的全身微循环状态。

桃红四物汤对肢体缺血-再灌注损伤大鼠骨骼肌三磷酸肌醇受体表达的影响

目的观察桃红四物汤对肢体缺血-再灌注损伤大鼠骨骼肌三磷酸肌醇受体(IP3R)表达的影响,从Wnt/Ca2+信号通路角度探讨其作用机制。方法取2月龄雄性SD大鼠80只,随机分为正常组、模型组、桃红四物汤组和阻滞剂组,每组20只,除正常组外,其余各组均阻断血流制备大鼠右后肢缺血-再灌注损伤模型,桃红四物汤组、阻滞剂组造模前分别给予桃红四物汤灌胃、阻滞剂腹腔注射预处理,HE染色和DAPI荧光染色观察再灌后8 h腓肠肌细胞凋亡,免疫组化检测再灌后8 h腓肠肌IP3R蛋白的表达,RT-PCR检测再灌后0、2、4、8 h腓肠肌IP3R mRNA的表达。结果HE染色和DAPI荧光染色结果显示,与正常组比较,模型组大鼠腓肠肌细胞凋亡率明显升高(P<0.05);与模型组比较,桃红四物汤组和阻滞剂组大鼠腓肠肌细胞凋亡率明显降低(P<0.05),桃红四物汤组低于阻滞剂组(P<0.05)。免疫组化及RT-PCR检测结果显示,与正常组比较,模型组大鼠腓肠肌IP3R蛋白和m RNA表达明显上调(P<0.05);与模型组比较,桃红四物汤组、阻滞剂组大鼠腓肠肌IP3R蛋白和m RNA表达明显下调(P<0.05)。结论桃红四物汤通过下调Wnt5a/Ca2+信号通路IP3R的表达减轻肢体缺血-再灌注损伤。

复方丹参液治疗肢体缺血再灌注损伤的实验研究

用家兔造成肢体缺血再灌注损伤的动物模型,并用复方丹参液治疗。结果表明,用药后血中丙二醛(MDA)、肌酸磷酸激酶(CPK)、谷草转氨酶(GOT)值较对照组明显下降(P<0.05),电镜下见骨骼肌细胞损害也轻于对照组。说明丹参可抑制氧自由基的产生并减轻骨骼肌细胞的损害,对肢体缺血再灌注损伤有治疗作用。

刺五加注射液对肢体缺血再灌注损伤的影响

为探讨刺五加注射液对肢体缺血再灌注损伤的影响。将 2 1只新西兰白兔随机分为假手术组 (A组 )、空白对照组 (B组 )、实验组 (C组 ) ,除A组外结扎左髂总动脉建立左后肢缺血模型 ,并于缺血 2 .5小时末让其再灌注。分别于缺血前、缺血 2 .5小时、再灌注 1小时末 (A组于对应时间 )静脉穿刺抽血 ,检测血清CK、LDH、SOD、MDA的变化 ,各时间段切取左小腿腓肠肌固定后作H E染色光镜观察和透射电镜观察。结果显示刺五加注射液能使肢体缺血再灌注的家兔血清CK、LDH、MDA值较空白对照组明显降低、SOD值较空白对照组明显升高 ,能使缺血再灌注的兔左小腿腓肠肌的病理改变明显减轻。表明刺五加注射液对肢体缺血再灌注损伤具有保护作用。

桃红四物液对肢体缺血再灌注损伤大鼠血清SOD与MDA的影响

目的:观察桃红四物液对肢体缺血再灌注损伤大鼠血清SOD和MDA浓度的影响。方法:选用2月龄SD雄性大鼠88只,按照随机原则将其分为对照组、缺血再灌注组(IR组)及桃红四物液组(T-IR组)。IR组和T-IR组在造成缺血前12 h、造成缺血时、再灌注时分别给予生理盐水和桃红四物液灌胃1次,以后每天早晚各1次。再灌注后12 h、1 d、3 d、5 d、7 d采血,用ELISA法检测血清中SOD与MDA的浓度。结果:IR组与T-IR组血清SOD、MDA浓度分别与对照组比较,差异均有统计学意义(P<0.01);IR组与TIR组SOD浓度从再灌注后12 h开始均升高,MDA浓度均降低,但T-IR组SOD与MDA浓度变化幅度均较大,差异均有统计学意义(P<0.05);在相同时间点上与IR组比较,T-IR组SOD浓度较高,MDA浓度较低,差异均有统计学意义(P<0.01)。结论:桃红四物液可提高肢体缺血再灌注损伤大鼠血清SOD的浓度,降低MDA浓度,减少氧自由基产生,减轻过氧化反应。

盐酸戊乙奎醚后处理对肢体缺血再灌注大鼠小肠黏膜病理损伤的保护

目的观察盐酸戊乙奎醚后处理对下肢缺血再灌注大鼠小肠黏膜屏障的影响,探讨其对肢体缺血再灌注引起大鼠小肠黏膜损伤的保护机制。方法Wistar雄性大鼠随机分为3组(每组36只):假手术组(S组)、下肢缺血再灌注组(LIR组)和盐酸戊乙奎醚后处理组(PHC组);橡皮筋结扎大鼠双后肢根部3 h后再灌注的方法制备双下肢缺血再灌注模型;PHC组完全阻断大鼠双下肢血流3 h后,尾静脉注射盐酸戊乙奎醚(0.15 mg/kg)后再灌注;检测再灌注即刻(t1)、1 h(t2)、3 h(t3)、6 h(t4)、12 h(t5)和24 h(t6)小肠组织湿/干重(W/D)和丙二醛(MDA)含量。在光学显微镜下观察小肠黏膜病理学改变,并行Chiu’s病理分级。结果与S组比较,LIR组和PHC组各时间点Chiu’s分级均升高(P<0.05);与LIR组比较,t3—t6时,PHC组大鼠小肠黏膜Chiu’s病理分级降低(P<0.05)。与S组比较,LIR、PHC组大鼠小肠组织各时间点W/D和MDA含量升高(P<0.05);与LIR组比较,t2—t6时,PHC组大鼠的小肠组织W/D和MDA含量降低(P<0.05)。结论盐酸戊乙奎醚后处理能够有效地降低缺血再灌注对肠黏膜组织的损伤,其机制可能与盐酸戊乙奎醚能够抑制MDA对肠黏膜细胞的毒性有关。

鹿瓜多肽注射液对肢体缺血再灌注损伤保护作用的时效及量效关系的临床运用

目的探讨鹿瓜多肽注射液对肢体缺血再灌注损伤保护作用的机制和时效及量效关系。方法选择合适病人如断肢再植、皮瓣移植、四肢大血管损伤、骨筋膜室综合征等或四肢手术须用止血带1～1.5h的男性患者45例,随机分为A、B、C、D和E组(空白对照组)五组,A、B组在手术前30min、术后30min分别以鹿瓜多肽注射液4mg加入5%糖盐水(GNS)静脉滴注,C、D组在手术前30min、术后30min分别以鹿瓜多肽注射液12mg加入5%GNS静脉滴注,E组单纯静脉滴入5%GNS,三组分别在术前1h、术后6h抽取静脉血,测定MDA、SOD、CPK、GOT和LDH含量。结果各治疗组中SOD明显增高,MDA、CPK、GOT则明显降低。结论鹿瓜多肽注射液对肢体缺血再灌注损伤具有保护作用,但术前治疗效果更佳。

川芎嗪对肢体缺血再灌注损伤影响的临床实验研究

目的 了解川芎嗪对肢体组织缺血再灌注损伤的影响。方法 病例选取四肢骨折手术 ,止血带时间需要 1～ 1.5h的 36例 ,分为A组 (川芎嗪组 ) 15例和B组 (空白对照组 ) 2 1例 ,另设立C组为腰椎或髋部手术病例 15例。分别于术前、术后 2 4小时测定血清SOD活性、LPO、GSH和血液流变学指标。结果 A组各项指标相对稳定 ,术后B组SOD酶活性短暂下降 ,LPO和GSH升高 (P <0 0 5 ) ,还原粘度明显升高 (P <0 0 1)。C组则显示血液流变学指标的降低 (P <0 0 5 )。结论 川芎嗪对肢体组织缺血再灌注损伤有保护作用 ,其作用机理与川芎嗪活血、化瘀、抗凝、抗癌、改善血液流变学特性 。

肢体缺血-再灌注损伤对凝血功能的影响

目的探讨肢体缺血-再灌注损伤(I-RI)对患者凝血功能的影响。方法 18例择期在硬膜外麻醉下行单侧膝关节镜手术治疗患者,术中使用充气式止血带,肢体缺血时间(42±6)min。分别于止血带充气前(T1)、肢体缺血30min(T2)、再灌注3min(T3)和30min(T4)抽取静脉血,应用血栓弹力描记图(TEG)检测凝血功能。结果与T1时比较,TEG显示反应时间(R值)和凝固时间(K值)降低、凝固角(α角)和血栓最大幅度(MA值)增大,但其改变均在正常值范围,且与其他时点相比差异无统计学意义。结论肢体I-RI对患者凝血功能没有显著影响。

复灌Ⅰ号注射液对大鼠肢体缺血—再灌注骨骼肌氧化损伤的保护机制

目的:探讨复灌Ⅰ号注射液对大鼠肢体缺血—再灌注骨骼肌氧化损伤的保护机制。方法:按文献[3]所报道的方法复制SD大鼠后肢缺血—再灌注模型。对照组动物不给药物;缺血再灌注组(IR组)于造成缺血前12 h、造成缺血时和再灌注时于腹腔内各注射生理盐水1 ml;复灌Ⅰ号药物干预组(Ⅰ-IR组)于造成缺血前12 h、缺血时和再灌注时腹腔各注射复灌Ⅰ号注射液1 ml。各组大鼠于相应时间点切取约1000 mg右侧腓肠肌中部肌肉,用于骨骼肌MDA、SOD、MPO的检测;切取左后肢腓肠肌行干湿重比值的检查;大鼠下腔静脉穿刺取血,取血清MDA、SOD、MPO、NO检测。结果:⑴MDA的检测结果:IR与Ⅰ-IR各组MDA含量均较对照组高,差异有统计学意义(P<0.05),且在8 h内随着时间的延长而逐渐增高。复灌Ⅰ号干预各组在相应时间点均较IR组低,各组间比较,差异有统计学意义(P<0.05)。⑵SOD的检测结果:IR与Ⅰ-IR各组血清和骨骼肌SOD值均较对照组低,差异有统计学意义(P<0.05),在8 h内其含量随时间的延长而逐渐降低。⑶MPO的检测结果:IR与Ⅰ-IR各组血清和骨骼肌MPO值均较对照组高,差异有统计学意义(P<0.05),在8 h内随时间的延长其含量逐渐升高,而Ⅰ-IR各组在相应时间点上均较IR组低,差异均有统计学意义(P<0.05)。⑷骨骼肌干湿重的检测结果:IR与Ⅰ-IR各组骨骼肌水肿明显,8 h内水肿逐渐增加,与对照组相比,差异有统计学意义(P<0.05)。⑸血清NO的检测结果:在再灌注后2 h时最高,8 h内随着时间的延长而逐渐下降,IR与Ⅰ-IR各组NO含量均较对照组高,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:复灌Ⅰ号注射液可减少氧自由基的产生、减轻SOD降低的程度、降低PMN的游出数量、降低血清中NO的含量、减轻组织水肿程度。

脉络宁注射液对肢体缺血-再灌注损伤一氧化氮及一氧化氮合酶的影响

目的 :探讨脉络宁注射液对肢体缺血再灌注损伤一氧化氮 (NO)和一氧化氮合酶 (NOS)的影响。方法 :健康成年家兔 2 0只 ,随机分为对照组和实验组 ,建立后肢缺血再灌注损伤动物模型。在即将恢复血流灌注时 ,实验组家兔自耳缘静脉注射脉络宁注射液 ,对照组注射等量生理盐水。在缺血前、缺血后 2 h、再灌注后1h和 4 h各自从术侧股静脉采血 ,分离血清 ,测定血清 NO和 NOS的含量 ;取胫前肌行电镜观察。结果 :两组血清 NO含量在缺血后 2 h比缺血前均明显增高 (P均 <0 .0 5 ) ,再灌注后均明显降低 (P均 <0 .0 5 )。两组 NOS活性在缺血后 2 h比缺血前明显降低 (P均 <0 .0 1) ,再灌注后比缺血后 2 h均明显增高 (P<0 .0 5或 P<0 .0 1) ,且实验组明显高于对照组 (P<0 .0 1和 P<0 .0 5 )。电镜观察可见再灌注后对照组组织损伤严重 ,而实验组较轻。结论 :脉络宁注射液能抑制肢体缺血再灌注损伤 NO的过量产生 ,提高 NOS活性 ,对肢体缺血再灌注损伤具有保护作用。

参附对肢体缺血再灌注损伤保护作用的时效及量效关系探讨

目的探讨参附注射液对肢体缺血再灌注损伤保护作用的机制、时效及量效关系。方法选择合适病例如断肢再植、皮瓣移植、四肢大血管损伤、骨筋膜室综合征等或四肢手术需用止血带1～1．5h的男性患者45例，随机分为A，B，C，D和E（空白对照组）五组，A，B组在手术前30min、术后30min分别以参附注射液10ml／kg加入5％糖盐水（GNS）静脉滴注，C，D组在手术前30min、术后30min分别以参附注射液20ml／kg加入5％GNS静脉滴注，E组单纯静脉滴入5％GNS，每组分别在术前1h、术后6h抽取静脉血，测定丙二醛（MDA）、血浆超氧化物歧化酶（SOD）含量。结果各治疗组中SOD明显增高，MDA明显降低。结论参附注射液对缺血再灌注肢体具有保护作用，且术前治疗效果更佳。

肢体缺血再灌注损伤防治的研究进展

肢体的创伤、断肢再植、血栓形成、组织移植及止血带的应用时间过长均可引起肢体缺血.随着血流的恢复,在随后的一段时间内组织损伤不仅不减轻反而加重,这种现象称缺血再灌注损伤(Ischemia/Reperfusion Injury,I/R I).对其发生机制,不同学者尚持有不同的观点,但I/R I时氧自由基的产生、钙超载、白细胞的活化及内皮细胞自稳态失衡却是肯定的.