鸡增殖型与肥大型软骨细胞差异表达基因筛选

为研究家禽软骨细胞分化过程中的差异基因,寻找家禽胫骨软骨发育不良发生的相关基因和通路,研究基于GEO数据库下载家禽软骨细胞分化的基因表达谱芯片数据进行生物信息学分析。结果显示:共筛选出292个差异基因,其中40个上调,252个下调;差异基因的GO富集主要在细胞成分活动的调节、趋化性、细胞间黏附和细胞黏附分子结合等过程,KEGG信号通路分析主要在ECM受体相互作用、黏着斑等通路富集;PPI网络分析筛选出APP、SPP1、TF和LAMB14个核心基因,并结合RT-PCR技术对核心基因进行表达谱验证,与预测的结果一致,均表现在增殖型软骨细胞中表达下调。研究表明,从GEO18568数据中分析筛选出的4个核心基因,在增殖型软骨细胞分化为肥大型软骨细胞过程中均发挥正向调控作用。

贵州地区假肥大型肌营养不良60例临床特征分析

目的 了解贵州地区假肥大型肌营养不良患者临床特征,为该类疾病的诊断及治疗提供理论依据。方法 收集60例因双下肢乏力、步态不稳、行走困难、运动发育落后、肝酶异常、肌酶异常就诊且基因检查确诊为假肥大型肌营养不良的患儿,整理其临床资料,分析这些患者临床表型特征。结果 60例假肥大型肌营养不良患者平均起病年龄为2岁10个月,其中包括女2例、男58例;从起病至确诊,平均诊断耗时25.4个月,耗时较长的原因主要为家属认识不足或基层医院诊断为肝酶、心肌酶异常原因导致延迟就诊;60例患儿实验室检查指标均表现出谷丙转氨酶、谷草转氨酶、肌酸激酶、肌酸激酶同工酶增高,肌酸激酶同工酶/肌酸激酶<0.07。结论 贵州地区假肥大型肌营养不良诊治现状不容乐观,需加强该类疾病的科普宣传及临床诊疗培训;在临床实践中,对于实验室指标发现不明原因谷丙转氨酶、谷草转氨酶、肌酸激酶、肌酸激酶同工酶增高,同时肌酸激酶同工酶/肌酸激酶<0.07的患者,应考虑假肥大型肌营养不良;对于临床考虑假肥大型肌营养不良患者,应积极完善基因检测。

贵州地区假肥大型肌营养不良60例临床特征分析

目的 了解贵州地区假肥大型肌营养不良患者临床特征,为该类疾病的诊断及治疗提供理论依据。方法 收集60例因双下肢乏力、步态不稳、行走困难、运动发育落后、肝酶异常、肌酶异常就诊且基因检查确诊为假肥大型肌营养不良的患儿,整理其临床资料,分析这些患者临床表型特征。结果 60例假肥大型肌营养不良患者平均起病年龄为2岁10月,其中包括2例女性患者及58例男性患者;从起病至确诊,平均诊断耗时25.4月,耗时较长的原因主要为家属认识不足或基层医院诊断为肝酶、心肌酶异常原因导致延迟就诊;60例患儿实验室检查指标均表现出谷丙转氨酶、谷草转氨酶、肌酸激酶、肌酸激酶同工酶增高,肌酸激酶同工酶/肌酸激酶小于0.07;结论 贵州地区假肥大型肌营养不良诊治现状不容乐观,需加强该类疾病的科普宣传及临床诊疗培训;在临床实践中,对于实验室指标发现不明原因谷丙转氨酶、谷草转氨酶、肌酸激酶、肌酸激酶同工酶增高,同时肌酸激酶同工酶/肌酸激酶小于0.07的患者,应考虑假肥大型肌营养不良;对于临床考虑假肥大型肌营养不良患者,应积极完善基因检测。

养心康对心肌肥大型心力衰竭大鼠血浆ET、CGRP含量的影响

【目的】探讨心肌肥大型心力衰竭大鼠血浆内皮素(ＥＴ)和降钙素基因相关肽(ＣＧＲＰ)水平的变化及养心康(由人参。麦冬、毛冬青等组成)的作用机理。【方法】大鼠皮下注射异丙肾上腺素共１３ｄ以制备心肌肥大型心力衰竭模型,采用放射免疫分析法观察各组动物血浆ＥＴ、ＣＧＲＰ水平的变化。【结果】模型组大鼠血浆ＥＴ含量比正常对照组显著升高(Ｐ＜０．０１),ＣＧＲＰ含量则比正常对照组显著降低(Ｐ＜０．０１),而养心豪能降低ＥＴ(Ｐ＜０．０１和升高ＣＧＲＰ含量(Ｐ＜０．０１),其大剂量组的疗效接近地高辛。【结论】ＥＴ、ＣＧＲＰ是参与心力衰竭发病的重要体液因素,二者之间的失衡是心力衰竭发生、发展的重要原因。而养心康的作用机理与纠正失衡的ＥＴ/ＣＧＲＰ比值有关。

假肥大型肌营养不良患者血清肌酸激酶变化规律

目的假肥大型肌营养不良患者血清肌酸激酶随病程进展而不断变化。该研究旨在分析假肥大型肌营养不良患者血清肌酸激酶的变化规律。方法收集临床已确诊的假肥大型肌营养不良患者的血清，其中男性39例，女性1例，通过连续监测法测定血清肌酸激酶。结果假肥大型肌营养不良患者血清肌酸激酶在3—5岁达到峰值，以后随病程进展和年龄增加逐年下降，年均下降率为8．7％。结论假肥大型肌营养不良患者的血清肌酸激酶在3—5岁达到峰值，以后随年龄增加而逐年下降，这种变化规律可以反映肌纤维坏死速率和病程进展速度，评估治疗效果。

异体骨髓干细胞移植后假肥大型肌营养不良症模型鼠膈肌dystrophin表达及病理改变

目的探讨骨髓干细胞移植对假肥大型肌营养不良症(DMD)模型鼠-mdx鼠膈肌的治疗效果。方法取雄性SD大鼠骨髓干细胞经尾静脉植入放疗处理后的8周龄雌性mdx鼠(n=18)。于移植后4、8、12周各取6只mdx鼠的膈肌行 HE染色、抗肌萎缩蛋白(dystrophin)免疫荧光检测以及dystrophin mRNA的RT-PCR分析,同时用正常C57鼠及放疗而未移植的mdx鼠作为对照,另进行PCR反应检测实验鼠膈肌内Sry(Y染色体的性别决定区)基因。结果移植后mdx 鼠膈肌间质内炎性细胞浸润较放疗而未移植mdx鼠有所减少;移植后核中心移位纤维比例[移植后4、8、12周分别为 (15．58±0．91)％、(12．50±1．87)％、(10．17％±1．17)％]较未移植mdx鼠(19．5±1．87)％显著减少。移植后dystrophin免疫荧光阳性细胞比例[移植后4、8、12周分别为(1．00±0．32)％、(6．00±1．05)％、(11．92±1．11％)]较未移植mdx鼠(O．17±0．41)％显著增加。RT-PCR结果显示C57鼠膈肌的dystrophin mRNA相对含量(0．63±0．04)最高;而未移植mdx鼠的膈肌中未检测到dystrophin mRNA;移植后的mdx鼠膈肌中mRNA的表达水平(移植后4、8、12周分别为0．19±0．05、0．26±0.06、0．36± 0．04)随时间推移逐渐增高;移植后各时间点mdx鼠膈肌Sry基因均为阳性。结论骨髓干细胞系统移植mdx鼠可以恢复部分膈肌的dystrophin表达,改善膈肌的病理,骨髓干细胞移植有希望成为全身治疗DMD的有效方法。

山东省假性肥大型肌营养不良的RFLP分析 Ⅰ.可疑携带者的基因型确定

本文选用10个DMD基因内部和桥探针,对山东省9个地区的21个DMD/BMD家系的173名成员进行RFLP分析,其中可疑携带者55人。多数家系应用1—3个探针,有基因重组家庭选用4—5个探针,便可完成多态分析。RFLP分析可以确定85.45%的可疑携带者(≥95%可信限),即13人确定为携带者,30人排除携带者,另有4人风险大幅提高。通过这些探针的群体多态检测和不同家庭结构和类型的应用分析,我们提出了在中国人群中DMD/BMD基因诊断的基本程序。

假肥大型肌营养不良症产前基因诊断的临床应用

目的 建立规范的假肥大型肌营养不良症 (DMD/BMD)产前基因诊断程序。方法 利用DMD基因内 18个缺失热点的PCR引物 ,6个DMD基因内 (CA)n短重复序列 (STR)引物以及性别决定基因SRY引物 ,多重聚合酶链反应检测羊水胎儿脱落细胞、先证者和双亲外周血有核细胞基因组DMD基因 ,通过胎儿性别确定、基因缺失检测和基因连锁分析确定胎儿DMD基因状态。结果 在 4例先证者基因缺失家系的产前诊断中 ,2例男胎DMD基因缺失与先证者相同 ,1例女胎为基因缺失携带者 ,1例男胎未发现缺失 ;在 4例有 2个或 2个以上患者且先证者未检出缺失的家系产前诊断中 ,发现获得风险染色体的男胎与女胎各 1例 ,余1例女胎和 1例男胎均未携带风险染色体。检测结果的可靠性经流产胚胎和已出生胎儿DNA分析、DMD临床症状监测得到部分证实。结论 胎儿性别基因诊断、DMD基因缺失检测结合基因连锁分析的方法 ,在严格控制检测范围、规范的检测程序和有效的质量控制下 ,能准确地对DMD/BMD进行产前基因诊断 。

肢带型肌营养不良与假肥大型肌营养不良肌型肌酸激酶亚型的比较

各种类型肌营养不良的临床特征和肌酸激酶（ＣＫ）在肌营养不良中的诊断价值，国内外已有不少报告［１，２］，人类的ＣＫ主要由ＣＫ－ＭＭ、ＣＫ－ＭＢ和ＣＫ－ＢＢ３种同工酶组成，而只有肌型同工酶ＣＫ－ＭＭ主要存在于骨骼肌和心肌。本文用电泳法比较肢带型肌营养不良...

扩髓更换交锁髓内钉治疗股骨干术后肥大型骨不连

目的分析扩髓后更换交锁髓内钉治疗股骨干术后肥大型骨不连的效果。方法对于35例肥大型股骨干骨不连患者行扩髓后更换交锁髓内钉治疗,术中无需植骨,不暴露骨折断端,术后不行外固定,早期活动关节。结果术后随访7～24个月,平均13个月。35例术后均无伤口感染,主钉及锁钉均无断裂或折弯。骨折均愈合,愈合时间14～30周(平均20周),未出现明显手术并发症。结论扩髓后更换交锁髓内钉治疗股骨干术后骨不连操作简便,效果确切。

第二代测序技术检测1例假肥大型肌营养不良家系Dystrophin基因突变

目的探讨第二代测序(NGS)技术检测假肥大型肌营养不良患者的可行性。方法用NGS技术检测1例假肥大型肌营养不良(DMD)患者,并用Sanger测序技术对患者基因型进行验证,同时检测家系其他成员基因型。结果 NGS技术结果表明,该患者DMD基因编码区第55号外显子存在1个移码突变c.8087delT(p.Leu2696ArgfsX30),为致病性突变;同时该患者还存在3个错义突变p.Arg2937Gln、p.Arg1745His和p.Asp882Gly,均为已知多态性变异;Sanger测序技术进一步证实了该点突变的存在,同时发现患者母亲为该突变的携带者,患者父亲和妹妹未见该突变。结论 NGS技术可用于DMD基因突变检测,为DMD临床遗传咨询和治疗提供了依据。

肌型肌酸激酶同工酶亚型在早期诊断假肥大型肌营养不良中的价值

目的 研究假肥大型肌营养不良 (DMD)患者肌型肌酸激酶 (CK MM )亚型的变化 ,为早期诊断和正确评价病情提供依据。方法 采用不连续缓冲体系 ,在稳流低压条件下电泳分离CK MM亚型 ,荧光扫描。结果 随着DMD患者病情的加重 ,其不同阶段的MM2 /MM1均与对照组差异显著 (P <0 .0 5 ) ;DMD患者不同阶段的MM2 /MM1值差异也显著 (P <0 .0 5 )。结论 CK MM亚型的改变是DMD的早期诊断指标 ,是判断病情及科学评价治疗效果的依据。

假肥大型肌营养不良患儿的血清酶学与基因特征分析

目的分析假肥大型肌营养不良(DMD/BMD)患儿的血清酶学与基因特征,提高对本病的认识及诊断水平。方法对118例临床诊断为DMD/BMD的患儿进行血清酶学(ALT、AST、LDH、CK、CK-MB、MB、HBDH)与基因检测结果分析。结果所有患儿的血清酶学结果明显高于正常对照组儿童(均P <0.001),学龄前患儿的CK和CK-MB水平明显高于学龄期患儿(均P <0.01);118例患儿中DMD基因检测阳性结果 91例,阴性结果患儿中8例接受基因测序检查,其中6例检出突变;CK、CK-MB及两者联合应用时预测患儿基因诊断阳性的曲线下面积分别为0.74、0.69和0.79。结论血清酶学检测对DMD/BMD筛查具有简便快速、经济可行、依从性好的优点,CK和CK-MB可作为基因诊断预测的指标;而基因检测可明确致病基因,为遗传咨询与未来可能的基因治疗提供依据。

微创锁定接骨板治疗非手术治疗失败的肱骨干骨折肥大型骨不连

目的：探讨应用微创锁定接骨板（ MIPO）技术治疗非手术治疗失败的肱骨干骨折肥大型骨不连的临床疗效。方法2008年11月至2012年10月运用微创锁定接骨板（ MIPO）技术治疗非手术治疗失败的肱骨干骨折肥大型骨不连17例，观察手术时间、输血量、愈合情况、并发症以及功能恢复情况等。结果术中出血平均为180mL（120～300mL），手术时间60min（40～95min）；术中未输血；术后患者切口均Ⅰ期愈合，无感染等并发症发生。本组17例，其中14例（82．3%）获得随访，随访时间8～22个月，平均14．6个月。 X线片示骨折均骨性愈合，其中1例有螺丝钉松动迹象但骨折最终愈合，愈合时间3．5～8个月，平均4．9个月。4例有5°～15°的肘内翻。根据 Constant-Murley肩关节评分及Broberg-Morrey肘关节评分，肩、肘关节功能恢复均满意，其中 Constant-Murley评分术前81．6（67～94）分，术后92．2（80～100）分，肩关节功能：前屈上举162°（100°～180°）；体侧外旋平均52°（35°～90°），内旋T7-T8（T12-T5）；Broberg-Morrey评分术前80．6（62～90）分，术后94．5（73～100）分，屈曲132°（110°～140°），伸直16°（0°～35°），前臂旋转正常。结论微创锁定接骨板（ MIPO）技术是治疗非手术治疗失败的肱骨干骨折肥大型骨不连的较好方法，其固定稳定，能最大程度地减少了对骨折端血供的破坏，符合生物学固定原则，但对病例的选择需要慎重。

肥大型骨不连断端组织成骨潜能的实验研究

目的观察肥大型骨不连断端及其周围区域组织的结构特点,评估其成骨潜能。方法收集2009年至2012年因肥大型骨不连在我院行手术治疗患者的骨不连断端标本共25例,通过光学显微镜及透射电镜观察不同区域的组织结构特点和微观特征。采用免疫组化检测BMP-2的表达,在高倍镜(400倍)下对阳性细胞进行观察并计数,并作统计分析。结果肥大型骨不连断端区域呈现出不同的组织类型,中心区主要是纤维化组织,其内可见大量的成纤维样细胞;边缘区可见大量的软骨细胞,可见少量的新生血管形成;骨痂区见有一定量的成骨细胞及丰富的新生血管。免疫组化染色显示肥大型骨不连断端中心区、周围区及骨痂区组织BMP-2的表达明显不同(P<0.05)。结论肥大型骨不连断端区域的组织及细胞类型呈现出不同的特点,BMP-2含量减少使得不同区域的成骨潜能不同。

复痿汤为主治疗假肥大型肌营养不良症41例临床分析

进行性肌营养不良(proqressivemusculardystrophy)是一组遗传性疾病,以全身肌肉组织原发性病变为主,临床特点是骨骼肌对称性加重的肌肉无力、萎缩及不同程度的障碍。其中最严重、最常见者是假肥大型肌营养不良(duchennemusculardystrophy简称DMD),多数为男性发病,女性为基...

带锁髓内钉静力固定治疗下肢长管状骨肥大型骨不连

目的 :分析下肢长管状骨肥大型骨不连的原因及带锁髓内钉静力固定的优点。方法 :对 2 6例下肢长管状骨肥大型骨不连扩髓后应用带锁髓内钉静力固定 ,根据需要决定是否植入同种异体骨或自体骨。结果 :所有病例 4～ 6个月内均达骨性愈合。结论 :带锁髓内钉静力固定能有效控制有害的剪应力 ,同时对骨折有一定的加压作用 ,是治疗下肢肥大型骨不连的理想方法。

体外冲击波和传统植骨内固定治疗肥大型骨折不愈合的临床研究

目的 :比较运用体外冲击波和传统植骨内固定两种方法治疗肥大型骨折不愈合的临床疗效。方法 :设计前瞻性的随机临床对照研究,将符合纳入排除标准且同意参与本临床研究的骨折不愈合患者72例,分为A组(体外冲击波治疗组)和B组(自体髂骨植骨+坚强内固定组),两组患者基线资料无统计学差异(P>0.05)。A组予以体外冲击波治疗3次,间隔7 d;B组行传统切开复位坚强内固定+自体髂骨植骨。平均随访18.2个月。比较两组骨折愈合率、骨痂出现时间、骨折愈合时间、治疗费用和并发症等情况。结果:两组在愈合率上未及明显统计学差异(P>0.05),骨痂出现时间上B组较A组早(P<0.05)。但在最终愈合时间上两组未见明显统计学差异(P>0.05)。在平均治疗费用上A组较B组明显降低(P<0.05)。结论:体外冲击波对于肥大型骨折不愈合治疗有着较好的临床疗效和经济效益,建议在行传统植骨内固定手术前应进行体外冲击波治疗。