应用双重免疫组化技术研究肥大细胞亚型与食管癌的相关性

目的:探讨食管癌组织中肥大细胞(mast cell,MC)亚型的变化及其浸润程度与食管癌临床病理特征的关系。方法:采用双重免疫组化染色方法对90例食管癌根治术手术标本中MC进行检测,并探讨MC亚型T型、TC型和C型与食管癌的组织学分级、浸润深度及淋巴结转移之间的关系。结果:食管癌组织内的MC主要分布于癌旁交界区。食管癌中MCT和MCTC两种亚型MC的表达与食管癌浸润深度及淋巴结转移呈显著的负相关性,而MCC型MC的表达与癌组织浸润深度及转移无关。结论:癌间质内MCT和MCTC型MC的浸润可能具有抑制食管癌生长及转移的作用。MC浸润的数量与食管癌的生物学行为有相关性,对食管癌患者预后评估有一定的参考价值。

大肠癌中肥大细胞亚型的改变

目的探讨大肠癌组织中肥大细胞(MC)亚型的变化及其浸润程度与大肠癌临床病理特征、预后的关系。方法采用免疫组织化学方法对60例大肠癌根治术手术标本的MC进行检测,并探讨MC亚型MCTC和MCT与大肠癌组织学类型、浸润深度、淋巴结转移及生存率之间的关系。结果①大肠癌组织的MCTC和MCT数量较正常组织均明显增加(P<0.05),但大肠癌组织与正常组织MCTC与MCT之间比例的差异无显著性(P>0.05);②MCTC和MCT高计数组的肿瘤浸润深度(P<0.01)、癌淋巴结转移发生率(P<0.05)及肿瘤远处转移发生率(P<0.05)均明显低于低计数组;③MCTC和MCT高计数组5年生存率分别为65.5%和59.3%,均明显高于低计数组的25.8%和33.3%(P<0.01)。结论大肠癌组织中MC亚型构成比的变化不明显,但其数量明显增加;MC浸润的数量与大肠癌的生物学行为有关,对大肠癌患者预后评估有较大的参考价值。

双重免疫组化技术鉴定食管癌中肥大细胞的亚型

目的:建立用于检测食管癌中肥大细胞(mast cell,MC)亚型的双重免疫组化染色方案。方法:采用双重免疫组化技术染色在食管癌组织中肥大细胞内表达的类胰蛋白酶(tryptase)和类糜蛋白酶(chymase)。结果:MC大部分为T型或C型,少部分为TC型。食管癌组织内的MC主要分布于癌旁交界区。结论:采用双重免疫组化染色方法以确定食管癌中MC的亚型是可行的,为深入研究MC亚型在食管癌发展和预后评价中的临床意义提供了基础。

组织中肥大细胞内F-actin对其不同亚型细胞分泌作用的影响

目的：研究细胞内丝状肌动蛋白的变化对不同亚型肥大细胞分泌作用的影响。方法：利用肥大细胞的特征性蛋白酶抗体和鬼比环肽的免疫荧光标记；以流式细胞仪检测分选人皮肤组织中肥大细胞的亚型；使用激光扫描共聚焦显微镜显示肥大细胞内分泌颗粒和微丝的分布。结果：类胰蛋白酶免疫反应性的肥大细胞内含有丰富的丝状肌动蛋白环，在质膜内层区域形成阻碍类胰蛋白酶释放的屏障；大量的类胰蛋白酶暂存于分泌泡中，少量的类胰蛋白酶因细胞内丝状肌动蛋白环的解聚使之从分泌泡中释放。而类胰蛋白酶和类糜蛋白酶免疫反应性的肥大细胞及类糜蛋白酶免疫反应性的肥大细胞内少见或未见明显的阻碍蛋白酶释放的丝状肌动蛋白环；细胞形态膨胀，细胞内蛋白酶已释放。结论：人皮肤组织中肥大细胞内类胰蛋白酶和／或类糜蛋白酶的含量及其肥大细胞亚型与丝状肌动蛋白环相关联。

肥大细胞亚型与大肠癌的关系

目的 探讨大肠癌组织中肥大细胞 (MastCell,MC)亚型的变化及其浸润程度与大肠癌临床病理特征和预后的关系。方法 采用免疫组织化学方法对 60例大肠癌根治术手术标本的MC进行检测 ,并探讨MC亚型MCTC和MCT 与大肠癌的组织学类型、浸润深度、淋巴结转移及生存率之间的关系。结果 (1)MCTC和MCT 的数量相对正常组织均明显增加 ,但大肠癌组和正常组的MCTC和MCT 之间的比例无显著性差异 (P >0 .0 5 ) ;(2 )MCTC和MCT 高计数组的肿瘤浸润深度均明显低于低计数组 (P <0 .0 1) ;(3 )MCTC和MCT 高计数组的癌淋巴结转移发生率及癌远处转移发生率均低于低计数组 (P <0 .0 5 ) ;(4 )MCTC和MCT 浸润高计数组 5年生存率 (65 .5 %和 5 9.3 % )明显高于低计数组 5年生存率 (2 5 .8%和 3 3 .3 % ,P <0 .0 1)。结论 大肠癌组织中MC亚型数量增加 ,但其亚型构成比的变化不明显 ;MC浸润的数量与大肠癌的生物学行为有关 ,对大肠癌患者预后评估有较大的参考价值。

流式细胞仪分析癌细胞对肥大细胞募集的影响

目的:研究食管癌细胞迁移到小鼠腹腔时肿瘤细胞周边微环境的变化。方法:将食管癌细胞株EC109和/或诱导试剂植入小鼠腹腔,利用组织化学的方法、荧光标记的肥大细胞蛋白酶和流式细胞术,我们在小鼠模型观察肠组织的形态和腹腔的MC亚型的变化。结果:胰酶导致小鼠肠道平滑肌层和黏膜下层的组织增厚,细胞间隙的增加可能有益于MC在组织移动或迁移进入腹腔;它引起小鼠腹腔液的总MC增加,MCC亚型的相对比例增加,MCT亚型减少。EC109细胞不能明显地改变小鼠肠道组织的形态,但它显著地引起腹腔MCT亚型的相对比例增加。结论:根据肥大细胞内颗粒的类胰蛋白酶和类糜蛋白酶的差异表达,可证实小鼠的MC亚型;并且不同的诱导物可能影响腹部微环境的变化。目前的研究表明,食道癌细胞可以诱导MCT(含有类胰蛋白酶)亚型迁移到小鼠腹腔,造成肿瘤细胞周围的内部环境的变化。

肾组织肥大细胞表型特点分析研究

目的阐明各种肾病患者肾组织肥大细胞的表型特点。方法选取包括糖尿病肾病、IgA肾病、急性间质性肾炎、慢性间质性肾炎、过敏性紫癜性肾炎、膜性肾病和狼疮性肾炎在内的肾病患者369例,正常供肾16例,以免疫组化方法检测肾活检标本中肥大细胞类胰蛋白酶和糜蛋白酶表达情况,对其进行分型分析。结果双连续切片分析发现,绝大多数肥大细胞表现为类胰蛋白酶和糜蛋白酶染色双阳性,仅有少数表现为类胰蛋白酶或糜蛋白酶单阳性;"双夹心"连续切片分析法显示,所谓的类胰蛋白酶或糜蛋白酶单阳性肥大细胞实际上是类胰蛋白酶和糜蛋白酶双阳性;以类胰蛋白酶为标记分子和以糜蛋白酶为标记分子检测肾组织肥大细胞的结果比较没有显著区别。结论类胰蛋白酶糜蛋白酶亚型(MCTC亚型)是正常个体和肾病患者肾组织肥大细胞的基本亚型。