COPD患者m6A甲基化酶水平观察及FTO对PM2.5刺激后MH-S细胞极化和NF-κB信号活化的影响

目的观察COPD患者体内N6-甲基腺苷(m6A)甲基化酶水平,并探讨肥胖相关蛋白(FTO)对细颗粒物2.5(PM2.5)刺激后小鼠肺泡巨噬细胞(MH-S)的极化及核因子κB(NF-κB)信号活化的影响。方法收集COPD患者的支气管肺泡灌洗液标本。使用m6A dot blot检测两组mRNA的m6A变化。体外培养MH-S细胞,使用PM2.5刺激细胞。构建FTO的过表达质粒pcDNA3.1-FTO(pc-FTO)及空载体pcDNA3.1-Null(pc-Null),并转染MH-S细胞。将MH-S细胞分为对照组、PM2.5组、PM2.5+pcFTO组、pcFTO组和pcNull组。RT-PCR和ELISA检测人肺泡灌洗液中m6A甲基化调节酶METTL3、METTL14、FTO、ALKBH5、YTHDF2的表达;CCK-8检测MH-S细胞的存活率,蛋白免疫印迹检测MH-S细胞的FTO、一氧化氮合酶2(iNOS2)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、精氨酸酶1(ARG1)、甘露糖受体C2(MRC2)、NF-κB-p65、磷酸化的(p)-p65、p-IκBα、IκBα的表达。结果FTO在COPD患者体内表达下调(P<0.05),METTL3、METTL14、ALKBH5、YTHDF2无变化(P>0.05);且COPD患者的m6A甲基化增加。不同浓度暴露PM2.5抑制MH-S细胞的存活率和FTO的表达水平(P<0.05),对METTL3、METTL14、ALKBH5、YTHDF2的表达影响不明显(P>0.05)。PM2.5明显促进MH-S细胞M1型极化特征标志物iNOS2和TNF-α、NF-κB信号蛋白NF-κB-p65、p-p65的表达(P<0.05),但是抑制M2型标志物ARG1和MRC2、NF-κB信号蛋白抑制蛋白p-IκBα及IκBα的表达(P<0.05)。PM2.5暴露MH-S细胞过表达FTO后,iNOS2和TNF-α,NF-κB信号蛋白NF-κB-p65、p-p65的表达下调(P<0.05),而M2型标志物ARG1和MRC2,NF-κB信号蛋白抑制蛋白p-IκBα及IκBα的表达上调(P<0.05)。结论COPD患者的去甲基化m6A酶FTO表达降低,过表达FTO可抑制PM2.5诱导MH-S细胞的M1型极化及NF-κB信号通路的激活。

2种中草药组方减肥功能的动物试验研究

[目的]为探讨2种中草药组方的潜在减肥效果,成功构建肥胖大鼠试验模型。[方法]在连续饲养8周后,取肥胖大鼠的肝脏和脂肪组织称重,检测3项血清生化指标和大鼠体内14项肥胖相关因子水平,并将相关结果进行统计学分析。[结果]2种受试样品都能够降低肥胖大鼠的体重和脂肪重量,改善血清中血糖、甘油三酯和胆固醇的水平;降低下丘脑中神经肽Y的水平、肝脏中脂肪酸合成酶的活性、血清中生长激素释放肽、生长激素和胰岛素的浓度;升高下丘脑中瘦素和血清中胰高血糖素样肽-1的浓度。[结论]2种受试样品对肥胖模型大鼠都有一定的减肥作用,有进一步开发成减肥类产品的潜力。