高效液相色谱法测定育发凝胶中胸腺素β4（17～23）片段的含量

目的建立育发凝胶中胸腺素β4（17～23）七肽片段的含量测定方法。方法采用反相C-12色谱柱，以三氟乙酸-乙腈-水为流动相进行梯度洗脱，检测波长为215nm,用高效液相色谱法测定育发凝胶中胸腺素β4七肽片段的舍量。结果胸腺素β4七肽片段含量的线性范围在0．02～0．18mg／mL，r=0.9998（n=5），平均回收率为100．06％，RSD为0．59％（n=9）。结论此法操作简便、快捷、准确、专属性高，可用于育发凝胶中胸腺素β4七肽片段的含量测定。

基于经皮吸收成分探究中药育发凝胶对雄激素性脱发小鼠的药效物质基础及作用机制

目的基于经皮吸收成分探究中药育发凝胶对雄激素性脱发(androgenetic alopecia,AGA)小鼠的药效物质基础及作用机制。方法采用涂抹丙酸睾酮建立AGA小鼠模型,涂抹中药育发凝胶进行治疗,观察小鼠毛发的生长情况;苏木素-伊红(hematoxylin-eosin,HE)染色观察毛囊状态和真皮厚度;ELISA检测小鼠皮肤组织中转化生长因子-β1(transforming growth factor-β1,TGF-β1)、肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)和白细胞介素-6(interleukin-6,IL-6)的含量。UPLC-QTOF-MS定性分析中药育发凝胶提取液化学成分、经皮入血成分和皮肤滞留成分。采用网络药理学和分子对接预测中药育发凝胶治疗AGA小鼠的潜在作用机制;采用Western blotting检测小鼠皮肤组织中雄激素受体(androgen receptor,AR)、半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-3(cystein-asparate protease-3,Caspase-3)、B淋巴细胞瘤-2(B-cell lymphoma-2,Bcl-2)和Bcl-2相关X蛋白(Bcl-2 associated X protein,Bax)的表达,验证网络药理学预测的关键靶点。结果与对照组比较,模型组小鼠毛囊数减少且毛发生长缓慢,说明模型建立成功;与模型组比较,中药育发凝胶高剂量组小鼠新生毛发区毛囊和真皮厚度增加(P<0.01、0.001),皮肤组织中TGF-β1、TNF-α和IL-6水平显著降低(P<0.05、0.001)。共鉴定出中药育发凝胶提取液中76种成分,皮肤滞留成分30种,经皮入血成分7种;基于经皮吸收成分共得到成分靶点481个、疾病靶点236个、共同靶点41个,核心靶点包括蛋白激酶B(protein kinase B1,AKT1)、连环蛋白1(catenin beta 1,CTNNB1)、TNF等,基因本体(gene ontology,GO)功能富集分析共375个条目,京都基因与基因组百科全书(Kyoto encyclopedia of genes and genomes,KEGG)富集通路共117条。与模型组比较,中药育发凝胶组小鼠皮肤组织中AR、Caspase-3、Bax蛋白表达水平显著降低(P<0.05、0.001),Bax/Bcl-2值显著降低(P<0.001)。结论初步揭示了中药育发凝胶对AGA小鼠的经皮吸收成分和作用机制,为其临床应用提供了理论参考。