小麦G—型细胞质雄性不育的育性恢复因子Rf3的研究Ⅱ.总体DNA构建提莫菲维小麦基因组文库

分别用ＰｓｔⅠ、ＨｉｎｄⅢ和ＥｃｏＲⅠ三种限制性内切核酸酶切割提莫菲维小麦基因组ＤＮＡ，再与用相应酶处理的载体ｐＵＣ１１９连接，然后转化到大肠杆菌菌系ＤＨ５α之中。转化效率为１．２×１０４／μｇ。经α互补检测，初步筛选重组子。随机挑取单菌落分别培养，提取质粒，经琼脂糖凝胶电泳和斑点杂交，最后确定重组子，重组率为４３．８％。