青藤碱在JNK/c-Jun信号通路中对LPS诱导的肺上皮细胞凋亡和自噬的影响

目的:探究青藤碱(SIN)通过JNK/c-Jun信号通路对LPS诱导的肺上皮细胞凋亡和自噬的影响。方法:培养肺上皮细胞MLE-12,通过CCK-8检测SIN的毒性。流式细胞术检测细胞凋亡,免疫荧光检测自噬体形成数量,Western blot检测细胞中凋亡、自噬以及JNK/c-Jun信号通路相关蛋白表达水平。结果:LPS造模后,细胞凋亡率和自噬体数量升高,Cleaved caspase-3、Bax和Beclin-1蛋白水平及LC3Ⅱ/LC3Ⅰ、p-JNK/JNK和p-c-Jun/c-Jun均升高(P<0.05);Bcl-2、P62蛋白水平均降低(P<0.05)。SIN处理可明显改善LPS对细胞凋亡和自噬的影响,以及对JNK/c-Jun信号通路的调控(P<0.05)。细胞自噬抑制剂3-MA或JNK激动剂ANISO处理均可部分逆转SIN对LPS诱导的肺上皮细胞的保护作用(P<0.05)。结论:SIN可通过调控JNK/c-Jun信号通路相关蛋白提高细胞自噬,保护被LPS损伤的肺上皮细胞。

IL-17抑制铜绿假单胞菌感染肺上皮细胞的机制研究

铜绿假单胞菌是常见的致病菌,白细胞介素-17(interleukin-17,IL-17)家族细胞因子直接参与宿主免疫应答,是宿主防御感染或炎症的关键介质。利用重组人IL-17蛋白处理铜绿假单胞菌PAO1,探索其对肺上皮细胞A549的侵袭作用。结果发现,在不影响细菌生长和细胞增殖的情况下,IL-17能够抑制PAO1对A549细胞的入侵。利用转录组测序分析IL-17对PAO1转录组的改变,探索IL-17影响PAO1入侵宿主细胞的作用机制。结果表明,有210个差异基因表达上调,123个表达下调;GO功能分析显示差异基因主要富集在肽酶活性、蛋白结合和蛋白水解等方面;KEGG富集分析显示,差异基因涉及RNA降解、生物膜形成、微生物代谢、ABC转运以及碳代谢等通路。此外,生物膜形成实验进一步证实了IL-17能够降低PAO1生物膜的形成。研究结果为耐药铜绿假单胞菌在临床感染造成的相关疾病的治疗提供了新思路和理论基础。

长链非编码RNA NNT-AS1在肺炎患儿血清中的表达及其对脂多糖诱导的肺上皮细胞损伤的影响

目的 探究长链非编码RNA(lncRNA) NNT-AS1在肺炎患儿血清中的表达及其对脂多糖(LPS)诱导的肺上皮细胞损伤的影响。方法 实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测NNT-AS1相对表达水平。将肺泡上皮细胞BEAS-2B分为对照组、LPS组(1 mg/L的LPS处理细胞)、LPS+si-NC组(转染si-NC,LPS处理细胞)、LPS+si-NNT-AS1组(转染si-NNTAS1,LPS处理细胞)、LPS+si-NNT-AS1+SB203580组(转染si-NNT-AS1,LPS处理和MAPK信号通路抑制剂SB203580细胞)。qRT-PCR检测NNT-AS1相对表达水平,流式细胞术检测细胞凋亡,蛋白质印迹法(Western blot)检测cleaved-caspase3、Bax、p-ERK1/2、p-p38 MAPK蛋白表达,ELISA检测IL-6、IL-1β、TNF-α。结果 NNT-AS1在肺炎患儿血清中的相对表达水平高于健康对照。与对照组相比,LPS组中NNT-AS1相对表达水平、凋亡率、cleaved-caspase3、Bax、p-ERK1/2、p-p38MAPK蛋白表达水平明显增加,IL-6、IL-1β、TNF-α增多。与LPS+si-NC组相比,LPS+si-NNT-AS1组NNT-AS1相对表达水平、凋亡率、cleaved-caspase3、Bax、p-ERK1/2、p-p38 MAPK蛋白表达水平明显降低,IL-6、IL-1β、TNF-α减少。与LPS+si-NNT-AS1组相比,LPS+si-NNT-AS1+SB203580组凋亡率、cleaved-caspase3、Bax蛋白表达水平明显降低,IL-6、IL-1β、TNF-α含量减少。结论 沉默NNT-AS1可能通过抑制MAPK信号通路减轻LPS诱导的肺泡上皮凋亡和炎症反应。

LPS通过促进FGFR1磷酸化诱导肺上皮细胞炎症反应及凋亡

目的 探讨脂多糖(LPS)通过促进成纤维细胞生长因子受体1(FGFR1)磷酸化的方式诱导肺上皮细胞炎症反应及凋亡。方法 培养肺上皮Beas-2B细胞并进行以下分组处理,以不含药物的培养基处理作为对照组,用5 mg/L LPS刺激作为LPS组,另加入不同浓度FGFR1选择性抑制剂AZD4547(2.5、5.0、10.0μmol/L)作为AZD4547组。采用CCK8法检测各组细胞的增殖活力,Tunel法检测细胞凋亡率,ELISA法检测细胞培养基中TNF-α、IL-1β、IL-6的含量,Western blot检测各组细胞总蛋白中磷酸化成纤维细胞生长因子受体1(p-FGFR1)、B淋巴细胞瘤-2基因(Bcl-2)蛋白、Bcl-2相关X蛋白(Bax)、切割型半胱氨酸天冬氨酸蛋白水解酶-3(cleaved caspase-3)以及核蛋白中p65核因子-κB(NF-κB)的表达水平。结果 LPS组Beas-2B细胞的增殖活力及Bcl-2水平均显著低于对照组(t分别为11.421、17.784,P<0.05),而Beas-2B细胞的细胞凋亡率、p-FGFR1、Bax、cleaved caspase-3、p65 NF-κB水平及培养基中TNF-α、IL-1β、IL-6含量均高于对照组(t分别为9.126、11.329、12.684、13.147、15.027、11.621、8.925、9.726,P<0.05);2.5、5.0、10.0μmol/L浓度AZD4547组Beas-2B细胞的增殖活力及Bcl-2水平均显著高于LPS组(F分别为45.012、72.286,P<0.05),而细胞凋亡率、p-FGFR1、Bax、cleaved caspase-3、 p65 NF-κB水平及培养基中TNF-α、IL-1β、IL-6含量均显著低于LPS组(F分别为43.527, 94.166, 113.028, 102.515, 41.091, 51.301, 30.280,P<0.05),且AZD4547浓度越高,上述变化趋势越显著。结论 LPS诱导肺上皮细胞炎症反应及凋亡激活的作用可能与促进FGFR1磷酸化有关。

SIRT5通过促进IDH2去琥珀酰化增加COPD小鼠肺上皮细胞的抗氧化能力

目的探讨去乙酰化酶5(SIRT5)对慢性阻塞性肺病(COPD)中肺上皮细胞抗氧化能力的调节作用及机制。方法体外实验:肺上皮细胞MLE-12经H_(2)O_(2)、SIRT5过表达质粒(SIRT5-OE)或空载体(EV)处理后分为control组、H_(2)O_(2)组、SIRT5-OE组、EV组、H_(2)O_(2)+SIRT5-OE组、H_(2)O_(2)+EV组。在体实验:用烟草烟雾(CS)和脂多糖(LPS)诱导小鼠COPD模型,并分为正常组(小鼠不进行任何处理)、CS组(模型小鼠)、CS+saline组(生理盐水静脉注射到模型小鼠中)、CS+rhSIRT5组(将rhSIRT5静脉注射到模型小鼠中)、CS+rhSIRT5+SIRT5 inhibitor 1组(将rhSIRT5和SIRT5抑制剂共同注射到模型小鼠中)。按照说明书检测各组肺细胞/肺组织中丙二醛(MDA)、活性氧(ROS)、超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)的水平;流式细胞术检测细胞凋亡水平。免疫沉淀法和蛋白免疫印迹法检测柠檬酸脱氢酶2(IDH2)的琥珀酰化水平和SIRT5蛋白表达。结果与EV组相比,SIRT5-OE组抑制IDH2的琥珀酰化水平降低,SIRT5蛋白表达增加,差异均有统计学意义(P<0.05)。与control组相比,H_(2)O_(2)组中IDH2的琥珀酰化、凋亡率、MDA、ROS的水平都增加/高(P<0.05)。与H_(2)O_(2)+EV组相比,H_(2)O_(2)+SIRT5-OE组的琥珀酰化和细胞凋亡率降低,且SOD和GSH-Px水平增加,差异均有统计学意义(P<0.05)。与正常组相比,CS组肺组织中IDH2的琥珀酰化、MDA、ROS的水平均增加/高(P<0.05)。与CS+saline组相比,CS+rhSIRT5组中IDH2的琥珀酰化减少,而SOD和GSH-Px水平均增加,差异均有统计学意义(P<0.05)。与CS+rhSIRT5组相比,CS+rhSIRT5+SIRT5 inhibitor 1组中MDA、ROS的水平均增加,SOD、GSH-Px水平明显降低,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论SIRT5通过促进IDH2去琥珀酰化增加COPD小鼠肺上皮细胞的抗氧化能力。

肺上皮细胞线粒体功能障碍在机械通气肺损伤中的作用机制

目的 探讨肺上皮细胞线粒体功能障碍在机械通气肺损伤中的作用机制。方法 以RLE-6TN细胞和呼吸机所致肺损伤(VILI)模型大鼠为实验对象。体外培养RLE-6TN细胞至传代稳定,建立大鼠VILI模型,机械通气4 h后取出肺组织,采用ELISA法检测上清液中炎症因子浓度,采用透射电镜观察线粒体形态,采用Western blot法检测肺组织线粒体动力相关蛋白1(Drp1)、细胞质中Drp1和线粒体融合蛋白(Mfn2)的蛋白含量,采用琥珀酸脱氢酶(SDH)试剂盒检测SDH活力,采用荧光显微镜观察活性氧(ROS)水平和线粒体膜电位(MMP)水平。建立大鼠VILI模型,机械通气4 h后,取出肺组织,采用HE染色法观察肺组织病理学变化,测定肺组织湿干质量比值(W/D),其余方法和体外实验相同。结果 体外实验中,与对照组比较,机械牵张引起RLE-6TN细胞炎症因子表达、线粒体ROS水平升高,MMP下降,线粒体形态异常、线粒体嵴模糊,Drp1表达增加和Mfn2表达减少。体内实验中,与对照组比较,机械通气引起大鼠肺组织病理结构改变显著,肺损伤评分、W/D比值、炎症因子表达、线粒体ROS水平均显著增加,MMP下降,线粒体形态异常,Drp1表达增加和Mfn2表达减少。在体内实验和体外实验中采用SDH抑制剂丙二酸二甲酯(DMM)和ROS清除剂N-乙酰-半胱氨酸(NAC)后以上变化均有显著的逆转。结论 炎症反应、氧化应激和线粒体功能障碍参与了VILI的过程,VILI导致氧化应激以及诱导Drp1和Mfn2表达异常引起线粒体功能障碍,线粒体功能障碍的改善或许是VILI治疗的重点。

长链非编码RNA SIL对肺炎链球菌感染的肺上皮细胞增殖、凋亡及转化生长因子β1/Smads通路的影响

目的:探讨长链非编码RNA(lncRNA) SIL对肺炎链球菌感染的肺上皮细胞细胞增殖、凋亡及转化生长因子β1(TGF-β1)/Smads通路的影响。方法:运用反转录PCR(RT-PCR)检测lncRNA SIL在人肺泡上皮细胞株A549、HEPApiC、肺泡Ⅱ型细胞(AECⅡ)以及被肺炎链球菌R6感染的A549、HEPApiC、AECⅡ细胞的表达,显示其表达在R6感染的A549细胞中最高,故应用A549细胞进行后续实验。将A549细胞随机分为A549组(常规培养)、A549+R6组(用R6感染A549细胞)、lncRNA SIL mimic组(在A549细胞中转染lncRNA SIL mimic,并用R6感染细胞)和lncRNA SIL siRNA组(在A549细胞中转染lncRNA SIL siRNA,并用R6感染细胞)。采用CCK-8法检测各组细胞增殖情况。采用流式细胞仪检测各组细胞凋亡情况。采用免疫印迹法检测TGF-β1/Smads通路相关蛋白表达,并设立TGF-β1/Smads通路抑制剂组进行对照。采用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测各组炎症因子表达。结果:与A549组比较,A549+R6组lncRNA SIL表达升高(P<0.05)。与A549+R6组比较,lncRNA SIL mimic组lncRNA SIL表达升高,lncRNA SIL siRNA组表达降低(均P<0.05)。与lncRNA SIL mimic组比较,lncRNA SIL siRNA组lncRNA SIL表达降低(P<0.05)。与A549组比较,A549+R6组不同时间细胞增殖率降低(均P<0.05)。与A549+R6组比较,lncRNA SIL mimic组不同时间细胞增殖率降低,lncRNA SIL siRNA组不同时间细胞增殖率升高(均P<0.05)。与A549组比较,A549+R6组细胞凋亡率增加(P<0.05)。与A549+R6组比较,lncRNA SIL mimic组细胞凋亡率增加,lncRNA SIL siRNA组细胞凋亡率降低(均P<0.05)。与A549组比较,A549+R6组TGF-β1、Smad 2、Smad 3蛋白表达升高,Smad 6、Smad 7蛋白表达降低(均P<0.05)。与A549+R6组比较,lncRNA SIL mimic组TGF-β1、Smad 2、Smad 3蛋白表达升高,Smad 6、Smad 7蛋白表达降低(均P<0.05)。与A549+R6组比较,lncRNA SIL siRNA组TGF-β1、Smad 2、Smad 3蛋白表达降低,Smad 6、Smad 7蛋白表达升高(均P<0.05)。lncRNA SIL siRNA组与抑制剂组各指标比较差异无统计学意义(均P>0.05)。与A549组比较,A549+R6组肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白介素细胞-1β(IL-1β)、IL-6水平升高(均P<0.05)。与A549+R6组比较,lncRNA SIL mimic组TNF-α、IL-1β、IL-6水平升高,lncRNA SIL siRNA组TNF-α、IL-1β、IL-6水平降低(均P<0.05)。结论:肺炎链球菌感染后,沉默lncRNA SIL可逆转肺上皮细胞凋亡增加及增殖减少的情况,并抑制TGF-β1/Smads通路激活,减少炎症因子释放,从而抑制炎性反应。

T细胞在肺上皮细胞损伤与修复中的作用和机制

肺上皮细胞在呼吸系统中起着重要的保护作用。然而,各种病理因素如感染、创伤和炎症等可以导致肺上皮细胞的损伤,进而引发呼吸系统疾病。在肺上皮细胞损伤和修复过程中,T细胞扮演着关键角色,并通过接触或者释放多种免疫介质来参与这一过程。不同亚群的T细胞分别承担着增强抗炎反应、清除感染的致炎作用以及促进血管新生和上皮细胞增殖的修复作用。本综述旨在总结T细胞在肺上皮细胞损伤和修复中的作用,并阐述其参与肺疾病发病和缓解的可能机制。

肿瘤来源外泌体通过激活肺上皮细胞TLR3促进肺转移前微环境形成

肿瘤转移是肿瘤患者死亡的主要原因。肿瘤转移前微环境是指原发灶肿瘤能通过肿瘤来源物质动员和募集骨髓来源细胞到转移靶器官，与靶器官中基质细胞的协同作用，创造利于肿瘤细胞定居的“土壤”。多种骨髓来源细胞（如中性粒细胞等）被证实参与了转移前微环境的形成。

我国两城市空气细颗粒物PM_2.5污染及对肺上皮细胞炎性因子的影响

[目的]比较北京和太原细颗粒物PM2.5 污染水平及研究其炎性损伤毒性。[方法]选取我国具有典型污染特征的两大城市太原与北京 ,采用分级采样器和重量法收集两城市空气中细颗粒物样品 ,用甲醇超声提取细颗粒物上的B(a)P ,硝酸和过氧化氢溶解Pb ,从质量浓度、B(a)P、Pb含量等方面比较分析了两城市细颗粒物污染水平 ;同时用ELISA及RT_PCR法 ,测定细颗粒物对人肺泡上皮细胞 (A549)产生的炎性因子IL_6、TNF_α表达的影响。[结果]以美国EPA大气环境质量PM2.5 标准为参考 ,PM2.5 太原冬季、北京冬季超标率、超标倍数分别为100 % ,4.23 ;90.6 % ,2.62。太原冬季、北京冬季空气中B(a)P浓度分别为5.86 ,1.09( μg/100m3) ,均超过我国标准。总之 ,太原细颗粒物污染高于北京。细颗粒物能引起人肺上皮细胞产生炎性因子IL_6、TNF_α及其mRNA的表达增加 ,而且呈现剂量_效应关系。[结论]上述两城市的细颗粒物污染严重 。

人蛔虫Ⅱ期幼虫提取物诱导人肺上皮细胞凋亡

目的 探讨人蛔虫Ⅱ期幼虫提取物诱导体外培养的人肺上皮细胞A549凋亡 ,以及提取物浓度和作用时间与细胞凋亡的相互关系。 方法 根据四氮唑盐酶还原法 (MTT)结果 ,选用 5种不同浓度的提取物诱导人肺上皮细胞凋亡。分别在诱导后的 5个时间段 ,采用苏木素 伊红 (HE)染色盲法计数和二苯胺法检测DNA断裂率 ,观察肺上皮细胞凋亡情况。同时对某个时间和浓度组的样本 ,用DNA琼脂糖凝胶电泳和流式细胞仪检测细胞凋亡。 结果不同浓度人蛔虫Ⅱ期幼虫提取物诱导A549细胞凋亡 ,在 5h之内细胞凋亡率随提取物浓度增加而增加 ,两者呈正相关关系 ,且细胞凋亡率显著高于对照组 (P <0 0 5 ) ,5h细胞凋亡率达高峰 (65 2 % )。 结论 人蛔虫Ⅱ期幼虫提取物可诱导人肺上皮细胞凋亡 ,细胞凋亡与其提取物浓度呈明显的相关关系。在时间上表现为双向变化关系 。

百草枯诱导肺上皮细胞上皮间质转化促进肺纤维化

目的观察百草枯(PQ)诱导人肺上皮HPAEpiC细胞发生上皮间质转化(EMT)作用及其调节机制。方法MTT法计算PQ对HPAEpiC细胞的半数抑制浓度(IC50)值,计算最适合诱导HPAEpiC细胞发生EMT的浓度,Transwell检测证实PQ诱导肺上皮细胞体外迁移能力增强,酶联免疫吸附试验(ELISA)检测转化生长因子-β(TGF-β)变化。实时聚合酶链式反应(Real time-PCR)和免疫印迹法(Western blot)检测细胞EMT标志物及TGF-β下游信号通路变化。结果 PQ对HPAEpiC细胞的IC50值为95.3μmol/L,与DMSO对照组比较,PQ可以诱导肺上皮HPAEpiC细胞形态发生EMT改变,并增加其体外迁移能力,PQ可以促进肺上皮HPAEpiC细胞TGF-β的分泌,并增加其下游Smad2/3、抑制Smad7的蛋白表达;PQ也可以增加间质性标志物N-cadhenrin、波形蛋白(Vimentin)及基质金属蛋白酶2(MMP2)表达,抑制上皮性标志物E-cadherin表达。结论 PQ在促进人肺上皮HPAEpiC细胞死亡的同时促进其向EMT转化,提示PQ诱导肺纤维化的一种新机制。

丹酚酸B对肺上皮细胞凋亡和急性肺损伤的影响

目的探索丹酚酸B对肺上皮细胞凋亡和急性肺损伤的影响。方法采用Hoechst染色法和流式细胞法测定肺上皮细胞NCI-H292的凋亡率;采用内毒素脂多糖(LPS)诱导小鼠急性肺损伤炎症。结果 Hoechst染色显示丹酚酸B预处理对H2O2诱导NCI-H292细胞凋亡呈浓度依赖保护;流式细胞法测定显示与模型组对照,丹酚酸B作用后呈剂量依赖抑制H292细胞凋亡。整体试验发现丹酚酸B静脉注射均呈剂量依赖抑制LPS诱导的小鼠支气管肺炎症反应,减少支气管灌流液中白细胞总数、中性粒细胞和巨噬细胞。结论离体实验和整体实验证明丹酚酸B有明显的抗凋亡和抗炎作用,对进一步深入研究其治疗肺部炎症损伤的作用和机制具有重要意义。

周期性机械拉伸对人肺上皮细胞增殖的影响

为了研究周期性拉伸应变对人肺上皮细胞DNA合成的影响 ,应用流式细胞术对拉伸应变下的细胞增殖动力学变化进行了分析。结果表明 :在应变为 15 % ,频率为 2 0次 /min、4 0次 /min的拉伸刺激下 ,在 2 4h ,正常人支气管上皮细胞H72 7的增殖活性指数明显降低 ,细胞的DNA合成受到显著抑制 ;4 8h后 ,人肺腺癌细胞A5 49的增殖活性明显降低 ,且拉伸时间越长 ,抑制作用越强。提示周期性拉伸应变抑制人肺上皮细胞的增殖。

微小RNA靶向胰岛再生源蛋白3A对肺上皮细胞增殖和凋亡的影响

目的检测重症肺炎患儿血清中可能靶向抑制胰岛再生源蛋白3A(REG3A)的miRNA表达情况,并探究miR-137与miR-342-3p对肺上皮细胞增殖和凋亡的影响及机制。方法qRT-PCR检测重症肺炎患儿和健康儿童血清样本中相关miRNA和REG3A mRNA表达;将肺上皮细胞A549随机分为空白对照组、miR-137 NC组、miR-137 mimic组、miR-342-3p NC组、miR-342-3p mimic组,qRT-PCR检测miR-137、miR-342-3p和REG3A mRNA表达,Western blot检测REG3A、Caspase-3、Bcl-2、Bax和p53蛋白表达,双荧光素酶报告基因实验检测荧光活性,CCK-8法和EdU染色检测细胞增殖,流式细胞术检测细胞凋亡。结果重症肺炎患儿血清中miR-425-5p、miR-137、miR-325-3p、miR-342-3p、miR-203a-3p及miR-9-3p相对表达量均高于健康儿童,而REG3A mRNA相对表达量低于健康儿童(P<0.05);miR-137、miR-342-3p均与REG3A 3′-UTR存在碱基互补现象,并靶向调控其表达(P<0.05);miR-137过表达和miR-342-3p过表达均能够使A549细胞增殖活性和EdU阳性细胞率降低、细胞凋亡率升高,Caspase-3、Bax和p53蛋白表达增加而Bcl-2蛋白表达减少(P<0.05)。结论miR-137和miR-342-3p可能通过靶向REG3A抑制肺上皮细胞增殖,并促进细胞凋亡。

阿托伐他汀对脂多糖诱导下人肺上皮细胞C反应蛋白表达的影响

目的:探讨阿托伐他汀能否调节脂多糖(LPS)诱导下人肺上皮细胞CRP的表达。方法:对LPS诱导的人肺上皮细胞给予不同浓度的阿托伐他汀干预,同时设置对照组,分别提取细胞RNA,采用RT-PCR方法比较CRP mRNA表达;收集培养上清液,采用ELISA方法比较CRP的浓度。结果:在LPS诱导下,人肺上皮细胞有CRP mRNA的表达及蛋白的分泌,并呈时间和剂量依赖关系;阿托伐他汀明显降低LPS诱导下人肺上皮细胞CRPmRNA的表达及蛋白的分泌,并呈剂量依赖关系。结论:阿托伐他汀能降低LPS诱导的人肺上皮细胞CRP mRNA表达及蛋白分泌,提示阿托伐他汀可能具有直接抗炎作用。

降钙素基因相关肽对LPS诱导肺上皮细胞炎症因子的影响

目的探讨降钙素基因相关肽(CGRP)对脂多糖(LPS)诱导大鼠肺上皮细胞分泌炎症因子的影响.方法对经LPS诱导的大鼠肺上皮MLE12细胞给予不同浓度的CGRP干预,同时设立对照组,分别收集上清液,采用酶联免疫法(ELISA)测定LPS、CGRP或二者联合干预后肺上皮MLE-12细胞分泌炎症因子的变化.结果正常MLE12细胞分泌CGRP较少,但LPS诱导后CGRP的分泌明显升高,且呈现一定的浓度和时间依赖性.LPS能够诱导MLE-12细胞中炎症因子的分泌,外源性CGRP对MLE12细胞分泌炎症因子没有影响,内源性CGRP拮抗剂可以阻断某些炎症因子的分泌.结论内源性CGRP可明显下调LPS诱导的MLE12细胞中炎症因子的分泌.

激光扫描共聚焦显微镜观察胰蛋白酶对肺上皮细胞游离钙离子的影响

目的:研究PAR-2激动剂SLIGKV和tc-LIGRLO、胰蛋白酶及其抑制剂对H292肺上皮细胞[Ca2+]i的影响。方法:应用Fluo-3/AM荧光标记技术和激光扫描共聚焦显微镜(LSCM)检测不同因素处理的H292肺上皮细胞[Ca2+]i。结果:胰蛋白酶、SLIGKVt、c-LIGRLO均能引发H292细胞[Ca2+]i的增加,平均荧光强度分别比加入药物前增加267%,60%和37%。胰蛋白酶抑制剂大豆胰蛋白酶抑制剂(SBTI)和α1-抗胰蛋白酶(α1-AT)可以抑制胰蛋白酶诱导的细胞[Ca2+]i的增加。结论:PAR-2可以介导H292肺上皮细胞[Ca2+]i的释放增加,胰蛋白酶抑制剂可以抑制胰蛋白酶诱导的细胞[Ca2+]i的增加。

广佛手对脂多糖诱导的人肺上皮细胞炎症细胞因子调控的影响

目的:探讨广佛手对脂多糖诱导的肺上皮细胞炎症细胞因子的调控作用。方法:不同浓度广佛手水提取物和醇提取物作用于肺上皮细胞A549细胞后,采用CCK8法检测广佛手水提取物和醇提取物对A549细胞活力的影响;以脂多糖(10μg/m L)作用于培养的A549细胞,同时加入广佛手提取物,24 h后ELISA法测定上清液IL-8和IL-10的含量。结果:广佛手水提取物和醇提取物对A549细胞活力影响无统计学意义(P>0. 05);脂多糖作用肺上皮细胞后,IL-8和IL-10释放均增加(P <0. 01),广佛手水提取物和醇提取物可减少脂多糖诱导的IL-8释放增加(P <0. 01),广佛手水提取物在LPS诱导后IL-10分泌明显增加(P <0. 01),而广佛手醇提取物对LPS诱导的IL-10分泌增加呈抑制作用(P <0. 01)。结论:广佛手水提取物和醇提取物对肺上皮细胞无损伤作用,对脂多糖造成的急性肺损伤模型有抑制促炎因子的释放和增加抗炎因子的释放双重保护作用。