3、4-二羟基苯乙酮对大鼠肺内动脉平滑肌细胞钾电流的影响

目的 研究 3、4 二羟基苯乙酮 (3、4 Dihydroxyace tophenone,DHAP)对钾通道的作用。 方法 建立大鼠肺内动脉平滑肌全细胞膜片钳方法并观察 3、4 二羟基苯乙酮对大鼠肺内动脉平滑肌细胞钾离子通道的作用。结果 ①将平滑肌细胞钳制在 - 4 0mV ,给予从 - 30mV复极化至 +6 0mV、阶跃电压为 10mV、脉冲时间是 30 0ms的去极化刺激10次时 ,可记录到时间及电压依赖性的延迟整流钾电流。②在指令电位 +5 0mV、+6 0mV时 ,细胞外给予 10 -6mol·L-1DHAP 5min后 ,可使该电流由用药前 (12 97± 2 4 5 )、(16 83± 3 2 8)pA/pF ,增加至 (18 2 9± 2 6 3)、(2 2 90±3 2 1)pA/pF ,增加百分比为 4 1%和 36 % (P <0 0 5 ,n =6 )。结论 DHAP可能通过开放钾通道而舒张肺内动脉平滑肌细胞 ,这可能是其降低肺动脉高压的重要机制之一。

大鼠肺内动脉平滑肌细胞钾通道的研究

目的 研究大鼠肺内动脉平滑肌细胞钾电流。方法 用急性酶解分离法得到单个大鼠肺内动脉平滑肌细胞 ,采用膜片钳全细胞记录方式研究钾通道特性。结果 将平滑肌细胞钳制在 - 70mV ,给予 - 70～ 5 0mV的斜坡刺激 ,时间为 6 0 0ms。可引出一随电压逐渐增大的电流 ,在 + 5 0mV时其值为 35 9± 31pA。细胞内用CsCl取代KCl后 ,该电流几乎完全消失 ;细胞外用无钙台氏液灌流 ,电极内液用高浓度的EGTA时 ,电流可被抑制 5 0 %± 1% ;细胞外给予特异性钙激活钾通道阻断剂TEA和延迟整流钾通道阻断剂 4 AP均可使该电流明显下降。

新型ATP敏感性钾通道开放剂Iptakalim对慢性缺氧大鼠肺内动脉平滑肌细胞钾电流的影响

目的探讨慢性缺氧对大鼠肺内动脉平滑肌细胞外向性钾电流的影响,及新型ATP敏感性钾（KATP）通道开放剂Iptakalim对此时钾电流的作用。方法SD雄性大鼠28只随机分成正常组、缺氧组[O2（10±0.5）%]、低剂量治疗组（每日缺氧前30min Iptakalim0.75mg·kg^-1灌胃）、高剂量治疗组（每日缺氧前30min Iptakalim1.5mg·kg^-1灌胃）,将缺氧组和已灌胃的大鼠放入常压缺氧舱制作动物模型。4周后,急性分离大鼠动脉平滑肌细胞,用膜片钳全细胞记录技术记录细胞外向性钾电流;通过浴槽内给药,观察Iptakalim对钾电流的影响。结果Iptakalim0.1,1,10,100μmol/L呈浓度依赖性增加正常大鼠肺内动脉平滑肌外向钾电流,格列本脲30μmol/L可拮抗Iptakalim10μmol/L对钾电流的增强作用;与对照组大鼠相比,慢性缺氧大鼠肺内动脉平滑肌细胞钾电流下降,电流密度减小（690±450）pA/pFvs（420±250）pA/pF（P〈0.01）,膜电容增大到（4.29±1.78）pF（P〈0.01）,电流-电压（I-V）曲线下移;与缺血氧组相比,每日缺氧前口服Iptakalim,细胞膜电容减小为（3.09±1.71）（P〈0.01）,电流密度增大到（610±320）pA/pF（P〈0.01）。结论慢性缺氧抑制大鼠肺内动脉平滑肌细胞钾通道,灌服Iptakalim可拮抗慢性缺氧对KATP通道的抑制作用。