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脂多糖生物探针法与传统培养法检测水中嗜肺军团菌的比较
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作者 张雅婕 林华 +9 位作者 周少磊 田竞 贾予平 曹文婧 何立伟 姚晓慧 刘晋源 高斌 张永 沈凡 《环境卫生学杂志》 2024年第9期788-792,共5页
目的比较脂多糖生物探针法和传统培养法(包括ISO 11731-2017法即“ISO法”、GB/T 18204.5-2013法即“国标法”)对水中嗜肺军团菌(Legionella pneumophila)的检测能力。方法分别采用脂多糖生物探针法和传统培养法对58份加标水样(其中50... 目的比较脂多糖生物探针法和传统培养法(包括ISO 11731-2017法即“ISO法”、GB/T 18204.5-2013法即“国标法”)对水中嗜肺军团菌(Legionella pneumophila)的检测能力。方法分别采用脂多糖生物探针法和传统培养法对58份加标水样(其中50份为实际水样加标用于以上两类方法比对测试,8份为纯水加标用于脂多糖生物探针法的方法学性能测试)和50份实际水样进行检测,确定脂多糖生物探针法的检出限、准确度、精密度、特异性和灵敏度,并比较两类方法对50份实际水样加标前的定性结果和50份实际水样加标前后的定量结果。结果脂多糖生物探针法检出限为1.55 CFU/L,准确度为102.10%~139.29%,精密度为0.14%~1.78%,特异性为95.12%,灵敏度为88.89%。50份实际水样加标前脂多糖生物探针法和国标法两种方法(检出或未检出)的定性结果无统计学差异(P>0.05);50份实际水样加标前后脂多糖生物探针法定量结果的中位数(M)高于ISO法测定结果,差异具有统计学差异(P<0.001),两类方法测定结果存在相关(r=0.981)。脂多糖生物探针法检出限(1.55 CFU/L)低于ISO法的(15.74 CFU/L),检测时间(2 d)短于ISO法(10 d)。结论与传统培养法相比,脂多糖生物探针法耗时短,检测性能更优。 展开更多
关键词 肺军团菌 脂多糖生物探针法
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以阵发性交感神经过度兴奋综合征为主要表现的嗜肺军团菌相关脑病一例报告
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作者 孙亮 王佳伟 杨庆林 《北京医学》 CAS 2024年第5期440-442,共3页
患者男,35岁,因“发热,精神行为异常8 d”于2024年2月21日就诊于首都医科大学附属北京同仁医院急诊科。8 d前出现发热,与家人及同事无法正常交流;3 d前意识模糊、问答不切题,答非所问。不能行走,伴有二便失禁,抽搐史不详;体温最高40℃,... 患者男,35岁,因“发热,精神行为异常8 d”于2024年2月21日就诊于首都医科大学附属北京同仁医院急诊科。8 d前出现发热,与家人及同事无法正常交流;3 d前意识模糊、问答不切题,答非所问。不能行走,伴有二便失禁,抽搐史不详;体温最高40℃,入院诊断“肺部感染、颅内感染待除外”,患者高热、躁动、大汗,阵发性浅快呼吸(12~50次/min)及HR波动(窦性节律、110~140次/min),间断肌注赖氨匹林(国药准字:H34022437,规格:0.9 g)0.9 g,体温39~40℃。给予抗感染、高流量吸氧及物理降温治疗后症状无缓解。给予丙泊酚等药物镇静,气管插管呼吸机辅助通气治疗。 展开更多
关键词 高流量吸氧 二便失禁 窦性节律 辅助通气治疗 赖氨匹林 急诊科 肺军团菌 间断肌注
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2023年中南某市夏季公共场所嗜肺军团菌污染状况
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作者 奚伟豪 桂卓嘉 +12 位作者 葛覃兮 罗姣 邵冉起 李峰 程淑燕 周纯良 彭蔚 彭敏兰 杨敏 张必科 王先良 姚孝元 苏丽琴 《环境卫生学杂志》 2024年第10期866-870,共5页
目的了解2023年中南某市三类公共场所嗜肺军团菌污染状况,分析健康风险。方法于2023年7月采取非随机抽样方法在在中南某市三类公共场所采集集中空调水样、室内空气样本,以及公共设施物体表面样本进行检测和分析。采用培养法对集中空调... 目的了解2023年中南某市三类公共场所嗜肺军团菌污染状况,分析健康风险。方法于2023年7月采取非随机抽样方法在在中南某市三类公共场所采集集中空调水样、室内空气样本,以及公共设施物体表面样本进行检测和分析。采用培养法对集中空调冷却水和冷凝水嗜肺军团菌进行检测;采用荧光定量PCR对室内空气以及物体表面嗜肺军团菌进行检测。利用Fisher确切概率法用于评估水样类型、场所类型与健康风险等级的相关性。结果调查中共采集集中空调水样24份、室内空气样本213份以及公共设施物体表面样本282份。培养法检测结果显示,集中空调水样的总体阳性率为37.5%,其中冷却水的阳性率为55.6%(5/9),冷凝水的阳性率为26.7%(4/15)。其中,地铁站的集中空调水样阳性率为27.3%(3/11),宾馆的阳性率为66.7%(6/9),火车站水样中未检测出嗜肺军团菌(0/4)。风险分析发现,冷却水的高风险率为55.6%(5/9),冷凝水的高风险率为20.0%(3/15);地铁和宾馆水样的高风险率分别为27.3%(3/11)和55.6%(5/9)。荧光定量PCR结果显示,公共场所的室内空气和物体表面的检测结果均为阴性,中高风险率为0%。结论三类公共场所中,地铁和宾馆嗜肺军团菌阳性率较高,冷却水和冷凝水中均有较高检出率。 展开更多
关键词 肺军团菌 公共场所 冷却水 冷凝水
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嗜肺军团菌效应蛋白Lpg1972与CNOT7相互作用研究 被引量:1
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作者 刘子赫 吴书娴 甄向凯 《福建师范大学学报(自然科学版)》 CAS 北大核心 2024年第1期23-33,共11页
嗜肺军团菌是一种寄生在真核细胞内的革兰氏阴性致病菌,其致病性主要是依靠IVB型分泌系统分泌的330多种效应蛋白,效应蛋白之间彼此协作共同干扰真核宿主细胞的各种细胞活动.嗜肺军团菌效应蛋白Lpg1972与真核细胞Ccr4-Not复合物中的CNOT... 嗜肺军团菌是一种寄生在真核细胞内的革兰氏阴性致病菌,其致病性主要是依靠IVB型分泌系统分泌的330多种效应蛋白,效应蛋白之间彼此协作共同干扰真核宿主细胞的各种细胞活动.嗜肺军团菌效应蛋白Lpg1972与真核细胞Ccr4-Not复合物中的CNOT7亚基存在相互作用,而Ccr4-Not复合物是真核细胞中调控mRNA降解的关键蛋白。基于此通过分子生物学的手段验证了它们之间的相互作用,设计共表达载体纯化了复合物蛋白,并利用AlphaFold2对复合物的结构和相互作用进行了预测分析,为后续研究奠定了基础。 展开更多
关键词 肺军团菌 大肠杆菌 Ccr4-Not复合物 相互作用
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福建省嗜肺军团菌血清1型及血清6型菌株PFGE分型研究 被引量:8
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作者 原灵 陈爱平 +1 位作者 杨劲松 林震宇 《中国人兽共患病学报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第5期461-463,共3页
目的研究福建省2008年至2010年公共场所空调冷却塔水及冷凝水中分离的嗜肺军团菌血清Ⅰ型(LP1)及血清Ⅵ型(LP6)的基因特征。方法应用脉冲场凝胶电泳(pulsed-field gel electrophoresis,PFGE)技术对57株LP1型军团菌及15株LP6军团菌进行电... 目的研究福建省2008年至2010年公共场所空调冷却塔水及冷凝水中分离的嗜肺军团菌血清Ⅰ型(LP1)及血清Ⅵ型(LP6)的基因特征。方法应用脉冲场凝胶电泳(pulsed-field gel electrophoresis,PFGE)技术对57株LP1型军团菌及15株LP6军团菌进行电泳,并用BioNumerics(version 6.0,Applied Maths,Inc)软件包对其进行聚类分析。结果 57株LP1军团菌可分为40种PFGE型,菌株间相似性系数在24.107%~100.000%之间不等,大部分菌株的PFGE型别差异明显,无优势型别。不同地区分离的LP1军团菌既有差异较大的带型,也存在相同和相似的带型;相同地区,菌株间相似性系数存在差异,无优势菌株。15株LP6军团菌可分为12个不同的PFGE型别,菌株间相似性系数在27.87%~100.00%之间。结论 2008-2010年福建省公共场所空调冷却塔水及冷凝水中分离的LP1及LP6军团菌呈现基因多样性。 展开更多
关键词 肺军团菌1型 肺军团菌6型 脉冲场凝胶电泳 指纹图谱 PFGE型
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嗜肺军团菌与非嗜肺军团菌所致社区获得性肺炎的临床对比分析 被引量:9
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作者 金建敏 张沪生 陈东宁 《首都医科大学学报》 CAS 2008年第3期348-353,共6页
目的探讨嗜肺军团菌与非嗜肺军团菌感染所致社区获得性肺炎的临床特点,提高对军团菌肺炎的认识。方法采用双重聚合酶链反应(DPCR)法对根据临床表现及血清抗体结果,临床诊断为军团菌肺炎患者的痰标本进行军团菌DNA检测。选择痰DPCR和血... 目的探讨嗜肺军团菌与非嗜肺军团菌感染所致社区获得性肺炎的临床特点,提高对军团菌肺炎的认识。方法采用双重聚合酶链反应(DPCR)法对根据临床表现及血清抗体结果,临床诊断为军团菌肺炎患者的痰标本进行军团菌DNA检测。选择痰DPCR和血清抗体结果呈一致阳性的患者并根据检测结果将其分为嗜肺军团菌肺炎组(42例)和非嗜肺军团菌肺炎组(18例)。将2组患者的临床资料进行对比分析。结果痰标本DPCR结果与血清特异性抗体结果呈一致阳性,嗜肺军团菌肺炎与非嗜肺军团菌肺炎诊断明确。嗜肺军团菌肺炎多发于既往体健的青壮年,主要发病于夏秋季;非嗜肺军团菌倾向于四季散发,多发于有基础疾病的老年人。与非嗜肺军团菌肺炎相比,嗜肺军团菌肺炎患者的肺脏受累面积较大,胸腔积液及ARDS发病率高,同时全身感染中毒症状和肺外表现更为明显(P<0.05)。结论嗜肺与非嗜肺军团菌感染所致社区获得性肺炎临床特点有所不同,早期予大环内酯类/喹诺酮类抗生素治疗是改善预后的关键手段。 展开更多
关键词 社区获得性 肺军团菌 非嗜肺军团菌 双重聚合酶链反应
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嗜肺军团菌抗体在儿童嗜肺军团菌感染性肺炎诊断中的价值 被引量:2
7
作者 彭心华 肖桂珍 《检验医学与临床》 CAS 2013年第11期1420-1420,共1页
目的探讨嗜肺军团菌(LP)抗体在儿童LP感染性肺炎诊断中的价值。方法对547例以发热为主要症状或具有急性呼吸道感染症状的患儿,采用间接免疫荧光法检测血清LP-IgM。结果 547例患儿LP-IgM阳性率为10.2%(56/547);56例LP-IgM阳性患儿中,LP... 目的探讨嗜肺军团菌(LP)抗体在儿童LP感染性肺炎诊断中的价值。方法对547例以发热为主要症状或具有急性呼吸道感染症状的患儿,采用间接免疫荧光法检测血清LP-IgM。结果 547例患儿LP-IgM阳性率为10.2%(56/547);56例LP-IgM阳性患儿中,LP感染性肺炎确诊率为62.5%(35/56)。结论血清LP-IgM检测对儿童LP感染性肺炎有良好的诊断价值,但存在一定数量的假阳性结果;LP感染性肺炎的确诊必须结合患儿临床症状及其他检查。 展开更多
关键词 肺军团菌抗体 肺军团菌感染性 间接免疫荧光法
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重组嗜肺军团菌鞭毛蛋白A(rflaA)体外诱导小鼠RAW264.7巨噬细胞分泌IL-6和IL-1β 被引量:3
8
作者 佳莉娟 曹秀琴 杨志伟 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2017年第5期601-605,共5页
目的探讨重组嗜肺军团菌鞭毛蛋白A(rflaA)对RAW264.7巨噬细胞分泌白细胞介素6(IL-6)、IL-1β的影响及其机制。方法采用(0.000、0.125、0.250、0.500、1.000、2.000、4.000、8.000)μg/mL rflaA处理RAW264.7细胞,并设细胞对照组,用CCK-8... 目的探讨重组嗜肺军团菌鞭毛蛋白A(rflaA)对RAW264.7巨噬细胞分泌白细胞介素6(IL-6)、IL-1β的影响及其机制。方法采用(0.000、0.125、0.250、0.500、1.000、2.000、4.000、8.000)μg/mL rflaA处理RAW264.7细胞,并设细胞对照组,用CCK-8法确定rflaA的半数效应剂量(EC_(50))。采用(0.04、0.08、0.16)μg/mL rflaA处理RAW264.7细胞24、36、48 h,采用ELISA检测IL-6、IL-1β分泌水平;(0.04、0.08、0.16)μg/mL rflaA处理RAW264.7细胞6、12、24、36、48 h,收集细胞,实时定量PCR检测IL-6、IL-1β、NOD样受体蛋白3(NLRP3)、胱天蛋白酶1(caspase-1)mRNA的含量;Western blot法检测NLRP3、caspase-1蛋白水平。结果 rflaA可促进RAW264.7细胞因子分泌,RAW264.7细胞被不同剂量的rflaA作用24、36、48 h,随rflaA剂量的递增,IL-6、IL-1β水平增加,以0.16μg/mL剂量时作用最显著,36 h达高峰;rflaA可增加RAW264.7细胞的IL-6、IL-1β、NLRP3、caspase-1 RNA水平,0.16μg/mL rflaA作用最显著,12 h达高峰;RAW264.7细胞被不同剂量的rflaA作用6、12、24、36 h,随rflaA剂量增加NLRP3、caspase-1表达水平增加,以0.16μg/mL剂量时作用最显著,24 h达高峰。结论 rflaA通过刺激NLRP3、caspase-1而增加RAW264.7细胞IL-6、IL-1β的分泌。 展开更多
关键词 肺军团菌 重组嗜肺军团菌鞭毛蛋白(rflaA) 巨噬细胞 细胞因子
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广东地区环境水源和临床标本嗜肺军团菌培养与基因快速鉴定 被引量:29
9
作者 朱庆义 胡朝晖 +4 位作者 梁耀铭 潘文刚 刘元力 梁卫桥 王军 《中华医院感染学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2006年第1期19-22,共4页
目的建立嗜肺军团菌培养与基因快速鉴定方法,探讨广东地区环境水源和非典型肺炎患者嗜肺军团菌感染状况。方法对广东地区采集的57份中央空调冷凝塔水、30份湖泊水和53份临床标本,用本室改良BCYE-α培养基作培养和PCR试验。结果57份中央... 目的建立嗜肺军团菌培养与基因快速鉴定方法,探讨广东地区环境水源和非典型肺炎患者嗜肺军团菌感染状况。方法对广东地区采集的57份中央空调冷凝塔水、30份湖泊水和53份临床标本,用本室改良BCYE-α培养基作培养和PCR试验。结果57份中央空调冷凝塔水培养检出嗜肺军团菌20株(35.1%),PCR检测LP-DNA阳性38份(66.7%);30份湖泊水细菌培养均阴性,PCR阳性4份(13.3%);53例非典型肺炎患者支气管洗液和痰液细菌培养均阴性,PCR阳性5例(9.4%);本实验设计的PCR扩增引物,只和标准嗜肺军团菌和本地分离株产生反应;不与其他病原菌扩增,而显示其良好特异性;本PCR敏感性可检出检体中0.6个细菌DNA含量。结论广东地区环境水源中普遍存在嗜肺军团菌,是引起非典型肺炎的重要病源之一。 展开更多
关键词 肺军团菌 环境水源 非典型 快速鉴定
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水中嗜肺军团菌分布规律研究 被引量:17
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作者 刘洪亮 侯常春 +2 位作者 徐瑛 黄爱华 陈学敏 《卫生研究》 CAS CSCD 北大核心 2004年第4期416-419,共4页
目的 探讨水环境中嗜肺军团菌分布规律及分型特征。方法 采集自然环境及生活环境中各主要水体样品 ,浓缩后经常规细菌培养后的疑似菌株 ,用血清学鉴定与 1 6SrRNA半套式PCR技术双重鉴定进行军团菌和嗜肺军团菌的分型。结果 全部 1 2 ... 目的 探讨水环境中嗜肺军团菌分布规律及分型特征。方法 采集自然环境及生活环境中各主要水体样品 ,浓缩后经常规细菌培养后的疑似菌株 ,用血清学鉴定与 1 6SrRNA半套式PCR技术双重鉴定进行军团菌和嗜肺军团菌的分型。结果 全部 1 2 6个监测点水样有 2 8个出现军团菌阳性 (其中嗜肺军团菌 2 1个 ) ;自然环境及生活环境监测点军团菌阳性率分别为 32 1 %、2 2 2 % (其中嗜肺军团菌阳性率分别为2 1 4 %、1 6 7% ) ;全年 4 30份水样有 36份军团菌阳性 (其中 2 3份为嗜肺军团菌 ) ,夏、秋季检出率较高 ,春、冬季也有检出 ;空调冷却塔水、淋浴喷头水、公园湖水检出率较高。结论 嗜肺军团菌在自然环境及生活环境各水体中分布广泛。环境温度是军团菌污染的重要因素 ,夏、秋季是军团菌污染和军团病传播的高发季节 ,春、冬季也可发生。公园娱乐水体、空调冷却水、淋浴喷头水等与人群密切接触水体是军团菌污染和军团病传播的高危水体。 展开更多
关键词 水环境 肺军团菌 分布规律 分子标记
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嗜肺军团菌荧光定量PCR检测 被引量:17
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作者 朱水荣 张政 +3 位作者 卢亦愚 任红宇 扬仕贵 高晓萍 《中国公共卫生》 CAS CSCD 北大核心 2008年第9期1111-1113,共3页
目的建立特异、快速、敏感的TaqMan探针荧光定量PCR方法,用于检测嗜肺军团菌mip基因。方法嗜肺军团菌及其他军团菌DNA模板来自中国疾病预防控制中心呼吸道室,嗜肺军团菌地方株及其他对照株由本中心菌种室供给。利用嗜肺军团菌mip基因保... 目的建立特异、快速、敏感的TaqMan探针荧光定量PCR方法,用于检测嗜肺军团菌mip基因。方法嗜肺军团菌及其他军团菌DNA模板来自中国疾病预防控制中心呼吸道室,嗜肺军团菌地方株及其他对照株由本中心菌种室供给。利用嗜肺军团菌mip基因保守序列设计引物和TaqMan探针,对其进行筛选,同时对荧光定量PCR反应条件和反应体系进行优化,并对嗜肺军团菌、非嗜肺军团菌及其他细菌进行检测,验证该方法的特异性、敏感性、重复性等。结果该方法在检测多株嗜肺军团菌时,均出现阳性信号,而对非嗜肺军团菌和其他细菌则未有阳性扩增结果出现。检测灵敏度达10个拷贝/反应,从菌株核酸的提取至检测完成仅需2 h左右,可减少常规PCR操作的污染机会。结论TaqMan荧光定量PCR方法可定量检测嗜肺军团菌,具有特异性高、快速、敏感等特点,适于外环境污染源状况的调查及应急事件的快速定量检测。 展开更多
关键词 肺军团菌 MIP基因 TAQMAN探针 荧光定量PCR
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广东地区嗜肺军团菌的扩增片段长度多态性分析 被引量:13
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作者 胡朝晖 屈平华 +1 位作者 刘元力 朱庆义 《微生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2008年第12期1659-1665,共7页
【目的】了解广东部分地区2002~2007年环境水中嗜肺军团菌的基因型及遗传学关系。【方法】参考欧洲军团菌感染工作组(the European Working Group for Legionella Infections,EWGLI)制定的分型草案(1.2版),采用PstⅠ酶对我室保存的2株... 【目的】了解广东部分地区2002~2007年环境水中嗜肺军团菌的基因型及遗传学关系。【方法】参考欧洲军团菌感染工作组(the European Working Group for Legionella Infections,EWGLI)制定的分型草案(1.2版),采用PstⅠ酶对我室保存的2株标准菌株及41株不同时间、不同地点的嗜肺军团菌环境分离株进行扩增片段长度多态性(amplified fragment length polymorphism,AFLP)分析,电泳图谱与EWGLI进行比对。【结果】AFLP分型结果稳定,重复性好;43株嗜肺军团菌,其不同来源菌株呈现多态性分布,经AFLP分析得到33个基因型,辨别力指数为99.79%,其中Kingmed AFLP 011为优势基因型。按Dice系数≥0.8,可分为18个群,Kingmed AFLPD群为优势群,占总菌株数的34.88%。由电泳图谱的相似性,初步推断存在EWGLI 001 Lugano型、002 Lugano、012 Rome、013 London、014 London型、015 Dresden型、021 Lyon等7个基因型,以及多个未报道的新基因型。【结论】广东地区嗜肺军团菌的基因型十分丰富,AFLP技术是其分子流行病学研究的有效手段。 展开更多
关键词 肺军团菌 基因分型 扩增片段长度多态性
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嗜肺军团菌mip/ctxB融合基因体外表达与动物免疫试验的免疫原性研究 被引量:7
13
作者 王涛 陈建平 +3 位作者 郅克谦 陶大昌 杨春蕾 张雷 《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2004年第9期818-823,共6页
PCR扩增嗜肺军团菌mip基因和霍乱弧菌ctxB基因,克隆入载体pcDNA3 1( +),重组子经限制性酶切分析、PCR、序列分析鉴定正确后,命名为pcDNA3 1 mip/ctxB.脂质体法将重组质粒pcDNA3 1 mip、pcDNA3 1 mip/ctxB转染NIH3T3细胞,用免疫荧光法和... PCR扩增嗜肺军团菌mip基因和霍乱弧菌ctxB基因,克隆入载体pcDNA3 1( +),重组子经限制性酶切分析、PCR、序列分析鉴定正确后,命名为pcDNA3 1 mip/ctxB.脂质体法将重组质粒pcDNA3 1 mip、pcDNA3 1 mip/ctxB转染NIH3T3细胞,用免疫荧光法和蛋白质印迹鉴定瞬时表达和稳定表达产物,结果发现:重组质粒成功转入细胞并获得短暂表达,稳定转染细胞分别在 2 4ku和 35ku处检测到阳性杂交信号.将pcDNA3 1 mip、pcDNA3 1 mip/ctxB作为DNA疫苗免疫BALB/c小鼠,检测免疫小鼠体内抗原特异性抗体水平、脾淋巴细胞增殖活性、IFN γ产生水平、细胞毒性T淋巴细胞(CTL)杀伤活性等体液免疫和细胞免疫反应的指标,评价疫苗的免疫原性.结果发现:各实验组均检测到免疫原性,pcDNA3 1 mip/ctxB免疫组的免疫原性高于pcDNA3 1 mip免疫组,有显著性差异(P <0 0 1). 展开更多
关键词 肺军团菌 霍乱弧菌 mip/ctxB融合基因 体外表达 免疫原性
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嗜肺军团菌主要外膜蛋白与鞭毛亚单位蛋白双基因融合表达载体的构建及其诱导表达 被引量:5
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作者 张雷 陈建平 +3 位作者 张莉 王涛 刘德松 田玉 《中国人兽共患病学报》 CAS CSCD 北大核心 2006年第3期216-220,共5页
目的构建嗜肺军团菌主要外膜蛋白S基因(mompS)与鞭毛亚单位蛋白基因(flaA)的融合表达载体,并在原核系统表达。方法以嗜肺军团菌1型DNA为模板,PCR分别扩增获得嗜肺军团菌mompS基因和flaA基因,与带有硫氧还蛋白(Trx)基因的高效原核表达质... 目的构建嗜肺军团菌主要外膜蛋白S基因(mompS)与鞭毛亚单位蛋白基因(flaA)的融合表达载体,并在原核系统表达。方法以嗜肺军团菌1型DNA为模板,PCR分别扩增获得嗜肺军团菌mompS基因和flaA基因,与带有硫氧还蛋白(Trx)基因的高效原核表达质粒pET32a(+)定向重组,构建mompS与flaA基因完全融合的重组质粒,经限制性核酸内切酶酶切鉴定、PCR和核酸序列分析后,以IPTG诱导表达Trx-MOMPS-FlaA融合蛋白,用SDS-PAGE及Western blot进行鉴定。结果限制性核酸内切酶酶切鉴定、PCR和核酸序列分析表明,扩增出了嗜肺军团菌904bp的mompS及1432bp的flaA基因,成功构建了重组质粒pET-LpSF,SDS-PAGE及Western blot分析显示重组质粒pET-LpSF在原核系统中得到了表达。结论成功构建了嗜肺军团菌mompS-flaA双基因的原核融合表达载体,并在大肠杆菌中得到了表达,为进一步研究嗜肺军团菌核酸双价疫苗提供研究基础。 展开更多
关键词 肺军团菌 mompS-flaA融合基因 克隆 表达
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社区获得性嗜肺军团菌肺炎治疗的抗菌药物使用分析 被引量:13
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作者 薛洪源 葛向华 +1 位作者 蔡长春 闫成 《中国感染与化疗杂志》 CAS 北大核心 2012年第5期348-351,共4页
目的探讨社区获得性嗜肺军团菌肺炎抗菌治疗的疗效,为临床治疗嗜肺军团菌感染提供依据。方法调查38例确诊嗜肺军团菌肺炎患者使用左氧氟沙星联合大环内酯类抗生素治疗后的转归及临床特点,分析联合用药、疗程、不良反应等情况。结果 38... 目的探讨社区获得性嗜肺军团菌肺炎抗菌治疗的疗效,为临床治疗嗜肺军团菌感染提供依据。方法调查38例确诊嗜肺军团菌肺炎患者使用左氧氟沙星联合大环内酯类抗生素治疗后的转归及临床特点,分析联合用药、疗程、不良反应等情况。结果 38例患者治疗后痊愈,给药后(2.2±1.1)d体温降为正常,总住院时间(23.5±13.5)d,治疗后未出现严重不良反应。结论选用左氧氟沙星联合大环内酯类抗生素序贯治疗社区获得性嗜肺军团菌肺炎,疗效确切,不良反应少。 展开更多
关键词 肺军团菌 左氧氟沙星 大环内酯类 抗菌药物 序贯治疗
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温泉水中嗜肺军团菌污染调查及分子分型研究 被引量:5
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作者 章乐怡 李毅 +4 位作者 上官智慧 吴跃进 谢爱蓉 王良怀 陈文斌 《中国人兽共患病学报》 CAS CSCD 北大核心 2016年第12期1096-1101,共6页
目的探讨温泉水环境中嗜肺军团菌的污染状况和分布规律,了解其主要血清型别及基因型别。方法采取随机抽样方法采集温泉场所蓄水池、温泉池、客房淋浴水等,浓缩后用细菌培养法分离得到可疑菌株,用血清学与荧光定量PCR技术进行嗜肺军团菌... 目的探讨温泉水环境中嗜肺军团菌的污染状况和分布规律,了解其主要血清型别及基因型别。方法采取随机抽样方法采集温泉场所蓄水池、温泉池、客房淋浴水等,浓缩后用细菌培养法分离得到可疑菌株,用血清学与荧光定量PCR技术进行嗜肺军团菌的鉴定。对分离的菌株用脉冲场凝胶电泳(PFGE)和多位点序列分型方法(SBT)进行基因分型。结果65份温泉水中35份检出嗜肺军团菌,检出率为53.85%。嗜肺军团菌计数范围在20CFU/100mL-16 000CFU/100mL之间。血清分型以LP1、LP3为主。分离的嗜肺军团菌菌株均携带dot基因。对40株嗜肺军团菌菌株进行了PFGE聚类分析,得到10种不同的带型。40株菌株13种ST型可以被分为3个克隆群和1个单态群。结论本地区温泉水嗜肺军团菌污染程度较高,分子分型结果表明这些菌株具有遗传多样性。 展开更多
关键词 温泉水 肺军团菌 分子分型 遗传多样性
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嗜肺军团菌flaA基因的克隆及原核融合表达 被引量:5
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作者 张雷 陈建平 +3 位作者 张莉 王涛 刘明杰 田玉 《四川大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2007年第2期194-197,共4页
目的构建嗜肺军团菌鞭毛亚单位蛋白基因(flaA)的融合表达载体,并在原核系统表达,为进一步研究鞭毛亚单位蛋白的致病作用和免疫保护性提供前提条件。方法以嗜肺军团菌1型DNA为模板,PCR扩增获得嗜肺军团菌flaA基因,与带有硫氧还蛋白基因(T... 目的构建嗜肺军团菌鞭毛亚单位蛋白基因(flaA)的融合表达载体,并在原核系统表达,为进一步研究鞭毛亚单位蛋白的致病作用和免疫保护性提供前提条件。方法以嗜肺军团菌1型DNA为模板,PCR扩增获得嗜肺军团菌flaA基因,与带有硫氧还蛋白基因(Trx)的高效原核表达质粒pET32a(+)定向重组,构建重组质粒,转化大肠杆菌BL21(DE3),并经限制性核酸内切酶酶切鉴定、PCR和核酸序列分析后,以IPTG诱导表达Trx-flaA融合蛋白,用SDS-PAGE及Western blot进行鉴定。结果限制性核酸内切酶酶切鉴定、PCR和核酸序列分析表明,扩增出了嗜肺军团菌1435bp的flaA基因,成功构建了重组质粒pET-flaA,SDS-PAGE及Western blot分析显示重组质粒pET-flaA在大肠杆菌中得到了高效融合表达。结论成功构建嗜肺军团菌flaA基因重组质粒,并在原核系统中得到了高效表达。 展开更多
关键词 肺军团菌 鞭毛亚单位基因(flaA) 克隆 表达
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儿童嗜肺军团菌肺炎合并肺炎支原体感染的临床研究 被引量:10
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作者 何志慧 周玉福 石远滨 《重庆医学》 CAS CSCD 北大核心 2013年第5期490-492,共3页
目的对儿童嗜肺军团菌(LP)肺炎合并肺炎支原体(MP)感染的临床特征进行研究总结,为临床防治积累资料。方法收集该院2010年1月至2012年6月收治的95例LP肺炎患儿的临床资料,其中有35例合并MP感染,对其临床特征进行回顾性对比分析。结果 LP... 目的对儿童嗜肺军团菌(LP)肺炎合并肺炎支原体(MP)感染的临床特征进行研究总结,为临床防治积累资料。方法收集该院2010年1月至2012年6月收治的95例LP肺炎患儿的临床资料,其中有35例合并MP感染,对其临床特征进行回顾性对比分析。结果 LP与MP混合感染所致儿童肺炎多见于城镇学龄前期儿童。与LP肺炎组比较,混合感染组多表现为热峰高、热程长,出现肺部阳性体征、心率增快、颈淋巴结肿大和肝脏增大的发生例数显著增多,差异有统计学意义(P<0.05);辅助检查出现胸片大片斑片影及胸腔积液表现,出现白细胞(WBC)增高、C反应蛋白(CRP)增高、心电图阳性表现(心动过速/ST段和T波即ST-T改变)、肌酸激酶同工酶(CK-MB)增高、肝功异常的例数显著增多,差异有统计学意义(P<0.05);所需治疗时间显著延长,差异有统计学意义(P<0.05)。结论儿童LP肺炎合并MP感染可群体发病,常表现为肺部症状体征重、更易合并肺外多器官及多系统的损害。应积极开展大样本、多中心的研究以获得我国感染现状的可靠资料,从而为临床防治提供思路和对策。 展开更多
关键词 支原体 儿童 肺军团菌
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一个细菌的致命之旅——嗜肺军团菌分泌系统及效应蛋白的研究进展 被引量:9
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作者 陆勇军 李向辉 曾咏伦 《遗传》 CAS CSCD 北大核心 2011年第10期1093-1101,共9页
嗜肺军团菌是引起军团菌肺炎以及庞蒂亚克热的革兰氏阴性胞内病原细菌,嗜肺军团菌侵染宿主的主要特点是可以通过其IVB型毒力分泌系统,向宿主细胞内分泌超过150种的底物效应蛋白。通过这些效应蛋白的作用,嗜肺军团菌能够调整宿主细胞的... 嗜肺军团菌是引起军团菌肺炎以及庞蒂亚克热的革兰氏阴性胞内病原细菌,嗜肺军团菌侵染宿主的主要特点是可以通过其IVB型毒力分泌系统,向宿主细胞内分泌超过150种的底物效应蛋白。通过这些效应蛋白的作用,嗜肺军团菌能够调整宿主细胞的胞内运输途径,改变内外环境来伪装自己的吞噬泡,干扰宿主的细胞周期,抑制宿主细胞的凋亡,从而有效逃避宿主细胞的防御功能,创造出理想的胞内增殖环境。最后,效应蛋白还可以帮助军团菌从宿主细胞中逃逸。目前,嗜肺军团菌已经成为"病原菌-宿主相互作用"的重要研究模型,其毒力分泌系统及其底物效应蛋白的功能也成为细胞微生物学的研究热点。对嗜肺军团菌分泌系统及效应蛋白的研究不仅能够帮助阐明病原细菌的致病机理,还有助于推动对宿主免疫机制的更深层次的研究。文章主要针对嗜肺军团菌的毒力分泌系统,尤其是IVB型分泌系统的结构和功能,以及底物效应蛋白的研究进展进行了综述,向读者展示出一个小小的细菌所拥有的那令人惊叹的、如此狡猾的生存策略和它精致的杀伤武器。 展开更多
关键词 肺军团菌 毒力 IVB型分泌系统 效应蛋白
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杭州市区公共场所空调冷却水中嗜肺军团菌的调查和分析 被引量:22
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作者 斯国静 俞骅 +2 位作者 王一泓 吴小辉 杨介钻 《中国卫生检验杂志》 CAS 2006年第3期281-282,共2页
目的:了解杭州市公共场所大型中央空调冷却水中嗜肺军团菌的污染情况及主要血清型。方法:于2005年9月~10月,采集杭州市13家商场和宾馆、2家医院和1家福利中心等中央空调冷却塔冷却水29件,应用GVPC、BCYE、BCY培养基进行嗜肺军团菌... 目的:了解杭州市公共场所大型中央空调冷却水中嗜肺军团菌的污染情况及主要血清型。方法:于2005年9月~10月,采集杭州市13家商场和宾馆、2家医院和1家福利中心等中央空调冷却塔冷却水29件,应用GVPC、BCYE、BCY培养基进行嗜肺军团菌分离培养、进行血清分型及种特异性PCR鉴定。结果:冷却塔冷却水中嗜肺军团菌的污染率达到44.83%(13/29),共分离到嗜肺军团菌16株(有2份水样中同时检出二个血清型以上菌株,其中一份有Lp1、Lp2、Lp3三个血清型,另一份有Lp3及未定型二个血清型)。血清型以LP1为主达37.50%(6/16)。结论:杭州市公共场所大型中央率调冷却水中嗜肺军团菌检出率较高,对市民健康构成了威胁。 展开更多
关键词 公共场所 肺军团菌 冷却塔水 调查
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