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GW501516对低氧致肺动脉内皮细胞损伤的影响及机制
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作者 陈昌贵 易春峰 +3 位作者 余志华 王栋 李立为 贺立群 《中国药房》 CAS 北大核心 2024年第2期179-185,共7页
目的探讨过氧化物酶体增殖物激活受体δ(PPARδ)激动剂GW501516对低氧诱导的肺动脉内皮细胞(PAECs)损伤的影响及机制。方法通过检测PAECs的相对存活率,观察GW501516的细胞毒性作用;采用Western blot法检测PPARδ蛋白的表达水平。建立低... 目的探讨过氧化物酶体增殖物激活受体δ(PPARδ)激动剂GW501516对低氧诱导的肺动脉内皮细胞(PAECs)损伤的影响及机制。方法通过检测PAECs的相对存活率,观察GW501516的细胞毒性作用;采用Western blot法检测PPARδ蛋白的表达水平。建立低氧条件下PAECs损伤的细胞模型,以抗氧化剂N-乙酰半胱氨酸(NAC)为阳性对照,通过检测细胞凋亡率、细胞活力、乳酸脱氢酶(LDH)活性、活性氧(ROS)水平,考察GW501516对细胞损伤及ROS产生的影响。以核因子E2相关因子2(Nrf2)激活剂富马酸二甲酯(DMF)为阳性对照,在低氧条件下通过GW501516和(或)Nrf2抑制剂ML385孵育PAECs,以细胞损伤(细胞凋亡、细胞活力、LDH活性)及超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GPx)、过氧化氢酶(CAT)、丙二醛(MDA)、ROS水平及Nrf2、血红素加氧酶1(HO-1)、裂解型胱天蛋白酶3(C-caspase-3)蛋白的表达水平,探讨GW501516对低氧致PAECs损伤的作用机制。结果低氧刺激能够抑制PAECs内PPARδ蛋白的表达(P<0.05),而GW501516可在低氧条件下促进PPARδ蛋白的表达且无明显的细胞毒性作用。GW501516可抑制PAECs凋亡,提高细胞活力,降低LDH活性及ROS水平。GW501516可通过激活Nrf2通路,上调PAECs内HO-1蛋白表达水平及SOD、GPx、CAT水平,降低MDA、ROS水平(P<0.05),而Nrf2抑制剂ML385能够逆转GW501516的上述作用(P<0.05)。GW501516下调C-caspase-3蛋白表达,抑制低氧诱导的PAECs损伤的作用与Nrf2激活剂DMF相似(P<0.05),而Nrf2抑制剂ML385能够逆转GW501516抑制PAECs损伤的作用(P<0.05)。结论GW501516可通过抑制氧化应激来减轻低氧诱导的PAECs损伤,其机制与激活Nrf2有关。 展开更多
关键词 GW501516 低氧 肺动脉内皮细胞 氧化应激 损伤 核因子E2相关因子2
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BMP9对动脉性肺动脉高压肺血管内皮细胞影响的研究进展
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作者 高婷 王丽红 《临床医学进展》 2024年第8期1195-1200,共6页
动脉性肺动脉高压(Pulmonary Arterial Hypertension, PAH),即第1大类肺动脉高压,是一种以高发病率和死亡率为特点的血管疾病,其主要表现是肺血管重塑和肺血管阻力增加,最终导致右心室衰竭甚至死亡。骨形态发生蛋白9 (Bone Morphogeneti... 动脉性肺动脉高压(Pulmonary Arterial Hypertension, PAH),即第1大类肺动脉高压,是一种以高发病率和死亡率为特点的血管疾病,其主要表现是肺血管重塑和肺血管阻力增加,最终导致右心室衰竭甚至死亡。骨形态发生蛋白9 (Bone Morphogenetic Protein 9, BMP9)属于转化生长因子β (Transforming Growth Factor-β, TGF-β)家族,主要由肝脏星状细胞产生,随血液循环到肺血管内皮细胞上与受体结合,在PAH中发挥相应的生物学效应,但是部分研究结果是相互矛盾的。本文对PAH中BMP9的信号通路及BMP9对肺血管内皮细胞作用的研究和进展进行综述。Arterial pulmonary hypertension (PAH), also known as the group 1 pulmonary hypertension, is a vascular disease characterized by high morbidity and mortality, and its main manifestations are pulmonary vascular remodeling and increased pulmonary vascular resistance, which eventually leads to right ventricular failure and even death. Bone Morphogenetic Protein 9 (BMP9) belongs to the Transforming Growth Factor-β (TGF-β) family, which is mainly produced by hepatic stellate cells, which circulates to pulmonary vascular endothelial cells with blood and bind to their receptors to exert corresponding biological effects in PAH, but some research results are contradictory. This article briefly reviews the BMP9 signaling pathway in PAH and the research and progress of BMP9 on pulmonary vascular endothelial cells. 展开更多
关键词 动脉肺动脉高压 BMP9 BMPRII 肺血管内皮细胞 肺血管重塑
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血府逐瘀汤对肺动脉内皮细胞间质转化的影响及机制
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作者 曾作梅 王昕玥 +3 位作者 田雷瑜 崔力丹 郭健 陈俞材 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第1期155-161,共7页
目的 研究血府逐瘀汤对转化生长因子-β1(TGF-β1)诱导的大鼠肺微血管内皮细胞(pulmonary microvascular endothelial cells, PMVECs)内皮间质转化(endothelial-to-mesenchymal transition, EndMT)的影响,并从TGF-β1/Smad信号通路进一... 目的 研究血府逐瘀汤对转化生长因子-β1(TGF-β1)诱导的大鼠肺微血管内皮细胞(pulmonary microvascular endothelial cells, PMVECs)内皮间质转化(endothelial-to-mesenchymal transition, EndMT)的影响,并从TGF-β1/Smad信号通路进一步分析其作用机制。方法 采用TGF-β1(5μg·L^(-1))建立EndMT细胞模型。实验分组为正常组,模型组(TGF-β1,5μg·L^(-1)),血府逐瘀汤低、中、高浓度组(3、10、30 mg·L^(-1)XFZYD+5μg·L^(-1)TGF-β1),SB 431542阳性药组(5μmol·L^(-1)SB 431542+5μg·L^(-1)TGF-β1)。观察细胞形态,鬼笔环肽染色观察细胞骨架,免疫荧光法观察内皮细胞标志物-血小板内皮细胞黏附分子1(CD31)和间质细胞标志物α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)的表达。蛋白免疫印迹法检测血府逐瘀汤对CD31、α-SMA、Snail、p-Smad2、p-Smad1/5蛋白表达的影响。结果 TGF-β1刺激后,细胞形态由鹅卵石形向梭形转变。CD31、p-Smad1/5表达明显减少,α-SMA、p-Smad2、Snail表达则显著升高。血府逐瘀汤干预后,与模型组相比,细胞形态不同程度的接近于正常组,CD31和p-Smad1/5表达呈上升趋势,α-SMA、p-Smad2、Snail表达呈下降趋势。结论 血府逐瘀汤可以减轻大鼠肺微血管内皮细胞发生内皮间质转化,其作用可能是通过影响TGF-β1/Smad信号通路实现的。 展开更多
关键词 血府逐瘀汤 肺微血管内皮细胞 内皮间质转化 TGF-Β1 TGF-Β1/SMAD信号通路 肺动脉高压
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缺氧时肺动脉内皮细胞与肺动脉平滑肌细胞增殖的相互影响 被引量:9
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作者 王培勇 刘健 +3 位作者 于中和 许蜀闽 王俊元 孙秉庸 《生理学报》 CAS CSCD 北大核心 1998年第2期199-205,共7页
血管内皮细胞和血管平滑肌细胞在结构和功能上关系密切,两者的相互作用参与血管舒缩和血管壁结构的调节。本文观察了培养的小牛肺动脉内皮细胞(PAECs)和肺动脉平滑肌细胞(PASMCs)缺氧时在细胞增殖方面的相互影响。PASMCs常氧条件... 血管内皮细胞和血管平滑肌细胞在结构和功能上关系密切,两者的相互作用参与血管舒缩和血管壁结构的调节。本文观察了培养的小牛肺动脉内皮细胞(PAECs)和肺动脉平滑肌细胞(PASMCs)缺氧时在细胞增殖方面的相互影响。PASMCs常氧条件培养基(CM)可使PAECs的3H-TdR掺入降低约58%(P<0.01),缺氧CM对PAECs的3H-TdR掺入无明显的抑制作用;PAECs的常氧CM使PASMCs的3H-TdR掺入升高约60%,缺氧CM则明显抑制PASMCs的3H-TdR掺入(降低27%,P<0.01)。PAECs和PASMCs混合培养24h后,常氧条件下混合细胞的相对3H-TdR降低22%(P<0.01),2.5%O2和0%O2缺氧条件下,相对3H-TdR掺入分别升高75%和44%(P<0.01,与常氧组相比)。与单独培养组相比,常氧或0%O2条件下共培养24h末,PASMCs的3H-TdR掺入分别升高18%和26%(P<0.05),常氧组GI期细胞减少,G2/M期细胞增多(P<0.01),缺氧组G1和S期细胞增多,G2/M期细胞减少(P<0.01);PAECs的3H-TdR掺入降低24%和38%(P<0.01),G1和S期细胞增多,G2/M期细胞大幅度减少(P<0.01)。上述结果表明PAECs和PASMCs在细胞增殖方面存在复杂的调节关系,其调节在缺氧时发生改变,这种改变可能参与缺氧性肺动脉高压的发生。 展开更多
关键词 缺氧 肺动脉 内皮细胞 平滑肌细胞 增殖
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PKC和血管内皮细胞在15-HETE收缩肺动脉中的作用 被引量:6
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作者 唐晓波 李倩 +3 位作者 毕海荣 周建秋 吕昌莲 朱大岭 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2006年第4期420-423,共4页
目的探讨蛋白激酶C(PKC)、蛋白激酶A(PKA)信号转导途经及血管内皮完整性在15-羟基二十碳四烯酸(15-HETE)收缩肺动脉中的作用。方法采用组织浴槽血管环法与PKC、PKA抑制剂以及除去血管内皮细胞相结合的方法。结果用6·8mmol·L-1... 目的探讨蛋白激酶C(PKC)、蛋白激酶A(PKA)信号转导途经及血管内皮完整性在15-羟基二十碳四烯酸(15-HETE)收缩肺动脉中的作用。方法采用组织浴槽血管环法与PKC、PKA抑制剂以及除去血管内皮细胞相结合的方法。结果用6·8mmol·L-1hypericin阻断PKC途径可使15-HETE收缩缺氧大鼠肺动脉量效曲线右移(P<0·01);用0·112mmol·L-1KT5720阻断PKA途径使15-HETE收缩缺氧大鼠肺动脉量效曲线右移不明显;除去血管内皮细胞可降低对照组和缺氧组肺动脉血管环对15-HETE的反应性。结论15-HETE收缩肺动脉的作用和PKC信号转导系统以及血管内皮细胞的完整性有关。 展开更多
关键词 15-HETE PKA PKC 肺动脉血管内皮细胞 肺动脉高压
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尾部悬吊大鼠胸主动脉及肺动脉内皮细胞一氧化氮合酶mRNA表达的动态变化 被引量:13
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作者 汪德生 孙磊 +3 位作者 任维 董建文 马铁民 向求鲁 《航天医学与医学工程》 CAS CSCD 北大核心 2001年第5期318-322,共5页
目的观察模拟失重时大小循环动脉血管内皮细胞一氧化氮合酶mRNA(NOSmRNA)表达随时间变化的过程 ,为模拟失重时血管局部调节的适应机理研究提供资料。方法采用Wistar大鼠 30°尾部悬吊模拟失重效应 ,原位杂交技术观察悬吊 7d(TS7组 )... 目的观察模拟失重时大小循环动脉血管内皮细胞一氧化氮合酶mRNA(NOSmRNA)表达随时间变化的过程 ,为模拟失重时血管局部调节的适应机理研究提供资料。方法采用Wistar大鼠 30°尾部悬吊模拟失重效应 ,原位杂交技术观察悬吊 7d(TS7组 )、1 4d(TS1 4组 )及对照 (CON组 )胸主动脉、肺动脉内皮细胞eNOSmRNA和iNOSmRNA表达变化。结果TS7组胸主动脉和肺动脉内皮细胞eNOSmRNA和iN OSmRNA的升高非常显著 ;TS1 4组肺动脉内皮细胞eNOSmRNA的升高仍非常显著而胸主动脉回到对照水平 ,TS1 4组胸主动脉内皮细胞iNOSmRNA回到对照水平而肺动脉下降非常显著。结论模拟失重对大循环动脉内皮细胞eNOSmRNA和iNOSmRNA的影响趋势相似 ,而对肺循环动脉影响趋势不同 ,归因于模拟失重初期由下体转移而来的体液进入大小循环高峰期的时间过程不同 ,可能是模拟失重时局部调节功能降低的一种重要表现 。 展开更多
关键词 尾悬吊 动脉 内皮细胞 肺动脉 一氧化氮合酶
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磷脂酶A_2对培养的小牛肺动脉内皮细胞的损伤及氯喹的保护作用 被引量:6
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作者 王琪 吴中立 +2 位作者 李少华 郑尊 张淑英 《第二军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 1990年第2期99-102,共4页
本研究观察了磷脂酶A_2(PLA_2)对培养的小牛肺动脉内皮细胞的损伤作用和氯喹的保护作用。结果发现:PLA_2可使膜通透性升高,硝酸镧颗粒在胞浆内沉着的数量和范围随PLA_2浓度增加和作用时间延长而增加,乳酸脱氢酶释放率、培养液血管紧张... 本研究观察了磷脂酶A_2(PLA_2)对培养的小牛肺动脉内皮细胞的损伤作用和氯喹的保护作用。结果发现:PLA_2可使膜通透性升高,硝酸镧颗粒在胞浆内沉着的数量和范围随PLA_2浓度增加和作用时间延长而增加,乳酸脱氢酶释放率、培养液血管紧张素转化酶活性、培养液和细胞内二醛含量显著高于正常对照组、PLA_2 +氯喹组和氯喹组。氯喹对PLA_2造成的细胞损伤有保护作用。 展开更多
关键词 磷脂酶A2 肺动脉 内皮细胞 氯喹
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埃他卡林对兔肺动脉平滑肌内皮细胞钙浓度的影响 被引量:8
8
作者 齐栩 王虹 +2 位作者 解卫平 胡刚 汪海 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2008年第1期67-70,共4页
目的观察埃他卡林(IPT)对内皮素1(ET-1)诱导培养的兔肺动脉平滑肌细胞(PASMC)增殖的影响,并探讨其作用机制。方法应用细胞培养、氚-胸腺嘧啶核苷([3H]-TdR)参入实验、Fluo-3和激光扫描共聚焦显微镜技术评价IPT对ET-1诱导的兔PASMC增殖及... 目的观察埃他卡林(IPT)对内皮素1(ET-1)诱导培养的兔肺动脉平滑肌细胞(PASMC)增殖的影响,并探讨其作用机制。方法应用细胞培养、氚-胸腺嘧啶核苷([3H]-TdR)参入实验、Fluo-3和激光扫描共聚焦显微镜技术评价IPT对ET-1诱导的兔PASMC增殖及PASMC[Ca2+]i调节的作用。结果ET-1(10-7mol.L-1)使PASMC[3H]-TdR参入量增加146.8%,与对照组比较,差异有显著性(P<0.01);在相同条件下,加入ET-1的同时,分别向培养基中加入IPT10-7、10-6、10-5mol.L-1,细胞[3H]-TdR参入量分别下降(19.8±4.6)%、(41.2±9.5)%、(54.7±10.1)%,与ET-1组比较差异有显著性(P<0.01);对照组PASMC[Ca2+]i荧光强度和荧光光密度值较低;ET-1组中[Ca2+]i荧光光密度值明显增高,从73.7±10.1增加到143.8±28.2,两者比较差异有显著性(P<0.01);而IPT组细胞内荧光光密度值明显降低,仅从74.30±10.2增加到86.03±9.82,与ET-1组比较差异有显著性(P<0.01)。结论IPT可明显抑制ET-1诱导的兔PASMC增殖、DNA合成;减少钙通道的开放时间,抑制细胞内Ca2+浓度增加。 展开更多
关键词 肺动脉高压 ATP敏感性钾通道 钙通道 内皮细胞
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重楼皂苷Ⅶ抑制内皮素1诱导的大鼠肺动脉平滑肌细胞增殖和迁移 被引量:6
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作者 赵方允 王紫微 +4 位作者 张春芳 张悦 徐双兰 邢西迁 杨姣 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2018年第10期1477-1478,共2页
肺动脉高压(pulmonary arterial hypertension,PAH)是由于肺血管收缩反应性增强及肺血管结构重建,最终引起肺动脉压力升高为特征的一组病理生理综合征[1-2]。其中,由肺动脉平滑肌细胞(pulmonary artery smooth muscle cells,PASMCs)增... 肺动脉高压(pulmonary arterial hypertension,PAH)是由于肺血管收缩反应性增强及肺血管结构重建,最终引起肺动脉压力升高为特征的一组病理生理综合征[1-2]。其中,由肺动脉平滑肌细胞(pulmonary artery smooth muscle cells,PASMCs)增殖、迁移所引起的肺血管结构重建,是PAH形成的中心环节[3-5]。重楼为百合科植物云南重楼或七叶一枝花的干燥根茎,主要成分重楼皂苷具有抗肿瘤、止血、抗炎、镇痛、镇静、抑制血管生成、免疫调节、抗氧化等功效[6-7]。其中,抗炎及抑制血管生成的作用可能会对PAH的防治起一定作用。该文主要研究重楼皂苷Ⅶ(polyphyllinⅦ,PPⅦ)对内皮素-1(endothilin-1,ET-1)诱导的大鼠PASMCs增殖和迁移的作用。 展开更多
关键词 重楼皂苷Ⅶ 内皮素-1 肺动脉平滑肌细胞 肺动脉高压 增殖 迁移 凋亡
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缺氧时体外培养的肺动脉内皮细胞增殖和活力的改变 被引量:4
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作者 刘健 王培勇 +3 位作者 罗德成 陈兆珍 许蜀闽 孙秉庸 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 1998年第6期583-587,共5页
目的:探讨无氧和/或低氧(0%O2和/或25%O2)对肺动脉内皮细胞(PAEC)活力和增殖的影响。方法:应用形态学观察、细胞活力测定、流式细胞技术、3H-TdR掺入、免疫组化染色等方法。结果:缺氧使PAEC胞浆内的... 目的:探讨无氧和/或低氧(0%O2和/或25%O2)对肺动脉内皮细胞(PAEC)活力和增殖的影响。方法:应用形态学观察、细胞活力测定、流式细胞技术、3H-TdR掺入、免疫组化染色等方法。结果:缺氧使PAEC胞浆内的线粒体和粗面内质网增多,随缺氧时间的延长,线粒体肿胀、空泡化,内质网扩张。MTT法细胞活力测定显示无氧6h末PAEC的细胞活力无明显变化,无氧12h至24h末PAEC的细胞活力明显增加(P<001)。在6h,12h,18h,24h,低氧和无氧使PAEC的3H-TdR掺入显著少于常氧对照组(P<005)。无氧24h末PAEC的增殖细胞核抗原(PCNA)阳性反应颗粒明显少于常氧对照组,且常氧组PCNA含量是无氧组的375倍。然而流式细胞分析显示,与常氧对照组相比,无氧和低氧PAEC的S期和G2/M期细胞比例明显增多(P<001)、G0/G1期细胞比例明显减少(P<0.001),细胞内总蛋白除无氧12h组外含量均显著增多(P<0.001)。结论:缺氧可激活PAEC使其细胞活力增加,但却抑制其增殖;缺氧PAEC的G2/M期细胞增多,可能由于缺氧通过延长细胞周期时间和使PAEC的G2/M期细胞和G? 展开更多
关键词 缺氧 肺动脉 内皮细胞 细胞增殖 活力
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缺氧对肺动脉内皮细胞和平滑肌细胞5-羟色胺转载体基因表达的影响 被引量:5
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作者 刘健 王培勇 +1 位作者 罗德成 孙秉庸 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 1998年第4期355-358,共4页
目的:探讨无氧(O%O2+95%N2+5%CO2)和低氧(25~3%O2+92%N2+5%CO2)对新生小牛肺动脉内皮细胞(PAEC)和肺动肺平滑肌细胞(PASM)5-羟色胺转载体基因表达的影响。方法:应用细胞培养... 目的:探讨无氧(O%O2+95%N2+5%CO2)和低氧(25~3%O2+92%N2+5%CO2)对新生小牛肺动脉内皮细胞(PAEC)和肺动肺平滑肌细胞(PASM)5-羟色胺转载体基因表达的影响。方法:应用细胞培养,核酸分子杂交技术。结果:无氧组和低氧组(15h、3h、6h)PAEC5-羟色胺转载体mRNA表达显著高于常氧组(P<005),而无氧和低氧12h至48h对PAEC5-羟色胺转载体mRNA表达无明显影响。无氧和低氧(3h、6h、12h、24h)组PASM5-羟色胺mRNA表达均显著高于常氧组(P<001),结论:推测缺氧早期通过促进PAEC5-羟色胺转载体基因表达,加强PAEC对5-羟色胺的摄取和降解,随缺氧时间的延长,PAEC的此功能受损。缺氧PASM5-羟色胺转载体基因表达的持续增加,则可能参与缺氧肺动脉高压的形成。 展开更多
关键词 缺氧 肺动脉 内皮细胞 平滑肌细胞 5-HT
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低氧大鼠肺动脉内皮细胞VEGF变化与PKC活性关系的探讨 被引量:9
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作者 杨曦明 谢印芝 +1 位作者 聂鸿靖 尹昭云 《中国应用生理学杂志》 CAS CSCD 2000年第3期250-253,共4页
目的 :探讨低氧培养大鼠肺动脉血管内皮细胞VEGF的表达变化与PKC活性的关系。方法 :培养大鼠肺动脉血管内皮细胞 ,观察低氧 (1%O2 )培养不同时间大鼠肺动脉血管内皮细胞浆、膜PKC活性和培养液中VEGF水平变化 ;加入PKC抑制剂 (staurospor... 目的 :探讨低氧培养大鼠肺动脉血管内皮细胞VEGF的表达变化与PKC活性的关系。方法 :培养大鼠肺动脉血管内皮细胞 ,观察低氧 (1%O2 )培养不同时间大鼠肺动脉血管内皮细胞浆、膜PKC活性和培养液中VEGF水平变化 ;加入PKC抑制剂 (staurosporine)后 ,测定低氧、常氧培养不同时间二者的变化。结果 :低氧时膜PKC活性和培养液中VEGF水平明显升高 (P <0 .0 1)。而加入PKC抑制剂后 ,常氧和低氧培养的内皮细胞浆、膜PKC活性都明显下降 (P <0 .0 1) ,相应的培养液中VEGF水平与常氧对照组比较无明显变化 (P >0 .0 5 )。结论 :低氧时PKC活性升高与VEGF表达升高有密切关系 ,PKC对低氧时VEGF的表达起正调控作用。 展开更多
关键词 低氧 肺动脉血管内皮细胞 蛋白激酶
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培养的肺动脉内皮细胞生长及生化特性的初步观察 被引量:19
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作者 王培勇 孙秉庸 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 1995年第3期212-213,共2页
采用胰蛋白酶消化法和刮取法培养了肺动脉内皮细胞(PAEC)。通过原代培养、传代和冻存复苏等步骤,观察了PAEC的形态及生化特点,如Ⅷ因子相关抗原、细胞内钙、环磷酸腺苷等。结果表明:原代及传代培养的PAEC可很快贴壁生... 采用胰蛋白酶消化法和刮取法培养了肺动脉内皮细胞(PAEC)。通过原代培养、传代和冻存复苏等步骤,观察了PAEC的形态及生化特点,如Ⅷ因子相关抗原、细胞内钙、环磷酸腺苷等。结果表明:原代及传代培养的PAEC可很快贴壁生长,经2~5d可汇合成单层,细胞呈铺路石状排列,Ⅷ因子相关抗原阳性,并能分泌血管紧张素转移酶;在含20%小牛血清的RPMI-1640培养基内,PAEC可传30代以上;传代后的细胞生长速度加快,但加保持其形态和生化特点。 展开更多
关键词 肺动脉 内皮细胞 生化特性 形态学
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组胺对肺动脉内皮细胞一氧化氮合酶基因表达的影响 被引量:5
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作者 陆德琴 李会革 +3 位作者 叶红 叶仕桥 金肆 王迪浔 《生理学报》 CAS CSCD 北大核心 2004年第3期288-294,共7页
本实验研究了组胺对原代培养的肺动脉内皮细胞一氧化氮合酶(nitric oxidCsynthase,NOS)基因表达的影响及分子机制。采用RT-PCR和免疫印迹技术分别检测mRNA和蛋白质的表达水平,用荧光素酶报告基因实验检测eNOS基因转录起始点上游长1.6-k... 本实验研究了组胺对原代培养的肺动脉内皮细胞一氧化氮合酶(nitric oxidCsynthase,NOS)基因表达的影响及分子机制。采用RT-PCR和免疫印迹技术分别检测mRNA和蛋白质的表达水平,用荧光素酶报告基因实验检测eNOS基因转录起始点上游长1.6-kb的启动子活性,用硝酸还原酶法检测NO的产量。结果发现,组胺增强eNOS表达,呈浓度和时间依赖性,10μmol/L组胺处理肺动脉内皮细胞24h可使eNOS mRNA和蛋白质的表达达到高峰,eNOS mRNA水平为正常对照组的160.8±12.2%(P<0.05),蛋白质水平为正常对照组的136.2±11.2%(P<0.05)。特异性CaMK Ⅱ抑制剂KN-93可抑制组胺的这一效应,表明组胺可通过激活CaMK Ⅱ增强肺动脉内皮细胞eNOS基因的表达。报告基因实验表明,10μmol/L组胺处理24h后肺动脉内皮细胞eNOS基因启动子的活性增强,为正常对照组的148.2±33.7%(P<0.05)。组胺可使肺动脉内皮细胞产生NO增加。这些结果表明组胺在转录水平增强肺动脉内皮细胞eNOS基因的表达,并使细胞产生NO增加,这可能是组胺调节肺血管张力的机制之一。CaMK Ⅱ可能是组胺增强肺动脉内皮细胞eNOS基因表达的途径之一。 展开更多
关键词 组胺 一氧化氮合酶 基因表达式 内皮细胞 肺动脉
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Calcineurin/NFAT信号通路上调5型磷酸二酯酶的表达及介导内皮素-1诱导的肺动脉平滑肌细胞增殖 被引量:6
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作者 卢家美 王小闯 +3 位作者 谢新明 韩冬 李少军 李满祥 《南方医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第1期26-29,共4页
目的探讨Calcineurin/NFAT信号通路是否介导内皮素-1(ET-1)诱导的5型磷酸二酯酶(PDE5)的表达及肺动脉平滑肌细胞(PASMCs)的增殖;同时验证Calcineurin抑制剂环孢素A及PDE5抑制剂西地那非能否抑制ET-1刺激的PASMCs增殖。方法以ET-1刺激PAS... 目的探讨Calcineurin/NFAT信号通路是否介导内皮素-1(ET-1)诱导的5型磷酸二酯酶(PDE5)的表达及肺动脉平滑肌细胞(PASMCs)的增殖;同时验证Calcineurin抑制剂环孢素A及PDE5抑制剂西地那非能否抑制ET-1刺激的PASMCs增殖。方法以ET-1刺激PASMCs增殖,分别于ET-1刺激前给予环孢素A或西地那非抑制Calcineurin或PDE5的活性。采用Calcineurin活性检测试剂盒检测其活性,免疫印迹法检测PDE5的表达,酶联免疫吸附法检测cGMP的含量,3H-TdR渗入法检测PASMCs的增殖。结果 ET-1可激活原代培养的PASMCs中Calcineurin的活性,上调PDE5表达,降低cGMP的水平。Calcineurin特异性抑制剂环孢素A可阻断ET-1的上述作用;抑制PDE5的活性可逆转ET-1导致的cGMP含量减少。而环孢素A及西地那非可分别抑制ET-1刺激的PASMCs增殖。结论 ET-1可通过激活Calcineurin/NFAT信号通路介导ET-1诱发的PDE5表达,进而降低cGMP含量,引起PASMCs增殖;而抑制Calcineurin或PDE5可提高cGMP水平,抑制ET-1诱导的PASMCs增殖。 展开更多
关键词 CALCINEURIN NFAT信号通路 5型磷酸二酯酶 内皮素-1 细胞增殖 肺动脉平滑肌细胞
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八肽胆囊收缩素对脂多糖诱导肺动脉内皮细胞凋亡的抑制作用 被引量:5
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作者 谷振勇 凌亦凌 +2 位作者 王杏云 丛斌 朱铁年 《中国危重病急救医学》 CAS CSCD 2001年第12期724-737,共14页
目的 :探讨八肽胆囊收缩素 ( CCK 8)对脂多糖 ( LPS)诱导培养的肺动脉内皮细胞 ( BPAEC)凋亡的影响。方法 :培养的 BPAEC用 L PS、CCK 8、CCK 8非特异性受体阻断剂丙谷胺分别或共同处理后 ,继续培养 2 4小时。用流式细胞术和核荧光染色... 目的 :探讨八肽胆囊收缩素 ( CCK 8)对脂多糖 ( LPS)诱导培养的肺动脉内皮细胞 ( BPAEC)凋亡的影响。方法 :培养的 BPAEC用 L PS、CCK 8、CCK 8非特异性受体阻断剂丙谷胺分别或共同处理后 ,继续培养 2 4小时。用流式细胞术和核荧光染色方法检测细胞凋亡 ,用生物化学方法检测培养上清中乳酸脱氢酶( L DH)活性和丙二醛 ( MDA)含量 ,用流式细胞术定量检测过氧亚硝基阴离子 ( ONOO-)含量。结果 :LPS可诱导 BPAEC凋亡和坏死明显增多 ,培养上清中 MDA含量增高 ;CCK 8抑制 BPAEC凋亡和 MDA含量的增高 ,此作用为 CCK 8受体非特异性阻断剂丙谷胺翻转 ;CCK 8可抑制 L PS诱导 BPAEC生成 ONOO-增多 ;CCK 8和丙谷胺对 LPS诱导的 BPAEC坏死无明显影响。结论 :CCK 8可抑制 L PS诱导的 BPAEC凋亡 ,此作用由其受体介导 ,并与 CCK 展开更多
关键词 八肽胆囊收缩素 内皮细胞 肺动脉 细胞凋亡
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红景天苷对人肺动脉内皮细胞线粒体ROS及细胞分泌功能的影响 被引量:8
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作者 欧阳金生 李玉苹 +4 位作者 蔡畅 陈彦凡 谢于鹏 陈成水 陈少贤 《中华中医药学刊》 CAS 2013年第4期798-800,共3页
目的:研究红景天苷对氧化应激下人肺动脉内皮细胞线粒体ROS及细胞分泌功能的影响及其分子机制。方法:应用香烟烟雾提取液(CSE)诱导人肺动脉内皮细胞(hPAE)生成ROS,红景天苷干预hPAE,ELISA检测CES诱导、红景天苷干预的hPAE合成的NOS、ET-... 目的:研究红景天苷对氧化应激下人肺动脉内皮细胞线粒体ROS及细胞分泌功能的影响及其分子机制。方法:应用香烟烟雾提取液(CSE)诱导人肺动脉内皮细胞(hPAE)生成ROS,红景天苷干预hPAE,ELISA检测CES诱导、红景天苷干预的hPAE合成的NOS、ET-1、VGGF的变化,DCFH-DA、Rh123法分别检测线粒体ROS、线粒体膜电位的变化。结果:CSE组线粒体ROS的DCFH-DA的荧光强度高于生理水组,NOS、ET-1和VEGF的合成高于CSE+红景天苷组、生理盐水组;CSE组的线粒体的膜电位高于CSE+红景天苷组和生理盐水组;CSE+红景天苷组的线粒体ROS的DCFH-DA和DiBAC4的荧光强度低于CSE组,而与生理盐水组接近。结论:红景天苷可抑制CSE诱导的人hPAE线粒体ROS的生成,恢复线粒体的膜电位,降低NOS、ET-1和VEGF的合成,从而保护氧化应激下hPAE细胞的分泌功能。 展开更多
关键词 氧化应激 肺动脉内皮细胞 红景天苷 活性氧族(ROS)
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大鼠肺动脉内皮细胞的简易培养鉴定 被引量:4
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作者 谢崧 钱桂生 +1 位作者 杨晓静 王关嵩 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 1997年第5期475-476,共2页
目的:探索一种简单的方法培养大鼠肺动脉内皮细胞(RPAECs)。方法:分离大鼠肺动脉,将其切成小块,使其内皮面贴于培养瓶,用含有20%新生牛血清、肝素90μg/ml、L-谷氨酰胺4mmol/L、青霉素100u/ml和... 目的:探索一种简单的方法培养大鼠肺动脉内皮细胞(RPAECs)。方法:分离大鼠肺动脉,将其切成小块,使其内皮面贴于培养瓶,用含有20%新生牛血清、肝素90μg/ml、L-谷氨酰胺4mmol/L、青霉素100u/ml和链霉素100ug/ml的RPMI-1640培养基培养。结果:培养24h后RPAECs从动脉块游出,72h后将动脉块移去,RPAECs于6~10d融合成单层细胞。这些细胞具有规律的鹅卵石样形成及Ⅷ因子相关抗原阳性。结论:本方法成功地培养出大鼠肺动脉内皮细胞并通过鉴定。 展开更多
关键词 肺动脉 内皮细胞 细胞培养 大鼠
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急性缺氧对肺动脉内皮细胞血栓素合酶基因表达及PGI_2、TXA_2代谢产物的影响 被引量:19
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作者 孔炜 方华丰 +1 位作者 王迪浔 孙秉庸 《同济医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2001年第4期295-297,共3页
为进一步研究 PGI2 和 TXA2 在慢性缺氧性肺动脉高压和机体对慢性缺氧习服过程中的作用 ,动态观察了慢性缺氧进程中肺动脉内皮细胞 (PAEC)血栓素合酶 (TXS)基因表达及 PGI2 、TXA2 代谢产物的变化。结果显示 :常氧培养的 PAEC,急性缺氧... 为进一步研究 PGI2 和 TXA2 在慢性缺氧性肺动脉高压和机体对慢性缺氧习服过程中的作用 ,动态观察了慢性缺氧进程中肺动脉内皮细胞 (PAEC)血栓素合酶 (TXS)基因表达及 PGI2 、TXA2 代谢产物的变化。结果显示 :常氧培养的 PAEC,急性缺氧后 TXS、 6 -酮 - PGF1α、TXB2 均增加 ,以 6 -酮 - PGF1α增加更明显 ,TXA2 / PGI2 比值降低 ;慢性缺氧 [PO2 (5 .3± 0 .7) k Pa]培养的 PAEC TXS、 6 -酮 - PGF1α、TXB2 均高于同代常氧组 ,复氧再急性缺氧 ,6 -酮 - PGF1α在第 2、 4代减少 ,第 6代不变 ,TXS、TXB2 在第 4代增加 ,第 6代减少 ;TXA2 / PGI2 在第 2、 4代增加 ,第 6代减少。提示在慢性缺氧的不同阶段 ,由急性缺氧所致 TXS、 6 -酮 - PGF1α、 TXB2 及 TXA2 / PGI2 展开更多
关键词 缺氧性肺动脉高压 内皮细胞 血栓素合酶 基因表达 PGI2 TXA2 前列环素 血栓素A2
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内皮素-1对缺氧肺动脉平滑肌细胞的增殖作用 被引量:5
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作者 冯晓东 蔡英年 +1 位作者 李世强 周晓梅 《中国应用生理学杂志》 CAS CSCD 1995年第3期197-200,共4页
内皮素(ET)是至今所发现的最强的内源性血管收缩肽,近年来发现ET-1能促进血管平滑肌细胞增殖。本研究表明ET-1对缺氧培养的肺动脉平滑肌细胞(PASMC)有剂量依赖的增殖作用,缺氧可促进PASMC的DNA合成且增加... 内皮素(ET)是至今所发现的最强的内源性血管收缩肽,近年来发现ET-1能促进血管平滑肌细胞增殖。本研究表明ET-1对缺氧培养的肺动脉平滑肌细胞(PASMC)有剂量依赖的增殖作用,缺氧可促进PASMC的DNA合成且增加ET-1的丝裂原作用。ET-1的丝裂原作用主要由其A型受体(ETR_A)所介导,ETR_A的特异拮抗剂BQ123可显著抑制缺氧以及缺氧与ET-1协同所产生的增殖作用,而且发现ETR_A在缺氧培养的PASMC中的表达显著高于常氧对照组PASMC。本研究表明ET-1参与了缺氧性肺动脉结构重组,而缺氧可增强PASMC对ET-1的增殖反应性。 展开更多
关键词 缺氧 内皮 肺动脉 平滑肌细胞 肺动脉高压
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