尼氟灭酸抑制跨膜蛋白16A参与高肺血流量诱导的肺动脉高压的机制研究

目的:探讨钙激活的氯离子通道(CaCCs)抑制剂尼氟灭酸(NFA)和跨膜蛋白16A(TMEM16A)在高肺血流量诱导的肺动脉高压(PAH)中的作用及机制。方法:将40只SD大鼠随机分为normal组、sham组、model组及model+NFA组,sham组使用血管夹夹闭腹主动脉15 min,model组采用腹主动脉—下腔静脉造瘘术建立左向右分流型PAH模型,model+NFA组在造瘘术后予NFA进行每日灌胃;饲养12周后,检测大鼠平均肺动脉压、肺动脉血管张力,并采用实时荧光定量PCR和蛋白质免疫印迹法(western blotting)检测各组肺动脉平滑肌细胞(PASMCs)TMEM16A的表达。结果:model组和model+NFA组大鼠肺动脉环收缩率及TMEM16A m RNA和蛋白表达水平显著高于normal组(P<0.05)。与model组比较,model+NFA组大鼠TMEM16A mRNA和蛋白表达水平降低,肺动脉环收缩率下降(P<0.05)。结论:高肺血流量诱导的PAH与TMEM16A高表达有关,NFA可以降低肺动脉血管张力,抑制TMEM16A的过表达。

TASK-1对缺氧状态下人肺动脉血管环张力的影响及其机制探究

目的 :探究串联孔域酸性敏感K通道(tandem pore domain acid-sensitive K channel,TASK-1)对缺氧状态下人离体肺动脉血管环张力的影响及其相关电生理机制。方法:手术分离并制备人离体肺动脉血管环,采用RM-6000多道生理记录仪记录给予缺氧或事先分别用PP2、PP3、bpv及A-293预孵育后再给予缺氧的血管环张力变化。原代培养人肺动脉平滑肌细胞,采用膜片钳实验分别记录缺氧、A-293、PP2、PP3、bpv处理以及用A-293、PP2、PP3、bpv预处理后再给予缺氧的TASK-1电流的变化。结果:(1)PP2预孵育后再给予缺氧处理与直接给予缺氧处理相比,人肺动脉血管环张力明显减低(P<0.05);PP3预孵育后再给予缺氧处理与直接给予缺氧处理相比,人肺动脉血管环张力差异无统计学意义(P>0.05);bpv预孵育后再给予缺氧处理与直接给予缺氧处理相比,人肺动脉血管环张力明显增加(P<0.05);A-293预孵育后再给予缺氧处理与直接给予缺氧处理相比,人肺动脉血管环张力明显减低(P<0.05)。(2)缺氧处理后人肺动脉平滑肌细胞TASK-1电流明显减少;A-293单独预处理也可明显减低TASK-1电流;A-293预孵育后再给予缺氧处理,不能进一步减低TASK-1电流;PP2预孵育后再给予缺氧处理与只用PP2处理相比,人肺动脉平滑肌细胞TASK-1电流差异无统计学意义(P>0.05);PP3预孵育后再给予缺氧处理与只用PP3处理相比,人肺动脉平滑肌细胞TASK-1电流明显减低(P<0.05);bpv预孵育后再给予缺氧处理与只用bpv处理相比,人肺动脉平滑肌细胞TASK-1电流明显减低(P<0.05)。结论:TASK-1参与缺氧后人肺动脉血管张力的调节,且此过程受c-Src的调控。