V-V ECMO成功救治非HIV型耶氏肺孢子虫肺炎1例

临床上较少见体外膜肺氧合(ECMO)治疗非人类免疫缺陷病毒(HIV)耶氏肺孢子虫肺炎(PJP)的报道,本研究报道1例患有急性脊髓炎的患者,因免疫功能低下出现PJP,迅速进展为急性呼吸衰竭伴严重低氧血症,启动静脉-静脉ECMO(V-V ECMO)治疗,经过V-V ECMO治疗21天后成功撤离ECMO,住院41 d存活出院。虽然ECMO在免疫功能损伤的患者治疗中充满挑战、预后差,但通过精细化管理,其在非HIV感染的PJP患者中是安全、有效的。

非艾滋病肺孢子虫肺炎的临床特点分析

目的对非艾滋病肺孢子虫肺炎(PCP)患者的临床资料进行分析,总结其临床特点,从而提高临床诊治水平,改善患者预后。方法回顾性分析9例非艾滋病PCP患者的临床表现、实验室检查结果、影像学特征、治疗及转归。结果主要临床表现为发热7例(77.8%)、咳嗽6例(66.7%)、喘息4例(44.4%)。胸部CT主要表现为双肺弥漫性或散在斑片影、磨玻璃影及囊状透亮影,斑片影9例(100.0%)、磨玻璃影5例(55.6%)、囊状透亮影5例(55.6%),双肺内、中、外带分布无差异,肋膈角处可累及,合并纵隔淋巴结增大3例(33.3%)、胸腔积液1例(11.1%)。9例患者中,白细胞计数(WBC)升高5例(55.6%),平均WBC(10.53±4.24)×10^(9)/L;降钙素原(PCT)不同程度升高8例(88.9%),平均PCT(0.19±0.18)ng/ml;氧合指数不同程度下降7例(77.8%),平均氧合指数(245.50±140.30)mm Hg(1 mm Hg=0.133 kPa);淋巴细胞计数下降3例(33.3%),平均淋巴细胞计数(1.16±0.61)×10^(9)/L。6例(66.7%)应用复方磺胺甲噁唑(SMZ-TMP)+卡泊芬净治疗,1例(11.1%)单用SMZ-TMP,2例(22.2%)单用卡泊芬净,6例(66.7%)合并应用糖皮质激素。6例(66.7%)患者疗效好,3例(33.3%)患者病情恶化自动出院。结论非艾滋病PCP缺乏特异性临床特点,临床工作中需提高警惕,恶性肿瘤、长期接受激素治疗、糖尿病等免疫受损患者出现发热、咳嗽、喘息等临床症状,加之合并斑片影、磨玻璃影等胸部影像学改变,需及时留取合格下呼吸道标本送检,尽早干预治疗,改善预后。

大鼠肺孢子虫肺炎动物模型的实验研究

目的建立肺孢子虫肺炎(PCP)的大鼠实验动物模型。方法将34只雌性清洁级SD大鼠随机分成实验组和对照组,每组17只。实验组采取每周2次每次每只皮下注射地塞米松1mg诱导的方法建立PCP动物模型;对照组则注射与地塞米松等体积的灭菌生理盐水。所有大鼠的饮水中加入1g/L盐酸四环素预防继发性细菌感染。12周后解剖全部大鼠,并分别制作肺组织印片,姬氏染色,检查肺孢子虫包囊。同时制作肺组织病理切片,HE染色,观察肺组织的病理学变化。结果用地塞米松诱导大鼠5周,肺组织印片均查见肺孢子虫包囊,肺组织也出现典型的病理学改变。连续诱导12周,均未见实验鼠死亡。实验组大鼠体重下降明显,与对照组比较,差异有非常显著性(P<0.01)。结论应用皮下注射地塞米松免疫抑制诱导的方法可成功建立PCP的大鼠动物模型。

1例胆汁淤积型肝损伤患者合并肺孢子虫病的护理

总结1例胆汁淤积型肝损伤患者合并肺孢子虫病的护理体会。根据患者的活动情况预给氧,达到合理的氧合管理;持续经鼻高流量吸氧治疗疾病造成的呼吸衰竭,降低插管率;积极处理并发症、电解质紊乱及皮肤瘙痒;根据患者耐受程度给予康复指导。治疗过程中重视护患关系,侧重心理护理。最后该例患者被成功救治。

白果内酯治疗实验大鼠肺孢子虫肺炎电镜观察

目的 观察白果内酯对卡氏肺孢子虫超微结构的影响。方法 地塞米松连续皮下注射Wistar大鼠 6周 ,建立大鼠卡氏肺孢子虫肺炎动物模型 ,腹腔内注射白果内酯 30mg/(kg·d)× 8d。停药 1周后取大鼠肺组织作超薄切片 ,透射电镜观察。结果 白果内酯作用后的卡氏肺孢子虫虫体有大量空泡形成 ,细胞器肿胀破坏 ,髓样结构形成 ,胞膜破坏 ,胞质内出现电子密度较高颗粒。结论 白果内酯可破坏卡氏肺孢子虫的超微结构 ,从而引起虫体死亡。

卡氏肺孢子虫肺炎大、小鼠低死亡率动物模型的建立

为建立低死亡率卡氏肺孢子虫肺炎 (PCP)SD大鼠和ICR小鼠动物模型 ,本试验将雌性SD大鼠和ICR小鼠分别随机分为实验组和对照组 ,实验组采用按体重定量皮下注射地塞米松的方法 ,免疫抑制诱导建立PCP动物模型 ,对照组注射与地塞米松等体积的生理盐水。分别制作肺印片 ,经瑞 姬氏复合染色后 ,检查卡氏肺孢子虫包囊。制作肺组织病理切片 ,经HE染色后观察肺组织病理变化。用地塞米松诱导后 ,实验组SD大鼠和ICR小鼠死亡率均为 0 ,肺印片阳性率均为 76 7% (2 3 30和 2 3 30 )。肺组织出现典型的病理变化 ,并可观察到Pc包囊。实验组SD大鼠体重下降明显 ,与对照组体重比较具有极显著性差异 (P <0 0 1)。ICR小鼠经诱导后 ,体重变化不显著。

卡氏肺孢子虫肺炎大鼠模型的比较研究

目的 比较用SpragueDawley(SD)大鼠和Wistar大鼠建立卡氏肺孢子虫肺炎 (PCP)模型的差异。 方法 选用SD大鼠和Wistar大鼠 ,随机分为实验组和对照组 ,免疫抑制诱导建立动物模型 ;收集肺组织和支气管肺泡灌洗液 (BALF) ,分别制成肺印片和BALF涂片 ,作Giemsa染色 ,镜检卡氏肺孢子虫滋养体和包囊。结果 共收集实验组SD大鼠和Wistar大鼠的肺组织及BALF标本各 2 8份 ,经Giemsa染色后 ,在肺印片中查见Pneumocystiscarinii(Pc)虫体的阳性率分别为 89.2 9%和10 0 % ,两者之间无显著性差异 (P >0 .0 5 ) ;BALF阳性率分别为 6 0 .71%和 78.5 7% ,两者之间亦无显著性差异 (P >0 .0 5 )。而同种大鼠的肺印片与BALF涂片 ,其阳性率之间有显著性差异 (P <0 .0 5 ) ,且肺印片的检出率均显著高于BALF涂片。同种大鼠不同肺叶的肺印片 ,其阳性率之间无显著性差异 (P >0 .0 5 )。

肺孢子虫包囊的分离及纯化

20只纯系Wistar大鼠经皮下注射醋酸可的松25m/次,每wk2次,用药7wk后即可诱发大鼠肺孢子虫肺炎。经相差显微镜直接检查、姬姆萨染色、亚甲胺蓝染色及六亚甲基四胺银染色在肺组织内检出肺孢子虫包囊。分离纯化过程包括三个步骤:1 肺组织匀浆的制备及过滤;2 采用0.2％胶原酶消化;3 不连续Percoll密度梯度离心。包囊及滋养体密度为1.033g/ml,肺组织碎片密度达1.040g/ml,从而分离。经上述过程处理后可获得较为纯净的肺孢子虫包囊,可用于ELISA。

黄芪注射液治疗大鼠卡氏肺孢子虫肺炎的实验研究

目的:探讨黄芪注射液对大鼠卡氏肺孢子虫肺炎(PCP)的治疗作用,寻找可抑制或杀灭卡氏肺孢子虫(Pc)繁殖的药物,以提高包括艾滋病病人在内的免疫功能低下患者的生存质量。方法:用地塞米松皮下注射W istar大鼠,连续9周,建立大鼠PCP模型,腹腔内注射不同剂量的黄芪注射液,连续10天,同时设有感染对照组和正常对照组。停药1周后杀鼠取肺,肺组织印片检查包囊,肺组织病理切片染色观察组织变化。结果:黄芪注射液高剂量注射组的肺组织印片所查包囊数量较治疗前明显减少,肺组织炎症反应较轻。结论:中药黄芪注射液对肺孢子虫有明显的抑制作用,有望用于PCP的治疗。

双氢青蒿素、青蒿琥酯治疗大鼠肺孢子虫肺炎的疗效研究

目的 研究双氢青蒿素、青蒿琥酯对实验大鼠肺孢子虫肺炎的疗效。方法 以醋酸可的松皮下注射Wistar大鼠诱导建立肺孢子虫肺炎动物模型 ,用双氢青蒿素、青蒿琥酯治疗实验大鼠 ,以蒿甲醚、复方磺胺为对照治疗组 ,通过存活率、存活天数、肺重、肺重 /体重比值、肺印片的每视野包囊均数等指标考核疗效。结果 双氢青蒿素 30mg/kg× 5d、6 0mg/kg× 5d治疗组的大鼠存活率提高 ,存活天数延长 ,治疗后体重增加 ,肺重、肺重 /体重比值、肺印片的每视野包囊均数低于模型对照组 ;青蒿琥酯 6 0mg/kg× 5d治疗组除存活率外 ,其余指标接近双氢青蒿素组 ;各治疗组的减虫率均高于 6 0 % ,接近复方磺胺组的73 .1%。结论 双氢青蒿素、青蒿琥酯对大鼠肺孢子虫肺炎具有疗效。

PCR检测大鼠卡氏肺孢子虫的研究

目的探讨PCR技术检测大鼠卡氏肺孢子虫的应用价值。方法SD大鼠和Wistar大鼠均随机分成实验组和对照组,实验组每周两次皮下注射醋酸可的松,诱导产生卡氏肺孢子虫;8week后,收集肺组织和支气管肺泡灌洗液(BALF),用PCR技术检测卡氏肺孢子虫DNA,并与Giemsa染色法比较。结果实验组两种大鼠肺组织卡氏肺孢子虫DNA阳性率分别为9643%和100%,BALF阳性率亦分别为9643%和100%,它们之间均无显著性差异(P>005);BALF的PCR阳性检出率显著高于Giemsa病原染色法,肺组织的两种方法检出率无显著性差异。结论PCR是一种检出率较高的方法,可作为早期诊断PCP的常规方法,特别适用于BALF检测卡氏肺孢子虫DNA。

青蒿素衍生物体外抗卡氏肺孢子虫作用的扫描电镜观察

目的 观察体外培养的卡氏肺孢子虫(Pc)经双氢青蒿素、青蒿琥酯作用后不同时相虫体表面结构变化。方法 将Pc接种入含HepG-2细胞的培养皿内并分别加入双氢青蒿素50μmol/L、青蒿琥酯100μmol/L、喷他脒15μmol/L、0.3％乙醇与空白对照。双氢青蒿素组于用药后1、2、4、8、12、16h作扫描电镜观察,后4组于用药后12h取样作扫描电镜观察。结果 双氢青蒿素作用2h后,Pc表面开始出现损伤,最初为表面绒毛脱落,残存绒毛肿胀呈球状,虫体体积增大。随着时间延长,虫体表面损伤明显,8h后表膜出现大小不等孔洞。青蒿琥酯组改变相同,但较轻微。结论 青蒿素衍生物可引起Pc虫体表膜损伤,通透性增加,功能障碍。

白果内酯抗卡氏肺孢子虫体外作用的研究

目的研究不同浓度白果内酯抗体外培养卡氏肺孢子虫的作用。方法接种卡氏肺孢子虫(Pc)于人肝癌细胞(HepG-2)。4h后加入试验药物和对照试剂。白果内酯浓度分别为:150、100、50、25、12.5μM/L;对照药喷他脒:15μM/L;以后每隔1d取1/10培养液观察,分别作对倍稀释PCR和六亚甲基四胺银(GMS)染色计数Pc包囊。结果卡氏肺包子虫在体外培养细胞上的生长高峰出现于第6d,对倍稀释PCR提示,白果内酯50μMol/L以上浓度对Pc均有抑制作用,白果内酯150μMol/L、100μMol/L对Pc的抑制率分别为91.67%和93.75%,与喷他脒95.83%之间比较,P>0.05,提示以上两浓度的白果内酯对Pc的抑制作用与喷他脒15μMol/L相似;白果内酯50μMol/L与各组间差异均有显著性,提示其作用优于空白对照组,而不及白果内酯100μMol/L组,同时随着药物剂量的增加其抗Pc的作用增强;药物对Pc包囊的抑制率白果内酯150μMol/L、100μMol/L分别为58.85%、53.62%,与喷他脒63.01%比较,P>0.05,提示这两个浓度的白果内酯对Pc包囊的抑制作用与喷他脒15μMol/L相似;其余浓度白果内酯与空白对照组间差异无显著性,提示这几种浓度的白果内酯对Pc包囊无明显的抑制作用。结论白果内酯在体外对Pc有明显抑制作用,白果内酯150μMol/L、100μMol/L对Pc的抑制作用与喷他脒相当。

实验猪卡氏肺孢子虫肺炎模型的建立及药物治疗试验

在住家及野外诱捕到 4只小家鼠、8只黄胸鼠和 5只褐家鼠 ,经皮下注射醋酸可的松 1 0周 ,建立了鼠类卡氏肺孢子虫 ( Pneumocystiscarinii,PC)肺炎模型。取模型鼠肺脏制成鼠 PC包囊接种物 ,给实验 组 8头猪经气管接种 3.2× 1 0 5个 PC包囊 ,且接种前 5d至接种后 4 2 d肌注醋酸可的松。给实验 组 8头猪经气管接种 6 .4× 1 0 5 个 PC包囊。接种后 ,实验 组猪均出现严重的临床症状 ,病理变化呈典型的 PC肺炎 ;实验 组猪均为亚临床症状。对实验 组猪再注射醋酸可的松后 ,出现了类似于实验 组猪的严重临床症状和病理变化。由此表明 ,实验猪免疫力低下时 ,接种外源性 PC可导致典型的 PC肺炎 ;健康实验猪接种外源性 PC,则呈隐性感染 ,经免疫抑制剂处理后可激活病原体 ,导致 PC肺炎。用氨苯砜 -联磺甲氧苄啶对 PC肺炎猪进行治疗试验 。

实验感染大、小鼠和临床疑似病例肺孢子虫mt LSU rRNA基因检测

为探讨PCR技术对实验感染大、小鼠肺孢子虫肺炎(PCP)和临床疑似病例诊断的可行性。用皮下注射地塞米松法诱导SD大鼠和ICR小鼠PCP并收集临床疑似病例24h深部痰液。受试动物解剖后,制备肺印片,经瑞姬氏复合染色镜检确定肺孢子虫(Pc)感染的阳性率;同时,以针对虫体mtLSUrRNA基因设计的引物,PCR扩增鼠肺组织和支气管灌洗液(BALF),以及痰液样本中的DNA;比较实验动物样本镜检和PCR两种方法的检测结果;测定PCR的敏感性和特异性。结果表明,SD大鼠和ICR小鼠肺印片的阳性率分别为68.8%(1116)和85.7%(1821),肺组织PCR检测的阳性率分别为75%(1216)和80.9%(1721),肺泡灌洗液PCR的阳性率分别为81.2%(1316)和23.8%(521)。肺印片镜检和PCR技术检测结果无显著性差别;可见,PCR对虫体mtLSUrRNA基因的检测具有显著的特异性和敏感性,至少可以检测出0.6pg的肺孢子虫DNA;6例临床疑似病例样本中2例显示肺孢子虫PCR阳性反应。