骨形成蛋白4在支气管肺发育不良相关肺动脉高压的肺微循环内皮细胞损伤中的机制研究

目的初步探讨骨形成蛋白4(BMP4)在低氧性支气管肺发育不良相关肺动脉高压(BPD-PH)的肺微循环内皮细胞(PMVEC)持续损伤中的作用机制。方法动物实验:制备低氧性BPD-PH小鼠模型,通过HE染色、免疫荧光、Western印迹比较BMP4基因半敲除(BmP4^(+/-))和野生型(wt)两组小鼠的肺组织形态学、肺微循环数量、肺血管内皮细胞形态和心脏功能;细胞实验:分离PMVEC,免疫荧光鉴定PMVEC,通过免疫印迹、细胞增殖和小管形成实验,分别以不同浓度人重组BMP4(rhBMP4)、不同程度低氧和BMP4抑制剂Noggin评价BMP4对PMVEC持续损伤的影响。结果动物实验发现与野生型相比,BmP4^(+/-)小鼠死亡率降低,体重增加,肺组织BPD样表现(辐射状肺泡计数增加和平均肺泡内衬间隔减少,P<0.05)和右心室肥厚指数均改善(P<0.05),肺微循环标记物血管内皮生长因子(VEGF)表达上调(P<0.01),肺血管内皮受损程度减轻;细胞实验发现:过高浓度的BMP4不利于PMVEC增殖和小管形成;低氧可上调PMVEC中的BMP4水平(P<0.01),2%氧浓度下PMVEC增殖受到抑制(P<0.01),小管成环减少(P<0.01),而加入BMP4抑制剂Noggin后,促进了PMVEC增殖(P<0.01),小管成环增加(P<0.05)。结论低氧引起的BMP4过度表达可以通过影响PMVEC增殖和小管形成导致肺微循环网减少,参与BPD-PH的发病机制。