抗菌肽CGA-N12通过lncRNA CASC2/AQP-1改善念珠菌感染引起的肺泡上皮细胞凋亡的研究

通过构建小鼠念球菌感染肺损伤模型探讨抗菌肽CGA-N12通过lncRNA CASC2/AQP-1改善念珠菌感染引起的肺泡上皮细胞凋亡机制。方法 通过构建小鼠念球菌感染肺损伤模型,实验结束后,取肺组织,检测肺W/d重量比、肺MPO活性等,qRT-PCR检测lncRNA CASC2等分子的表达;western blot检测AQP-1、细胞凋亡相关蛋白表达。结果 在C. albicans诱导的ALI小鼠和肺上皮细胞中,CASC2的表达降低,此外,CASC2和AQP1是相应蛋白表达的靶标,CASC2可以通过调控间接调控AQP1的表达。此外,CASC2和AQP1通过调节靶标来控制上皮细胞的凋亡。结论 通过本次研究验证了lncRNA CASC2与AQP-1靶向结合调控机制。并揭示了抗菌肽CGA-N12通过下调lncRNA CASC2靶向调控AQP-1改善念珠菌感染引起的肺泡上皮细胞凋亡的作用机制。

重症急性胰腺炎肺损伤发病机制中的肺泡Ⅱ型上皮细胞凋亡的作用及乌司他丁干预的实验研究

目的探讨重症急性胰腺炎(SAP)发病机制中其肺泡Ⅱ型上皮细胞凋亡的作用并对乌司他丁对其干预的作用进行分析。方法将42只健康大鼠随机分为3组,分别为假手术组、模型组与乌司他丁干预组,每组14只,以向大鼠十二指肠乳头内侧胰胆管注射脱氧胆酸钠建立SAP大鼠模型,假手术组大鼠仅打开大鼠腹腔轻轻翻动其胰腺后关闭腹腔,乌司他丁干预组于大鼠建模后给予乌司他丁注射。对几组大鼠术后肺组织及胰腺组织的病理变化及相关指标差异进行分析。结果与假手术组比较,SAP组及乌司他丁干预组TNF⁃α、AMY及MDA水平明显更高,乌司他丁干预组与SAP组比较,TNF⁃α、AMY及MDA水平明显更低(P<0.05)。SAP大鼠伴随着明显的肺损伤状况,假手术组、SAP组、乌司他丁干预组肺湿/干比值分别为3.62±0.56、6.48±0.77、4.69±0.63,血气指标PaCO_(2)、PaO_(2)分别为(31.25±1.03)mmHg、(106.52±2.03)mmHg,(48.67±2.01)mmHg、(73.57±2.44)mmHg和(35.22±1.32)mmHg、(90.22±3.01)mmHg),SAP组及乌司他丁干预组大鼠肺湿/干比值及PaCO_(2)明显上升,PaO_(2)明显下降,相较于SAP组,乌司他丁干预组大鼠的肺湿/干比值及PaCO_(2)更低,PaO_(2)更高(P<0.05)。假手术组大鼠肺泡Ⅱ型上皮细胞凋亡率[(3.58±0.57)%]及Ca^(2+)浓度[(34.52±2.35)%]均显著低于SAP组凋亡率[(29.67±4.52)%]及Ca^(2+)浓度[(82.66±4.66)%]及乌司他丁干预组凋亡率[(14.62±3.67)%]及Ca^(2+)浓度[(46.77±5.02)%],乌司他丁干预组大鼠肺泡Ⅱ型上皮细胞凋亡率及Ca^(2+)浓度显著低于SAP组(P<0.05)。假手术组大鼠Caspasee⁃8、BaxmRNA表达均显著低于SAP组及乌司他丁干预组,乌司他丁干预组大鼠Caspasee⁃8、BaxmRNA表达显著低于SAP组(P<0.05)。SAP肺损伤大鼠线粒体细胞破坏明显,乌司他丁对减少线粒体细胞破坏数量具有明显作用。结论SAP肺损伤中肺泡Ⅱ型上皮细胞凋亡可能参与了其作用机制,TNF⁃α、AMY、MDA、Caspasee⁃8、BaxmRNA在肺损伤机制中存在重要作用,乌司他丁干预有利于缓解SAP肺损伤状况,有利于控制病情进展。

川芎嗪调控miR⁃31⁃5p/Ednrb通路抑制人肺泡上皮细胞BEAS⁃2B凋亡和炎症反应

目的探讨川芎嗪(TMP)调控miR⁃31⁃5p/内皮素受体B(Ednrb)通路对人肺泡上皮细胞BEAS⁃2B凋亡和炎症反应的影响。方法采用1μg/mL脂多糖(LPS)处理BEAS⁃2B细胞构建炎症模型。将BEAS⁃2B细胞分为对照组、LPS组、LPS+川芎嗪5μmol/L组、LPS+川芎嗪20μmol/L组、LPS+川芎嗪80μmol/L组、LPS+miR⁃con组、LPS+miR⁃31⁃5p组、LPS+si⁃con组、LPS+si⁃Ednrb组、LPS+川芎嗪+pcDNA组、LPS+川芎嗪+pcDNA⁃Ednrb组。酶连免疫吸附实验(ELISA)试剂盒检测细胞培养液中白介素IL⁃1β、IL⁃6和TNF⁃α(肿瘤坏死因子)的含量;RT⁃qPCR和Western blot检测miR⁃31⁃5p(炎性相关微小RNA)和Ednrb(内皮素受体B)表达。双荧光素酶报告实验和Western blot验证miR⁃31⁃5p对Ednrb的靶向调控关系。结果与对照组比较,LPS组BEAS⁃2B细胞Ednrb蛋白、凋亡率以及IL⁃1β、IL⁃6和TNF⁃α的水平增加,miR⁃31⁃5p表达降低(P<0.01);与LPS组比较,LPS+川芎嗪5μmol/L组、LPS+川芎嗪20μmol/L组、LPS+川芎嗪80μmol/L组BEAS⁃2B细胞Ednrb蛋白表达、凋亡率以及IL⁃1β、IL⁃6和TNF⁃α的水平降低,miR⁃31⁃5p表达升高(P<0.05,P<0.01)。miR⁃31⁃5p靶向负性调控Ednrb表达。与LPS+miR⁃con组比较,LPS+miR⁃31⁃5p组BEAS⁃2B细胞凋亡率以及IL⁃1β、IL⁃6和TNF⁃α的水平降低(P<0.01);与LPS+si⁃con组比较、LPS+si⁃Ednrb组BEAS⁃2B细胞凋亡率以及培养液中IL⁃1β、IL⁃6和TNF⁃α的水平降低(P<0.01);与LPS+川芎嗪+pcDNA组比较,LPS+川芎嗪+pcDNA⁃Ednrb组BEAS⁃2B细胞凋亡率、培养液中IL⁃1β、IL⁃6和TNF⁃α的浓度升高(P<0.05)。结论川芎嗪通过上调miR⁃31⁃5p/Ednrb通路抑制人肺泡上皮细胞BEAS⁃2B凋亡和炎症反应。

氧化应激与肺纤维化肺泡上皮凋亡的研究进展

氧化应激由细胞内产生过量的活性氧簇所导致,是一种氧化与抗氧化体系失衡的应激损伤状态。肺纤维化是一种慢性、进行性、纤维性间质性疾病,其特征在于过量的细胞外基质胶原沉积在远端肺间质中导致的上皮损伤及肌成纤维细胞活化。肺纤维化的发病机制尚未完全明确,近年多项研究表明,氧化应激在肺纤维化形成过程中发挥着重要的作用,且氧化应激可诱导肺泡上皮细胞凋亡,肺泡上皮细胞凋亡可能是肺间质纤维化早期发生、发展的重要因素。该文总结了近年氧化应激与肺纤维化肺泡上皮细胞凋亡的研究进展,以供临床同道参考。

血管紧张素与肺纤维化的研究进展

肺纤维化起始靶位在肺泡腔,病理过程是肺泡上皮基底膜损伤断裂后,激活的成纤维细胞及炎症细胞进入肺泡腔内增殖,使细胞外基质沉积而成。近年来研究发现,血管紧张素在肺组织结构重塑中起重要作用,与成纤维细胞增殖、肺泡上皮细胞凋亡等有关,与肺纤维化的发生发展过程关系密切,本文就血管紧张素与肺纤维化的关系作一综述。