干细胞动员对急性肺损伤幼鼠肺泡表面活性蛋白的影响

目的分析干细胞动员对急性肺损伤(ALI)幼鼠肺泡表面活性蛋白表达的影响。方法选择SPF级BALB/c品系健康幼鼠120只,随机分为动员组、对照组各60只,均经尾静脉注射精制大肠杆菌内毒素脂多糖(LPS)5 mg/kg复制内毒素性肺损伤幼鼠模型,动员组采用皮下注射重组人粒细胞刺激因子(rhG-CSF)30μg/(kg·d)进行干细胞动员干预,对照组注射同等剂量生理盐水,连续5 d,在干预后5 d、10 d、14 d对两组肺组织进行半定量肺损伤评分法及辐射状肺泡计数(RAC)评估,对两组肺表面活性物质蛋白SP-A、SP-D、水通道蛋白5(AQP5),肺组织匀浆SP-A、SP-D、AQP5 mRNA含量的表达水平进行检测。结果对照组5 d、10 d、14 d半定量肺损伤评分逐渐增加(P<0.05);动员组干预后10 d与14 d半定量肺损伤评分均高于干预后5 d(P<0.05);干预后5 d、10 d、14 d,动员组半定量肺损伤评分均低于对照组;干预后10 d半定量肺损伤评分与14 d比较差异有统计学意义(P<0.05);干预后5 d、10 d、14 d动员组RAC值高于对照组(P<0.05);动员组干预后5 d、10 d、14 d肺组织中SP-A、SP-D、AQP5蛋白表达高于对照组(P<0.05),SP-A、SP-D、AQP5 mRNA含量高于对照组(P<0.05)。结论干细胞动员可减轻LPS诱导的幼鼠急性肺损伤,促进其肺泡表面活性物质再生,促进肺恢复。

表面活性蛋白-A 二胺氧化酶与重症肺炎患者急性肠损伤的相关性分析及病情评估价值

目的 探讨重症肺炎患者血清、气道深部痰液中的表面活性蛋白-A(SP-A)与血清二胺氧化酶(DAO)的相关性及对肺和肠组织损伤的评估价值。方法 选取2020年4月至2022年6月重庆市中医院重症医学科收治的重症肺炎患者72例为试验组,参照肺炎严重指数(PSI)、急性生理学与慢性健康状况评估系统Ⅱ(APACHEⅡ)评分,分为中危组(18例)、高危组(25例)、极高危组(29例);根据急性胃肠损伤分级(AGI)分为Ⅰ级(12例)、Ⅱ级(19例)、Ⅲ级(17例)、Ⅳ级(24例)。另外选择同期健康体检者30例为对照组。收集入组患者的一般资料、血清SP-A、气道深部痰液SP-A及血清DAO水平。分析各检测指标的相关性,并绘制受试者工作特征(ROC)曲线分析相关指标检测意义。结果 两类分组中血清DAO与血清SP-A均呈中度正相关(r=0.567,r=0.501,P<0.05)、与痰液SP-A均呈中度负相关(r=-0.675,r=-0.633,P<0.05);血清SP-A与痰液SP-A分别呈高度、中度负相关(r=-0.724,r=-0.648,P<0.05)。重症肺炎严重程度与血清DAO、血清SP-A均呈中度正相关(r=0.634,r=0.567,P<0.05),与痰液SP-A呈高度负相关(r=-0.783,P<0.05);AGI等级与血清DAO、血清SP-A均呈中度正相关(r=0.677,r=0.550,P<0.05),与痰液SP-A呈中度负相关(r=-0.473,P<0.05)。绘制ROC曲线显示,血清DAO、血清SP-A、痰液SP-A单独及联合评估重症肺炎严重程度的AUC及其AGI分级的AUC均>0.70,均有一定评估价值,其中联合检测价值最高(AUC分别0.890、0.803)。结论 重症肺炎患者肺、肠损伤程度与血清DAO、血清SP-A水平均呈正相关,与气道深部痰液SP-A水平呈负相关。血清SP-A、气道深部痰液SP-A与血清DAO均可评估重症肺炎严重程度及肠组织损伤程度,三者联合观察更加准确。

难治性支原体肺炎患儿支气管肺泡灌洗液中表面活性物质相关蛋白-A表达与肺功能的关系

目的探讨难治性支原体肺炎(RMPP)患儿支气管肺泡灌洗液(BALF)中表面活性物质相关蛋白-A(SPA)的表达与肺功能的相关性。方法选择2015年1月至2016年12月鹤壁市人民医院收治的RMPP患儿30例,分别于急性期和恢复期检测患儿动脉血氧分压(PaO_2)、动脉血二氧化碳分压(PaCO_2)、第1秒用力呼气量(FEV1)和用力肺活量(FVC),并行支气管肺泡灌洗,收集BALF,采用酶联免疫吸附试验检测BALF中SP-A水平。结果 RMPP患儿急性期和恢复期BALF中SP-A水平分别为(3.63±0.09)、(5.86±0.17)mg·L^(-1),RMPP患儿急性期BALF中SP-A水平显著低于恢复期(t=-63.499,P<0.05)。RMPP患儿急性期PaO_2和PaCO_2分别为(49.25±7.32)、(47.16±6.48)mm Hg,恢复期PaO_2和PaCO_2分别为(76.54±6.48)、(36.20±5.61)mm Hg;RMPP患儿急性期PaO_2显著低于恢复期(t=^(-1)5.289,P<0.05),急性期PaCO_2显著高于恢复期(t=7.004,P<0.05)。RMPP患儿急性期FEV1、FVC和FEV1/FVC分别为(1.36±0.67)、(1.68±0.31)L和69.85±8.34,恢复期FEV1、FVC和FEV1/FVC分别为(1.89±0.58)、(1.99±0.53)L和87.32±9.52;RMPP患儿急性期FEV1、FVC和FEV1/FVC显著低于恢复期(t=-3.276、-2.765、-7.560,P<0.05)。RMPP患儿BALF中SP-A水平与PaO_2呈正相关(r=0.921 6,P<0.05),与PaCO_2无显著相关(r=1.211 4,P>0.05);BALF中SP-A水平与FEV1、FVC和FEV1/FVC均呈正相关(r=0.831、0.905、0.803,P<0.05)。结论 RMPP患儿BALF中SP-A水平与呼吸功能呈正相关,检测患儿BALF中SP-A水平有助于评估患儿肺功能,判断患儿病情。

不同因素致急性肺损伤大鼠的病理转归及肺泡表面活性蛋白-A的动态变化

不同原因导致的急性肺损伤的程度、病程演变及转归是否相同，值得进一步深入研究。肺泡表面活性蛋白-A（surfactant protein—A，SP—A）在急性肺损伤发生发展中的作用备受关注。本研究采用内毒素及博来霉素诱导大鼠急性肺损伤，探讨肺损伤的病理组织学及SP-A的动态变化及意义。

不同胎龄人胚肺支气管肺泡灌洗液表面活性物质蛋白A、D的变化

目的探讨不同发育时期人胚胎支气管肺泡灌洗液(BALF)中表面活性蛋白A、D(SP—A、SP—D)含量的变化规律。方法对临床收集来的水囊引产正常胎儿进行支气管肺泡灌洗(30mL生理盐水),回收灌洗液[总回收率(856±13.1)%],并进行蛋白定量分析.反向间接血凝法和ELISA法测定不同胎龄胎儿和新生儿BALF中SP—A、SP—D含量。结果BALF中总蛋白浓度从胎龄第10周开始随胚肺发育逐渐升高至出生时的高峰。其中SP-A和SP—D含量也分别由[(0.34±007)、(0.05±001)ng/L]逐渐达到出生时峰值[(6.42±0.36)、(1.22±0.13)ng/L]。结论随着胎龄增长和胚肺发育.胚肺BALF中蛋白分泌增加.SP—A和SP—D合成逐渐达到出生时高峰.是新生儿肺成熟度的重要标志。

烟雾吸入性肺损伤肺泡表面活性物质结合蛋白A表达异常机制的研究

为探讨烟雾吸入性肺损伤肺泡表面活性物质结合蛋白A (SPA)表达异常机制。本实验采用烟雾吸入性肺损伤大鼠模型 ,研究吸入伤后肺氧化应激及SPAmRNA表达情况。提取SPA转录因子(TTF1) ,采用EMSA实验 ,研究氧化应激对TTF1与SPA基因调控区DNA结合活性的影响。结果发现 ,烟雾吸入伤后肺组织过氧化氢 (H2 O2 )含量显著增加 ,SPAmRNA表达下降 ;EMSA实验显示 ,H2 O2 剂量依赖地抑制TTF1与SPA基因调控区DNA结合活性。研究表明 ,氧化应激对TTF1活性抑制可能是烟雾吸入性肺损伤SPA表达下降的原因。

异氟醚对肺泡Ⅱ型细胞表面活性物质相关蛋白A的影响

目的 通过原代培养的正常及受H2 O2 损伤的肺泡Ⅱ型上皮细胞 (ATⅡcell) ,探讨异氟醚 (Iso)对肺泡Ⅱ型上皮细胞表面活性物质相关蛋白A(SP A)的影响。方法 肺泡Ⅱ型上皮细胞培养 32小时后 ,被分为六组 :对照组 (不加任何药物 )、0 2 8mmol/LIso组、2 8mmol/LIso组、75 μmol/LH2 O2 组、75 μmol/LH2 O2 +0 2 8mmol/LIso组和 75 μmol/LH2 O2 +2 8mmol/LIso组 ,继续培养 3小时。通过酶联免疫吸附法 (ELISA)检测Ⅱ型上皮细胞内和培养液中SP A含量。结果 Iso降低正常肺泡Ⅱ型上皮细胞内和培养液中SP A含量 ;经H2 O2 作用后 ,SP A含量亦显著减少 ,异氟醚增强H2 O2 的作用。结论 Iso可降低肺泡Ⅱ型上皮细胞合成SP A的功能 ,尤其是在过氧化环境中。

慢性阻塞性肺疾病患者血清中肺泡表面活性蛋白D水平变化的研究

目的探讨慢性阻塞性肺疾病(COPD)患者血清中肺泡表面活性蛋白D(SP-D)的水平变化及其临床意义。方法检测29例COPD急性加重期、26例COPD稳定期及19例健康人血清SP-D水平,比较各组间的差异;并采用多元线性回归分析影响SP-D水平可能的因素,探讨SP-D与肺功能之间的相关性。结果 COPD急性加重期患者血清SP-D为(70.6±20.7)ng/mL,较COPD稳定期和健康对照组均显著增加[(47.9±13.3)ng/mL和(31.2±11.4)ng/mL,P<0.01],COPD稳定期患者血清SP-D水平也明显高于健康对照组(P<0.01)。血清中SP-D与吸烟指数、COPD分期呈正相关,与稳定期COPD患者的FEV1%pred呈负相关。结论血清SP-D在COPD的诊断、分级和分期中有一定的应用价值。

单肺通气大鼠肺泡表面活性蛋白表达的研究

目的研究单肺通气(OLV)大鼠肺组织肺泡表面活性蛋白A(SP-A)和肺泡表面活性蛋白B(SP-B)表达的变化。方法 42只SD大鼠随机分成单肺通气组(A组)、双肺通气对照组(B组)和空白对照组(C组)。A组和B组根据不同的通气时间分成亚组A1、A2、A3组和B1、B2、B3组,将气管导管过深插管至右肺建立右肺OLV模型。分别取各组左右两侧肺组织,光镜下观察其肺泡结构及肺间质的病理变化,免疫印迹法检测肺组织中SP-A和SP-B蛋白水平。结果与C组相比较,随着通气时间的延长,A组和B组肺组织逐渐表现出肺泡充血水肿、肺间质逐渐增厚,且在A组非通气侧这些病理变化更为严重。与C组比较,A组各亚组SP-A和SP-B蛋白表达均减少(P<0.05),且随着OLV时间延长,蛋白表达减少更加明显(P<0.05);与B组各亚组对应侧肺比较,A组中各亚组左侧肺SP-A和SP-B蛋白表达均减少(P<0.05),右侧肺SP-A蛋白表达差异无统计学意义(P>0.05),右侧肺SP-B蛋白表达在A1、A2组差异无统计学意义(P>0.05),而在A3组则比B3组蛋白表达减少(P<0.05);A组各亚组组内两侧肺比较,SP-A和SP-B蛋白在A组各亚组左侧肺均比右侧肺蛋白表达减少(P<0.05)。结论 OLV可致SP-A和SP-B表达下调,且非通气侧比相同时间的双肺通气肺组织下调更明显,这可能是OLV所致肺损伤更加严重的重要因素。

气管切开插管大鼠肺组织病理及肺泡灌洗液肺泡表面活性物质相关蛋白A浓度的变化情况

目的探讨气管切开插管大鼠肺组织病理及肺泡灌洗液肺泡表面活性物质相关蛋白A(SP-A)的变化情况。方法将36只雄性SD大鼠采用随机数字表法分为空白对照组(A组)18只、气管切开插管模型组(B组)18只。于建立模型后24 h、72 h、168 h分别取各组大鼠6只,并取右肺组织行病理切片检查,进行Smith评分评估肺组织损伤情况;取左肺肺泡灌洗液检测SP-A浓度。结果肺组织病理结果显示B组大鼠在建模后24 h、72 h、168 h均有不同程度的水肿、肺泡及间质炎症、出血、肺不张等肺组织损伤,各时间点Smith评分均明显高于A组(P<0.05),并随着时间的延长而增高(P<0.05)。B组大鼠肺泡灌洗液SP-A浓度在各时间点均明显高于A组(P<0.05),且随气管切开插管时间的延长而降低(P<0.05)。结论气管切开插管可导致水肿、肺泡炎症、出血、肺不张等肺组织损伤及肺部固有免疫功能紊乱,SP-A有保护肺组织作用,气管切开插管早期SP-A代偿性增高,随后逐渐下降。

支气管结核患者支气管肺泡灌洗液中骨桥蛋白和表面活性蛋白D的水平变化及其临床意义

目的探讨支气管结核患者支气管肺泡灌洗液(BALF)中骨桥蛋白(OPN)和表面活性蛋白D(SPD)的水平变化及其临床意义。方法选取2016年5月至2017年5月收治的55例支气管结核的患者作为支气管结核组,55例支气管哮喘患者作为支气管哮喘组,55例健康体检者作为对照组。采用酶联免疫吸附实验(ELISA)法测定BALF中OPN和SPD水平。将患者分为痰菌阳性组和痰菌阴性组,比较两组患者的OPN和SPD水平差异。将支气管结核患者分为活动期和非活动期两组,比较两组患者的OPN和SPD水平差异。结果支气管结核组和支气管哮喘组的OPN和SPD水平均高于对照组(P<0.05),支气管结核组的OPN和SPD水平显著高于支气管哮喘组。痰菌阳性组患者的OPN和SPD水平显著高于痰菌阴性组患者。活动性支气管结核组患者的OPN和SPD水平显著高于非活动性支气管结核组患者。OPN和SPD水平与痰菌涂片和结核活动性均具有相关性(P<0.05)。结论支气管结核患者BALF中的OPN和SPD水平显著升高,且与病灶的痰菌涂片和结核活动性密切相关。

慢性阻塞性肺疾病机械通气患者肺泡灌洗液中肺表面活性物质相关蛋白D及白介素-6的临床意义

目的探讨慢性阻塞性肺疾病（COPD）机械通气患者肺泡灌洗液（BALF）中白介素-6（IL-6）与肺表面活性物质相关蛋白D（SP-D）水平的意义。方法62例COPD患者，患者入院后进行APACHEⅡ评分，根据评分结果分为病情缓解组40例（APACHEⅡ评分6．1～8．3分）与病情加重组22例（APACHEU评分8．5～12．4分），收集两组患者机械通气第1天、第5天的肺泡灌洗液，采用酶联免疫吸附（ELISA）法检测其中IL-6、SP—D浓度，比较两组患者肺泡灌洗液中IL-6、SP—D水平。结果病情缓解组行机械通气后第1天，肺泡灌洗液中IL-6、SP—D浓度明显高于病情加重组（P〈0．05），机械通气后第5天，肺泡灌洗液中IL-6浓度低于病情加重组，而SP—D浓度高于病情加重组（P〈0．05）。结论检测COPD机械通气患者肺泡灌洗液中IL-6、SP—D水平变化，有助于了解患者病情变化，预测预后。

高碳酸培养环境对A549细胞合成、分泌肺泡表面活性蛋白C的影响

目的研究不同培养浓度CO2对A549活性、合成和分泌肺泡表面活性蛋白C(SP-C)的影响,为允许性高碳酸血症的肺保护机制提供理论依据。方法 A549细胞按不同CO2培养浓度分为A组(5%CO2)、B组(10%CO2)和C组(18%CO2)。细胞培养24 h、36 h、48 h后,采用噻唑蓝(MTT)比色法检测细胞活性;免疫印迹法检测细胞内肺泡表面活性蛋白C前体蛋白(proSP-C)的水平;酶联免疫吸附测定法检测细胞培养上清液中SP-C的浓度。结果 (1)与A组比较,B组各观测点的细胞活性均增高;C组的细胞活性则在36 h、48 h降低。(2)B组36 h、48 h细胞培养液中SP-C浓度较A组升高,但是细胞内proSP-C差异无统计学意义。(3)与A组比较,C组24 h培养液中的SP-C浓度已开始降低,但胞内proSP-C在36 h才开始下降。结论 (1)一定的CO2培养浓度升高不影响A549的活性,对SP-C的合成和分泌起促进作用;(2)过高的CO2培养浓度可抑制A549的活性、SP-C的合成和分泌。

肺泡表面活性物质相关蛋白A在慢性心源性肺水肿大鼠肺组织中的表达

目的观察慢性心源性肺水肿大鼠肺组织病理形态学改变,研究其肺泡表面活性物质相关蛋白A及肺泡灌洗液中TNF-α、IL-1、IL-6的表达,阐述它们在慢性心源性肺水肿发病机制中的作用。方法 14只自发性高血压大鼠高脂饮食饲养1年,建立慢性心源性肺水肿模型,14只血压正常大鼠以正常饮食饲养1年,为正常对照组,分别以免疫组织化学染色检测各组大鼠肺组织中SP-A的表达。RT-PCR法检测各组大鼠肺组织SP-A mRNA的表达,ELISA法检测各组大鼠支气管肺泡灌洗液中TNF-α、IL-1、IL-6的水平。结果试验组肺组织中SP-A mRNA的表达较对照组明显上调(P<0.05),肺泡灌洗液中TNF-α、IL-1、IL-6水平明显高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。SP-A mRNA表达与支气管肺泡灌洗液中TNF-α、IL-1、IL-6的水平呈显著正相关(r=0.612、r=0.702、r=0.824,P<0.05)。结论慢性心源性肺水肿大鼠的肺组织中SP-A mRNA的表达较对照组明显上调,且与支气管肺泡灌洗液中TNF-α、IL-1、IL-6的水平呈显著正相关。SP-A及TNF-α、IL-1、IL-6均与慢性心源性肺水肿的发生发展过程密切相关,但因果关系不明。

新生儿肺泡表面活性物质蛋白A基因多态性与肺炎易感性、炎症反应程度的相关性

目的:研究新生儿肺泡表面活性物质蛋白A基因多态性与肺炎易感性、炎症反应程度的相关性。方法:选择在本院出生且诊断为肺炎的新生儿作为肺炎组,非感染新生儿作为对照组。测定SP-A基因rs1059054和rs1136454位点的多态性、血清中炎症细胞因子的含量、外周血炎症转录因子的表达量。结果:肺炎组新生儿rs1059054位点CC基因型的构成比显著高于对照组,CT、TT基因型的构成比显著低于对照组;rs1136454位点AA基因型的构成比显著低于对照组,AG、GG基因型的构成比显著高于对照组。SP-A基因rs1059054位点CC基因型肺炎患儿血清中PCT、sTREM1、TNF-α、IL-6的含量以及外周血中RORγt的mRNA表达量显著高于CT基因型、TT基因型肺炎患儿,外周血中SOCS1、Foxp3的mRNA表达量显著低于CT基因型、TT基因型肺炎患儿;SP-A基因rs1136454位点AA基因型肺炎患儿血清中PCT、sTREM1、TNF-α、IL-6的含量以及外周血中RORγt的mRNA表达量显著低于AG基因型、GG基因型肺炎患儿,外周血中SOCS1、Foxp3的mRNA表达量显著高于AG基因型、GG基因型肺炎患儿。结论:新生儿SP-A基因rs1059054位点CC基因型会增加肺炎易感性并加重炎症反应,rs1136454位点AA基因型会降低肺炎易感性并减轻炎症反应。

咽鼓管管旁腺腺体中表面活性蛋白-A和β防御素2的表达及意义

目的检测表面活性蛋白-A(surfactant protein A,SP-A)和β防御素2(β-defensin-2,BD2)在小鼠咽鼓管管旁腺腺体的表达和分布,初步探讨咽鼓管管旁腺腺体的分泌功能及其在中耳防御机制中的作用。方法取 SPF 级昆明小鼠的咽鼓管,石蜡切片,HE 染色显示管旁腺体正常位置和组成成分,采用免疫组织化学技术链霉菌抗生物素蛋白过氧化物酶(strept-avidin oxidase,SP)法检测 SP-A 和 BD2在小鼠咽鼓管管旁腺腺体的表达及分布。结果①咽鼓管管旁腺腺体位于咽鼓管管腔内侧壁,由浆液性、黏液性及混合性腺体组成;②SP-A 和BD2在小鼠的咽鼓管管旁腺腺体中呈阳性表达。免疫阳性产物定位于浆液性腺体细胞胞浆和部分黏液性腺体细胞核周胞浆。阳性产物集中于咽部及咽口部腺体。结论咽鼓管管旁腺腺体可分泌 SP-A 和 BD2。SP-A 降低咽鼓管管腔表面张力,维持纤毛黏液系统的正常功能,BD2和 SP-A 清除入侵的病原体,对维持正常中耳的无菌状态起着一定的作用。咽鼓管管旁腺腺体是中耳防御体系中的机体保护屏障。

急性中耳炎小鼠咽鼓管管旁腺体中表面活性蛋白-A的表达

目的研究急性中耳炎期间咽鼓管管旁腺体中表面活性蛋白-A(SP-A)的表达,探讨咽鼓管管旁腺体在防止中耳感染中的作用。方法用免疫组织化学方法结合图像分析技术检测Ⅲ型肺炎链球菌悬液中耳腔注射后的不同时段的小鼠咽鼓管管旁腺体中SP-A的表达。结果实验组和对照组的咽鼓管管旁腺体中均有SP-A的表达,中耳感染急性期的表达较对照组呈现出时间依赖性增强(P<0.05)。结论咽鼓管管旁腺体在中耳感染的急性期可通过增加释放SP-A清除病菌,在防止中耳感染上可能起重要作用。

特发性肺纤维化患者血清肺泡表面活性蛋白-D水平与其病情分期的相关性分析

研究特发性肺纤维化(IPF)患者的血清肺泡表面活性蛋白-D(SP-D)水平与其病情分期的相关性。选取从2015年3月至2016年5月,于笔者所在医院接受治疗的IPF加重期患者25例,另取同期IPF稳定期患者25例以及正常体检者25例。分别对比三组血清SP-D水平,并做相关性分析。同时对加重期组治疗前后有效组与无效组患者血清SP-D水平进行比较。健康对照组血清SP-D水平(93.1±3.6)ng/ml显著低于稳定期组(121.6±6.2)ng/ml,而稳定期组又显著低于加重期组(180.8±9.7)ng/ml,差异均有统计学意义(P<0.05)。血清SP-D水平与IPF患者病情(FEV1.0/FVC%)呈显著相关性(r=-0.837,P=0.000)。加重期患者经治疗后,有效组患者治疗后血清SP-D水平(137.7±3.2)ng/ml显著低于治疗前(181.5±3.5)ng/ml,同时显著低于无效组(180.5±4.6)ng/ml,差异有统计学意义(均P<0.05)。IPF患者的血清SP-D水平与病情分期及严重程度呈显著相关性,能够用于IPF病情的进展和评估预后的辅助性监测。

表面活性蛋白-A对脂多糖诱导的人肾小管近曲上皮细胞白介素-6表达的影响

目的：探讨表面活性蛋白-A（SP-A）的表达改变对脂多糖（LPS）诱导的人肾小管近曲上皮细胞（HK-2细胞）白介素-6（IL-6）表达的影响及机制。方法培养HK-2细胞，ELISA方法检测不同浓度的LPS（0、0．1、1、2、5、10 mg／L）作用8 h及5 mg／L的LPS于不同时间（0、2、4、8、16、24 h）作用HK-2细胞后IL-6蛋白表达的变化；应用脂质体转染法将SP-A SiRNA转染入HK-2细胞，筛选稳定转染细胞株，采用5 mg／L的LPS刺激SP-A SiRNA稳定转染的HK-2细胞8 h，ELISA方法检测细胞上清中IL-6的分泌量，Western印迹检测细胞NF-κB p65蛋白的表达。结果应用1、2、5、10 mg／L的LPS刺激HK-2细胞8 h后，IL-6蛋白表达水平较0、0．1 mg／L的LPS刺激后显著升高（P＜0．05）；同时，应用5 mg／L的LPS作用HK-2细胞4、8、16、24 h后，IL-6蛋白的表达水平较5 mg／L的LPS作用0、2 h显著升高（P＜0．05）。SP-A SiRNA转染的HK-2细胞经LPS刺激后，其NF-κBP65和IL-6蛋白表达较未转染经LPS刺激细胞明显升高（P＜0．05）。结论 SP-A可能通过抑制NF-κB p65的表达进而下调LPS诱导的HK-2细胞IL-6的表达，在脓毒症急性肾损伤时发挥保护作用。

稳定期COPD患者外周血肺表面活性蛋白-A和肿瘤坏死因子-α及生长分化因子-15的表达及意义

目的探讨稳定期慢性阻塞性肺疾病(COPD)患者外周血肺泡表面活性蛋白-A(SP-A)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)及生长分化因子-15(GDF-15)的表达水平及意义。方法将99例稳定期COPD患者作为观察组,同期54例体检健康者作为对照组,比较2组受试者外周血SP-A、TNF-α、GDF-15水平及一秒用力呼气容积占预计值百分比(FEV1%pred)、一秒用力呼气容积与用力肺活量比值(FEV1/FVC),比较不同慢性阻塞性肺疾病全球倡议(GOLD)分级COPD患者外周血SP-A、TNF-α及GDF-15水平;采用Spearman分析COPD患者外周血SPA、TNF-α、GDF-15水平与FEV1%pred、FEV1/FVC的相关性,Pearson分析COPD患者外周血SP-A、TNF-α、GDF-15水平与各级GOLD的相关性。结果观察组SP-A、TNF-α、GDF-15水平高于对照组,FEV1%pred、FEV1/FVC低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);Ⅲ~Ⅳ级COPD患者外周血SP-A、TNF-α、GDF-15水平高于Ⅰ~Ⅱ级患者,差异有统计学意义(P<0.05);COPD患者外周血SP-A、TNF-α及GDF-15水平均与FEV1%pred、FEV1/FVC呈负相关关系(P<0.01),GOLD分级与患者外周血SP-A、TNF-α、GDF-15水平呈正相关关系(r=0.391、0.412、0.354,P<0.01)。结论稳定期COPD患者外周血SP-A、TNF-α、GDF-15水平升高,与FEV1%pred、FEV1/FVC呈负相关、与病情严重程度呈正相关。