急性肺损伤/急性呼吸窘迫综合征大鼠肾素-血管紧张素系统的变化及其干预的实验研究

目的:观察油酸诱导的急性肺损伤/急性呼吸窘迫综合征(ALI/ARDS)中肾素-血管紧张素系统(RAS)的变化,探索ALI/ARDS治疗新途径。方法:①建立ALI/ARDS动物模型,并利用症状、动脉血气分析、肺湿/干重比(W/D)和肺组织病理等指标评估;采用紫外分光光度法和放射免疫法分别测定RAS关键酶:血管紧张素转换酶(ACE)、ACE2和血管紧张素Ⅱ(AngⅡ),并研究其变化规律。②分别给模型鼠腹腔注射卡托普利、重组大鼠ACE2(rmACE2)和氯沙坦,观察干预效果。结果:①模型评判及RAS变化:模型复制成功,油酸组大鼠肺水含量较正常组明显增多(W/D:6.71±0.64 vs 4.02±0.10,P<0.01),氧合指数明显下降(PaO_2/FiO_2:267±19 vs 450±15,P<0.01),且病理显示明显的肺损伤改变;油酸组血浆中ACE2表达下降,而ACE表达明显升高,氯沙坦组ACE表达降低,对应ACE2表达升高;油酸组大鼠血浆AngⅡ水平明显增高,而氯沙坦组水平降低(76.50±29.21 vs 118.92±45.48,P<0.05,单位:Pg/ml)。②RAS药物对ALI/ARDS的影响:与油酸组比较,卡托普利组W/D明显降低(5.35±0.25 vs 6.06±0.22,P<0.05),而rmACE2组也出现下降趋势(6.33±0.32 vs 6.71±0.64,单位:U),但无明显统计学差异(P=0.542)。氯沙坦组降低最显著(5.35±0.25,P<0.01,单位:U);氯沙坦可提高ALI/ARDS大鼠7d生存率。结论:①RAS存在激活,表现为关键酶发生显著变化:ACE、AngⅡ的升高和ACE2的降低。②干预RAS能部分改善ALI/ARDS肺损伤。其中以氨沙坦作用最为显著,且能最终提高7d生存率。③RAS可能开辟ALI/ARDS药物治疗的新时代,有望降低ALI/ARDS病死率。

川芎嗪对大鼠急性坏死性胰腺炎肺损伤的保护作用

目的探讨微循环障碍在急性坏死性胰腺炎肺损伤中的作用,同时观察川芎嗪对胰腺炎肺损伤的干预效应。方法SD大鼠192只,随机均分为对照组(C)、胰腺炎组(P)、川芎嗪治疗组(T)。大鼠胰腺被膜下均匀注射5%牛磺胆酸钠4ml·kg-1,制作急性坏死性胰腺炎模型,C组胰腺被膜下注射等量生理盐水,T组经股静脉注射0.6%川芎嗪10ml·kg-1。每组中8只SD大鼠采用放射性生物微球技术,在制模后0.5、2.0、6.0、12.0h分别测定肺的血流量,另8只用于胰腺、肺的病理评分,以肺组织的过氧化酶(MPO)活性、肺湿/干重比作为衡量肺损伤的指标。结果P、C组相比,各时相肺脏的血流量均明显降低(P<0.05);各时相病理改变明显加重,时间越长,损害越重,其程度与血流量相关;肺干/湿明显加重,组织MPO活性明显增加(P<0.05或P<0.01)。T、P组相比,各时相肺的血流量较P组均明显降低(P<0.01);各时相病理改变明显减轻,肺干/湿无明显变化(P>0.05),组织MPO活性明显下降(P<0.05)。急性坏死性胰腺炎(ANP)时,肺组织血流量与肺湿/干重比率、肺组织MPO活性、肺组织损伤程度呈显著负相关。结论微循环障碍在急性坏死性胰腺炎的肺组织损伤中起着重要的作用。川芎嗪可以改善微循环,减轻胰腺及肺损害。

急性肺缺血再灌注引起肺组织表面活性物质相关蛋白A变化实验研究

目的:探讨肺急性肺缺血再灌注(ischemia reperfution,I/R)时表面活性物质相关蛋白A(surfactant-associated protein A,SP-A)含量的变化与肺损伤的关系。方法:40只健康的SD大鼠,雌雄不拘,随机分成5组:假手术组(S)、单纯缺组(I)、再灌注1h组(R1组)、再灌注2h组(R2组)、再灌注6h组(R3组)。根据Eppinger模型建立原位阻断左肺门大鼠温肺I/R模型。术毕测定各组血清丙二醛(MDA)及肺湿/干重比例(W/D)、病理观察、用Western-Blot及免疫组化法检测各组肺组织中SP-A。结果:(1)MDA、肺W/D在I组即较S组开始升高,予再灌注后,各组MDA、肺W/D随再灌注时间的延长明显升高(P<0.05);(2)SP-A在S组表达最多,在I组表达减少,再灌注后随时间的延长表达更少(P<0.05)。结论:大鼠肺急性I/R后,肺表面活性物质相关蛋白A减少是造成肺一系列损害的重要因素。

硫辛酸对ALI／ARDS大鼠肺组织学改变的影响

急性肺损伤（ALI）是急性呼吸窘迫综合征（ARDS）的早期阶段，死亡率高。硫辛酸（LA）是一个多功能的抗氧化剂。本研究通过内毒素（LPS）诱导大鼠ALI模型，观察LA对ALI肺组织学的影响，为临床防治Au提供理论依据。

输血相关急性肺损伤小鼠模型的建立

目的探索建立输血相关急性肺损伤(TRALI)小鼠模型。方法雄性Balb/c小鼠随机分为5组(分别命名为A、B、C、D及E组),前4组小鼠5只/组,E组15只/组。E组(TRALI模型组):每只小鼠腹腔注射1 mg/m L脂多糖(LPS)预处理,注射剂量为0.1 mg/(kg·只),24 h后尾静脉注射1 mg/m L H2Kd单克隆抗体,注射剂量为2.25mg/(kg·只),建立TRALI小鼠模型;其余均为对照组,其中A为空白对照组,B为注射LPS组,C为注射LPS及24 h后注射生理盐水(NS)组,D为注射H2Kd单克隆抗体组。分析各组小鼠肺组织病理、肺湿重/干重比、直肠温度、死亡率等指标,建立TRALI小鼠模型,并以此为基础,对阿司匹林(ASA)干预小鼠TRALI的效果做验证。结果与对照组相比,TRALI模型组小鼠2 h的直肠温度(31.060±0.472)℃,明显低于其他各对照组小鼠(P<0.01),肺湿重/干重比为7.642±1.309,则较其他各组明显增加(P<0.01);TRALI模型组小鼠肺组织出现肺泡间隔增厚,肺泡壁断裂,肺泡内纤维蛋白浸润等病理变化,符合TRALI急性肺损伤典型的症状及体征;在ASA干预后2 h,TRALI小鼠死亡率为0,肺水肿明显减轻(P<0.01)。结论成功建立了TRALI小鼠模型,该模型能够模拟TRALI的临床表现,可重复性强,稳定性好,有助于解释TRALI病理过程、探索TRALI的救治措施。

尾加压素受体拮抗剂对急性肺损伤的干预效应

目的探讨尾加压素受体拮抗剂（urotensin receptor antagonist,URA）对损伤肺的影响。方法健康SPF级Sprague Dawley（SD）大鼠49只,随机分为A、B、C三组：抽取7只注射生理盐水作为正常对照（A组）;B、C两组各21只,二组所有大鼠用油酸复制急性肺损伤（acute lung injury,ALI）模型,B组为模型对照组,C组在模型基础上加用URA为干预组。三组均于注射后3h各抽动脉血作血气分析测定血氧分压,A组抽动脉血后全部活杀取肺,B、C两组分别于3（抽动脉血后）及12、24h三个时间段各取7只活杀取肺,右肺称湿重后烘干,左肺立即以中性福尔马林固定作病理切片。结果A组大鼠注射生理盐水后无异常表现,B、C两组注射油酸后均出现呼吸急促、活动减少或不合群、紫绀等表现,与A组相比,B、C两组动脉血氧分压（PaO2）明显下降（P〈0.05）,肺湿/干（W/D）比值明显升高（P〈0.05）,但A、B两组间差异无统计学意义（P〉0.05）。C组活动能力改善较B组更快,肺组织病理符合急性肺损伤变化,随时间延长,炎症细胞、红细胞、肺水肿进行性加重,但C组红细胞渗出较B组有所减少。结论尾加压素受体拮抗剂可能对急性肺损伤动物肺损害有保护作用。

高压氧预处理对高原肺水肿大鼠肺水通道蛋白-1的影响

目的 观察高压氧（HBO）预处理对高原肺水肿（high-altitude pulmonary edema,HAPE）大鼠肺水通道蛋白-1（aquaporin-1,AQP-1）的影响.方法 38只Wistar大鼠按数字表法随机分为对照组（C组）、HAPE模型组（HAPE组）及高压氧预处理组（HBO组）.制作HAPE模型后,分别以Western Blot法及实时PCR法检测各组大鼠肺AQP-1蛋白、基因表达,同时观察肺水含量及肺病理变化.结果 HAPE组肺湿/干重比明显高于C组;HBO组肺损伤积分明显低于HAPE组;HAPE组AQP-1及AQP-1mRNA表达较C组显著降低,HBO组AQP-1及AQP-1mRNA表达均明显高于HAPE组.结论 AQP-1表达降低可能是HAPE的发病机制;HBO预处理能上调AQP-1表达,具有预防和减轻HAPE的作用.