肺炎克雷佰氏菌药敏的临床观察

目的:对196株肺炎克雷佰氏菌药敏分析,为婴幼儿治疗合理用药提供依据。方法:采用美国Microscanautoscan4细菌自动鉴定药敏分析仪。结果判断按美国国家临床实验室标准化委员会(NCCLS)制定标准进行。结果;①出生1～30天患儿肺炎克雷佰氏菌感染率20.9%,1个月～12个月患儿感染率62.3%,高于国内文献报道。②196株肺炎克雷佰氏菌对20种常用抗生素最敏感的是亚胺硫霉素敏感率98.0%,依次是妥布霉素87.8%、丁胺卡那霉素86.2%、呱拉西林84.7%、庆大霉素82.1%、头孢西丁70.9%、环丙氟哌酸68.4%、复方新诺明67.9%,其它12种抗生素耐药率达56.6%～94.9%。结论:婴幼儿细胞及体液免疫功能差,妇幼保健院应加强围产期及婴幼儿健康保健工作。肺炎克雷佰氏菌耐药的危险性,应引起相关医务工作者高度重视。

肺炎克雷伯菌毒力因子的分布特征及其对小鼠的致死性

为分析肺炎克雷伯菌各种毒力因子的致病性,本文用PCR的方法检测高黏性厚荚膜形成相关因子-染色体和质粒介导的c-rmpA和p-rmpA/p-rmpA2,铁载体基因(iucA、iroN、ybtS,enterobactin),III型黏附因子(MrkD)及溶血毒素;用动物实验检测LD50值。结果表明:57株肺炎克雷伯菌临床分离菌株分为高黏性菌(22.81%,13/57)和非黏性菌(77.19%,44/57)。不同于非黏性菌,100%的高黏性菌携带c-rmpA和p-rmpA/p-rmpA2,普遍携带iucA(100%,13/13),iroN(84.61%,11/13)及ybtS(76.92%,10/13)。动物感染实验结果显示,高黏性肺炎克雷伯菌的LD50值中位数值(9.10×105 cfu/mouse)明显低于非黏性菌值(3.24×108 cfu/mouse)。可见携带c-rmpA和p-rmpA/p-rmpA2并伴随携带铁载体基因是高黏性肺炎克雷伯菌共有的特征,其高黏性特性在一定程度上可作为筛选高致病性肺炎克雷伯菌的预测性指标。

肺炎克雷伯菌生物膜形成能力及其与多黏菌素B耐药相关性研究

目的 探究肺炎克雷伯菌生物膜形成能力及其与多黏菌素B耐药相关性.方法 收集温州医科大学附属第一医院临床分离的耐碳青霉烯类肺炎克雷伯菌（carbapenem-resistant Klebsiella pneumonia,CRKPs）共37株,琼脂稀释法检测亚胺培南（imipenem,IMP）、美罗培南（meropenem,MEP）、厄他培南（ertapenen,ETP）和多黏菌素B（polymyxin B,PB）对37株试验菌株的最低抑菌浓度（minimum inhibition concentrations,MICs）;96孔板结晶紫染色法检测37株试验菌株的生物膜A590值;检测37株试验菌株对PB的生物膜最低消除浓度（minimal biofilm elimination concentrations,MBECs）.结果 37株CRKPs对3种碳青霉烯类药物的敏感性都表现出不同程度的下降,对PB保持敏感,MIC为0.25～1 μg/mL,而MBEC为3～＞12μg/mL,相对于MIC值都表现为耐药;但是生物膜形成能力的强弱与MBEC值之间不存在线性相关性.结论 本次37株耐碳青霉烯肺炎克雷伯菌形成生物膜后可以增加对PB的耐药,但是生物膜形成能力的强弱与耐药程度无关.

根据抗生素MIC值检测超广谱β-内酰胺酶

目的 利用药敏鉴定组合板根据头孢菌素类抗生素浓度(MIC值)直接测定大肠埃希菌和肺炎克雷佰菌的超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)。方法 首先根据药敏鉴定组合板头孢菌素类抗生素的MIC值筛选出134株可疑ESBLs菌株,凡可疑菌株用纸片扩散确证试验和协同试验进行检测,阳性菌株再与组合板上头孢类抗生素的实际MIC值比较。结果 134株可疑菌株纸片扩散确证试验阳性80株,协同试验阳性78株,而这些阳性菌株头孢菌素类抗生素的实际MIC值均大于筛选时MIC值的三倍以上。结论 在日常工作中可根据组合板上头孢菌素类抗生素的MIC值直接推测ESBLs报告给临床治疗参考应用。

临床产超广谱β-内酰胺酶菌株的耐药性分析

目的探讨临床产超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)菌株的耐药谱特点及其耐药变迁趋势.方法采用MIC方法对2001年4月～2004年3月我院临床标本中分离出的非重复大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌进行产ESBLs株初筛,用双纸片扩散法做表型确证试验.结果临床产ESBLs菌株分离率呈逐年上升趋势,其耐药率和最小抑菌浓度几何均数Gm均高于ESBLs阴性菌株.结论应加强对产ESBLs菌株的检测,为合理使用抗生素提供依据.

三种抗菌药物对大肠杆菌和胸膜肺炎放线杆菌MIC值及FIC指数的测定

最小抑菌浓度（MIC）是抑制细菌生长的最低药物浓度。细菌对抗菌药物的敏感性,通常以药物常用剂量在血清中的浓度大于MIC为敏感,反之则为耐药[1]。各种病原菌对抗菌药物的敏感性不同,同种细菌的不同菌株对同一种药物的敏感性有差异,检测细菌对抗菌药物的敏感性,可筛选最有疗效的药物。同时,探求合适的联合用药可达到协同作用或相加作用,从而增强疗效,在临床上对控制细菌性传染病的流行至关重要。

医院感染革兰阴性杆菌的耐药性监测

目的:监测我院病房分离的100株革兰阴性杆菌对12种抗生素的耐药率,以指导临床用药。方法:采用E test药敏试验测定我院分离的100株革兰阴性杆菌对12种抗生素的最低抑菌浓度(M IC)。结果:这12种抗生素中总耐药率最低的是亚胺培南(7%),头孢吡肟(13%),舒普深(14%),阿米卡星(14%);49株大肠埃希菌及肺炎克雷伯菌中,超广普β-内酰胺酶的发生率为43%;大肠杆菌对环丙沙星的耐药率高达76.5%;大肠埃希菌,肠杆菌属,不动杆菌,克雷伯菌属对亚胺培南的耐药率小于等于5.9%。结论:亚胺培南,头孢吡肟,舒普深,阿米卡星对革兰阴性杆菌的耐药率最低。

拉氧头孢对171株产超广谱β-内酰胺酶菌株的体外抗菌活性检测

采用肉汤稀释法,对100株超广谱β-内酰胺酶(ESBLS)阳性的大肠埃希菌和71株ESBLS阳性的肺炎克雷伯菌进行体外最小抑制浓度(MIC)检测,求得拉氧头孢对ESBLS阳性的大肠埃希菌与ESBLS阳性肺炎克雷伯菌的MIC50和MIC90分别是1μg/ml和8μg/ml,敏感率分别为94.0%和97.2%。实验结果表明,对产ESBLS菌株,拉氧头孢在体外保持较高的抗菌活性,临床可优先考虑选用,并可指导于临床应用。

一株泛耐药肺炎克雷伯菌噬菌体的分离及其对细菌耐药性变化的影响

目的探讨泛耐药肺炎克雷伯菌噬菌体的分离及其对细菌耐药性变化的影响。方法收集该院污水站处理前污水,提取肺炎克雷伯菌噬菌体,筛选出泛耐药菌株的噬菌体,对其生物学特性进行分析,并探讨其与细菌在体外试验中相互作用的关系。结果通过处理提取并纯化分离得到噬菌体φKPN338HL7,经过3次纯化后,双层LB平板可见清晰、等圆、大小均一、外缘光滑透明、直径3~4 mm的噬菌斑,噬菌体效价约为5×1010 pfu/mL,最佳感染复数(MOI)=4时能产生最佳裂解效果。经过一段时间的噬菌体刺激后,该菌株对于亚胺培南及厄他培南的敏感性有所改变。结论噬菌体可以诱导细菌耐药性变化,为抗生素再次使用提供了可能。

bla_(CTX-M)基因与氨基糖苷类抗生素耐药水平的相关性

目的分析β-内酰胺类耐药基因在肺炎克雷伯菌中的分布并评估这些基因对抗生素耐药水平的影响。方法选择76株肺炎克雷伯菌临床分离菌株,用K-B纸片法和MIC法检测抗生素的耐药性;用PCR法检测肺炎克雷伯菌株中β-内酰胺类抗生素的相关基因,RT-PCR的方法检测β-内酰胺类基因的表达。结果 76株肺炎克雷伯菌中,ESBLs相关基因主要为SHV(45/76,59.21%)、TEM(27/76,35.53%)和CTX-M(38/76,50.00%);携带SHV基因菌株对阿米卡星的耐药率(37.78%)明显高于非携带SHV基因菌株(16.13%)(P<0.05)。携带CTX-M基因(76.32%)和TEM基因(70.37%)的菌株对庆大霉素的耐药率明显高于不携带CTX-M基因(34.21%)和TEM基因(46.94%)的菌株(P<0.05)。RT-PCR的结果显示,阿米卡星和庆大霉素耐药株的CTX-M基因mRNA的表达率均明显高于敏感株。结论β-内酰胺类基因与氨基糖苷类抗生素的耐药相关,CTX-M基因与肺炎克雷伯菌对氨基糖苷类抗生素的耐药水平相关。