新型肺靶向多西他赛脂质体在原位肺癌模型兔中的药动学研究

目的 研究新型肺靶向多西他赛脂质体(DTX-LP)在原位肺癌模型兔中的药动学行为。方法 采用超高效液相色谱-二级串联质谱(UPLC-MS/MS)法测定DTX在兔血浆中的含量,并进行方法学考察。采用胸腔微创穿刺术制备原位肺癌模型兔,然后随机分为多西他赛注射液(DTX-IN)组和DTX-LP组,耳缘静脉注射给予相应药物,给药剂量均为1.0 mg/kg(以DTX计),然后于5、15、30、60、90、120、240、480 min时取血,测定血浆中DTX浓度。采用DAS 3.3软件进行拟合与分析,并计算药动学参数。结果本研究所用UPLC-MS/MS法的准确度、精密度良好,符合生物样品分析要求。与DTX-IN组比较,DTX-LP组的药-时曲线趋势较平缓,各时间点的血药浓度更低,c_(max)、t_(1/2)、AUC_(0→480 min)、AUC_(0→∞)均显著降低(P<0.05)。结论 DTX-LP在血浆中的暴露量较DTX-IN降低,提示其能快速地从体循环中分布到肺靶器官。

苯并[a]芘恶性转化细胞THBEc1致裸小鼠原位肺癌模型的构建及血清人源神经纤维网蛋白2对该模型的诊断价值

目的建立苯并[a]芘(BaP)恶性转化人支气管上皮细胞T-16HBE-C1(THBEc1)的裸小鼠原位肺癌模型,评估血清人源神经纤维网蛋白2(NRP2)对该模型的诊断价值。方法12只雄性ICR小鼠随机分为3组,右肺分别一次性注射无菌生理盐水20,30和40μL,观察14 d内小鼠死亡数,以确定小鼠肺内注射安全体积。16只雄性BALB/c-nu裸小鼠随机分为4组:对照组[皮下和肺内同时一次性接种人支气管上皮16HBE(HBE)细胞,皮下1×10^(6),肺内2×10^(5)]、皮下荷瘤模型组(皮下一次性接种THBEc1细胞1×10^(6))、原位肺癌模型组(肺内一次性接种THBEc1细胞2×10^(5)或5×10^(5))。接种后每7 d监测小鼠体重和皮下肿瘤体积;HE染色检测肺肿瘤和皮下肿瘤组织病理特征,计算成瘤率;酶联免疫吸附实验(ELISA)检测裸小鼠血清和胸水中人源NRP2水平;采用受试者工作特征(ROC)曲线确定血清人源NRP2对THBEc1细胞导致的裸小鼠原位肺癌模型的诊断价值。结果肺内注射40μL无菌生理盐水可致2/4小鼠死亡,20和30μL组未见小鼠死亡,但整体表现欠佳,故后续实验注射体积选择20μL。对照组裸小鼠均未在接种部位检出肿瘤,小鼠体重持续增长;皮下荷瘤模型组祼小鼠全部成瘤,体重显著低于对照组(P<0.05)。接种细胞后第10天,原位肺癌模型5×10^(5)细胞组裸小鼠全部成瘤(4/4);第14天,原位肺癌模型2×10^(5)细胞组裸小鼠3/4成瘤,且2个剂量组小鼠体重均低于对照组(P<0.01,P<0.05),肿瘤组织均呈鳞状细胞癌特征。ELISA结果显示,对照组裸小鼠血清人源NRP2水平均显著低于皮下荷瘤模型(4只)和原位肺癌模型(7只)裸小鼠(P<0.05)。原位肺癌模型组(4只)裸小鼠胸水中均可检出高水平的人源NRP2。ROC曲线显示,血清人源NRP2水平能有效区分THBEc1细胞在裸小鼠肺内是否成瘤,最佳截断值为123.00 ng·L^(-1)。结论通过肺内注射接种THBEc1细胞建立了裸小鼠原位肺癌模型,血清人源NRP2可用于该模型诊断。

基于兔VX2原位移植肺癌模型评价多西他赛脂质体疗效和安全性

目的评价多西他赛脂质体(DTX-LP)的远期疗效和不良反应。方法建立兔VX2原位移植肺癌模型,分别静脉给予荷瘤兔空白脂质体(BLA-LP)、多西他赛注射剂(DTX-IN,2.7 mg/kg)、DTX-LP高剂量(0.9 mg/kg)、DTX-LP中剂量(0.3 mg/kg)以及DTX-LP低剂量(0.1 mg/kg)治疗4周期,记录兔生存时间并作生存分析,考察兔存活期间体质量及白细胞计数变化率,食欲减退、腹泻、肠道出血发生率,实验兔死亡后作大体解剖,评估主要脏器的组织病理损害程度。结果 BLA-LP组,DTXIN组,DTX-LP高、中、低剂量组兔的中位生存时间分别为28、35、49、34、32 d。生存曲线经Log-Rank检验,DTX-LP高剂量组分别与BLA-LP组、DTX-IN组比较,差异有统计学意义(P=0.001,P=0.005)。上述各治疗组兔的平均体质量变化率分别为(-23.03±7.99)%、(-11.25±9.67)%、(-1.48±6.36)%、(-2.08±14.39)%和(-17.27±18.41)%;白细胞计数累积变化率分别为(-3.53±18.17)%、(-52.78±12.50)%、(-16.56±10.21)%、(-22.19±10.70)%和(-15.37±14.14)%。DTX-IN组和DTX-LP高剂量组食欲减退的发生率分别为83.3%和50.0%;BLA-LP组、DTX-IN组及DTX-LP高、中、低剂量组腹泻发生率分别为16.7%、66.7%、33.3%、16.7%、16.7%;DTX-IN组肠道出血发生率83.3%。病理检查结果显示DTX-LP高剂量组的心、肝、脾、肺、肾组织无明显异常,DTX-IN组上述脏器均有不同程度的病理损害。结论 DTX-LP高剂量组明显延长VX2肺癌兔中位生存期,且不良反应轻微。

肺复康对Lewis肺癌模型小鼠肿瘤细胞P53、Bcl-2表达的影响

目的:观察肺复康对Lewis肺癌小鼠肿瘤细胞P53、Bcl-2表达的影响。方法:复制Lewis肺癌小鼠模型,分别采用肺复康大、中、小剂量、紫杉醇以及肺复康联合紫杉醇对其进行治疗,通过RT-PCR法检测Lewis肺癌小鼠肿瘤细胞凋亡相关基因P53、Bcl-2的表达。结果:用药组P53 mRNA的表达明显增强,除肺复康小剂量组与模型组比较无显著性差异外,其余各组与模型组比较均有显著性差异(P<0.05);用药组Bcl-2 mRNA的表达低于模型组,肺复康剂量越大Bcl-2 mRNA的表达越低,以肺复康联合紫杉醇组最为显著,各用药组与模型组比较均有显著性差异(P<0.05)。结论:肺复康可能通过上调P53 mRNA的表达及下调Bcl-2 mRNA的表达启动线粒体途径来诱导肿瘤细胞凋亡,这可能是肺复康临床治疗非小细胞肺癌的作用机制之一。

平衡保健丹对Lewis肺癌模型小鼠抑瘤效应研究

目的观察不同剂量平衡保健丹对Lewis肺癌模型小鼠的抑瘤作用。方法将C57B1/6小鼠随机分为对照组、平衡保健丹低剂量组(低剂量组)、平衡保健丹高剂量组(高剂量组)。于接种前3 d开始给药,对照组给予等体积的蒸馏水,低剂量组与高剂量组分别给予平衡保健丹2 g·kg-1与4 g·kg-1。给药第4天时每只小鼠于右腋皮下接种小鼠Lewis肺癌细胞株(LLC)。观察各组小鼠肿瘤体积及小鼠体重,并计算肿瘤抑制发生率。结果高、低剂量组的平衡保健丹对肿瘤体积有抑制作用,与对照组比较差异有统计学意义(P<0.01),且高、低剂量组之间无明显的剂量依赖性。在给药期间,高、低剂量组的小鼠体重绝大部分时间显著低于对照组(P<0.01),高剂量组在后期体重稳步回升与对照组持平。两组肿瘤发生率分别为70%与80%,提示平衡保健丹有显著抑瘤作用。结论平衡保健丹具有明确抑癌作用,高剂量组效果更佳,其抑瘤率和抑制肿瘤体积作用明显。

使用Lewis肺癌细胞建立昆明种小鼠肺癌模型初探

目的:探讨建立昆明种小鼠Lewis肺癌模型的可行性。方法:将32只雌雄各半的昆明组小鼠随机分为空白组和模型组,将Lewis肺癌细胞悬液按0.2 m L(细胞含量1×107/m L)于模型组16只昆明种小鼠右腋皮下注射,观察其一般状况及成瘤率、肺癌形成率。结果:与空白组相比,模型组小鼠饮食量减少,体重增加缓慢,成瘤率及肺癌形成率均为68.75%。结论:使用Lewis肺癌细胞可以建立昆明种小鼠肺癌模型。

近年来中药对肺癌模型鼠的干预作用研究初探

近年来关于中药对肺癌模型小鼠作用的研究日益增多,其中不乏对小鼠自身免疫力影响、化疗增效减毒、抗肿瘤机制等的研究。本文就近年中药对肺癌模型鼠的干预作用实验研究做了简要的概述。

TETs蛋白在乌拉坦诱导小鼠肺癌模型中的表达模式

目的探讨TET家族蛋白在小鼠肺癌模型中的表达模式。方法将小鼠分成3组,每组10只。分别设为对照组(Con),乌拉坦诱导组(Ure),以及羟基脲给药组(Ure-HU)。对Ure组和Ure-HU组连续10周给予800 mg/kg乌拉坦溶液,诱导建立小鼠肺癌摸型。10周后对Ure-HU组给予HU药物(500 mg/kg),连续21 d。观察肺部形态结节个数。利用q PCR和Western blot分析TETs在3组小鼠中的表达模式。结果与Con组相比,Ure和Ure-HU组体重下降明显。形态学观察显示,Ure组和Ure-HU组均有肺组织病变。q PCR结果显示,在Ure组,TETs表达显著降低(P<0.05)。经过HU处理后,Ure-HU组TET1和TET2表达上升(P<0.05)。Western blot与q PCR结果一致。结论在乌拉坦诱导的小鼠肺癌模型中,TETs蛋白表达模式异常,证明在肺癌发生过程中,TET1和TET2具有重要作用。

转基因小鼠肺癌模型的研究和应用

肺癌是目前全球病死率较高的恶性肿瘤。由于其发病机制不明,缺乏有效的早期诊断,且临床治疗效果差,造成肺癌发病率与病死率均较高。美国每年大约有170 000人死于肺癌,占癌症死亡总数的30%,且肺癌的发病率呈明显上升趋势,全球每年约增加1 200万新患者。

多次注射乌拉坦诱导的BALB／C及C57BL／6J小鼠肺癌模型的比较

目的探讨一种稳定的多次乌拉坦注射诱导小鼠肺癌模型的构建方法,比较BALB/C及C57BL/6J小鼠对该肺癌模型的敏感性。方法 10只BALB/C小鼠及10只C57BL/6J小鼠适应性饲养3周,随后每只小鼠分别被给予每周1次腹腔注射1 g/kg体重乌拉坦,连续注射10周,继续喂养15周后处死小鼠取肺组织。由3名不同的检测者在解剖显微镜下观察计数肺组织表面肿瘤数目并以直径记录肿瘤大小;HE染色检测肺组织病理变化。结果多次乌拉坦注射诱导的BALB/C及C57BL/6J小鼠肺癌发生率均为10/10(100%);BALB/C小鼠荷瘤数明显多于C57BL/6J小鼠(P<0.01),同时,直径也大于C57BL/6J小鼠(P<0.05);HE染色显示多次乌拉坦注射诱导的肺癌有非典型性腺瘤增生及腺瘤两种病变类型。结论 BALB/C和C57BL/6J小鼠均可以作为多次注射乌拉坦诱导性肺癌模型的动物,BALB/C小鼠对该肺癌模型的敏感性高于C57BL/6J小鼠。

尾静脉注射EMT-6细胞建立转移性肺癌模型的研究

目的通过尾静脉注射EMT-6细胞建立一种临床特征明显、稳定可重复的转移性肺癌BALB/c小鼠模型。方法取对数生长期的EMT-6细胞,用0.25%胰蛋白酶消化,再用磷酸盐缓冲溶液调整细胞浓度至1×10~6个/m L(高)、5×10~5个/m L(中)和1×10~5个/m L(低)3个浓度,尾静脉注射0.2 m L EMT-6细胞悬液,对不同浓度模型的临床症状、成瘤时间、生存期、成瘤程度和病理学特征等生物学特征和评价指标进行研究,筛选出效果好的模型,并对该模型的重复性和稳定性通过3次重复实验加以确定,成功建立EMT-6细胞转移性肺癌BALB/c小鼠模型。结果 EMT-6细胞注射后解剖小鼠发现,高浓度组小鼠7 d肺表面开始出现肿瘤灶,18 d内所有小鼠死亡;中浓度组小鼠7 d肺表面开始出现肿瘤灶,28 d内所有小鼠死亡;低浓度组小鼠14 d肺表面开始出现肿瘤灶,21 d所有小鼠肺表面均有肿瘤灶,荷瘤小鼠24 d开始出现死亡,35 d肿瘤灶数量达到顶峰(平均12~15个/只)且肿瘤体积变大,42 d内全部死亡。结论相比之下,低浓度模型成瘤时间到小鼠全部死亡时间,为实验研究留有4周的处理、观察、评价的窗口期,其病理组织学符合肺癌的组织学特征,临床症状指标明显,模型重复性和稳定性好,是适合转移性肺癌研究的理想模型。

四种肺癌预测模型对体检人群孤立性肺结节预测效能的比较

目的比较四种肺癌预测模型对孤立性肺结节(SPN)的预测效能。方法以健康体检中被诊断为SPN的体检者为研究对象,四种肺癌预测模型分别对SPN进行风险评估,前瞻性追踪随访SPN患者的临床结局。对四种肺癌预测模型中的风险因素进行统计描述及单因素分析,绘制ROC曲线及比较模型的检验效能。结果最终纳入479例SPN体检者,82例确诊为肺癌,恶性概率为17.12%。恶性组患者年龄、结节直径、吸烟、恶性肿瘤家族史、肺外肿瘤5年及以上、位于上叶、边界不清和毛刺比例高于良性结节组(P<0.05)。Brock模型预测效能最好,AUC为0.833,灵敏度80.49%,特异度74.31%,约登指数、阳性似然比、阳性预测值及阴性预测值最高,阴性似然比最低。Mayo模型AUC为0.815,灵敏度81.71%,特异度67.51%;PKUPH模型AUC为0.754,灵敏度69.51%,特异度73.55%;VA模型AUC为0.738,灵敏度68.29%,特异度67.55%。结论Brock模型对健康体检人群SPN风险预测效能提示最好,VA模型预测效能最差,Brock、Mayo和PKUPH三种模型的联合应用有待进一步研究。

山仙颗粒对lewis肺癌小鼠模型抑制作用的影响

目的通过山仙颗粒(SXG)对Lewis肺癌小鼠模型MMP-2和CyclinD1水平的影响,观察该药对肿瘤的抑制作用。方法将50只小鼠分组造模、灌胃给药,21天后处死小鼠,分别用ELISA法和SP法检测MMP-2和CyclinD1的水平及其它指标。结果大、小剂量SXG和JLC均能降低MMP-2和cyclinD1的水平(P<0.01)并能抑制肿瘤生长、阻抑肺癌的自发转移(P<0.01);小剂量SXG和JLC作用相当(P>0.05);大剂量SXG的作用强于JLC(P<0.05);大剂量SXG的作用比小剂量SXG明显(P<0.01、P<0.05)。结论SXG能显著抑制Lewis肺癌小鼠模型肿瘤的生长和自发性肺转移,可能是通过降低MMP-2和CyclinD1的表达发挥作用。

间充质干细胞对VX2肺癌模型化疗所致肝损害的作用

本实验通过对间充质干细胞（MSCs）干预化疗所致肝损害的探讨,为临床应用MSCs治疗提供实验依据.一、材料与方法1.材料：新西兰大白兔52只,体质量3.0 ～ 3.2 kg;MSCs（济南军区总医院干细胞研究中心赠送）;VX2瘤株（东南大学实验室提供）;吉西他滨（江苏豪森药业股份有限公司,批准文号：H20030104）.丙氨酸氨基转移酶（ALT）、门冬氨酸氨基转移酶（AST）、碱性磷酸酶（ALP）试剂盒购于北京索莱宝科技有限公司.

建立移植型肺癌动物模型的最新方法和进展

在众多的肺癌模型研究中，尤其是移植型肺癌模型，是将人肺癌细胞移植到动物体内传代生长，其移植的肿瘤细胞形态学特征，染色体数量，同工酶水平等仍保持不变，对临床常用抗癌药物敏感性也大致相同，所以常用来做疾病定向性筛选，抗癌药物的筛选。同时还具有移植肿瘤细胞生长迅速，倍增时间短，耗费低等优点。

孤立性肺结节的影像学特征及两种肺癌预测模型的比较

目的探讨肺部孤立性结节的影像学特征,并比较两种肺癌预测模型对孤立性肺结节(SPN)的诊断价值。方法回顾性分析上海交通大学医学院附属瑞金医院2002年至2009年期间入住呼吸科和胸外科,肺部有孤立性结节且获病理诊断的患者。总结患者的临床特征和胸部CT影像学特征,验证并比较两种肺癌预测模型在评估孤立性肺结节良恶性上的诊断准确性。结果入选病例共90例,其中良性32例,恶性58例。研究结果显示,孤立性肺结节的分叶征对于良恶性的鉴别最有意义,良恶性结节间存在显著差异(P<0.05)。VA模型ROC曲线下面积(0.712,95%CI 0.606-0.821);Mayo Clinic模型ROC曲线下面积(0.753,95%CI 0.652-0.843),其诊断价值优于VA模型。结论分叶征对良恶性结节的鉴别有意义,而综合临床特征和影像学特征的肺癌预测模型更有助于临床医师的鉴别诊断。

中药逐水饮对小鼠Lewis肺癌胸腔积液模型积液生成及Th17免疫平衡的影响

目的观察中药逐水饮对小鼠Lewis肺癌胸腔积液模型积液生成及Th17细胞免疫平衡的影响。方法小鼠随机分为正常对照组、模型组、逐水饮组、顺铂组、逐水饮+顺铂组。采用胸腔注射Lewis肺癌单细胞悬液的方法建立小鼠Lewis肺癌胸腔积液模型。给药结束处死小鼠,记录模型小鼠恶性胸腔积液(MPE)体积、胸壁转移瘤计数、转移瘤质量,采用流式细胞术法检测MPE和外周血中Th17、Treg细胞百分比,ELISA法检测MPE和外周血中白细胞介素17(IL-17)、白细胞介素-23(IL-23)、转化生长因子β1(TGF-β1)表达水平。结果与模型组比较,逐水饮组、顺铂组和逐水饮+顺铂组小鼠MPE体积、胸壁转移瘤数目减少(P<0.05),转移瘤质量减轻(P<0.05),生存期延长(P<0.05),其中逐水饮+顺铂组变化更加明显(P<0.05)。与正常对照组比较,模型组外周血中Th17细胞百分比及IL-17、IL-23水平降低(P<0.05),Treg细胞百分比及TGF-β1水平升高(P<0.05);与模型组比较,逐水饮组、顺铂组和逐水饮+顺铂组小鼠MPE和外周血中Th17细胞百分比及IL-17、IL-23水平升高(P<0.05),MPE中Treg细胞百分比及TGF-β1水平降低(P<0.05);逐水饮+顺铂组小鼠MPE和外周血中Th17细胞百分比及IL-17/IL-23水平高于逐水饮组,Treg细胞百分比及TGF-β1水平低于逐水饮组,但差异无统计学意义(P>0.05);模型小鼠MPE中Th17、Treg细胞百分比均高于其外周血中Th17、Treg细胞百分比(P<0.05)。结论中药逐水饮能够抑制小鼠MPE生成,纠正Th17细胞失衡,减轻MPE微环境免疫抑制状态,增强小鼠对肿瘤的免疫作用。

三种肺癌风险预测模型在肺结节患者中的验证性研究

目的运用肺结节患者的临床和影像资料,验证3种肺癌风险预测模型的诊断价值。方法回顾分析2015年8月-2016年7月在我中心明确诊断的肺结节患者的临床和影像资料,用国内外认可的Mayo模型、VA模型和北大模型进行验证,比较3个肺癌风险预测模型的效能参数及ROC曲线。结果纳入研究的肺结节患者共407例,平均年龄(56.09±9.56)岁,男205例,女202例。其中良性结节84例(20.6%),恶性结节323例(79.4%)。北大模型的敏感度最高(78.6%),Mayo模型的特异性最高(76.2%);ROC曲线下面积,Mayo模型为0.608,VA模型为0.550,北大模型为0.615。结论对于肺结节患者,北大人民医院建立的肺癌风险预测模型的诊断价值较Mayo模型和VA模型更高。

组织块移植法建立人肺癌裸鼠移植瘤模型

肺癌对人类的健康构成了严重的威胁,人肺癌裸鼠移植瘤模型的建立对于肺癌的研究是一项重要的工具.建立肺癌移植瘤模型的方法主要有细胞培养移植法、组织块移植法和匀浆液移植法.组织块移植法建立的模型能最大限度地模拟人体内环境,是一种理想的模型.就组织块移植法建模的操作方法及当前研究进展作一综述.