羟基红花黄色素A对小鼠Lewis肺癌移植瘤的抑制作用及VEGF表达的影响

目的观察羟基红花黄色素A(hydroxysafflor yellow A,HSYA)对C57BL/6小鼠Lewis肺癌移植瘤的抑制作用,并观察其对肿瘤组织血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)表达的影响。方法 C57BL/6近交系小鼠30只,造模后,分为5组,每组6只,分别使用生理盐水、环磷酰胺(CTX)及HSYA(分小、中、大3个剂量)作用于动物模型。观察各组肿瘤体积大小,并在造模第22天处死所有小鼠,无菌条件下剥取瘤组织并称重,计算抑瘤率;应用免疫组化法及图像分析技术检测瘤组织VEGF表达的情况。结果 HSYA中、小剂量组,在瘤株接种第10、16、22天肿瘤体积与生理盐水组比较差异有统计学意义(P<0.05);在第22天,瘤重与生理盐水组比较差异有统计学意义(P<0.05);在肿瘤组织中VEGF表达上,中、小剂量组与生理盐水组比较差异有统计学意义(P<0.05),而HSYA大剂量组肿瘤体积、瘤重及VEGF表达上均与生理盐水组比较差异无统计学意义。结论羟基红花黄色素A能抑制Lewis肺癌小鼠肿瘤生长,并能降低小鼠Lewis肺癌移植瘤组织中VEGF的表达。

虫类攻毒法、草木解毒法对小鼠Lewis肺癌移植瘤的抑制作用及其机制的研究

目的研究虫类攻毒法、草木解毒法对小鼠Lewis肺癌移植瘤的抑制作用及其作用机制。方法参照文献方法复制小鼠Lewis肺癌移植瘤模型,用虫类攻毒方、草木解毒方进行干预,观察其对小鼠体重、胸腺指数、抑瘤率以及瘤细胞增殖周期的影响。结果虫类攻毒方、草木解毒方均可减轻Lewis肺癌移植瘤对小鼠体重及胸腺指数的影响,并可抑制肿瘤的生长和瘤细胞的增殖周期,与模型组比较,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论虫类攻毒方、草木解毒方的抗肿瘤作用确切,虫类攻毒方抗肿瘤作用优于草木解毒方。其作用机制主要为:调控肿瘤细胞G0/S位点,使肿瘤细胞阻滞于G0期,不再进入有丝分裂,从而达到抑制肿瘤的作用;虫类攻毒方、草木解毒方可以通过激活胸腺功能,调节机体的免疫系统,从而起到增强免疫、对抗肿瘤的作用。

羟基红花黄色素A对小鼠Lewis肺癌移植瘤的抑制作用

目的研究羟基红花黄色素A(hydroxysafflor yellow A,HSYA)对C57BL/6小鼠Lewis肺癌移植瘤的血管抑制作用。方法 C57BL/6近交系小鼠30只,造模后,分为5组,每组6只,分别使用生理盐水、环磷酰胺(CTX)及HSYA(分低、中、高3个剂量)作用于动物模型。观察各组肿瘤体积大小,分析小鼠生长曲线,并在造模第22天处死所有小鼠,无菌条件下剥取瘤组织进行HE染色,观察不同浓度HSYA在不同视野下对肿瘤血管的抑制情况。结果 HSYA中、小剂量组对小鼠移植瘤血管生成有一定抑制作用。结论中药羟基红花黄色素A(HSYA)对Lewis肺癌小鼠移植瘤血管生成有一定的抑制作用。

反义小鼠端粒酶RNA及顺铂对小鼠肺癌移植瘤的抑制作用

目的:探讨顺铂(DDP)及硫代修饰的反义寡核苷酸(ASODN)对小鼠肺癌移植瘤的抑制作用以及对瘤体、肝脏和睾丸组织中端粒酶活性的影响。方法:建立肿瘤模型,以荷瘤小鼠的Lewis肺腺癌制成肺癌单细胞悬液(细胞数约1×10 7/ml)接种健康C5 7雄性小鼠4 4只,待移植瘤体积约5 0 0mm3 时(第9天) ,按随机方法分成6组;Ⅰ组非治疗组,腹腔注射生理盐水;Ⅱ组腹腔注射反义端粒酶RNA(mTR) ,1次/日×6天;Ⅲ、Ⅳ和Ⅴ组于第15天腹腔注射不同浓度DDP 1次;Ⅵ组联合使用反义mTR及DDP。另设健康对照组,腹腔注射生理盐水,1次/日×6天。PCR ELISA法测定端粒酶活性。结果:肿瘤体积缩小及端粒酶活性均以Ⅴ、Ⅵ组显著,与其余各组比较差异均有显著性(P <0 .0 1) ;Ⅱ组与Ⅰ组及健康对照组肝脏及睾丸端粒酶活性差异均无显著性(P >0 .0 5 )。Ⅳ、Ⅴ、Ⅵ组端粒酶活性下降与健康对照组及Ⅰ组差异均有显著性(P <0 .0 1) ;Ⅴ组较Ⅵ组端粒酶活性下降更显著(P <0 .0 1) ;Ⅵ组与Ⅱ组端粒酶活性有明显不同(P <0 .0 1) ,但与Ⅳ组比较差异均无显著性(P >0 .0 5 )。结论:ASODN单独使用对肿瘤体积以及肝脏和睾丸端粒酶活性均无明显影响,但对移植瘤端粒酶活性有抑制作用。单用DDP及DDP和反义mTR联合使用均可使移植瘤体积缩小、肿瘤发生坏死、抑制其端粒酶?

清热消积方通过PD-1/PD-L1途径调控荷Lewis肺癌移植瘤小鼠免疫功能的实验研究

清热消积方基于肿瘤患者"正气虚损、阴阳失衡、脏腑功能失调,痰、瘀、热、毒互结"的病机而组方。已有研究证实该复方具有较好的抗肿瘤效果,但其是否通过调控免疫功能进而发挥抗肿瘤作用尚不清楚。本研究采用荷瘤Lewis肺癌小鼠移植瘤作为研究对象,观察其对肿瘤组织PD-1/PD-L1蛋白及相关细胞因子的影响,对其抗肿瘤机理进一步探讨。

滤泡调节性T细胞在肺癌移植瘤小鼠体内的变化及意义

目的:研究滤泡调节性T细胞(follicular regulatory T cells,Tfr)在肺癌移植瘤小鼠体内的变化,并探讨肿瘤微环境对Tfr细胞的影响。方法:采用皮下注射Lewis肺癌细胞株的方式建立肺癌移植瘤小鼠模型,通过流式细胞术检测小鼠腹壁引流淋巴结和肿瘤组织中Tfr细胞以及CD4+CXCR5+T细胞的比例,分析Tfr/CD4+CXCR5+T细胞比值的变化。结果:肺癌移植瘤小鼠腹壁引流淋巴结中Tfr细胞的比例为(4.13±0.35)%,较正常对照组小鼠[(1.97±0.26)%]明显增加(t=4.985,P<0.01),并且Tfr/CD4+CXCR5+T细胞比值为0.39±0.03,较正常对照组小鼠(0.21±0.02)明显增加(t=5.148,P<0.01)。在肿瘤发展的第14天,肺癌移植瘤小鼠肿瘤组织中Tfr细胞比例增加尤为显著,与第7天相比差异具有统计学意义(t=5.617,P<0.01)。结论:肺癌移植瘤小鼠体内Tfr细胞比例的增加以及Tfr/CD4+CXCR5+T细胞比值的失衡,预示着Tfr细胞可能参与小鼠肺癌移植瘤的发展进程。

人参皂苷Rg3联合苏拉明对小鼠Lewis肺癌移植瘤的抑制作用及相关基因表达的影响

目的:分析联用人参皂苷Rg3和苏拉明对Lewis肺癌小鼠进行治疗对其移植瘤的抑制作用及相关基因表达的影响。方法:选取40只小鼠作为研究对象。对其中的4只荷瘤小鼠进行肿瘤接种,在接种后的2周提取移植瘤组织,对其余的36只小鼠构建Lewis肺癌小鼠模型。将这些小鼠模型平均分为对照组、人参皂苷Rg3组、苏拉明组、联合组。在对照组小鼠的腹腔内注射0.2 mL的生理盐水,在其胃内灌注0.2 mL的生理盐水,1次/d。在人参皂苷Rg3组小鼠的胃内灌注0.2 mL、含5 mg/kg人参皂苷Rg3的药液,在其腹腔内注射0.2 mL的生理盐水,1次/d。在苏拉明组小鼠的腹腔内注射0.2 mL、含10 mg/kg苏拉明的药液,在其胃内灌注0.2 mL的生理盐水,1次/d。在联合组小鼠的腹腔内灌注0.2 mL、含10 mg/kg苏拉明的药液,在其胃内灌注0.2 mL、含5 mg/kg人参皂苷Rg3的药液,1次/d。对四组小鼠均给药15 d。然后比较四组小鼠移植瘤的质量、抑瘤率、肿瘤微血管密度(MVD)值、MEK1/2 mRNA的相对表达量、MEK1/2蛋白的表达量。结果:人参皂苷Rg3组小鼠、苏拉明组小鼠、联合组小鼠移植瘤的质量均小于对照组小鼠,P<0.05;这三组小鼠的抑瘤率均高于对照组小鼠,P<0.05;这三组小鼠的MVD值均小于对照组小鼠,P<0.05;这三组小鼠肿瘤细胞中MEK1/2 mRNA的相对表达量均低于对照组小鼠,P<0.05。人参皂苷Rg3组小鼠、苏拉明组小鼠移植瘤的质量均大于联合组小鼠,P<0.05;这两组小鼠的抑瘤率均低于联合组小鼠,P<0.05;这两组小鼠的MVD值均大于联合组小鼠,P<0.05;这两组小鼠肿瘤细胞中MEK1/2 mRNA的相对表达量均高于联合组小鼠,P<0.05。四组小鼠肿瘤细胞中MEK1/2蛋白的表达量相比,P>0.05。结论:联用人参皂苷Rg3和苏拉明对Lewis肺癌小鼠进行治疗,可明显抑制其移植瘤的生长,并可降低其肿瘤细胞中MEK1/2 mRNA的相对表达量。

miRNA21联合重组人干扰素γ对小鼠肺癌移植瘤的作用效果及机制研究

目的探讨miRNA21联合重组人干扰素γ(IFN-γ)对小鼠肺癌移植瘤的作用效果,并分析了相关机制。方法每只小鼠接种2×10^6个肺癌细胞建立小鼠肺癌移植瘤模型。将建模成功的54只肺癌移植瘤小鼠随机分为3组:模型组、干扰素组与联合组,每组18只。模型组给予腹腔注射磷酸盐缓冲液治疗,干扰素组给予腹腔注射重组人IFN-γ治疗,联合组给予miRNA21联合重组人IFN-γ治疗。记录与计算小鼠的移植瘤重量和抑瘤率。采用TUNEL法检测与计算细胞凋亡指数。采用免疫组织化学法检测组织微血管密度(MVD)。采用Western bolt法检测Beclin-1、LC3的表达情况。采用免疫组化法检测肿瘤坏死因子-α(TNF-α)与白介素-6(IL-6)含量。结果①干扰素组与联合组的移植瘤重量[(4.91±0.15)、(4.01±0.22)g]低于模型组[(6.26±0.53)g],抑瘤率[(23.71±5.22)%、(40.86±11.31)%]高于模型组(0),且联合组的移植瘤重量低于干扰素组,抑瘤率高于干扰素组,差异有统计学意义(P<0.05)。②干扰素组与联合组的移植瘤细胞凋亡指数[(21.74±3.13)%、(30.67±4.14)%]均高于模型组[(3.13±0.24)%],且联合组移植瘤高于干扰素组,差异有统计学意义(P<0.05)。③干扰素组与联合组的移植瘤组织MVD计数(10.38±1.09、6.83±0.85)低于模型组(14.56±1.11),且联合组低于干扰素组,差异有统计学意义(P<0.05)。④干扰素组与联合组的移植瘤组织Beclin-1(6.34±0.34、16.43±1.91)、LC(37.23±0.82、12.22±1.13)相对表达量均高于模型组(1.13±0.03、1.23±0.11),且联合组移植瘤高于干扰素组,差异有统计学意义(P<0.05)。⑤干扰素组与联合组的血清TNF-α[(14.49±1.48)、(7.21±0.52)pg/mL]与IL-6含量[(16.02±1.85)、(8.08±1.84)pg/mL]均低于模型组[(27.33±1.49)、(34.20±2.11)pg/mL],且联合组低于干扰素组,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论miRNA2与重组IFN-γ联合应用于小鼠肺癌移植瘤能抑制TNF-α与IL-6的表达,促进移植瘤细胞凋亡与自噬,降低组织微血管密度,从而提高抑瘤率与降低移植瘤重量。

血管抑素基因治疗Lewis肺癌移植瘤小鼠的疗效研究

目的 探讨血管抑素基因（PAng）治疗Lewis肺癌移植瘤小鼠的效果.方法 45只Lewis肺癌移植瘤模型的小鼠,根据对肺癌移植瘤小鼠治疗方式的不同将其随机分为3组,每组小鼠15只,分别为A组（空白组）、B组（空白脂质体组）以及C组（PAng组）,观察治疗前后肿瘤体积、重量的变化以及比较肺表面转移灶数目和小鼠的平均生存周期.结果 PAng组小鼠治疗21 d后的移植肿瘤体积为（189 ± 20） mm3,与A组（5 324±246） mm3、B组（5 367 ±326） mm3比较,差异均有统计学意义（P＜0.05）;PAng组小鼠治疗21 d后的移植肿瘤重量为（3.54 ±0.48）g,与A组（4.21 ±0.58）g、B组（4.26 ±0.59）g比较,差异均有统计学意义（P＜0.05）;PAng组小鼠治疗后的肺表面转移灶数目为（4.30 ±0.42）个、平均生存周期为（54.6±6.52）d,与对照组比较差异有统计学意义（P＜0.05）.结论 采用PAng的治疗方式具有比较理想的治疗效果.

单次大剂量照射对Lewis肺癌移植瘤的放射生物学效应

目的研究同等生物有效剂量（biological effective dose，BED）下，单次大剂量照射对Lewis肺癌移植瘤的生物学作用。方法构建Lewis肺癌C57小鼠移植瘤模型，待移植瘤直径达4～6mm时随机分为3组：空白对照组（OGy组）、单次大剂量组（12Gy／1 f／1d组）及常规照射组（22Gy／11f／15d组），后两组BED值均为26．4Gy。绘制移植瘤生长曲线，于第1次照射后的第1、3、8、15、21d处死荷瘤小鼠，收集肿瘤组织并采用流式细胞术、免疫荧光等实验技术检测肿瘤细胞的乏氧、损伤及周期的变化。结果两种剂量分割模式均可抑制小鼠移植瘤的生长，单次大剂量组肿瘤生长抑制更为明显（P％0．05）。单次大剂量组首次照射后第3、8、15d乏氧细胞较常规照射组低（P％0．05），且其第1、3d磷酸化组蛋白（7-H2AX）阳性肿瘤细胞数高于后者（P〈O．05）。两种剂量分割模式可使G0／G1期细胞比例减少，G2／M期细胞比例增加，且单次大剂量组G2／M期细胞增加更为明显（P〈0．05）。结论同等BED不同分割模式下，单次大剂量放射治疗较常规分割放射治疗对肿瘤的生长抑制作用更为显著，基于线性二次模型（LQ模型）的BED可能低估了大分割放疗的生物学效应。

组织块移植法建立人肺癌裸鼠移植瘤模型

肺癌对人类的健康构成了严重的威胁,人肺癌裸鼠移植瘤模型的建立对于肺癌的研究是一项重要的工具.建立肺癌移植瘤模型的方法主要有细胞培养移植法、组织块移植法和匀浆液移植法.组织块移植法建立的模型能最大限度地模拟人体内环境,是一种理想的模型.就组织块移植法建模的操作方法及当前研究进展作一综述.

羟基红花黄色素A对Lewis肺癌移植瘤微血管密度及血管内皮生长因子mRNA表达的影响

目的研究羟基红花黄色素A(HSYA)对小鼠Lewis肺癌移植瘤中微血管密度(MVD)及血管内皮生长因子(VEGF)mRNA表达的影响,探讨HSYA抑制肿瘤的分子机制。方法运用C57/BL小鼠接种Lewis肺癌细胞株于右侧肋腹皮下建立小鼠肺癌移植瘤模型,随机分为对照组(生理盐水)、环磷酰胺组(CTX)、HSYA不同剂量组(28 mg/L、56 mg/L、112 mg/L),给药方式均为腹腔注射给药。用药22 d后脱颈处死小鼠并剥离肿瘤组织,采用免疫组织化学法检测MVD,采用实时荧光定量PCR检测各组肿瘤组织中VEGF mRNA的表达情况。结果 56 mg/L、28 mg/L HSYA组与CTX组小鼠肿瘤组织MVD分别为30.01±3.12、22.56±2.11、16.21±2.40,显著低于对照组的41.10±2.93以及112 mg/L HSYA组的37.66±3.04,差异有统计学意义(X^2=2.82,P=0.010;X^2=3.16,P=0.007;X^2=4.58,P=0.000)及(X^2=1.98,P=0.038;X^2=2.45,P=0.016;X^2=3.82,P=0.001)。28 mg/L HSYA组与对照组VEGF扩增荧光表达阈值所需循环次数比较,差异无统计学意义,但其VEGF mRNA的表达值仅为0.43±0.16,明显低于对照组的0.82±0.06,差异有统计学意义(F=0.77,P=0.038)。结论 28 mg/L HSYA能够使小鼠Lewis肺癌移植中MVD明显减少,具有抑制肿瘤生长的作用,可能与下调VEGF mRNA表达有关。

扶正散结汤拆方配伍中药对Lewis肺癌荷瘤小鼠血清IL-2、IL-10、IFN-γ影响的研究

目的研究扶正散结汤拆方对Lewis荷瘤小鼠免疫调节的机制,为其发挥临床效果提供科学依据。方法建立Lewis移植瘤模型,随机分为空白组、模型组、顺铂组、扶正组、化痰组、活血组、清解组、联合组,连续用药后处死小鼠,ELISA法检测小鼠外周血清IL-2、IL-10、IFN-γ变化。结果造模后各组脾脏指数、IL-2、IFN-γ血清含量降低,IL-10均有不同程度升高,小鼠免疫受到不同程度的抑制。扶正散结汤各配伍组分比较研究发现,配伍分组及联用组的脾脏系数降低程度均低于模型组。在防止IL-2下降方面,扶正组、活血组效果优于DDP组;在防止IFN-γ含量降低方面,联用组效果显著,提示全方组对IFN-γ作用最好,单独使用各配伍分组的效果稍差;在防止IL-10升高方面,联用组效果最好,其次为活血组。结论扶正散结汤正确配伍在调节免疫方面具有一定的协同效应而发挥抗肿瘤作用。

白屈菜碱对小鼠肺癌细胞皮下移植瘤生长和血管生成的抑制作用及其机制

目的:探讨白屈菜碱对肺癌移植瘤小鼠肿瘤生长和血管生成的影响,并阐明其作用机制。方法:选取32只健康C57BL/6小鼠,制备Lewis肺癌移植瘤小鼠模型。将小鼠随机分为模型组(0.9%氯化钠)、低剂量白屈菜碱组(25 mg·kg^(-1)白屈菜碱)、高剂量白屈菜碱组(50 mg·kg^(-1)白屈菜碱)和阳性对照组(60 mg·kg^(-1)环磷酰胺),每组8只。称量各组小鼠移植瘤质量并计算抑瘤率,计算各组小鼠胸腺指数和脾脏指数,采用酶联免疫吸附测定(ELISA)法检测各组小鼠血清中白细胞介素2(IL-2)、γ干扰素(INF-γ)和肿瘤坏死因子α(TNF-α)水平,免疫组织化学法检测各组小鼠肿瘤组织中血管内皮生长因子(VEGF)蛋白表达情况并计算微血管密度(MVD)及VEGF蛋白表达评分,Westernblotting法检测各组小鼠肿瘤组织中核因子κB(NF-κB)和缺氧诱导因子1α(HIF-1α)蛋白表达水平。结果:与模型组比较,低和高剂量白屈菜碱组及阳性对照组小鼠移植瘤质量均降低(P<0.05);与低剂量白屈菜碱组比较,高剂量白屈菜碱组和阳性对照组小鼠移植瘤质量均降低(P<0.05),抑瘤率均升高(P<0.05);与高剂量白屈菜碱组比较,阳性对照组小鼠移植瘤质量均降低(P<0.05),抑瘤率升高(P<0.05)。与模型组比较,低和高剂量白屈菜碱组及阳性对照组小鼠脾脏指数和胸腺指数均升高(P<0.05);与低剂量白屈菜碱组比较,高剂量白屈菜碱组和阳性对照组小鼠脾脏指数及胸腺指数均升高(P<0.05);与高剂量白屈菜碱组比较,阳性对照组小鼠脾脏指数和胸腺指数均升高(P<0.05)。ELISA法,与模型组比较,低和高剂量白屈菜碱组及阳性对照组小鼠血清中IL-2、INF-γ和TNF-α水平均升高(P<0.05);与低剂量白屈菜碱组比较,高剂量白屈菜碱组和阳性对照组小鼠血清中IL-2、INF-γ和TNF-α水平均升高(P<0.05);与高剂量白屈菜碱组比较,阳性对照组小鼠血清中IL-2、INF-γ和TNF-α水平均升高(P<0.05)。与模型组比较,低和高剂量白屈菜碱组及阳性对照组小鼠肿瘤组织MVD降低(P<0.05);与低剂量白屈菜碱组比较,高剂量白屈菜碱组和阳性对照组小鼠肿瘤组织MVD降低(P<0.05);与高剂量白屈菜碱组比较,阳性对照组小鼠肿瘤组织中MVD降低(P<0.05)。与模型组比较,低和高剂量白屈菜碱组及阳性对照组小鼠肿瘤组织中VEGF蛋白表达量减少;与低剂量白屈菜碱组比较,高剂量白屈菜碱组和阳性对照组小鼠肿瘤组织中VEGF蛋白表达量减少;与高剂量白屈菜碱组比较,阳性对照组小鼠肿瘤组织中VEGF蛋白表达量减少;模型组、低剂量白屈菜碱组、高剂量白屈菜碱组和阳性对照组小鼠肿瘤组织VEGF蛋白表达评分比较差异有统计学意义(P<0.05)。Western blotting法,与模型组比较,低和高剂量白屈菜碱组及阳性对照组小鼠肿瘤组织中NF-κB和HIF-1α蛋白表达水平降低(P<0.05);与低剂量白屈菜碱组比较,高剂量白屈菜碱组和阳性对照组小鼠肿瘤组织中NF-κB和HIF-1α蛋白表达水平降低(P<0.05);与高剂量白屈菜碱组比较,阳性对照组小鼠肿瘤组织中NF-κB和HIF-1α蛋白表达水平降低(P<0.05)。结论:白屈菜碱能够抑制Lewis肺癌移植瘤小鼠肿瘤组织生长、保护免疫器官和抑制肿瘤血管生成,可能通过靶向NF-κB/HIF-1α信号通路和下调NF-κB及HIF-1α蛋白表达水平发挥治疗作用。

玛咖多糖增强机体免疫状态提高5-氟尿嘧啶对荷瘤小鼠的疗效

目的:观察玛咖多糖预处理荷瘤小鼠对5-氟尿嘧啶(5-FU)治疗效果的影响;考察在实施化疗前和化疗过程中应用玛咖多糖以调整机体免疫状态和辅助化疗的可能性。方法:将30小鼠随机分为5组,每组6只;空白对照组、5FU组采用PBS灌胃,其余分别采用低、中、高剂量玛咖多糖灌胃;建立肺癌移植瘤(LLC)小鼠模型;除空白组外,其余4组小鼠均腹腔注射5-FU。观察抑瘤效果并分别计算抑瘤率,通过流式细胞术分析脾脏CD4^+T细胞、CD8^+T细胞和Treg细胞的数量与比例。结果:体内实验显示,5-FU组、低、中、高剂量玛咖多糖辅助5-FU组的平均肿瘤抑制率分别为51. 16%、51. 38%、62. 17%和69. 78%。流式细胞术分析结果显示,1 000 mg/kg玛咖多糖^+5-FU组的CD4^+T细胞比例较单独5-FU处理组显著升高(P <0. 05)。结论:玛咖多糖辅助5-FU治疗,可明显减缓肿瘤生长速度,提高抑瘤率。

龙葵氯仿提取物对荷瘤鼠肿瘤生长及脾和胸腺指数的影响

目的观察龙葵氯仿提取物对荷瘤鼠肿瘤生长及脾和胸腺指数的影响。方法建立Lewis肺癌移植瘤模型,将小鼠随机分为5组,荷瘤模型组予生理盐水(0.2mL/10g)灌胃,龙葵氯仿提取物高、中、低剂量组分别按50、25、12.5mL/kg剂量的龙葵氯仿提取物灌胃,环磷酰胺组予环磷酰胺(CTX)(20mg/kg)腹腔注射(每隔2天1次),共15天。停药后24h,处死小鼠,分别剥离瘤块、胸腺、脾脏组织称重,测定各组小鼠的肿瘤生长抑制率、脾指数和胸腺指数。结果氯仿高、中、低剂量组抑瘤率分别为25.36%、38.93%、13.57%;CTX组为51.43%。环磷酰胺组及氯仿高、中、低剂量组平均瘤重分别为(1.36±0.07)g、(2.09±0.16)g、(1.71±0.11)g和(2.42±0.07)g,与荷瘤模型组(2.80±0.04)g比较,差异有统计学意义(P<0.01、P<0.05)。与荷瘤模型组比较,氯仿中剂量组的胸腺指数和脾指数显著提高(分别为130.85%、131.04%),差异有统计学意义(P<0.01),CTX组则显著降低(分别为46.24%和74.69%),差异有统计学意义(P<0.01)。结论龙葵氯仿提取物具有抑制荷瘤小鼠移植瘤生长的作用,其机制可能为通过增加荷瘤小鼠的胸腺和脾脏的重量,抑制荷瘤小鼠胸腺和脾脏萎缩,增加小鼠抗肿瘤免疫反应。

骨髓间充质干细胞对肺癌细胞生长和凋亡的影响

目的探讨人骨髓间充质干细胞(bone marrow mesenchymal stem cells,BMSCs)对裸鼠肺癌A549细胞移植瘤生长和凋亡影响。方法 30只皮下肺癌移植瘤Balb/c-nu裸鼠模型,随机分为3组。分别为PBS溶液注射组,BMSCs培养上清组,BMSCs移植组。每3天测量肿瘤体积变化。分离肺癌移植瘤细胞,采用MTT法检测肺癌移植瘤细胞增殖情况,RT-PCR法检测肺癌移植瘤细胞凋亡相关基因(P53,P21,Bax,Bcl-2,Caspase-3)表达情况,流式细胞仪检测肺癌移植瘤细胞凋亡情况。结果相对于PBS组和BMSCs上清组,BMSCs移植组肺癌移植瘤生长明显减慢,其细胞增殖速率下降,凋亡相关基因表达增高同时凋亡率明显上升。结论 BMSCs移植可以减缓肺癌移植瘤组织生长,同时抑制肺癌A549细胞增殖,增加其凋亡相关基因表达并促进其凋亡。

芪玉三龙汤对肺癌小鼠肿瘤组织TLR4/MyD88/NF-κB通路分子表达的影响

目的:研究芪玉三龙汤对肺癌小鼠肿瘤组织TLR4/MyD88/NF-κB通路相关分子表达的影响。方法:基于前期研究基础,采用LLC细胞构建肺癌移植瘤小鼠模型,造模成功后随机分为模型组、顺铂组、芪玉三龙汤20.1 g/kg、40.2 g/kg、80.5 g/kg、芪玉三龙汤80.5 g/kg+顺铂3.67 mg/kg组,每组20只移植瘤小鼠。灌胃相应药物或生理盐水,联合组灌胃及腹腔注射给予,连续治疗21天,剥离瘤组织,称取瘤质量,计算抑瘤率。HE常规染色,光镜下观察肿瘤组织病理形态学。RT-qPCR、Western Blot法检测各组小鼠肿瘤组织中TLR4/MyD88/NF-κB通路相关基因和蛋白表达水平。结果:芪玉三龙汤具有移植瘤抑制作用,量效关系明显,与顺铂联用具有明显协同作用。光镜下观察模型组肿瘤细胞排列紊乱,周围未见坏死肿瘤细胞,而芪玉三龙汤20.1 g/kg、40.2 g/kg、80.5 g/kg组可见不同程度的坏死肿瘤细胞,其中以80.5 g/kg组最为明显。同时该复方能够下调TLR4/MyD88/NF-κB通路中TLR4、MyD88、IRAK、TRAF6、NF-κB及IκB基因和蛋白的表达水平,量效关系明显,且与顺铂联用具有明显协同作用。结论:结合前期研究基础,芪玉三龙汤的抑瘤作用可能与其调控TLR4/MyD88/NF-κB信号通路,改善免疫功能有关。

白花丹素体内外抗Lewis肺癌的效果及机制研究

目的研究白花丹素(plumbagin,PL)对Lewis肺癌的抑制作用。方法 CCK8检测细胞的增殖;流式细胞仪检测细胞的凋亡率;Western blot检测细胞内Bcl-2和血管内皮生长因子(VEGF)蛋白的表达水平;建立Lewis肺癌小鼠模型;分别使用生理盐水、白花丹素(分小、中、大3个剂量组)及环磷酰胺(CTX)作用于动物模型;观察各组肿瘤体积大小、瘤重、抑瘤率及测肿瘤组织VEGF表达情况。结果 CCK8结果显示,白花丹素对Lewis肺癌细胞增殖有明显的抑制作用,且呈浓度依赖性(r=0.953,P<0.01);白花丹素显著增加Lewis肺癌细胞凋亡率(P<0.05);白花丹素可使Lewis肺癌细胞中Bcl-2和VEGF蛋白的表达较对照组显著下调(P<0.05);白花丹素小、中、大剂量组及CTX组的肿瘤体积、瘤重及肿瘤组织中VEGF蛋白表达水平均较对照组显著降低(P<0.05)。结论白花丹素在体内外均能抑制Lewis肺癌细胞的增殖,其机制可能与下调Bcl-2、VEGF蛋白的表达和诱导Lewis肺癌细胞凋亡有关。

SA脂质体介导血管抑素和/或内皮抑素基因治疗Lewis肺癌小鼠的实验研究

目的观察SA脂质体介导血管抑素和/或内皮抑素基因对Lewis肺癌小鼠移植瘤生长、转移的抑制作用。方法建立C57BL/6j小鼠肺癌模型,30只荷瘤鼠随机分空白对照组,SA脂质体对照组,血管抑素基因(pAng)治疗组,内皮抑素基因(pEnd)治疗组,血管抑素和内皮抑素基因联合治疗组,每组6只。以SA脂质体介导,将血管抑素和/或内皮抑素基因直接注入移植瘤内,每周2次,共6周,每周测瘤体大小2次,6周末处死所有小鼠,观察瘤体大小变化、肺表面转移灶数、生存期等。结果各治疗组均能抑制肿瘤增长及肺内转移,与对照组比较有统计学意义(P<0.01),小鼠活动能力、饮食、对外界刺激的反应能力均无明显改变,生存期明显长于对照组。结论SA脂质体介导血管抑素和/或内皮抑素基因治疗可有效地抑制Lewis肺癌移植瘤的生长、转移,生存期明显长于对照组。