益肺清化膏含药血清对肺癌细胞株的抑制作用

目的:研究益肺清化膏对肺癌细胞的抑制作用.方法:使用血清药理学的方法,体外观察益肺清化膏含药血清对两种不同的肺癌细胞株(PG、PAa细胞株)的抑制作用.结果:益肺清化膏含药血清具有一定的抑瘤效果,抑瘤率为23.0%～36.2%,且以较高浓度时抑瘤作用显著;但总体来说,抑瘤作用要明显弱于化疗药物顺铂.结论:益肺清化膏对肿瘤生长具有一定的抑制作用.

肺癌细胞株中NVB和Doc药物敏感性关联基因的研究

目的:筛选小细胞肺癌(SCLC)和非小细胞肺癌(NSCLC)细胞株中与诺维苯(NVB)、泰索帝(Doc)药物感受性相关的基因。方法:采用MTT比色分析法测定4株SCLC细胞株和6株NSCLC细胞株对NVB、Doc的药物感受性,同时应用cDNAmacroarray技术检测10株肺癌细胞株中1291个药物感受性关联基因的表达状态,分析二者之间的相关性。结果:与NVB和Doc药物敏感性关联(r≥±0.4)的基因共有56个。1)与NVB药物敏感性相关联的基因有36个,SCLC+NSCLC组与NSCLC组共同表达的基因有20个,其中,SCLC+NSCLC组表达的基因有27个,特异表达的有7个,NSCLC组为29个基因,9个基因特异表达。2)与Doc药物敏感性相关联的基因有50个,其中,SCLC+NSCLC组与NSCLC组共同表达的基因有12个,SCLC+NSCLC组表达的基因有24个,12个基因特异表达,NSCLC组为38个基因,26个基因特异表达。3)肺癌细胞株中与NVB、Doc药物感受性相关联基因的分类主要分布于:信号转导分子﹑代谢酶类及其抑制剂、细胞因子和转录因子等4类。结论:SCLC和NSCLC细胞株中NVB、Doc药物敏感性相关联基因存在明显差异,但分类基本相同。

肺癌细胞株中GEM和CDDP药物敏感性相关基因的研究

背景与目的筛选小细胞肺癌(small cell lung cancer,SCLC)和非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC)细胞株中与健择(gemcitabine hydrochloride,GEM)和顺铂(cisplatin,CDDP)药物敏感性相关的基因,有助于进一步阐明抗癌药物作用机制,为克服抗癌药物的耐药性、研制开发新的抗癌药物提供新线索,同时也将为临床的个体化治疗提供理论依据。方法采用MTT比色分析法测定4株SCLC细胞株和6株NSCLC细胞株对CDDP和GEM的药物敏感性,同时应用cDNA macroarray技术检测10株肺癌细胞株中1291个药物敏感性相关基因的表达状态,分析二者之间的相关性。结果与GEM药物敏感性呈明显正相关(r≥0.632,P<0.05)的基因有6个;与CDDP药物敏感性关联的基因共有45个;与GEM、CDDP敏感性关联(r≥±0.4)的基因有41个;肺癌细胞系中与GEM和CDDP两类药物敏感性呈明显相关的基因是Metallothinein(信号转导分子)、CathepsinB(组织蛋白酶B)和TIMP1(生长因子);肺癌细胞系中与GEM、CDDP药物敏感性相关联的基因主要分布于Metallothinein、Cathepsin B、生长因子TIMP1等类别。结论SCLC和NSCLC细胞株中GEM、CDDP存在药物敏感性相关基因,其中Metallothinein、Cathepsin B和TIMP1基因与GEM药物敏感性呈正相关,与CDDP药物敏感性呈负相关。

肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体联合化疗药物对非小细胞肺癌细胞的作用机制研究

肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体（tumor necrosis factor related apoptosis-inducing ligand,TRAIL）在肿瘤的免疫监视中起到一定作用。rhTRAIL可诱导肿瘤细胞凋亡。研究表明,大多数非小细胞肺癌细胞株对TRAIL抵抗,因此,我们研究化疗药物与TRAIL联合作用对非小细胞肺癌细胞的作用机制。

胃癌细胞株化疗药物相互作用的实验研究

目的 利用胃癌细胞株探讨化疗药物的相互作用。方法 利用MTT法测定四种化疗药的单药和联合用药对胃癌细胞株的抑制率 ,将测得的数据输入电脑 ,用CalcuSyn(Biosoft)软件处理 ,推算出有关数据 :斜率 (m )、截距 ( y int)、IC50 、联合指数 (CI)和剂量减少指数 (DRI)。结果 资料显示 ,胃癌细胞株化疗敏感性顺序 :ADM >CDDP >MMC >5Fu ;联合用药的敏感性顺序 :MMC +CDDP >5Fu +MMC >ADM +MMC >5Fu +ADM >5Fu +CDDP >ADM +CDDP。联合用药协同作用的大小依次为 :5Fu +MMC >5Fu +CDDP >5Fu +ADM >MMC +CDDP >ADM +CDDP。根据两种药物联合用药DRI分析 ,以 5Fu +MMC为最佳 ;三种药物的联合用药的DRI也明显优于两种药物的联合用药。在三种药物联合使用中 ,5Fu、MMC和ADM中 2 0 0∶1∶1的配比要比 10 0∶1∶1更理想。结论 三种药物联合用药优于两种药物联合用药 ;在两种药物联合用药中 ,5Fu +MMC最佳。

CD_3AK细胞对人肺癌细胞株的细胞毒作用

目的研究ＣＤ３ＡＫ细胞对人肺癌细胞株的细胞毒作用。方法应用抗ＣＤ３单克隆抗体及重组白细胞介素２（ｒＩＬ－２）刺激培养ＣＤ３ＡＫ细胞，体外实验研究ＣＤ３ＡＫ细胞的增殖及对人肺癌细胞株Ａ５４９、ＳＰＣ－Ａ１细胞的杀伤能力。结果刺激培养４ｄ，ＣＤ３ＡＫ细胞增殖及杀伤能力与ＬＡＫ细胞无差异；培养８ｄ，ＣＤ３ＡＫ细胞的增殖及杀伤能力明显优于ＬＡＫ细胞（Ｐ＜０．０１）；培养１６ｄＣＤ３ＡＫ细胞仍见增殖，且杀伤作用保持在５０％以上。结论ＣＤ３ＡＫ中细胞作为一种新的肿瘤过继性免疫治疗效应细胞具有潜在的临床应用价值。

抗癌口服液体外对人胃癌MGC-803细胞株的抗增殖作用及药物敏感性的研究

目的:探讨抗癌口服液体外给药对胃癌MGC-803细胞株的抗增殖作用并观察其药物敏感性。方法:应用MTT法、生长曲线及集落形成率的测定研究该中药在体外对人胃癌细胞株增殖的抑制作用及药物敏感性。结果:用MTT法和生长曲线的检测结果表明,谊中药在体外对MGC-803胃癌细胞株有明显抑制作用,加药组与对照组相比其生长抑制率有显著性差异(P<0.01),而且这种抑制作用呈现浓度和时间的依赖性。通过集落形成率的测定结果表明,加药组与对照组相比其集落形成率和集落形成抑制率有显著性差异(P<0.01),说明读中药对MGC-803胃癌细胞株有明显的抗增殖作用。结论:该中药在体外能够抑制胃癌细胞增殖,并对MGC-803胃癌细胞株有较好的敏感性。

从1例非小细胞肺癌患者探讨TKI与抑酸药物的相互作用

1例62岁女性患者,因"右肺腺癌全身多发转移"入院。入院后行EGFR基因检测,结果为21外显子敏感突变,余未见突变。给予口服EGFR-TKI盐酸厄洛替尼片(150 mg,qd)抗肿瘤治疗,服用第2天因出现胃肠道不适给予奥美拉唑肠溶胶囊(20 mg,qd)对症治疗。临床药师结合相关资料分析了TKI与抑酸药物的相互作用、临床意义及防治措施,并根据现有证据探讨,盐酸厄洛替尼与奥美拉唑可能存在具有临床意义的相互作用,建议将抑酸药物更换为雷尼替丁胶囊(150 mg,bid),并在给药前2 h或给药后10 h给予盐酸厄洛替尼。患者治疗过程顺利,胃肠道反应亦明显减轻。服用盐酸厄洛替尼1个月后再次入院复查,疗效评价为PR。

廿烷五烯酸对人肺癌A-549细胞株的凋亡作用及细胞周期的影响

[目的]观察廿烷五烯酸诱导人肺癌A-549细胞株的凋亡作用及其对A-549细胞周期的影响.[方法]用人肺癌A-549进行体外培养,分为对照组和小、中、大剂量廿烷五烯酸组,分别给予蒸馏水及15,30,60 mg/L廿烷五烯酸,培养48 h,观察细胞变化.对照组加入培养液500μL,实验步骤相同.应用FCM进行定量检测细胞凋亡并作细胞周期分析.[结果]对照组细胞培养48 h,凋亡率仅为0.14%±0.05%,未见亚二倍体峰;用15,30,60 mg/L廿烷五烯酸处理48 h时,细胞出现凋亡峰,凋亡率分别为10.50%±0.56%,19.87%±1.34%,30.12%±1.78%,不同质量浓度凋亡率间差异有统计学意义,廿烷五烯酸质量浓度在15～60 mg/L时,G0/G1期和G2/M期细胞百分比下降,S期细胞百分比上升,阻滞周期于S期.[结论]体外实验中,廿烷五烯酸通过干扰细胞周期抑制人肺癌A-549细胞的生长,主要阻滞于S期;抑制肿瘤细胞增殖可能是廿烷五烯酸抗肺癌作用的机制之一.

姜黄素(Curcumin)能够升高肺癌细胞对抗肿瘤药物的敏感性

作为重要的天然药物产物,姜黄素(Curcumin)分离自Curcuma longa L.,具有多个方面的活性,包括抗氧化、抗感染和抗炎作用。最近的研究提示姜黄素可能具有一定的抗肿瘤活性,但其活性和作用机制有待深入研究。为考察姜黄素对抗肿瘤药物杀伤肺癌细胞的影响,用肺癌细胞系A549、H460、H1299以及H358使用姜黄素预处理后,分别使用抗肿瘤药物吉非替尼(Gefitinib)、舒尼替尼(Sunitinib)、吉西他滨(Gemcitabine)和紫杉醇(Paclitaxel)处理上述肺癌细胞,检测其抑制率;并计算IC50值。CCK-8实验结果显示,姜黄素能够上调抗肿瘤药物对肺癌细胞的杀伤作用,显著下调其IC50值。说明姜黄素具有增加肿瘤细胞对化疗药物敏感性的作用,具有潜在逆转化疗耐药的价值。

高良姜素对肺癌肿瘤细胞DNA拓扑异构酶的抑制及细胞杀伤作用

目的:探讨高良姜素对肺癌肿瘤细胞DNA拓扑异构酶(Topo I)的活性的影响及对肺癌肿瘤细胞株A549和H46生长的抑制作用。方法:采用MTT法研究高良姜素对肺癌肿瘤细胞株A549和H46生长的抑制作用,利用琼脂糖凝胶电泳法测定高良姜素对Topo I活性的影响,在此基础上通过荧光光谱和分子对接研究高良姜素与Topo I的相互作用机制,最后进一步探讨高良姜素对Topo I结构的影响。结果:高良姜素对肺癌肿瘤细胞株A549和H46的生长起抑制作用(半抑制率IC50分别为0.221 mmol/L和0.173 mmol/L);琼脂糖凝胶电泳显示高良姜素对Topo I的活性有较好的抑制作用;荧光光谱分析显示高良姜素能显著猝灭Topo I的荧光,且疏水作用力是二者相互作用的主要驱动力;圆二色谱分析表明高良姜素诱导Topo I构象的解折叠,使α-螺旋含量增加,而不利于其形成活性中心,进而导致Topo I活性的降低;分子模拟结果表明:高良姜素能够优先结合到Topo I的活性中心附近,并与催化基团Arg364和Asn352形成氢键。结论:高良姜素能够抑制Topo I的活性,而使肿瘤细胞DNA单链解旋的速率降低,从而在诱导肺癌肿瘤细胞株A549和H46凋亡的过程中起重要作用。

丹参酮ⅡA对NCI-H460肺癌细胞的增殖抑制和诱导凋亡作用

目的:本研究拟探讨丹参酮ⅡA对肺癌细胞株NCI- H460的增殖抑制作用及其作用机理。方法:应用MTT比色法检测不同浓度丹参酮ⅡA对NCI- H460细胞的增殖抑制,应用流式细胞仪观察丹参酮ⅡA对NCI- H460细胞周期的影响,应用RT- PCR法检测用药后bcl 2和C myc基因mRNA表达水平。结果:丹参酮ⅡA对NCI H460细胞增殖抑制作用成剂量依赖性。细胞周期分析显示:用0 5μg/ml丹参酮ⅡA作用NCI H460细胞24、48、72h后,凋亡细胞分别占细胞总数1 .2%、3 .4%、7. 7%;用1 0μg/ml丹参酮ⅡA作用24、48、72h,凋亡细胞分别占细胞总数2 .6%、5. 9%、13 .4%;用2 0μg/ml丹参酮ⅡA作用24、48、72h,凋亡细胞分别占细胞总数4 .1%、8 .7%、37. 6%,说明丹参酮ⅡA能促使NCI H460细胞发生凋亡,且此作用呈剂量依赖性。用药48h后bcl- 2和C -myc基因mRNA表达明显降低。结论:丹参酮ⅡA对NCI H460细胞的增殖具有明显的抑制作用及诱导凋亡的作用。关键词 丹参酮ⅡA;NCI H460细胞株;细胞周期;

人外周血γδT细胞对肺癌细胞杀伤作用的研究

目的:探讨人外周血扩增的γδT细胞对肺腺癌细胞A549的杀伤作用。方法:取健康人外周血分离单个核细胞,置于RPMI1640培养基(含100ml/L小牛血清,50ml/L人AB型血清,IPP2μg/L,IL-2105IU/L)中培养扩增γδT细胞,用流式细胞仪检测γδT细胞的纯度。用扩增后的γδT细胞与肺腺癌细胞A549按不同效靶比例孵育,用乳酸脱氢酶释放法进行细胞毒活性测定。结果:人外周血单个核细胞经过培养扩增γδT细胞可以达到较高的纯度。人外周血γδT细胞对人肺腺癌细胞A549有较强的杀伤活性,其杀伤活性与效靶比和效应细胞的纯度呈正相关。人外周血γδT细胞对靶细胞的杀伤活性要高于CIK细胞。结论:人外周血扩增的γδT细胞对肺腺癌细胞A549有较强的杀伤作用。

大蒜素对人乳腺癌细胞株的抑制作用

目的探讨大蒜素对人乳腺癌细胞株(MDA-MB-231)的抑制作用。方法采用四甲基偶氮唑蓝(MTT)法测定不同浓度(5、10、20、40、80mg/L)大蒜素对增殖MDA-MB-231的抑制率。通过药物半数抑制浓度(IC50)计算软件计算IC50。相差倒置显微镜下观察细胞形态的改变情况。结果10、20、40mg/L组大蒜素对MDA-MB-231的增殖有明显抑制作用(P<0.01)。24、48、72hIC50值分别为16.50、8.28、7.82mg/L。相差倒置显微镜下观察可见MDA-MB-231细胞分裂相减少,部分细胞漂浮,残存细胞形态不规则,状态差,反光差,出现细胞碎片。16.50、8.28、7.82mg/L的大蒜素作用24、48、72h后,琼脂糖凝胶电泳可见DNA凋亡梯形条带。结论大蒜素可使MDA-MB-231的增殖受到抑制,促进肿瘤细胞凋亡,具有抗肿瘤作用。

siRNA对肺癌细胞株bcl-2基因表达的抑制

目的研究小干扰RNA(siRNA)对bcl-2基因表达的抑制作用。方法利用Ambion公司提供的设计软件和试剂盒,设计合成以bcl-2基因为靶标的siRNA,通过脂质体将合成的siRNA转入A549和NCIH460细胞株,以未转染细胞和转染bcl2的反义药物G3139为对照,经MTT法检测siRNA对细胞生长的抑制,RTPCR检测bcl2mRNA水平,流式细胞仪检测细胞周期的改变和bcl-2蛋白表达,反应siRNA对bcl-2表达的抑制效应。结果siRNA组与对照组细胞存活率各时间点均有显著差异(P<0.05);与反义组在24、48h也有显著差异(P<0.05),而72h无差异(P>0.05)。转染12h后,siRNA组bcl-2mRNA与对照组和反义组有显著差异(P<0.05)。转染48h后,siRNA组bcl2蛋白阳性率明显低于对照组和反义组,siRNA组和反义组细胞阻滞于S期。结论体外转录合成的siRNA可抑制A549和NCIH46细胞bcl2基因的表达,效率可达50%以上。

基于药学信息数据库评价肺癌治疗药物的相互作用

目的评价肺癌治疗药物的药物相互作用(DDI)。方法在Lexicomp和Micromedex两个数据库中检索中国临床肿瘤学会《原发性肺癌诊疗指南》(2018版)所涉及的全部肺癌治疗药物的DDI,并进行归纳分析。结果25种肺癌治疗药物在Lexicomp中提示存在931对DDI,在Micromedex中则为349对,其中达到禁忌级别的分别为170对和47对。Lexicomp显示抗肿瘤植物药的DDI最多,平均每种药物的DDI数量为70对。结论对于存在多种基础疾病以及使用酪氨酸激酶抑制剂的患者,临床药师应对其进行药物治疗方案整理与优化,避免因DDI引起药物不良反应或导致疗效下降。

抑癌基因p53对非小细胞肺癌化疗药物敏感性的影响

p53基因与肺癌密切相关,可作为诊断肺癌及判断预后的参考指标。研究显示p53基因变异的肺癌预后较差,而且对化疗的敏感性也较低。p53基因异常会降低铂类、吉西他滨、依托泊苷、长春碱类以及环磷酰胺和异环磷酰胺等抗肿瘤药物的敏感性,野生型p53(Wt p53)基因的重建和修复可能作为基因治疗成为与这些类药物联合治疗肺癌的有效治疗手段;对紫杉碱类药物的敏感性没有负面影响。对p53等基因药物学的研究,并有助于肺癌个体化治疗的实施,提高肺癌治疗的有效率。

肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体对肺癌细胞的杀伤作用研究

目的研究肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体受体(TRAILR)在肺癌细胞株A549中的表达及TRAIL对肺癌细胞的杀伤作用,探讨TRAIL治疗肺癌的可行性。方法采用RTPCR检测非小细胞肺癌细胞株A549TRAILR的表达。采用不同浓度TRAIL处理A549,MTT法检测药物处理前后肿瘤细胞的凋亡发生率。采用不同浓度TRAIL与不同浓度的化疗药物、中药联合作用于A549,观察其疗效。结果肺癌细胞株A549中有DR5、DR4、DcR2的表达,但DcR1表达缺失。经TRAIL(100μg/L)处理48h,肺癌细胞凋亡发生率约5%。TRAIL联合化疗药物、中药可显著增强A549的凋亡率。结论A549中存在TRAILR类型的表达差异。TRAIL可诱导A549凋亡,联合化疗药物、中药可显著增强A549的凋亡率。

眼镜蛇毒心脏毒素对人肺癌A549细胞株的遗传毒性研究

探讨蛇毒心脏毒素（ＣＴＸ）对人肺癌Ａ５４９细胞株的遗传毒性。方法应用眼镜蛇毒（ＣＴＸ）处理体外培养的人肺癌Ａ５４９细胞株，通过细胞生长速率、有丝分裂指数（ＭＩ）、细胞周期动力学指数（ＣＫＩ）、银染核仁组织区计数（ＡｇＮＯＲ）、姐妹染色单体交换（ＳＣＥ）频率、二倍体细胞比率的分析，观察ＣＴＸ所产生的遗传毒性作用。结果ＣＴＸ能明显抑制肺癌Ａ５４９细胞的ＤＮＡ复制过程和ｒＲＮＡ的合成，且随着浓度增大，癌细胞受抑制程度越大。用２ｍｇ／ＬＣＴＸ作用肺癌细胞后，ＳＣＥ频率比对照组明显下降（Ｐ＜０．０１），但对照组和实验组出现的二倍体细胞比率差异不明显（Ｐ＞０．０５）。结论眼镜蛇毒ＣＴＸ可抑制肺癌细胞的生长恶性程度，但使其恶性表型逆转的作用不明显。