大黄素对肺癌细胞系A_(973)增殖的影响

目的 了解大黄素对肺癌细胞系A_(973)细胞生长、增殖的影响。方法 采用台盼蓝染色排斥法进行细胞计数,MTT法测定大黄素对肺癌细胞系A_(973)细胞增殖的抑制率。结果 大黄素IC_(50)=1775.54μg/mL。结论 大黄素的抗肿瘤作用较弱。

野生型P53、P16基因协同对肺腺癌细胞系生长抑制作用的研究

为了探讨野生型P5 3基因及P16基因在恶性肿瘤基因治疗中的作用 ,用腺病毒为载体将野生型P5 3基因转入高、低转移的肺腺癌细胞系Anip973、AGZY83 -a和经野生型P16基因质粒转染的高、低转移肺腺癌细胞系Anip973(Anip973P16 )、AGZY83-a(AGZY83-aP16 )。对各组转染细胞进行生长曲线、MTT生长抑制率、原位末端标记、Western -blotting等技术检测分析。结果发现 (1)野生型P5 3蛋白的过表达对上述肺腺癌细胞系均呈现出较强的生长抑制作用。 (2 )野生型P5 3蛋白的过表达对高转移肺癌细胞系Anip973的抑制作用明显高于低转移细胞系AGZY83 -a。 (3)野生型p5 3蛋白的过表达对经野生型P16基因转染的高、低转移的肺癌细胞Anip973、AGZY83-a抑制作用明显高于未经P16基因转染的细胞。野生型P5 3基因可以作为肺腺癌基因治疗的候选基因。肿瘤抑制基因P5 3、P16的联合转染可能是对肺腺癌进行基因治疗的有效手段。

微阵列技术对两种人类肺腺癌细胞系基因组变异的实验研究

目的对Anip973和AGZY83-a两个细胞系的基因组加以分析,以明确它们中导致肿瘤形成、演进及转移的基因。方法通过全基因高分辨率微阵列对照基因组杂交(aCGH)技术对这两种细胞系进行评估绘制完整的CNV图谱。结果对从这两个细胞系获得的基因组DNA进行染料交叉杂交,并未得到可测得的任何遗传物质的获得或缺失;但当细胞系的DNA与正常对照DNA分别进行联合杂交,发现他们具有相同的拷贝变异数的基因图谱,包括39个获得的和60个缺失。共获取9个纯合子缺失片段,其中5个含有重要的肿瘤相关基因。结论细胞系中的这些纯合子缺失基因可能与肿瘤形成机制相关。

UCN-01去除放射后肿瘤细胞G_2期阻滞及其相关机制

背景与目的:辐射对肿瘤细胞的影响常表现为细胞周期的改变。本研究观察X线照射后肿瘤细胞G2期阻滞及药物UCN鄄01去除此阻滞的情况,并进一步研究其相关机制。方法:选用已知p53突变的人鼻咽癌CNE鄄1细胞系和人肺腺癌973细胞系进行研究,并以p53功能正常的人纤维母细胞瘤HT鄄1080细胞系作为对照。采用细胞培养和流式细胞仪技术分析X线照射对以上细胞系的细胞周期的影响,并观察UCN鄄01对放射后细胞G2期阻滞的影响;应用蛋白印迹法(Westernblot)测定在UCN鄄01去除CNE鄄1细胞G2期阻滞的过程中,细胞内磷酸化CDC2鄄Tyr15含量的相应变化。结果:X线照射明显导致CNE鄄1细胞和973细胞G2阻滞,照射2Gy后两组的G2期细胞比例分别由18.4%和14.8%上升至43.6%和42.8%,两组细胞的G1期阻滞不显著,衡量G1期阻滞的指标“S期消耗率”均较低,分别为14.8%和-1.2%,明显低于p53功能正常的HT鄄1080细胞(57.0%)。UCN鄄01能够去除放射后CNE鄄1细胞和973细胞G2阻滞,两组的G2期细胞比例分别从单纯照射组的63.5%和35.4%降至16.1%和16.3%。CNE鄄1细胞照射后随着细胞G2期阻滞增加,磷酸化CDC2鄄Tyr15的含量相应增加,而UCN鄄01能够降低照射后细胞内磷酸化CDC2鄄Tyr15的含量,并与该药去除细胞G2期阻滞的过程相一致。

高转移肺腺癌细胞系Anip973中存在3p24的断裂重排

目的 确认一对细胞来源相同、转移能力不同的人肺腺癌细胞系 AGZY83- a和 Anip- 973中3号染色体短臂的分子细胞遗传学差异。方法 采用 3p涂染探针对两细胞系进行 G显带后荧光原位杂交。结果 两细胞系共同存在标记染色体 der(3;5 ) (3pter→ 3p10∷ 5 q10→ 5 qter)和 der(1) t(1;12 ;3)(3pter→ 3q12∷ 12 q2 4→ 12 q15∷ 1p2 2→ 1qter)。不同的是 ,低转移细胞系 AGZY83- a中存在 1条正常的 3号染色体 ;而在高转移细胞系 Anip973中 ,存在 1条涉及 3号染色体断裂重排的标记染色体 +(?∷ 3p2 4→3qter) ,断裂点发生于转移相关基因 RAB5 A的染色体区域。结论 高转移肺腺癌细胞系 Anip973中 3号染色体上 RAB5 A基因区 3p2 4的断裂重排与该基因的高表达一致。

水飞蓟宾诱导肺腺癌Anip973细胞凋亡的分子机制研究

目的:探讨水飞蓟宾诱导肺腺癌Anip973细胞系细胞凋亡的分子机制。方法:采用MTT法、倒置显微镜和电子显微镜等形态学检测以及流式细胞仪(FCM)技术检测、DNALadder分析、凋亡分子PARP的表达检测细胞凋亡,同时进行凋亡相关蛋白Bax、Bcl-2、caspase-3和caspase-9表达活性分析。结果:(1)水飞蓟宾对人肺腺癌Anip973细胞系细胞的增殖有显著抑制作用;(2)水飞蓟宾作用Anip973细胞48h后,随着浓度的增加,倒置显微镜下可见细胞数目减少,胞体变小、变圆,到高浓度时出现较多的死亡细胞;(3)扫描电镜观察发现,随着水飞蓟宾作用浓度的增加,Anip973细胞中出现增多的凋亡细胞,凋亡细胞表现出典型的超微结构特征;(4)流式细胞仪检测的结果发现,随着药物作用时间的延长,Anip973细胞的G1期细胞比例增多,S期细胞明显减少,G2期细胞略有减少,并出现明显的凋亡峰。(5)水飞蓟宾作用后的Anip973细胞出现明显的DNALadder和PARP降解增加等凋亡特征;(6)水飞蓟宾作用后,Anip973细胞中的凋亡相关蛋白Bax表达增加、caspase-3和caspase-9酶活性增加,而Bcl-2表达降低。结论:水飞蓟宾在体外有抑制人肺腺癌细胞Anip973的增殖作用,并通过激活线粒体依赖的caspase凋亡通路,诱导其凋亡。

CI-973的临床前抗肿瘤活性

CI-973化学名[SP-4-3-(R)]-[1,1-环丁烷二羧酸基-(2-)][2-甲基-1,4-丁二氨基-N,N’]合铂(Ⅱ),是一种新的铂类抗肿瘤药。本文对它进行了几种临床前模型系统的抗肿瘤活性研究。体外实验主要对耐顺铂及对顺铂敏感的小鼠白血病细胞进行了研究,并把CI-973与其它的铂类药物顺铂、卡铂进行了活性比较,对顺铂敏感的细胞系L1210及P388,CI-973的ID50浓度(_μM)分别为1.4和0.71;而顺铂则为1.03和0.43;卡铂为7.6和3.2。这表明CI-973的活性强度高于卡铂而低于顺铂。