大豆胰蛋白酶抑制剂抑制肺癌PG细胞生长及诱导细胞调亡的研究

目的研究大豆胰蛋白酶抑制剂(SBTI)在体外对人肺癌PG细胞生长抑制作用和对细胞周期的影响。方法采用MTT法检测SBTI对人肺癌PG细胞的增殖抑制作用;流式细胞仪检测SBTI对人肺癌PG细胞周期的影响;电子显微镜观察SBTI对细胞调亡的作用。结果 SBTI对人肺癌PG细胞的生长有明显抑制作用;SBTI可以将人肺癌PG细胞阻滞于S期;SBTI可以促使人肺癌PG细胞出现明显的染色质浓缩和凋亡小体,诱导人肺癌PG细胞的凋亡。结论大豆胰蛋白酶抑制剂能抑制人肺癌PG细胞生长、诱导人肺癌PG细胞调亡的作用,其作用的机制为阻滞人肺癌PG细胞于S期,促使人肺癌PG细胞出现明显的染色质浓缩和凋亡小体,实验为大豆胰蛋白酶抑制剂抗肿瘤效应提供了实验依据。

消瘤保肺丸对人肺癌PG细胞上皮细胞钙粘蛋白、α-Catenin、及β-catenin表达水平的影响及意义

目的研究消瘤保肺丸对上皮细胞钙粘蛋白(E-cadherin)、α-catenin及β-catenin在人肺癌PG细胞株中表达的影响及其意义。方法采用免疫组化链霉菌抗生物素蛋白-过氧化物酶法(SP法)检测人肺癌PG细胞E-cadherin、α-catenin及β-catenin在消瘤保肺丸干预作用下的表达情况。随机分为4组即消瘤保肺丸高剂量组、消瘤保肺丸低剂量组、清肺化痰丸组和空白组。结果 E-cadherin与α-catenin、β-catenin在消瘤保肺丸作用下阳性表达率不同,其中E-cadherin在消瘤保肺丸的影响下阳性表达率较低,明显低于清肺化痰丸组和空白(P<0.01);而α-catenin、β-catenin在消瘤保肺丸干预作用下阳性表达率较高,且高于清肺化痰丸组和空白组(P<0.01)。结论消瘤保肺丸对E-cadherin、α-catenin及β-catenin的表达影响显著,提示其对肺癌的侵袭转移有一定抑制作用,从而表明E-cadherin、α-catenin及β-catenin的表达与肺癌的进展和转移密切相关。

半枝莲对人肺巨细胞癌细胞株PG细胞端粒酶活性的影响

目的:研究半枝莲对人肺巨细胞癌细胞株PG细胞端粒酶活性的影响。方法:用不同浓度的半枝莲含药血清分别处理人肺巨细胞癌细胞株PG细胞,采用流式细胞仪法观察其对PG细胞端粒酶活性的影响。结果:经半枝莲含药血清作用的PG细胞端粒酶活性明显下降。结论:下调肿瘤细胞的端粒酶活性,可能是半枝莲抗肿瘤的重要机制之一。

噻唑蓝法检测半枝莲对人肺巨细胞癌细胞株PG细胞增殖的抑制作用

目的观察半枝莲对人肺巨细胞癌细胞株PG细胞增殖的影响。方法采用噻唑蓝(MTT)比色法检测PG细胞增殖的状况。结果不同浓度的半枝莲含药血清对肺癌细胞PG增殖有抑制作用,且呈明显的时效和量效关系。结论半枝莲含药血清在体外可有效抑制肺癌细胞PG的生长,具有一定的细胞毒作用。

半枝莲对人肺巨细胞癌细胞株PG细胞bcl-2基因表达的影响

目的:研究半枝莲对人肺巨细胞癌细胞株PG细胞bcl-2基因表达的影响,以探讨其抗肿瘤的作用机制。方法:用不同浓度的半枝莲含药大鼠血清分别处理人肺巨细胞癌细胞株PG细胞,采用流式细胞仪法观察其对PG细胞bcl-2基因表达的影响。结果:经半枝莲含药血清作用的PG细胞bcl-2基因表达明显降低。结论:半枝莲抗肿瘤作用机制可能与bcl-2基因表达减少有关。

白花蛇舌草对人肺巨细胞癌细胞株PG细胞端粒酶活性的影响

目的研究白花蛇舌草对人肺巨细胞癌细胞株PG细胞端粒酶活性的影响,以探讨其抗肿瘤的作用机制。方法用不同浓度的白花蛇舌草含药血清分别处理人肺巨细胞癌细胞株PG细胞,采用流式细胞仪法观察其对PG细胞端粒酶活性的影响。结果经白花蛇舌草含药血清作用的PG细胞端粒酶活性明显下降。结论下调肿瘤细胞的端粒酶活性,可能是白花蛇舌草抗肿瘤的重要机制之一。

白花蛇舌草对人肺巨细胞癌细胞株PG细胞p^(53)基因表达的影响

目的研究白花蛇舌草对人肺巨细胞癌细胞株PG细胞p53基因表达的影响,以探讨其抗肿瘤的作用机制。方法用不同浓度的白花蛇舌草含药血清分别处理人肺巨细胞癌细胞株PG细胞,采用流式细胞仪法观察其对PG细胞p53基因表达的影响。结果经白花蛇舌草含药血清作用的PG细胞p53基因表达水平明显上调。结论白花蛇舌草抗肿瘤作用机制可能与p53基因表达增多有关。

白花蛇舌草对人肺巨细胞癌细胞株PG细胞bcl-2基因表达的影响

目的研究白花蛇舌草对人肺巨细胞癌细胞株PG细胞bcl-2基因表达的影响,以探讨其抗肿瘤的作用机制。方法用不同浓度的白花蛇舌草含药血清分别处理人肺巨细胞癌细胞株PG细胞,采用流式细胞仪法观察其对PG细胞bcl-2基因表达的影响。结果经白花蛇舌草含药血清作用的PG细胞bcl-2基因表达明显降低。结论白花蛇舌草抗肿瘤作用机制可能与bcl-2基因表达减少有关。

半枝莲对人肺巨细胞癌细胞株PG细胞nm23基因表达的影响

目的:研究半枝莲对人肺巨细胞癌细胞株PG细胞nm23基因表达的影响,以探讨其抗肿瘤的作用机制。方法:用不同浓度的半枝莲含药血清分别处理人肺巨细胞癌细胞株PG细胞,采用流式细胞仪法观察其对PG细胞nm23基因表达的影响。结果:经半枝莲含药血清作用的PG细胞nm23基因表达水平明显上调。结论:半枝莲抗肿瘤作用机制可能与nm23基因表达水平上调有关。

MTT法检测白头翁对人肺巨细胞癌细胞株PG细胞增殖的抑制作用

观察中药白头翁对人肺巨细胞癌细胞株PG细胞增殖的影响。采用噻唑蓝(MTT)比色法检测PG细胞增殖的状况。结果表明:不同浓度的白头翁含药血清对肺癌细胞PG增殖有抑制作用,且呈明显的时效和量效关系。白头翁含药血清在体外可有效抑制肺癌细胞PG的生长,具有一定的细胞毒性作用。

益肺清化颗粒对人肺癌PG细胞增殖、迁移与侵袭能力的影响

目的:研究益肺清化颗粒对人脐静脉内皮细胞血管生成的抑制作用及其可能机制。方法:益肺清化颗粒含药血清与体外培养的人肺癌PG细胞共培养,分别以MTT法、Transwell小室和Western blot实验观察益肺清化颗粒对人肺癌PG细胞增殖、迁移、侵袭能力的影响。结果:益肺清化颗粒含药血清可明显抑制PG细胞的增殖、迁移和侵袭能力,对VEGF和KDR的表达具有抑制作用,且益肺清化颗粒高浓度与吉非替尼联用效果更加明显。结论:益肺清化颗粒可能通过抑制血管新生从而抑制人肺癌PG细胞增殖、迁移和侵袭行为,进而限制肿瘤的生长、转移并诱导细胞发生凋亡,从而达到治疗肿瘤的目的。

抗Ⅳ型胶原酶胞内抗体对人巨细胞肺癌PG细胞侵袭的抑制作用

目的探讨内质网滞留型胞内抗体对Ⅳ型胶原酶分泌及其对人巨细胞肺癌PG细胞侵袭的抑制作用。方法构建了编码胞浆和内质网滞留型抗Ⅳ型胶原酶抗体的表达载体pcDNA3.1-CP.scFv和pcDNA3.1-ER.scFv。对人巨细胞肺癌PG细胞系进行基因转染。以Western blot检测pcDNA3.1-CP.scFv和pcDNA3.1-ER.scFv的表达,明胶酶谱检测PG细胞Ⅳ型胶原酶分泌情况,Matrigel实验检测细胞侵袭。结果CP.scFv和ER.scFv胞内抗体在PG细胞内表达,ER.scFv对Ⅳ型胶原酶分泌具有显著的抑制作用,对基质金属蛋白酶-9和基质金属蛋白酶-2的抑制率分别为85.7%和51.2%;而CP.scFv对Ⅳ型胶原酶分泌无抑制作用。ER.scFv编码基因转染的PG细胞与野生型和空白质粒组比较,对体外侵袭有明显的抑制,抑制率为76.3%;而CP.scFv编码基因转染的PG细胞未显示出有抑制作用。结论内质网滞留型胞内抗体技术可以在蛋白加工、分泌通路中抑制Ⅳ型胶原酶的活性,进而抑制肿瘤侵袭,可能在肿瘤基因治疗中具有重要的应用前景。

IFNγ在抗肿瘤新生血管形成中潜在的作用及机制研究

目的 :探讨干扰素 γ(IFNγ)在抗肿瘤新生血管形成中可能的作用及机制。方法 :建立人脐静脉内皮细胞 (humanumbilicalcordvascularendothelialcell,HUVEC)的体外培养体系 ,MTT法检测IFNγ(10、10 0、10 0 0U·ml-1)对HUVEC生长的直接影响 ;应用流式细胞术观察IFNγ对HUVEC凋亡和细胞周期的影响 ;半定量逆转录 多聚酶链反应 (RT PCR)检测IFNγ对HUVEC凋亡相关基因Bcl 2和BaxmRNA的表达的影响。酶联免疫吸附实验 (ELISA)检测缺氧状态下IFNγ(30、30 0、30 0 0U·ml-1)对人肺癌PG细胞分泌到培养上清中VEGF的影响。结果 :IFNγ(10、10 0、10 0 0U·ml-1)可抑制体外培养的HUVEC的生长 (P <0 .0 1) ;流式细胞术检测IFNγ(10、10 0、10 0 0U·ml-1)作用的HUVEC ,无亚二倍体峰出现 ,但细胞周期分析显示 ,IFNγ各给药组均可减少G2 M期的细胞比例 (P <0 .0 5或P <0 .0 1)。IFNγ(10 0、10 0 0U·ml-1)对抑凋亡基因Bcl 2和促凋亡基因Bax的mRNA的表达与对照组相比无显著的统计学意义 (P >0 .0 5 )。缺氧状态下IFNγ 30 0 0U·ml-1可抑制人肺癌PG细胞培养上清中VEGF的含量 ,与对照组相比有显著性差异 (P <0 .0 5 )。结论 :IFNγ可能通过直接抑制肿瘤血管内皮细胞的生长或间接下调肿瘤血管生成刺激因子释放的机制 ,

逆转录-聚合酶链反应法检测消瘤保肺丸对E-cad、α-catenin及β-catenin表达的影响

目的研究消瘤保肺丸对人肺癌PG细胞中E-cad、α-catenin及β-catenin表达的影响。方法采用逆转录-聚合酶链反应法(RT-PCR)检测E-cad、α-catenin及β-catenin表达的情况。随机分为四组,即消瘤保肺丸高剂量组、消瘤保肺丸低剂量组、对照组及空白组,分析电泳凝胶的灰度值。结果消瘤保肺丸高剂量组对3种分子的表达与空白组差异显著,(P<0.01)。消瘤保肺丸低剂量组α-catenin、β-catenin表达与空白组差异显著,(P<0.05);E-cad表达与空白组无显著差异,(P>0.05)。在α-catenin的表达与空白组差异显著,(P<0.05)。结论消瘤保肺丸对人肺癌PG细胞的E-cad、α-catenin及β-catenin的表达有明显影响,消瘤保肺丸对肺癌有一定的抑制作用,该实验为今后分子水平的进一步研究提供了依据。