升降散对急性肺损伤大鼠肺细支气管粘膜上皮细胞ICAM-1表达的影响

目的:探讨升降散对急性肺损伤模型大鼠细气管粘膜上皮ICAM-1表达的影响。方法:40只雄性SD大鼠,随机分为正常组、模型组、升降散大剂量组、中剂量组及小剂量组。给药6天后,舌下静脉注射LPS复制急性肺损伤模型,取肺组织切片,免疫组化检测。采集图像,分析细支气管粘膜上皮细胞胞质的平均灰度。结果:药物治疗组与模型组比较,能明显抑制肺细气管粘膜上皮细胞胞质ICAM-1的表达,有显著性差异。结论:升降散可通过抑制肺细气管粘膜上皮细胞胞质ICAM-1的表达,抑制炎症反应对肺组织造成的急性损伤,对急性肺损伤起到防治作用。

PM_(2.5)有机提取物经由铁死亡诱导人支气管上皮细胞损伤的研究

目的探讨细颗粒物(PM_(2.5))有机提取物能否诱导人支气管上皮细胞铁死亡。方法通过索氏提取法提取PM_(2.5)中有机物作为受试物,使用BEAS-2B细胞,以0.1%DMSO溶液作为溶剂对照,染毒于不同剂量(2.5、5、10和20μg/mL)的PM_(2.5)有机提取物构建细胞染毒模型;使用铁死亡抑制剂(Ferrostatin-1,Fer-1)构建铁死亡干预模型。通过吸光度法检测PM_(2.5)有机提取物染毒后BEAS-2B细胞存活率、丙二醛(malondialdehyde,MDA)和谷胱甘肽(glutathione,GSH)浓度;通过荧光法检测细胞内Fe2+含量、活性氧(reactive oxygen species,ROS)含量和脂质过氧化物(lipid peroxidation,LPO)含量;通过qRT-PCR方法检测铁死亡相关基因(如GPX4、SLC7A11、ACSL4、FTL和TFRC等)表达。结果与对照组相比,PM_(2.5)有机提取物染毒24 h后,当染毒剂量为10μg/mL时,细胞内Fe2+含量、ROS含量、LPO含量和MDA浓度均出现显著上升;而GSH浓度出现显著下降;qRT-PCR结果显示,细胞暴露于20μg/mL PM_(2.5)有机提取物时,细胞内铁死亡相关基因GPX4显著下调,SLC7A11、ACSL4、FTL和TFRC出现显著性上调。干预实验中,使用铁死亡特异性抑制剂Fer-1干预后上述变化得到明显改善。结论PM_(2.5)有机提取物可能通过诱导细胞铁死亡导致呼吸系统细胞损伤,进而对肺组织产生潜在健康影响。

抑制肺泡上皮细胞焦亡对支气管肺发育不良新生大鼠肺泡化阻滞的改善作用

目的·研究gasderminD(GSDMD)抑制剂necrosulfonamide(NSA)通过抑制肺上皮细胞焦亡对脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)诱导的新生大鼠支气管肺发育不良(bronchopulmonary dysplasia,BPD)肺泡化阻滞的影响。方法·将孕SD大鼠随机分为对照组、BPD组、BPD+NSA组和NSA组,羊膜腔注射LPS建立新生鼠BPD模型。取各组出生后第1、3、7日新生鼠肺组织,通过苏木精-伊红(H-E)染色观察肺泡化情况;利用免疫荧光法检测各组新生鼠肺部GSDMD-N端蛋白表达情况;荧光定量PCR法检测新生鼠肺组织中炎症因子白介素-1β(interleukin-1β,IL-1β)mRNA水平。体外培养小鼠肺泡上皮细胞系MLE-12,给予LPS以及腺苷三磷酸(adenosine triphosphate,ATP)刺激和NSA干预,CCK-8法检测MLE-12细胞活力,Hoechst 33342和碘化丙啶(propidium iodide,PI)染色法检测细胞焦亡水平,免疫荧光法检测MLE-12细胞表面活性剂蛋白C(surfactant protein C,SFTPC)和GSDMD-N端蛋白的表达情况。结果·体内实验结果显示:羊膜腔内注射LPS可导致肺发育受阻,模拟BPD的病理改变;羊膜腔内注射LPS建立的BPD模型中肺泡上皮细胞GSDMD-N端表达升高;NSA干预明显改善了BPD新生鼠的肺发育阻滞并抑制了IL-1β的mRNA表达(均P<0.05)。体外实验结果显示:LPS/ATP刺激下肺泡上皮细胞MLE-12活力下降,发生焦亡;NSA干预提高了肺泡上皮细胞活力并且抑制了焦亡(均P<0.05);NSA上调了LPS/ATP刺激下肺泡上皮细胞SFTPC的表达,抑制了LPS/ATP刺激下肺泡上皮细胞GSDMD-N端表达的上调(均P<0.05)。结论·抑制肺泡上皮细胞焦亡可改善LPS诱导的BPD新生鼠肺组织病理学改变。

上皮-间充质转化在高氧诱导大鼠支气管肺发育不良模型中的作用及机制研究

目的探讨上皮-间充质转化(epithelial-mesenchymal transition,EMT)在大鼠支气管肺发育不良(bronchopulmonary dysplasia,BPD)模型中的作用及机制。方法实验分为两部分。(1)将48只早产大鼠随机分为常氧组和高氧组,每组24只。高氧组暴露于85%氧气中建立早产大鼠BPD模型,常氧组置于同一室内常压空气中,于实验第1、4、7、14天收集早产大鼠肺组织标本。(2)将大鼠肺泡Ⅱ型上皮细胞系(RLE-6TN)随机分为常氧组(常规空气中培养)和高氧组(在95%氧气中培养),分别于高氧暴露后12 h、24 h、48 h收集细胞标本进行检测。使用苏木精-伊红染色法观察早产大鼠肺泡化情况,免疫荧光检测早产大鼠肺组织和RLE-6TN细胞肺表面活性蛋白C(surfactant protein C,SPC)和α-平滑肌肌动蛋白(α-smooth muscle actin,α-SMA)的共定位。实时荧光定量聚合酶链反应和蛋白免疫印迹法检测早产大鼠肺组织和RLE-6TN细胞EMT相关mRNA和蛋白表达水平。结果(1)与常氧组相比,高氧暴露7 d开始高氧组早产鼠可见肺泡化阻滞和肺泡结构简单化改变;肺组织中SPC和α-SMA存在明显共定位现象,高氧暴露7 d、14 d时,与常氧组比较,高氧组SPC表达减少,α-SMA表达增加;高氧暴露7 d、14 d时,与常氧组比较,高氧组TGF-β1、α-SMA、N-钙黏蛋白mRNA和蛋白表达水平升高(P<0.05),SPC、E-钙黏蛋白mRNA和蛋白表达水平降低(P<0.05)。(2)高氧暴露24 h、48 h时,与常氧组比较,高氧组SPC表达减少,α-SMA表达增加;高氧暴露48 h时,与常氧组比较,高氧组SPC、E-钙黏蛋白mRNA和蛋白表达降低(P<0.05),TGF-β1、α-SMA、N-钙黏蛋白mRNA和蛋白表达升高(P<0.05)。结论EMT破坏了BPD早产大鼠肺泡上皮细胞之间的紧密连接,造成肺泡结构简单化和发育异常,参与了BPD的发生发展。

肺内调节肽对兔支气管上皮细胞分泌白介素的影响

为探讨肺内调节肽对支气管上皮细胞 (bronchialepithelialcells ,BECs)分泌功能的影响 ,实验观察了兔BECs在未受应激与臭氧应激两种条件下白细胞介素 (interleukin ,ILs)的分泌。结果发现 :血管活性肠肽 (vasoactiveintestinalpeptide ,VIP)对未受应激BECs存在抑制作用 ,并使臭氧应激BECs分泌ILs下降 ;表皮生长因子 (epidermalgrowthfactor,EGF)使未受应激BECsIL 1、IL 8分泌增加 ,使臭氧应激的BECsILs分泌降低 ;内皮素 1(endothelin 1,ET 1)、降钙素基因相关肽 (calcitoningene relatedpeptide ,CGRP)可使未受应激的BECs分泌ILs增加 ,CGRP还可使臭氧应激的BECsILs分泌增加。结果提示 :肺内调节肽可调控BECsILs的分泌 。

肺内调节肽对兔支气管上皮细胞与嗜酸性粒细胞粘附功能的影响及机制探讨

为了探讨肺内调节肽在气道各类过敏性炎症发生、发展中的作用 ,我们观察了血管活性肠肽 (vasoactiveintestinalpeptide ,VIP)、表皮生长因子 (epidermalgrowthfactor,EGF)、内皮素 1(endothelin 1,ET 1)、降钙素基因相关肽(calcitoningene relatedpeptide ,CGRP)在未受应激与臭氧应激两种条件下对支气管上皮细胞 (bronchialepithelialcell,BEC)与嗜酸性粒细胞 (eosinophil,EOS)粘附的影响。结果发现 ,VIP、EGF可使O3应激的BEC与EOS的粘附率下降 ,下调气道上皮炎症反应 ;ET 1、CGRP可使未受应激的BEC与EOS的粘附率增加 ,诱发炎症损伤反应 ;CGRP还能加重臭氧的应激反应 ;ET 1、CGRP的效应可被W7、H7阻断。抗细胞间粘附分子 1(intercellularadhesionmolecule ,ICAM 1)抗体能阻断BEC与EOS的粘附 ,提示介导BEC与EOS粘附的粘附分子可能是ICAM 1。

肺内调节肽对支气管上皮细胞ICAM-1表达及NF-κB活性的调控(英文)

细胞间粘附分子 1(ICAM 1)是介导细胞与细胞之间粘附的重要生物分子 ;核因子 κB (NF κB)是体内普遍存在、能迅速对刺激产生反应的重要核转录因子。越来越多的证据显示 ,ICAM 1表达与NF κB激活是炎症反应的重要步骤。我们应用免疫组化、RT PCR、凝胶阻滞电泳 (EMSA)等多种实验方法 ,观察了肺内调节肽对支气管上皮细胞ICAM 1表达及NF κB活性的影响 ,以及NF κB抑制剂MG 13 2对ICAM 1表达的影响。实验结果发现 ,VIP、EGF可使臭氧应激BECs的ICAM 1表达降低 ;ET 1、CGRP可使未受应激BECs的ICAM 1表达增加。NF κB抑制剂MG 13 2可阻断O3、ET 1、CGRP引起的ICAM 1表达 ,提示NF κB在调控ICAM 1表达中起重要作用。EM SA结果显示 ,BECs中NF κB在臭氧应激下反复激活 ,CGRP与ET 1可促进NF κB的激活 ;VIP与EGF可抑制臭氧应激的BECs中NF κB的激活。以上结果说明 ,VIP、EGF可通过下调ICAM 1转录及NF κB激活减轻炎症反应 ,而ET 1、CGRP可通过上调ICAM 1转录及NF κB激活、加大炎症反应。ICAM 1与NF

鹅不食草挥发油对急性肺损伤大鼠支气管上皮细胞CD54表达的影响

目的:研究鹅不食草挥发油的抗炎作用及其可能的机制。方法:采用油酸合并脂多糖“两次打击”致大鼠急性肺损伤模型,观察鹅不食草挥发油对大鼠急性肺损伤的保护作用。结果:鹅不食草挥发油能显著抑制急性肺损伤所致大鼠肺水肿及中性粒细胞升高,抑制肺损伤大鼠支气管上皮细胞中CD54的表达。结论:鹅不食草挥发油对大鼠急性肺损伤有明显的保护作用,减少支气管上皮细胞CD54的表达是其抗吸呼道炎症作用的可能机制。

GSK3在人、鼠、猪的肺组织及培养的猪支气管上皮细胞中的表达

目的探讨GSK3在动物肺组织及培养的猪支气管上皮细胞中的表达。方法用免疫组化,免疫细胞荧光法检测GSK3在人、大鼠、小鼠和猪的肺组织及培养的猪支气管上皮细胞中的表达。结果GSK3α和β广泛表达于人、鼠和猪的肺组织中,定位于胞浆。它们在几种动物肺组织中的表达分布大致相似,主要见于各级支气管上皮细胞、肺泡上皮细胞、粘膜平滑肌细胞和粘膜下腺体。但GSK3α在软骨细胞中表达明显强于GSK3β;几种哺乳动物肺组织中均未检测到GSK3的磷酸化。免疫荧光检测培养的猪支气管上皮细胞中有丰富的GSK3α、β的表达,磷酸化的GSK3信号弱。结论GSK3α、β丰富表达于不同种属哺乳动物肺组织的支气管上皮、腺体以及肺泡上皮,提示其可能在肺组织的生理功能和病理发生机制中起着重要作用。

TLR基因在人肺腺癌细胞和支气管上皮细胞中的表达

目的探讨Toll样受体家族(Toll-like receptors,TLRs)基因在人肺腺癌细胞(A549细胞)和人支气管上皮细胞(HBE细胞)中的表达及意义。方法通过GenBank网站查找基因全序列,根据引物设计原则应用软件Primer 5.0设计TLR2、TLR3、TLR9和内参β-actin引物。体外培养A549细胞和HBE细胞,提取细胞总RNA并逆转录得到cDNA,采用实时定量荧光PCR检测TLRs基因mRNA在这2种细胞中的表达。琼脂糖凝胶电泳检测各扩增产物片段大小。采用Western blot检测TLR2、TLR3、TLR9蛋白的表达。结果 TLR2、TLR3、TLR9基因在A549细胞中的表达丰度均比在HBE细胞中高(P<0.01)。琼脂糖凝胶电泳显示扩增产物符合预期片段大小。TLR2、TLR3、TLR9蛋白在A549细胞中的表达相对值分别为(0.472 8±0.010 3)、(0.319 3±0.011 2)和(0.856 9±0.007 9),而在HBE细胞中的表达相对值分别为(0.258 5±0.005 7)、(0.160 7±0.003 0)和(0.699 1±0.010 0),A549细胞中TLR2、TLR3、TLR9表达的相对值均高于HBE细胞(均P<0.01)。结论 TLR2、TLR3、TLR9基因在A549细胞中的表达高于HBE细胞,提示TLRs基因可能参与人肺腺癌的发生发展。

补肺运脾法在支气管哮喘慢性持续期的应用

哮喘,即支气管哮喘,是由多种类细胞(如T淋巴细胞、肥大细胞、中性粒细胞、气道上皮细胞、嗜酸性粒细胞等)以及细胞组分介导的气道慢性炎症为特点的呼吸系统疾病,以反复发作性的喘息、气短,伴有或者不伴有咳嗽,胸闷为主要表现,夜间及早晨频发[1]。

肺巨细胞癌细胞与支气管上皮细胞分泌蛋白质的差异分析

目的分析肺巨细胞癌细胞株95C与支气管上皮细胞株16HBE分泌蛋白质的差异。方法利用双向电泳(2-DE)分离肺巨细胞癌细胞株95C、支气管上皮细胞株16HBE分泌的蛋白质,寻找其分泌的蛋白质的差异。结果通过2-DE建立了较稳定的肺巨细胞癌细胞株95C、支气管上皮细胞株16HBE分泌的蛋白质2-DE图谱。经分析,两细胞株共有7个差异蛋白质点,肺巨细胞癌细胞株特有的差异点4个,量下调的差异点3个。结论差异蛋白质的鉴定为确定肺癌早期诊断相关蛋白标志物奠定了基础。

肺移植后闭塞性支气管炎与支气管上皮细胞的作用

肺移植是目前治疗终末期肺病的惟一有效方法,而闭塞性支气管炎是阻止肺移植长期存活的最主要并发症,其中支气管上皮细胞是引起这种迟发性排斥反应的主要靶器官。文章主要简要阐述了闭塞性支气管炎发生、发展中的免疫机制以及支气管上皮细胞在此过程中的作用和研究中的进展,其目的是初步讨论支气管上皮细胞与闭塞性支气管炎的紧密关系,使人们更加关注终末期肺疾病患者肺移植的研究,希望找到解决肺移植长期生存的方法。

炎症在化脓隐秘杆菌引起的支气管上皮细胞损伤中起关键作用

化脓隐秘杆菌是一种革兰氏阳性、不运动、无孢子、短的棒状或球状的细菌,可单独、成对或成群出现。在世界范围内,化脓隐秘杆菌经常从家畜和野生动物的化脓性疾病如肺炎、心内膜炎、胸膜炎的炎性产物和器官脓肿物中分离到。它在家畜的二次感染和混合感染中也起重要的作用。关于化脓隐秘杆菌对小鼠、猪精密肺组织切片及猪支气管上皮细胞的致病性及致病机制的研究少有报道。

肺支气管粘膜上皮细胞在癌变中核DNA含量变化特点

目的 研究肺支气管良恶性病变中DNA倍体及DNA指数(DI)情况;探讨DNA含量在癌变过程中的变化特点。方法用图像分析系统(MPIAS—500)对39例支气管粘膜慢性炎、45例支气管粘膜上皮鳞状上皮化生、45例支气管粘膜上皮异型增生、63例支气管肺癌进行DNA倍体分布及DNA指数的检测。结果 支气管粘膜慢性炎组、鳞状上皮化生组非整倍体均<1.3％,DI均值分别为0.92和1.03;异型增生组非整倍林为2.8％,DI均值为1.34;而肺癌组非整体为18.93％,DI均值为1.72,明显高于良性病变组(P<0.001)。结论 肺支气管良、恶性病变细胞核DNA倍体和非整倍体中所占的百分比不同;支气管粘膜上皮细胞在癌变过程中核DNA含量逐渐增多,核型分布范围增宽,非整倍体细胞增多,DI均值呈递增趋势。

健脾化痰益肺汤治疗儿童闭塞性细支气管炎疗效及对肺功能、抗中性粒细胞抗体的影响

目的:探讨中药健脾化痰益肺汤治疗儿童闭塞性细支气管炎的临床疗效。方法:选择深圳市罗湖区中医院2017年8月-2021年8月收治的闭塞性细支气管炎患儿89例,按照随机数字表法分为两组,治疗组45例,对照组44例。治疗期间,治疗组脱落6例,对照组脱落5例,两组均有39例患儿纳入研究。对照组予以西药治疗,治疗组服用中药组方健脾化痰益肺汤,疗程均为6周。比较两组治疗前后症状评分(咳嗽、喘息、咳痰)和血氧饱和度(Oxygen Saturation,SaO_(2))评分,并比较两组第1秒用力呼气容积(Forced Expiratory Volume in One Second,FEV_(1))、一秒率(FEV_(1)/FVC)和呼气中段最大流量(Maximal Mid-expiratory Flow,MMEF);比较两组胸部高分辨率CT(High Resolution CT,HRCT)评分、血清髓过氧化物酶(Myeloperoxidase,MPO)-抗中性粒细胞抗体(Anti-neutrophil Cytoplastic Antibody,ANCA)、蛋白酶3(Recombinant Proteinase 3,PR3)-ANCA浓度,疗程结束后比较两组临床疗效。结果:治疗后治疗组咳嗽、喘息、咳痰等评分均低于对照组(P<0.01);FEV_(1)、FEV_(1)/FVC、MMEF高于对照组(P<0.01);血清MPO-ANCA、PR3-ANCA浓度低于对照组(P<0.01);临床疗效优于对照组(P<0.05),差异均有统计学意义。结论:中药健脾化痰益肺汤可缓解症状,改善肺功能,降低血液ANCA的浓度,治疗儿童闭塞性细支气管炎效果显著。

鸡胚肺内支气管芽上皮细胞分化的组织学定量研究

鸡胚肺内支气管芽上皮细胞分化的组织学定量研究崔慧先李亚丽樊平白泽信行＊（河北医科大学＊日本信州大学）鸡胚肺常作为研究肺内分泌细胞的实验材料。本实验选用不同日龄的鸡胚，对其肺内支气管芽上皮的分化进行了组织学定量研究。取孵育５、６、７和９ｄ各三只鸡胚左肺...

鸡胚肺内支气管芽上皮分化过程中LH样细胞的表达及其定量研究

鸡胚肺内支气管芽上皮分化过程中ＬＨ样细胞的表达及其定量研究崔慧先李亚丽白泽信行＊（河北医科大学＊日本信州大学）本研究取孵育５、６、７和９ｄＷｈｉｔｅＬｅｇｈｏｒｎＳｔｒａｉｎ鸡胚肺，Ｂｏｕｉｎ液固定，常规酒精脱水、透明后石蜡包埋。使用超薄切片机左肺３...

肺移植治疗造血干细胞移植后肺部慢性移植物抗宿主病的临床分析

目的探讨肺移植治疗造血干细胞移植(HSCT)后肺部慢性移植物抗宿主病(cGVHD)的疗效。方法回顾性分析因肺部cGVHD接受肺移植治疗的12例患者的临床资料。分析患者的术前临床表现及累及器官,对比肺移植前后肺功能,分析患者肺移植术后生存情况。结果11例患者因原发血液系统恶性疾病行HSCT,其中白血病9例、骨髓增生异常综合征1例、淋巴瘤1例。1例因系统性红斑狼疮行HSCT。12例c GVHD患者中,8例同时累及皮肤,5例同时累及口腔,4例同时累及胃肠道,3例同时累及肝脏。12例患者肺移植术前均存在严重肺部cGVHD导致的呼吸衰竭,其中表现为Ⅱ型呼吸衰竭9例;表现为Ⅰ型呼吸衰竭3例。肺移植手术方式包括右肺移植2例、左肺移植2例、双肺移植8例。从接受HSCT到接受肺移植的间隔时间为75(19~187)个月。截至投稿日,随访时间为18(7~74)个月,其中10例患者存活,1例于术后22个月死于重症肝炎,另外1例于术后6个月死于消化道大出血,存活患者均未发现原发病复发。结论肺移植是治疗HSCT后肺部cGVHD的一种有效手段,可延长患者生存时间并提高生活质量。