肺舒灵对金黄地鼠肺泡巨噬细胞表达一氧化氮合酶及产生一氧化氮的影响

观察中药复方肺舒灵对金黄地鼠肺泡巨噬细胞表达一氧化氮合酶及产生一氧化氮的影响,以探讨肺舒灵防治慢性阻塞性肺疾病的作用机理。方法:经支气管肺泡灌洗获得肺泡巨噬细胞并进行培养。在脂多糖刺激同时或刺激6小时后加入不同剂量的肺舒灵,应用比色法测定上清液中反映一氧化氮(NO)含量的亚硝酸盐含量,免疫组织化学技术检测细胞中诱生型一氧化氮合酶(iNOS)的表达情况。结果:应用肺舒灵后,上清液中NO含量和细胞中iNOS表达均明显低于脂多糖刺激组(P<0.01),且呈剂量依赖关系。结论:减少肺泡巨噬细胞表达iNOS和产生NO,减轻NO介导的肺组织损伤,可能是肺舒灵防治慢性阻塞性肺疾病的机理之一。

中药复方肺舒灵对弹性蛋白酶活性的抑制作用

观察中药复方肺舒灵对弹性蛋白酶活性的抑制作用,探讨其防治慢性阻塞性肺疾病的作用机理,在体外培养肺泡巨噬细胞和复制肺气肿、肺动脉高压模型的基础上,应用琼脂弹性蛋白板方法,观察肺舒灵对体外培养的肺泡巨噬细胞产生弹性蛋白酶及肺气肿、肺动脉高压地鼠血清及肺泡灌洗液中弹性蛋白酶活性的抑制作用。结果肺舒灵对体外培养的肺泡巨噬细胞产生弹性蛋白酶及肺气肿、肺动脉高压地鼠血清和肺泡灌洗液中弹性蛋白酶活性有明显抑制的作用。琼脂弹性蛋白板法是测定弹性蛋白酶活性的一种切实可行的方法,对弹性蛋白酶活性具有较明显的抑制作用,可能是肺舒灵对慢性阻塞性肺疾病发挥较好防治作用的机理之一。

肺舒灵对金黄地鼠肺泡巨噬细胞产生肿瘤坏死因子的影响

目的：观察中药复方肺舒灵对金黄地鼠肺泡巨噬细胞产生肿瘤坏死因子（ＴＮＦα） 的影响，探讨肺舒灵防治慢性阻塞性肺疾病的作用机制。方法：经支气管肺泡灌洗获得肺泡巨噬细胞并进行培养，在脂多糖刺激同时或刺激６ｈ 后加入不同剂量的肺舒灵，应用ＥＬＩＳＡ 法测定上清液中ＴＮＦα含量，原位杂交技术检测细胞中ＴＮＦαｍ ＲＮＡ 表达情况。结果：应用肺舒灵后，上清液中ＴＮＦα含量和细胞中ＴＮＦαｍ ＲＮＡ 表达均明显低于脂多糖刺激组（ Ｐ＜ ０ ．０１） ，且呈剂量依赖关系，与单纯培养基培养组相比无明显差异（ Ｐ＞ ０ ．０５） 。结论：减少肺泡巨噬细胞ＴＮＦα的产生，减轻ＴＮＦα介导的肺组织损伤，可能是肺舒灵防治慢性阻塞性肺疾病的机制之一。

慢性阻塞性肺疾病和缺氧性肺动脉高压的发病机理及药物防治研究

目的研究慢性阻塞性肺疾病(COPD)和缺氧性肺动脉高压的发病机理及中药814、肺舒灵的防治作用。方法建立弹性酶、吸烟、细菌感染、缺氧及脂多糖诱发COPD、肺动脉高压鼠模型及体外肺泡巨噬细胞、肺泡Ⅱ型上皮细胞培养,利用形态定量病理学、电镜、病理生理、免疫组化及分子生物学技术检测。结果 1、814、肺舒灵对COPD造成的气道、肺、肺小动脉的病理性结构改建有抑制(减轻)作用,降低肺动脉高压。2、814、肺舒灵能保护肺血管内皮细胞;抑制肺泡巨噬细胞肿瘤坏死因子TNF-α的产生和一氧化氮合酶NOS的异常表达;促进肺泡巨噬细胞发生凋亡。3、通过培养细胞的免疫组化,West-ern,Northern杂交检测,提示814可拮抗TNF-α对肺表面活性物质A、B、mRAN表达的抑制,并证明表面活性物质的基因表达变化与肺气肿病变的发生发展相关。提示内源性表面活性物质系统的改善有助于肺气肿的减轻。4.COPD及肺动脉高压肺组织中基质金属蛋白酶MMP-9、MMP-12 mRNA表达增强,肺舒灵有抑制MMP表达增强,防治COPD的作用。结论 814、肺舒灵对动物实验性COPD、缺氧性肺动脉高压有明显防治作用。其主要作用机理可能是保护肺血管内皮细胞,抑制肺泡巨噬细胞TNF-α的产生和iNOS的表达,减少炎症因子,从而起到防治COPD的作用。