低氧诱导肺血管平滑肌细胞诱生型一氧化氮合酶基因表达

本研究采用原位杂交、免疫组织化学、酶组织化学染色方法从三个层次分别证明低氧诱导大鼠肺血管中膜平滑肌细胞一氧化氮合酶（ＮｉｔｒｉｃＯｘｉｄｅＳｙｎｔｈａｓｅ，ＮＯＳ）的基因和蛋白表达，并使中膜平滑肌细胞具有ＮＯＳ活性；离体培养的肺动脉平滑肌细胞实验也证明低氧使肺动脉平滑肌细胞ＮＯＳ活性增加，ＮＯ生成增多。提示诱生型ＮＯＳ基因可能是一种低氧诱导基因，低氧诱导ＮＯＳ表达可能是细胞感受低氧的一种重要机制。

当归抑制人肺血管平滑肌细胞黏着斑激酶的表达

目的探讨当归对肺血管平滑肌细胞黏着斑激酶(FAK)的影响。方法实验分成4组。对照组:不加任何干预因素;fibronection(FN)组:(作为刺激剂)40μg/mL;当归组:3mg/mL;联合组:FN40μg/mL+当归组:3mg/mL。采用免疫印迹方法检测了FAK蛋白质的表达,应用Tunel法检测细胞凋亡的变化。结果FAK蛋白质在对照组与当归组中无表达,在FN组中,FAK蛋白质呈高表达;FAK蛋白质在混合组(当归+FN组)中表达降低,与FN组比较差异具有显著性(P<0.01);Tunel法检测细胞凋亡表明当归组细胞凋亡明显增加。结论当归通过减少FAK形成抑制肺血管平滑肌细胞增生,促进细胞凋亡,在防治肺血管平滑肌细胞增生方面有着重要的作用。

内皮素—1促进人肺血管平滑肌细胞黏着斑激酶的表达

目的探讨内皮素-1(ET-1)与黏着斑激酶(FAK)在肺血管平滑肌细胞增生中的关系及其影响。方法采用免疫印迹方法测定了不同组别中FAK的表达,并采用流式细胞仪分析了不同组别细胞周期的变化。结果Westernblot分析结果表明:对照组FAK蛋白质无表达,其余4组细胞的FAK均有表达,其中ET-1组表达最高;BQ123组、混合组与fibronection(FN)组之间比较没有明显差异;但都比ET-1组低(P<0.01)。流式细胞仪测定结果示:与对照组比较:FN组、混合组、ET-1组、BQ123组均有明显差异(P<0.01),均表现为细胞中G1相的比例减少,而S相增高(P<0.01);与FN组比较,BQ123组、混合组无明显差异;但ET-1组有明显差异(P<0.01),BQ123、混合组与FN组。的G1相、S相变化基本相同(P>0.05)。结论ET-1促进人肺血管平滑肌细胞FAK的表达,在肺血管结构的重构方面可能有着重要的病理生理学意义。

血管紧张素Ⅱ对人肺血管平滑肌细胞增殖及黏着斑激酶表达的影响

目的:探讨血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)与黏着斑激酶(FAK)对人肺血管平滑肌细胞增生的影响。方法:采用免疫印迹方法测定了不同组别中FAK的表达,并采用MTT比色法,3H-TdR掺入测定细胞增殖情况。结果:AngⅡ能促进细胞增殖,对细胞的影响呈现剂量依赖关系。结论:AngⅡ促进人肺动脉平滑肌细胞增殖,并促进FAK的表达,在肺血管结构的重构方面可能有着重要的病理生理学意义。

肺血管平滑肌肉瘤一例报告

肺平滑肌肉瘤是一种较少见的肺部原发性的恶性肿瘤,其临床表现、X线及CT表现均无特征性,我院收治1例报道如下.

肺血管平滑肌增殖的研究进展

血管平滑肌细胞的增殖是高血压的一个重要的病理特征，其机制是各种刺激经由细胞内的信号网络转导后引起相关基因表达和细胞因子生成，并因此改变正常时增殖和凋亡之间的平衡状态，导致血管平滑肌细胞过分增殖。本文对肺血管平滑肌增殖的相关影响因素、信号转导途径的研究进展作一综述。

血管紧张素-(1-7)对肺动脉平滑肌细胞增殖的影响

目的探讨血管紧张素-（1—7）[ANG-（1—7）]对体外培养兔肺动脉平滑肌细胞增殖的影响。方法体外培养兔肺动脉平滑肌细胞，鉴定后传代培养，取4～7代细胞，应用不同浓度ANG-（1—7）干预，并与血管紧张素-Ⅱ（ANG—Ⅱ，浓度10^-6mol／L）、空白组对照。通过台盼蓝染色法细胞计数、四甲基偶氮唑蓝（MTT）比色法，确定肺动脉平滑肌细胞的生长趋势变化。结果10^-12～10^-10mol/L浓度ANG-（1—7）与相应对照组比较，细胞数、光吸收值（A值）变化不明显，无统计学意义，10^-9～10^-5mol／L浓度组，ANG-（1—7）＋ANG—Ⅱ（浓度均为10^-6）组与空白对照组比较，细胞数和A值均下降，差异有统计学意义，与血管紧张素-Ⅱ组比较差异也有统计学意义；10^-6、10^-5浓度组与ANG-（1—7）＋ANG—Ⅱ（浓度均为10^-6mol／L）组引起的变化差异不明显，无统计学意义。结论ANG-（1—7）呈剂量依赖性抑制胎牛血清诱导的兔肺动脉平滑肌细胞增殖，在浓度为10^-6时效果最明显，再增加浓度效果无明显增强，这种抑制作用与ANG-Ⅱ的存在无明显关系。

旁分泌TGF-β1促进缺氧诱导的肉鸡肺血管平滑肌细胞增殖与迁移

制备禽转化生长因子-β1(transforming growth factor-β1,TGF-β1)重组蛋白(chTGF-β1)和禽特异性TGF-β1抗体,采用免疫组化法检测肺动脉高压(pulmonary arterial hypertension,PAH)肉鸡和正常肉鸡肺血管中TGF-β1的表达。分离培养肉鸡肺动脉平滑肌细胞(pulmonary arterial smooth muscle cells,PASMCs)和内皮祖细胞(endothelial progenitor cells,EPCs),构建低氧细胞模型,采用Western blot检测TGF-β1表达;将常氧(21%O_(2))和缺氧(5%O_(2))培养的PASMCs用chTGF-β1(20μg/L)处理24 h,采用CCK-8试验和细胞划痕试验分别检测细胞增殖和迁移。将肺动脉节段置于常氧和缺氧条件下培养48 h,采用免疫组化法检测肺动脉中膜Ⅰ型TGF-β受体(TGFβR-1)的表达。结果显示,TGF-β1在正常肉鸡肺小动脉中膜中仅有微弱表达,在PAH肉鸡肺小动脉中膜中表达增强;chTGF-β1可促进低氧诱导的PASMC增殖及迁移;低氧对PASMCs中TGF-β1表达无显著性影响,但可显著促进EPCs表达TGF-β1;在低氧条件下,离体培养的肺动脉中膜Ⅰ型TGF-β受体(TGFβR-1)表达升高。结果表明,在PAH发病过程中,TGF-β1可能通过旁分泌方式作用于PASMCs,促进肺血管中膜肥厚。

肺原发性血管平滑肌肉瘤

患者女，21岁，住院前6个月始觉右侧胸背部疼痛，为钝痛。此后疼痛加重，并于1个月前出现不明原因的干咳并出现胸闷持续性发热（体温维持在38℃）。胸部X光示：右侧中卜肺可见．-11cm×10．5cm×10cm的肿块影，密度均匀，意见：考虑右肺上叶巨大肿瘤，建议CT检查。行胸部CT示：两侧胸廓不对称，右侧上胸腔为巨大软组织影充填体积约为10．5cm×10．2cm×11cm，

慢性低氧所致肺动脉高压对大鼠肺血管平滑肌细胞及成纤维细胞中蛋白激酶C βI的膜转位和蛋白表达量的影响

本文旨在通过观察慢性低氧所致肺动脉高压对大鼠肺血管平滑肌细胞及成纤维细胞中蛋白激酶CβI（PKCβI）的膜转位和蛋白表达量的影响,初步探讨PKCβI在慢性低氧诱导大鼠肺动脉高压的发生、发展过程中所起的作用。作者选取清洁级健康雄性成年SD大鼠60只,体重（200～250）g,将其随机分成正常对照组、低氧1日、3日、7日、14日和21日组,

姜黄素对大鼠肺微血管平滑肌细胞周期和增殖能力的影响

目的探讨姜黄素对肺微血管平滑肌细胞增殖的影响,及其分子机制。方法原代SD雄性大鼠肺微血管平滑肌细胞的培养、鉴定、传代,MTT法检测细胞增殖,流式细胞术分析细胞周期,RT-PCR检测mRNA的表达,Westernblot检测蛋白表达。结果姜黄素以浓度依赖的方式抑制肺微血管平滑肌细胞增殖,使细胞周期停滞在G0/G1期。姜黄素处理后细胞内p21和p53的mRNA、蛋白水平表达增高、p300的蛋白表达以及p300介导的乙酰化H3和p53蛋白表达降低。结论姜黄素能够抑制肺微血管平滑肌细胞的增殖,使细胞周期停滞在G0/G1期。其作用可能是通过下调p300活性和上调p53相关信号通路来实现的。

组蛋白去乙酰化酶4抑制肌细胞增强因子2C介导的肺动脉高压小鼠肺血管重构研究

目的观察经组蛋白去乙酰化酶4抑制剂(HDAC4i)处理后小鼠肺组织中组蛋白去乙酰化酶4(HDAC4)、肌细胞增强因子2C(MEF2C) mRNA及其蛋白表达水平变化,以及小鼠肺血管的病理生理改变,探讨HDAC4是否调节MEF2C介导的肺动脉平滑肌细胞增殖。方法健康雄性BALB/C小鼠32只,随机分为肺动脉高压模型(PAH)组(野百合碱处理)、HDAC4i组(HDAC4i处理)、PAH+HDAC4i组(野百合碱联合HDAC4i处理)及阴性对照组(NC组)4组,每组8只。在第2周、第4周监测4组小鼠肺动脉血流动力学改变、右心室肥厚指数[RV/(LV+S)],采用荧光定量PCR与蛋白质印迹技术检测小鼠肺组织MEF2C mRNA及其蛋白表达水平变化,采用免疫组化检测小鼠肺组织α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、骨桥蛋白(OPN)及HDAC4蛋白表达及定位。结果第2周和第4周,PAH组、PAH+HDAC4i组及HDAC4i组小鼠RV/(LV+S)均明显高于NC组(P<0.01);PAH组、PAH+HDAC4i组及HDAC4i组小鼠右心室收缩压(RVSP)均明显高于NC组(P<0.01)。与NC组比较,第4周PAH组、PAH+HDAC4i组及HDAC4i组MEF2C mRNA及其蛋白表达量均升高,且MEF2C mRNA表达差异有统计学意义(P<0.05)。免疫组化显示:与NC组比较,PAH组、PAH+HDAC4i组及HDAC4i组小鼠肺动脉平滑肌细胞呈现OPN表达水平上升,而α-SMA与HDAC4蛋白表达水平明显下降。结论 HDAC4抑制MEF2C介导的肺动脉高压小鼠肺血管重构。

钾通道在肺动脉高压中的作用

肺血管上分布着多种钾通道 ,它们决定着膜静息电位 ,调节血管紧张性。患有肺动脉高压的机体 ,其肺血管上存在钾通道基因表达和功能异常 ,而钾通道功能状况与肺血管收缩、增生、重构密切相关。了解两者相辅相成的关系 ,有利于了解肺动脉高压形成机制 ,并为肺动脉高压治疗提供依据。

α-1肾上腺素受体与肺动脉高压

本文综述了α１－肾上腺素受体在肺动脉高压形成中的作用。低氧或血管壁张力改变均可引起α１－肾上腺素受体基因转录增加、受体密度增高、敏感性增强;去甲肾上腺素、食欲抑制药、可卡因等通过兴奋α１－肾上腺素受体,可引起肺血管平滑肌收缩、增殖,导致肺动脉高压。

内质网应激-线粒体自噬通路在大鼠肺动脉高压中的作用观察

目的 在野百合碱诱导的肺动脉高压大鼠模型上抑制内质网应激,观察内质网应激-线粒体自噬通路在大鼠肺动脉高压中的作用。方法 选择45只SD大鼠,将其随机分为3组:分别为正常对照组、野百合碱诱导的肺动脉高压(pulmonary arterial hypertension, PAH)组及4-苯基丁酸(4-phenylbutyric acid, 4-PBA)药物干预组,每组15只。利用生物信息采集系统测定各组大鼠血流动力学指标平均肺动脉压力和平均右心室压力;采用苏木精-伊红染色观察肺血管重塑改变,并利用Image J病理分析软件测定肺血管重塑相关指标;在电镜下观察肺血管平滑肌细胞中线粒体状态改变;采用qPCR分子生物学手段测定内质网应激-线粒体自噬通路关键因子的mRNA表达水平。结果 (1)野百合碱诱导的PAH组平均肺动脉压力及平均右心室压力均升高。经过4-PBA干预后,与PAH组相比,平均肺动脉压力及平均右心室压力均下降(P<0.001)。(2)HE染色后发现PAH组肺小血管重塑明显,血管重塑指标测定提示肺小动脉中膜厚度增加,管腔狭窄(P<0.05)。(3)电镜观察肺血管平滑肌细胞超微结构发现,PAH组肺血管平滑肌细胞线粒体肿胀、线粒体嵴结构破坏,溶解消失,可见线粒体自噬现象增多。抑制内质网应激后,线粒体正常结构破坏减少,线粒体自噬减少。(4)内质网应激-线粒体自噬通路关键因子的mRNA水平测定结果发现,PAH组内质网应激相关因子PERK、ATF4、Bcl-2、CHOP的mRNA表达水平上调(P<0.001),线粒体融合关键因子Mfn2(mitofusin-2)表达水平下调,线粒体分裂关键因子Drp1(dynamin-related protein 1, Drp1)表达上调(P<0.001),自噬相关因子12 (autophagy related 12,Atg12)、微管相关蛋白1A/1B-轻链3 (microtubule-associated proteins 1A and 1B,LC3)、p62 (sequestosome-1,p62/SQSTM1)的mRNA表达上调(P<0.01)。抑制内质网应激后,内质网应激相关因子的mRNA表达水平下降(P<0.001),线粒体融合因子Mfn2表达上调(P<0.001),线粒体分裂因子Drp1的mRNA表达下调(P<0.001),Atg12、LC3和p62的mRNA表达水平降低(P<0.01)。结论 内质网应激可能通过线粒体自噬途径在肺动脉高压发生发展中发挥重要作用,干预该通路可能为肺动脉高压的防治提供治疗新思路。

电压门控性钾通道在缺氧性肺动脉高压中作用的研究进展

肺动脉高压是临床常见病,多种心、肺血管疾病均可引起,其特征是肺动脉压力持续升高,右心室的后负荷不断增加,从而导致进行性的右心衰竭甚至死亡。近年来,国内外学者研究发现钾通道的表达和活性与肺动脉高压的形成关系密切。肺动脉高压的形成主要涉及肺血管收缩和肺血管构型重建两个方面〔1,2〕。

酚妥拉明在肺结核大咯血中的应用

常规治疗肺结核大咯血的方法较多,但大多数止血药疗效差,副作用较大。我们于1995年5月至1998年2月共收治肺结核大咯血142例,用酚妥拉明治疗,取得良好效果。1、资料与方法1．1 一般资料我院1995-1998年收住院肺结核大咯血142例,我们将142例按入院时间先后分成两组(治疗组与对照组),治疗组男49例,女22例,年龄18~72岁,平均年龄36.3岁,病程1~32年,平均21.5年,对照组男54例,女17例。

Noggin通过下调钙池操纵性钙内流与瞬时受体电位阳离子通道蛋白表达抑制缺氧诱导的肺动脉平滑肌细胞增殖

肺动脉高压是一系列以肺血管功能和结构改变为特点的疾病，表现为远端肺小动脉持续收缩、异常增生及重塑，最终可导致右心衰竭，目前认为其发病进程中，肺血管平滑肌细胞的异常增殖和迁移导致了肺小动脉的增生与重塑所致。