肺转移前微环境体外模型的建立与双参颗粒干预机制

目的:构建肺转移前微环境体外模型,观察S1pr1-stat3信号通路在模型成熟过程中的作用,同时验证双参颗粒对该模型的干预作用,探讨其可能的机制。方法:体外构建小鼠Lewis肺癌细胞和原代骨髓细胞共培养模型,并用S1pr1激活剂SEW2871干预髓系细胞分化的过程,观察相关蛋白MMP9、Lox、Version及Fibronectin的表达情况,并检测模型中骨髓来源的抑制性细胞(MDSCs)细胞的分化情况及双参颗粒对模型的干预效果。结果:S1pr1可以明显促进肺转移前微环境体外模型的成熟构建,S1pr1-stat3是该模型成熟的关键信号通路,双参颗粒不仅显著降低模型中该信号通路相关蛋白的表达,同时对微环境成熟的关键蛋白的表达也具有抑制作用,还可显著降低该信号通路相关的骨髓细胞向MDSCs细胞的分化(P<0.05),同时对转移前微环境中部分肿瘤源性细胞因子如粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子(GM-CSF)及转化生长因子(TGF-β)有显著抑制作用(P<0.05)。结论:双参颗粒通过抑制S1pr1-stat3信号通路及部分肿瘤源性细胞因子的表达,抑制肺转移前微环境模型的成熟。

肿瘤转移前微环境动物模型的构建与评价方法研究进展

肿瘤转移是一个庞杂的过程,转移前微环境(PMN)概念的提出,揭示了肿瘤转移的关键因素。实验动物模型在模拟人类的疾病进程、开发新型药物及疗法和临床试验等方面有着巨大的贡献,现已被广泛用于研究肿瘤行为学相关研究,其中肿瘤的肺转移微环境模型具有操作性强、成功率高、实验效果良好等优点。基于肿瘤转移前微环境这一概念,本文围绕肿瘤的肺转移前微环境实验动物模型的构建方法及评价指标展开综述。

淫羊藿总黄酮微颗粒对肺转移前微环境调控的影响

肿瘤转移是临床患者死亡的主要原因,转移前微环境假说的提出为肿瘤转移提供新的研究方向,通过靶向抑制肿瘤细胞衍生微颗粒对干扰素基因刺激因子(STING)信号的激活,有助于减少肿瘤转移。该研究通过构建重组腺相关病毒载体介导短发夹核糖核酸干扰STING(rAAV STING shRNA)肺转移前微环境及肺转移模型,考察STING干扰后对转移前微环境的影响及对淫羊藿总黄酮干预作用的影响。采用小鼠Lewis肺癌细胞(LLC)与淫羊藿总黄酮(EFs)孵育制备含药微颗粒,通过测定平均粒径、多分散系数、电位、释放表征淫羊藿总黄酮微颗粒(EFs-LLC-MPs)。通过Western blot分别考察微颗粒标志性蛋白、淫羊藿总黄酮微颗粒处理小鼠肺泡上皮细胞(MLE-12)后肺转移前微环境的各项指标变化。通过HPLC、流式测定载药量、MLE-12以及小鼠肺泡巨噬细胞(MH-S)对微颗粒的摄取情况。摄取实验结果表明,经鼻滴转染rAAV STING shRNA后,STING表达受到显著抑制,肺转移前微环境指标显著降低。Micro CT结果表明肺转移肿瘤、结节减少,同时淫羊藿总黄酮的抗转移作用受到影响。结果表明,微颗粒为膜结构的囊泡,粒径(373.17±3.18)nm,电位(-35.40±1.08)mV,测得的蛋白质量浓度562.62μg·mL^(-1),每微克蛋白载药0.0609μg,微颗粒可以被MLE-12、MH-S细胞摄取。结果表明,EFs-LLC-MPs处理MLE-12、MH-S细胞后能够降低肺转移前微环境指标纤连蛋白(fibronectin)、赖氨酰氧化酶(LOX)等蛋白的表达。基于以上研究结果,证实STING参与调控肺转移前微环境形成,并成功制备具有干预炎症转移前微环境潜力的淫羊藿总黄酮微颗粒,有望控制肿瘤转移。