人骨肉瘤自发性高肺转移模型的建立及其生物学特性初探

目的 在裸鼠体内建立人骨肉瘤自发性高肺转移模型 ,为探讨骨肉瘤肺转移机制和抗转移治疗提供尽可能与临床条件相近的实验工具 .方法 将裸小鼠腹腔筛选的人骨肉瘤高转移细胞亚群经裸鼠间传代 ,组织块原位植入胫骨骨髓腔 ,待裸鼠发生转移时 ,皮下扩增肺转移灶 ,再次原位移植 .如此循环 3个周期 .观察各代肿瘤细胞致瘤率、脏器转移及染色体数目变化情况 .结果 各代肿瘤细胞致瘤率均为 10 0 % ,肺转移率稳定在 80 %以上 ,转移途径单一 ;体内增殖能力及染色体数目稳定 .结论 建立了人成骨肉瘤自发性高肺转移模型 。

活体生物发光肺癌骨转移模型构建及其生物学特性

在全世界范围内,肺癌一直是恶性肿瘤死亡的主要原因之一.肺癌容易复发和转移,其中骨转移是其常见的转移方式.将稳转Luciferase和GFP编码基因的A549细胞接种入胫骨内,第7天生物发光成像检测到胫骨腔内明显肿瘤生长信号.随着时间延长小鼠呈现明显的类似晚期癌症患者的恶液质现象,并伴随持续性疼痛和触觉疼痛.HE染色显示骨髓腔及骨小梁间被大量肿瘤细胞填充,骨髓腔和骨质结构破坏严重.骨肿瘤组织中肿瘤转移相关基因Mta1、Mta3高表达.上述结果表明,构建的骨转移模型具有人体肺癌骨转移相似的生物学特性及病理学表现,可用于开展肺癌骨转移相关机制研究、筛选开发抗肿瘤药物.此肺癌骨转移模型可以多时间点、动态地观测活体肿瘤病灶的生长情况,具有极高的检测灵敏度和非常高的医学应用价值.

小鼠肿瘤肺转移模型及其应用进展

尽管肿瘤的早期诊断和治疗手段不断提高,转移依然是导致恶性肿瘤患者死亡的主要原因。肺由于独特的生理、病理特征,是恶性肿瘤最容易发生远端转移的器官。肿瘤肺转移具有难以预测性,并且可能导致无法逆转的损伤。目前尚未发现肿瘤转移的确切机制和针对其有效的靶向防治手段。中医药凭借独特的辨证论治理论体系,在肿瘤肺转移的防治方面已有显著进展,但其应用方法和具体作用机制等仍待深入的研究和探索。为此,需要更精准、更符合临床疾病发生发展规律的动物模型作为研究媒介,故建立模拟肿瘤患者肺转移的动物模型已成为肿瘤肺转移研究的关键。通过介绍尾静脉注射法、乳垫注射法、皮下注射法、骨髓注射法、组织块原位移植法和基因工程小鼠等常用的肺转移模型的构建方法、应用以及评价,以期能够为研究肺转移小鼠模型的选择提供参考,为肿瘤肺转移的早期诊断、预防治疗及其发病原因、内在分子机制探索等提供更好的研究平台。此外,小鼠肺转移模型的发展还需思维广度及深度的拓展,对现有的模型合理、灵活的叠加运用及多学科的交叉合作,以建立更符合临床实际的动物模型,获得更可靠的研究结果。

A549肺腺癌细胞株BALB/C-nu/nu裸鼠骨转移模型的建立

目的探讨A549肺腺癌细胞株裸鼠骨转移模型建立的可行性.方法选择健康6~8周龄Balb/c-nu/nu裸鼠20只,将20只Balb/c-nu/nu裸鼠采用经皮左心室内注射法,将A549肺腺癌细胞株接种于裸鼠体内,接种后饲养观察Balb/c-nu/nu裸鼠的成瘤情况.结果全部裸鼠均完成经皮心脏肺腺癌细胞的种植,共造模成功12只,占到全部裸鼠的60%.造模成功的裸鼠成瘤天数经SPSS分析,结果符合正态分布,得出裸鼠成瘤天数的均值、标准差、及可信区间.结论通过经皮左心室内注射A549肺腺癌细胞株,建立Balb/c-nu/nu裸鼠肺腺癌骨转移模型,方法可行性强,科学可靠,成膜率高,可用于肺腺癌骨转移发病机制的研究.

欣力康胶囊对Lewis肺癌模型小鼠生存期的影响及作用机制初探

目的:观察欣力康胶囊对尾静脉注射肺癌细胞建立的肺转移模型小鼠生存期和生存状态的影响,并分析其潜在的作用机制。方法:尾静脉注射造模,建立Lewis 肺癌(lewis lung carcinoma, LLC)转移模型小鼠,共分3 组,每组各10 只,分别为生理盐水组、低浓度欣力康组(0.08 g/mL)、高浓度欣力康组(0.40 g/mL)。分别观察3 组小鼠精神状态、摄食量、毛色光泽度以及生存期,同时荧光素酶报告基因法(Luciferase assay)分析欣力康胶囊对肿瘤相关信号转导与激活因子3(signal transducer and activator of transcription 3, STAT3)和核转录因子-κB(nuclear factor-κB, NFκB)信号通路的影响。结果:生理盐水组小鼠普遍表现为精神萎靡、嗜睡,毛色无光泽,基本无活动,且极少进食与饮水;低浓度欣力康组小鼠表现与生理盐水组相似;高浓度欣力康组小鼠精神状态明显改善,毛色相对光泽,活动性增强,且进食与饮水量明显增加。生理盐水组小鼠中位生存时间为17 d,低浓度欣力康组为17.5 d,高浓度欣力康组为21 d,高浓度欣力康组小鼠生存时间明显长于生理盐水组(P <0.05)。欣力康胶囊能够显著抑制肿瘤相关的STAT3 和NFκB 信号通路。结论:欣力康胶囊能够延长肺癌转移模型小鼠的生存时间,改善模型小鼠的生存状态,这可能和欣力康抑制STAT3 和NFκB 信号通路有关。

重组新城疫病毒对肝癌肺转移鼠的治疗效果

文章利用重组新城疫病毒(rNDA)治疗肝癌肺转移鼠,将免疫调节基因白细胞介素2(IL2)插入rNDV基因组,拯救获得rNDV-IL2。MTT法检验rNDV-IL2对肝癌HepG2细胞体外抑制效果。通过小鼠尾静脉注射H22肝癌细胞,构建肝癌细胞肺转移模型,腹腔注射rNDV和rNDV-IL2,治疗肝癌肺转移模型小鼠。结果表明,rNDV-IL2有效感染HepG2细胞,表达外源基因IL2并抑制HepG2细胞增殖。重组新城疫病毒rNDV-IL2治疗试验动物后,体内IL2基因表达量提高,重组新城疫病毒有效控制转移灶形成,且显著促进T细胞增殖,提高试验动物存活率,未治疗组、rDNV载体治疗组和rNDV-IL2治疗组30d成活率分别为0、50%和77.8%。

抑制巨噬细胞Act 1表达对黑色素瘤肺转移的影响

目的本文通过建立黑色素瘤肺转移模型,研究巨噬细胞NF-κB活化因子1(nuclear factor kappa B activator 1,Act 1)对黑色素瘤肺转移的影响。方法以抑制巨噬细胞Act 1表达的小鼠(anti-Act 1)为研究对象,通过尾静脉注射B16-F10细胞诱导肺转移模型,采用HE染色法检测小鼠肺组织的转移情况;免疫组化方法分析肿瘤细胞的增殖指数和白细胞、巨噬细胞的浸润情况。结果与C57小鼠相比,在尾静脉注射B16-F10细胞20 d后,实验组anti-Act 1小鼠肺组织转移灶面积、数量较少;Ki67、CD45、CD68表达量较低。结论靶向抑制巨噬细胞Act 1表达能够显著减轻黑色素瘤肺转移程度。

肿瘤肺转移建模方法及应用概述

由于目前肿瘤转移确切机制尚不明确,针对其有效靶向防治手段的缺失,转移成为恶性肿瘤患者死亡的主要原因。肺是恶性肿瘤最容易发生远处转移的器官之一,故建立肿瘤肺转移动物模型是研究肿瘤肺转移的关键,也为其他转移瘤的研究提供更加全面、有效的参考。本文旨在介绍目前常用的肿瘤肺转移模型,如尾静脉注射法、皮下注射法、原位注射法、组织块原位移植法和PDX (Patient derived xenografts)。概述其在科研领域中的最新应用,总结其优缺点,以期能够为肺转移实验研究选择合适的动物模型提供参考。

肿瘤转移前微环境动物模型的构建与评价方法研究进展

肿瘤转移是一个庞杂的过程,转移前微环境(PMN)概念的提出,揭示了肿瘤转移的关键因素。实验动物模型在模拟人类的疾病进程、开发新型药物及疗法和临床试验等方面有着巨大的贡献,现已被广泛用于研究肿瘤行为学相关研究,其中肿瘤的肺转移微环境模型具有操作性强、成功率高、实验效果良好等优点。基于肿瘤转移前微环境这一概念,本文围绕肿瘤的肺转移前微环境实验动物模型的构建方法及评价指标展开综述。

BrdU体内标记腺样囊性癌肺转移灶的实验观察

目的 动态观察非放射性标记物 Brd U在动物体内标记情况 ,为 Brd U取代 3H- Td R提供依据。方法 6只裸鼠经尾静脉分别注入 Acc- M细胞 1× 10 6 / 0 .2 m l,4周后腹腔注射 Brd U2 0 0 μg/ g体重 ,注射 0 .5 h～ 2 0 h期间分别取材固定 ,免疫组化 ABC法染色 ,统计标记指数。结果 所有裸鼠形成肺转移癌阳性细胞核标记指数 (L I)约2 0 %～ 40 %。单次注射 Brd U后 ,L I不随注射时间延长而增加。正常组织中 ,肝窦和肠绒膜上皮有标记阳性细胞 ,肾、胰、脾等器官未见。结论 Brd U体内标记法可替代 3H- Td R应用于细胞增殖研究 ,避免放射性污染 ,但在人体内标记 ,尚需进一步探索。

小动物活体生物发光成像技术在肿瘤转移研究中的应用

建立小动物活体生物发光成像技术,研究三氧化二砷(As2O3)抑制小鼠B16恶性黑色素瘤的肺转移作用的方法,比较活体生物发光成像技术与常规动物实验技术的优劣性;并探讨As2O3抗小鼠恶性黑色素瘤肺转移的可能机制。结果表明,活体生物发光成像技术可以非侵袭性地动态监测黑色素瘤B16细胞在小鼠肺部的转移过程以及评估As2O3的体内抑制B16肺转移的作用,且活体生物发光成像技术的检测灵敏度优于传统肺转移瘤结节计数技术;As2O3主要通过减低肿瘤新生血管形成、促使肿瘤组织坏死而发挥抗小鼠黑色素瘤肺转移的作用。

Kiss1抑制鼻咽癌细胞的转移能力及其机制研究

目的研究Kiss1对鼻咽癌转移能力的影响及其可能机制。方法首先通过裸鼠鼻咽癌肺转移模型观察移植瘤与转移瘤中Kiss1的表达差异,继而通过transwell实验在细胞水平检测Kiss1细胞过表达后的侵袭转移能力的变化,通过qRT-PCR和western-blot检测MMPs家族的相关分子表达变化。结果裸鼠实验发现Kiss1在肺转移瘤中的表达较移植瘤低,细胞实验发现过表达Kiss1后鼻咽癌细胞的转移能力降低,qRT-PCR和western-blot检测发现过表达Kiss1后MMP9表达降低。结论通过动物实验论证Kiss1基因可抑制鼻咽癌细胞的侵袭转移。推测MMP9是Kiss1的下游靶基因,在Kiss1基因抑制肿瘤转移过程中发挥着重要作用。

大鼠肝癌自发肺转移裸鼠模型的建立

目的 建立大鼠肝癌细胞系自发性肺转移裸鼠模型。方法 大鼠肝癌细胞系C5F皮下接种 4周龄雄性和 7周龄雌性BALB/CA裸鼠 ,观察皮下成瘤及肺部和腹腔脏器的大体转移灶形成情况 ,取可能转移的器官作组织学检查 ,肺组织连续切片并计数镜下转移灶。结果 裸鼠皮下成瘤率 10 /10 ,雌性裸鼠中肺表面肉眼可见明显转移灶 ,转移率为 6/6,肺表面大体转移灶中位数45 ,镜下转移灶中位数 75 5个 /裸鼠 ,腹腔及其脏器均未见转移灶。雄性裸鼠未见大体和镜下转移灶。结论 该细胞系在雌性BALB/cA裸鼠中能充分表达自发转移潜能 ,肺脏是其优势转移器官。成功建立的大鼠肝癌细胞自发肺转移裸鼠模型为肝癌转移抑制基因的染色体功能定位研究提供了适宜的动物模型。

两种黑色素瘤B16细胞肺转移小鼠模型的构建和比较

目的采用尾静脉接种法建立C57BL/6小鼠和KM小鼠两种黑色素瘤B16细胞肺转移动物模型,观察小鼠肺部成瘤过程,并对两种模型进行比较。制作肿瘤切片,通过HE染色分析两种肿瘤模型的组织病理学特征。方法培养B16黑色素瘤细胞至对数生长期时收集细胞,用生理盐水调整浓度为5×106/ml备用。将备好的B16细胞通过尾静脉接种小鼠,每只注射0.2 ml。接种后,两种小鼠每隔一定时间随机各取一只小鼠处死,解剖取肺,观察成瘤情况,计数肺表面的瘤结节数,测量瘤结节大小。以出现瘤结节开始计时,记录小鼠荷瘤时间。形成稳定的肿瘤模型后,制作肿瘤组织切片,HE染色进行病理学观察分析。结果 B16细胞尾静脉接种C57BL/6小鼠和KM小鼠,均能形成肺转移模型,但两种小鼠成瘤情况差异较大。KM小鼠的荷瘤时间比C57BL/6小鼠荷瘤时间长。HE染色结果显示黑色素瘤B16细胞在两种小鼠的肺组织中均形成巢团状的转移瘤,且两种模型肺转移瘤均多分布在支气管周围。结论通过对C57BL/6小鼠和KM小鼠两种黑色素瘤B16细胞肺转移小鼠模型的成瘤特点的分析比较,可以看出KM小鼠更适合用于研究新的肺肿瘤治疗药物,为研究黑色素瘤的发生发展提供依据。

蛋白酶活化受体1在B16F10瘤细胞体内外迁移中的作用

目的:研究蛋白酶活化受体 1(PAR1)在肿瘤细胞转移过程中的作用,评估凝血系统与肿瘤转移的关系。方法:首先通过逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)和 Western-blot 方法检测了 siRNA 对 B16F10 黑色素瘤细胞中 PAR1的内源表达的影响,然后在 PAR1 受 siRNA 干扰的情况下检测 B16F10细胞在体内外迁移能力,其结果与未受siRNA 干扰的试验结果相对照,来确定 PAR1 在 B16F10 瘤细胞体内外迁移中的作用。结果:75nmol/L 的 siRNA 干扰48h 后可明显抑制 B16F10中 PAR1 的表达,其转录水平抑制率是60%,蛋白水平的抑制率为85%;体外迁移实验表明,PAR1 表达量减少后与对照组相比细胞迁移能力减弱(P<0.01);动物实验表明.干扰 B16F10细胞中的 PAR1后,肿瘤细胞经血管迁移能力减弱,在肺部形成的转移瘤数目减少(P<0.01)。结论:PAR1 具有促进肿瘤细胞迁移作用。开发 PAR1 封闭剂有望抑制肿瘤转移,可作为研制抗肿瘤转移药物的新靶点。