肺ECM水凝胶抑制TGF-β1/Smad3通路减轻大鼠放射性肺纤维化

目的探索肺ECM水凝胶是否抑制TGF-β1/smad3通路,减轻放射性肺纤维化。方法20 Gy照射制备大鼠放射性肺纤维化模型,将27只大鼠随机分为3组(n=9):Control组、IR+NS组、IR+ECM组;Control组无处理,其余两组造模,在造模后0.5h,IR+NS组气管内注射0.9%氯化钠500μl,IR+ECM组注射等量肺ECM水凝胶,第16周取材,Elisa法测血清TNF-α、IL-6、TGF-β1,左肺固定后做病理染色(HE、Masson),右肺深低温保存做western blot、羟脯氨酸检测。结果与IR+NS组比,IR+ECM组大鼠血清TNF-α、IL-6、TGF-β1水平下降(P<0.05),肺系数降低(P<0.05),HE及Masson染色显示肺泡炎及纤维化程度改善,肺组织羟脯氨酸含量下降(P<0.05),TGF-β1、Smad3、p-Smad3、α-SMA蛋白表达下降(P<0.05)。结论肺ECM水凝胶能减轻大鼠放射性肺纤维化,可能是通过抑制TGF-β1/Smad3信号通路实现的。

肺细胞外基质水凝胶治疗大鼠放射性肺损伤的实验研究

目的探讨气管内注射肺细胞外基质(ECM)水凝胶对大鼠放射性肺损伤的疗效。方法脱细胞法制备肺ECM水凝胶,单次全肺20Gy照射复制放射性肺损伤模型。实验一:照射后30min将24只大鼠随机分为4组,分别注射肺ECM水凝胶0、300、500及800μl,比较注射后30min的死亡率、动脉血氧分压(PaO2),免疫荧光染色观察水凝胶分布。实验二:将18只大鼠分为对照组(正常大鼠)、照射组(照射+气管内注射生理盐水)及ECM组(照射+气管内注射肺ECM水凝胶),注射时间为照射后30min,剂量500μl,照射7d后行肺病理学检查,ELISA法检测血清中肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-6(IL-6)水平。结果气管内注射肺ECM水凝胶300或500μl不会影响大鼠PaO2(P>0.05),而800μl则会影响大鼠PaO2(P<0.05),300、500及800μl组均能在肺泡表面观察到绿色荧光,其中800μl分布最均匀;照射组及ECM组大鼠血清中TNF-α、IL-6水平较对照组升高(P<0.05),ECM组大鼠血清中TNF-α、IL-6水平较照射组降低(P<0.05)。结论肺ECM水凝胶能减轻放射性肺损伤早期的炎症反应,可作为一种新的治疗策略。