花生蛋白多肽饮料肽含量测定重复性差原因研究

对经TCA沉淀、用双缩脲法测定花生蛋白多肽饮料中肽含量重复性差原因进行研究,从沉淀时间、TCA浓度及与样品体积比、离心速度和时间、放置时间、显色时间及反应体系pH几方面因素进行探讨。研究表明,处理液中TCA浓度在0.30 mol/L^0.43 mol/L范围内,沉淀和放置时间对肽含量不具有显著性影响;在11 000 r/min,10 min下离心,静置30 min,与双缩脲1∶3反应,肽含量稳定。

脑蛋白水解物原料肽含量测定方法的改进

目的：优化脑蛋白水解物原料肽含量测定方法。方法：采用Agilent Zorbax Eclipse—AAA色谱柱（4．6mmxl50mm，5gm），流动相A：0．04mol／L磷酸盐缓冲液（pH7．80），流动相B：乙腈-甲醇-水（45：45：10），流速1．5ml／min，柱温40℃，检测波长：338nm，262nm，梯度洗脱。结果：各种氨基酸的浓度在15．0—120．0gg／ml范围内与峰面积呈良好的线性关系（r〉0．999），各种氨基酸的平均回收率为98．1％～103．6％。结论：该方法快速、简便、专属性强、重复性好，结果准确可靠，适用于脑蛋白水解物原料肽含量的测定。

三公膏传统工艺的改进及其多肽含量的测定

笔者采用酶解法改进三公膏传统生产工艺和采用双缩脲法测定三公膏中多肽含量。结果表明,在三公膏传统工艺基础上增加酶解、离心除杂、脱油等步骤,使生产周期从5天4夜缩短到2天左右,出膏率由3. 0%左右提高到8. 84%,多肽含量由11. 90%提高到40. 36%;双缩脲法测定多肽含量简便、准确。

双缩脲法测定罗非鱼源胶原蛋白肽含量的改良及应用评价

为探究罗非鱼源胶原蛋白肽含量的快速测定方法,以罗非鱼皮胶原蛋白肽为对照品,改良双缩脲比色法测定肽含量的操作方法,考察显色络合物最大吸收波长、线性拟合度高的肽和三氯乙酸(trichloroacetic acid,TCA)用量范围、pH值;在优化条件下对标准曲线进行重复性、精密度评价以及加样回收率实验;研究本方法对不同分子质量罗非鱼皮及鱼鳞胶原蛋白肽体系检测的适用性.结果显示,当胶原蛋白肽(标称分子质量3 kDa)质量浓度在0.3~1.5 mg/mL范围内,使用13%TCA溶液,调整体系pH 12.5,在波长545 nm处检测,吸光度与肽质量浓度线性拟合好(R2=0.999),标准曲线方程为y=0.1449x+0.0015;重复性和精密度实验得到相对标准偏差(relative standard deviation,RSD)分别为1.86%和1.84%,加样回收率分别为113.9%、109.7%,RSD分别为1.39%、1.00%;线性范围宽、重复性好、准确度高.将本法应用于不同种类罗非鱼肽产品体系的检测,加样回收率相差不大,偏差均较小,说明本法简便、快捷,适用于罗非鱼源肽含量的检测.

HPLC法测定重组人甲状旁腺素1-34肽含量及有关物质

目的:用高效液相色谱法测定重组人甲状旁腺素1-34原液和制剂的肽含量及有关物质。方法:采用 Zorbax 300SB-C_(18)色谱柱(250mm×4.6mm,5μm),以流动相 A:水-乙腈-三氟乙酸(990:10:1),流动相 B:水-乙腈-三氟乙酸(10:990:1)为流动相,梯度洗脱,流速1.0mL·min^(-1),检测波长215nm,柱温37℃。结果:重组人甲状旁腺素1-34浓度在26.25～841.5μg·mL^(-1)范围内,与峰面积的线性关系良好(r=0.9999),最低检测限为131ng,高、中、低3种浓度的平均回收率范围为99.5%～100.6%,RSD 为0.52%～0.72%(n=3)。结论:方法简便,快速,准确,可靠,可作为本品的质量控制方法。

鹿瓜多肽注射剂质量评价与研究

研究鹿瓜多肽注射剂的新鲜度、高相对分子质量物质、多肽含量测定、溶血与凝聚及生物学活性等指标,为鹿瓜多肽注射剂质量标准修订提供理论参考。首先,对影响终产品新鲜度的因素包括生物胺含量、黄曲霉毒素、甜瓜子原料的酸价和过氧化值等进行考察。建立丹磺酰氯柱前衍生-HPLC法测定鹿瓜多肽注射剂中8种生物胺的含量,方法学验证结果显示该法专属性、精密度、线性关系以及回收率等均良好,适用于鹿瓜多肽注射剂中生物胺类成分的检测,样品测定结果显示个别样品中检出较高浓度的尸胺;黄曲霉毒素、甜瓜子原料的酸价和过氧化值测定结果表明:部分生产原料甜瓜子存在霉变、酸败等问题,提示含动植物源性成分的多组分生化药质量标准应在新鲜度方面加强控制。其次,改进了鹿瓜多肽注射剂质量标准中高相对分子质量物质和多肽含量测定的方法。采用Tricine-SDS-PAGE电泳法代替凝胶色谱法测定高相对分子质量物质,提高了测定的准确性;采用试剂盒法代替福林酚法测定多肽含量,该法操作简便、专属性更强,可适用于高通量样品测定。最后,对鹿瓜多肽注射剂质量标准中缺失的溶血与凝聚、生物学活性测定项目进行了研究。研究结果显示,样品均无溶血与凝聚现象;鹿瓜多肽注射剂对单核巨噬细胞THP-1具有增殖抑制作用,且所检测样品的体外抗炎效果具有一定差异。优化后的检测方法更适用于鹿瓜多肽注射剂的质量检测,并为多组分生化药质量控制奠定了基础。

虫草花酶解液中肽含量的测定

基于双缩脲反应和紫外分光光度法,建立一种简便、快速测定虫草花酶解液中肽含量的方法。以样品与双缩脲试剂的比例、反应时间、反应温度为自变量,以吸光度为因变量,对检测方法进行优化,并进行了回收率试验和精密度试验。结果表明:最佳的反应条件为样品:双缩脲试剂(v/v)=1.5:1,室温下反应5 min。线性回归方程为y=0.0947x+0.0062(R2=0.9977),虫草花酶解前和酶解后的肽含量分别为(13.094±0.528)mg/m L和(17.318±0.914)mg/m L。回收率为(104.54±2.22)%,精密度试验的相对标准偏差(RSD)为2.37%。综上所述,该方法的准确度好、精密度高,适用于虫草花酶解液中肽含量的测定。

转移因子注射剂质量评价与研究

目的考察国产转移因子注射剂的质量现状及存在问题,对现行质量标准的科学性及检验方法进行研究,完善质量标准。方法转移因子注射剂为多组分生化药,是2013年国家药品计划抽验品种。通过对3个生产企业57批次转移因子注射剂,依据现行法定质量标准进行标准检验,运用多种统计学方法分析其质量总体水平,比较不同生产企业产品质量;通过探索性研究,建立并完善了多个检测方法,包括微量板-白细胞黏附抑制法、高效液相色谱-氨基酸差值法、酶解-反相离子对色谱法、高效液相色谱特征图谱法等,对该品种的质量状况及现行质量标准的可行性做出总体分析及评价。结果本次抽验中涉及的57批次样品按现行标准检验,合格率为91.2%。在5批不符合规定样品中,4批为转移因子注射液,均为可见异物不符合规定,1批为注射用转移因子,核糖含量不符合规定。法定检验与探索性研究结果之间存在显著差异,部分项目的检测反映出一些标准上的缺陷和问题;通过本次实验,对国家药品标准地升部十六册中收载的转移因子注射剂标准作了大幅提高和修订。结论从标准检验和探索研究结果的质量分析情况看,本品总体质量状况一般。探索性研究结果表明法定标准需提高,应采用更专属、准确、灵敏的方法全面控制产品质量。