抗M_2受体的抗肽段抗体对cAMP产生量和钙电流的影响

应用放射免疫分析方法及全细胞膜片钳技术研究了抗M2 受体细胞外第二环上的抗肽段抗体 (Abs )对豚鼠心室肌细胞cAMP产生量和内向钙电流 (ICa)的影响并同M受体激动剂的效应进行了比较。结果如下 :M受体激动剂carbachol(Carb10 μmol/L)和抗肽段抗体 (Abs 10 0nmol/L)两者均可抑制异丙肾上腺素 (Iso 0 .8μmol/L)所引起的cAMP量的增加〔Carb可使组织中cAMP从 (10 8.2± 7.0 )降为 (88.4± 7.2 )pmol/ (mg·min) ,Abs可使组织中cAMP从 (10 8.2± 7.0 )降为 (88.6± 5 .1)pmol/ (mg·min)〕及ICa的增加〔Carb可使ICa从 (5 3.5± 7 0 ) %降为 (13.0± 2 0 ) % ,而Abs可使ICa从 (6 6 .9± 10 .5 ) %降为(34 .5± 8 0 ) %〕。M受体阻断剂阿托品 (Atr)可以阻断Carb和Abs的以上效应。以上结果提示 :此抗肽段抗体同M受体激动剂一样可以通过减少 β受体激动剂所引起的cAMP的增加从而达到降低 β受体激动剂所引起的ICa的增加 ,由此可以对心室肌M2 受体产生作用。以上结果进一步提示自身免疫有可能参与了特发性扩张性心肌病的发病过程 ,而M2 受体细胞外第二环上的氨基酸肽段可能为免疫反应的靶作用区。

pICln蛋白肽段血清抗体和单克隆抗体的制备

目的:探讨高质量蛋白抗体的制备,为蛋白质的研究提供有效的工具。方法:用人绒毛膜促性腺激素(h CG)免疫BAL B/ c小鼠制备其单克隆抗体(Mb) ;以p ICln蛋白的18肽为抗原对兔进行免疫注射制备血清抗体,用EL ISA分别检测抗h CG的单克隆抗体腹水和p ICln蛋白的肽段血清抗体的效价及特异性。结果:肽段血清抗体在12 80 0倍稀释时也呈阳性反应且高特异性。结论:从制备方法的复杂程度、抗体的效价及特异性等方面看,肽段血清抗体的制备是一种方便有效地制备蛋白质研究用抗体的方法。