目的利用多肽合成技术制备抗胎儿血红蛋白（fetal hemoglobin，HbF）γ链的抗体，探讨其用于检测孕妇外周血中胎儿有核红细胞（nucleated red blood cell，NRBC）进行无创性产前基因诊断的可行性。方法针对胎儿血红蛋白的特异性抗原表...目的利用多肽合成技术制备抗胎儿血红蛋白（fetal hemoglobin，HbF）γ链的抗体，探讨其用于检测孕妇外周血中胎儿有核红细胞（nucleated red blood cell，NRBC）进行无创性产前基因诊断的可行性。方法针对胎儿血红蛋白的特异性抗原表位，选定第69～78位HbF-γ特异的11个氨基酸残基的肽段为免疫原，将人工合成的胎儿血红蛋白γ链的多肽与载体蛋白（KLH）偶联，佐剂乳化后免疫羊，制备羊抗人胎儿血红蛋白的抗血清，经蛋白G纯化，HbF特异性抗体标记、识别、显微操作法富集32例孕周为22—39周的孕妇外周血中的胎儿有核红细胞，引物延伸预扩增后，利用9个短串联重复序列（short tandem repeat，STR）的复合扩增方法对富集的阳性细胞进行扩增，用于孕妇外周血中富集的HbF阳性细胞胎儿来源的遗传学鉴定。结果经HbF多克隆抗体标记，32名孕妇外周血中均发现与HbF呈阳性反应的胎儿NRBC，并具有鲜明的形态学特征，光学显微镜下可见NRBC细胞质呈棕黄色，核浆比例较低，苏木素复染后胞核呈蓝色，明显区别于其他细胞，每份样本出现NRBC0．6～1．8个／ml，共计183个，平均为1．3个／ml，经STR多态性基因位点鉴定，准确率为90．6％。结论利用多肽合成技术制备的抗胎儿血红蛋白γ链的抗体能有效识别母血中的胎儿有核红细胞，可应用于无创性产前基因诊断，具备良好的应用前景。展开更多
文摘目的利用多肽合成技术制备抗胎儿血红蛋白（fetal hemoglobin，HbF）γ链的抗体，探讨其用于检测孕妇外周血中胎儿有核红细胞（nucleated red blood cell，NRBC）进行无创性产前基因诊断的可行性。方法针对胎儿血红蛋白的特异性抗原表位，选定第69～78位HbF-γ特异的11个氨基酸残基的肽段为免疫原，将人工合成的胎儿血红蛋白γ链的多肽与载体蛋白（KLH）偶联，佐剂乳化后免疫羊，制备羊抗人胎儿血红蛋白的抗血清，经蛋白G纯化，HbF特异性抗体标记、识别、显微操作法富集32例孕周为22—39周的孕妇外周血中的胎儿有核红细胞，引物延伸预扩增后，利用9个短串联重复序列（short tandem repeat，STR）的复合扩增方法对富集的阳性细胞进行扩增，用于孕妇外周血中富集的HbF阳性细胞胎儿来源的遗传学鉴定。结果经HbF多克隆抗体标记，32名孕妇外周血中均发现与HbF呈阳性反应的胎儿NRBC，并具有鲜明的形态学特征，光学显微镜下可见NRBC细胞质呈棕黄色，核浆比例较低，苏木素复染后胞核呈蓝色，明显区别于其他细胞，每份样本出现NRBC0．6～1．8个／ml，共计183个，平均为1．3个／ml，经STR多态性基因位点鉴定，准确率为90．6％。结论利用多肽合成技术制备的抗胎儿血红蛋白γ链的抗体能有效识别母血中的胎儿有核红细胞，可应用于无创性产前基因诊断，具备良好的应用前景。
