CTL识别的HLA-A2限制性人卵巢癌相关抗原OVA66表位的鉴定

目的: 鉴定CTL识别的HLA A2限制性人卵巢癌相关抗原OVA66表位。方法: 以细胞因子从外周血单个核细胞(PBMC)中诱导树突状细胞(DC), 通过形态学观察和流式细胞术进行鉴定。用表位预测法选取并合成两种肽分子, 分别脉冲成熟的DC, 并刺激HLA- A2+健康人自体CD8+ T细胞。1wk后, 用脉冲肽的自体PBMC以每 7d的间隔刺激该CD8+T细胞 3次。以共接受 4次抗原肽刺激的T细胞作为CTL,用乳酸脱氢酶(LDH)释放试验, 检测CTL对靶细胞的杀伤效应。用酶联免疫斑点法 (ELISPOT), 检测CTL中抗原特异性分泌IFN- γ的T细胞数。结果: 形态学和流式细胞术的结果显示, PBMC可诱生成熟的DC。肽L235(FLPDHINIV)诱导的CTL, 可特异性杀伤L235脉冲的T2细胞和OVA66+、HLA A2+的SW480细胞, 且L235诱导的特异性分泌IFN- γ的T细胞数增加。结论: 卵巢癌相关抗原OVA66的HLA A2限制性CTL表位L235, 能激发对肿瘤抗原的特异性免疫应答, 为制备肿瘤特异性肽疫苗奠定了实验基础。