紫贻贝蛋白酶解过程中呈味物质释放规律和呈味肽结构

通过氨基酸分析法、超滤法、凝胶层析柱法、反相高效液相色谱法、超高分辨四极杆—飞行时间质谱法等,研究紫贻贝蛋白酶解过程中各种呈味物质的释放规律及呈味肽的结构。结果表明,酶解过程中,大分子肽逐渐降解为小分子肽,游离呈味氨基酸含量、三甲胺含量升高,肽基呈味氨基酸的含量先上升后下降,总糖含量变化不明显。pH较低时有利于低分子量肽的生成。总酸含量在酶解1h、酶解温度为50℃时最高。在50℃、pH 6.5条件下酶解2h后,紫贻贝酶解液中低分子量肽的比例较高,有机酸、糖和呈味氨基酸的释放较充分。紫贻贝酶解液中海鲜风味肽的分子量<1kDa,其结构为Cys-Ser-Val-Gln-Asp-Gln或Gln-Ala-ValAsn-Phe-Thr,不同于任何已知序列的呈味肽,其呈味阈值为0.1mg/mL。

两性多肽结构影响鲍曼不动杆菌外膜通透性的实验研究

目的明确两性多肽结构对鲍曼不动杆菌(AB)外膜通透性的影响。方法 PCR扩增LysAB3基因及删除两性多肽结构的LysAB3-D基因,以pET28a(+)为载体构建重组质粒,在大肠杆菌BL21(DE3)中表达LysAB3及LysAB3-D,金属离子螯合亲和层析法纯化重组蛋白。将AB分别经LysAB3及LysAB3-D处理后,用扫描电子显微镜观察菌体形态,荧光显微镜观察菌体中是否有绿色荧光的聚集。结果经LysAB3处理后的AB,在扫描电子显微镜下可见菌体表面粗糙、皱缩,部分裂解为碎片;在荧光显微镜下可见菌体内有绿色荧光聚集。而删除两性多肽结构的LysAB3-D作用AB后,却没有上述现象的发生。结论两性多肽结构可增加AB外膜通透性,有助于裂解酶进入其中,达到抗菌目的。

用4肽结构字预测蛋白质二级结构

介绍一种新的方法来预测蛋白质二级结构.该方法是基于4肽结构字的基础上,利用4肽结构字建立多样性源同时结合二次判别法来预测一个序列片段中心残基的二级结构,最后对预测后的结果进行修正.对1645个蛋白进行检验,其21残基片段中心残基,10折交叉检验的结果Q3**(Q3score)达到79.68%.当考虑长程序列信息时,预测将会更精确.与其它预测软件相比较,显示了一定的优势.

肽结构天然调味品的特性及生产方法

该文介绍了肽结构天然调味品在食品中的主要功能,如参与热反映、改善品质和风味、增加厚味等,并论述了其种类和生产方法。

具有环状肽结构的生物表面活性剂--枯草菌脂肽钠

介绍了一种新型生物表面活性剂—枯草菌脂肽钠(KANEKA·Surfactin)。枯草菌脂肽钠是一种纯天然的表面活性剂,拥有独特的环状肽结构,从而得到了异常优异的乳化、分散等一系列表面活性性能。这一纯天然表面活性剂目前已经成功量产,并在化妆品、个人护理、洗涤等领域得到应用。

四肽重复结构域36(TTC36)通过增强IκBα的表达抑制NF-κB信号通路的激活抑制HK2人肾小管上皮细胞的炎症反应

目的研究四肽重复结构域(TTC36)对HK2人肾小管上皮细胞损伤的影响及潜在的机制。方法采用慢病毒感染法建立过表达TTC36的HK2稳转细胞系,转入空载质粒CMV-Flag作为对照。实时荧光定量PCR检测HK2细胞肿瘤坏死因子α(TNF-α)、诱导型一氧化氮合酶(iNOS)、白细胞介素6(IL-6)、CC趋化因子配体2(CCL2)、IL-1β以及核因子κB抑制物α(IκBα)、核因子κB p65(NF-κB p65)的mRNA水平。流式细胞术检测细胞凋亡,CCK-8法检测细胞增殖。Western blot法检测iNOS、TNF-α、胱天蛋白酶3(caspase-3)、裂解型胱天蛋白酶3(c-caspase-3)、Bcl2相关X蛋白(BAX)、增殖细胞核抗原(PCNA)、闭锁小带1(ZO-1)、核因子κB(NF-κB)信号通路中IκBα、NF-κB p65、磷酸化的NF-κB p65(p-NF-κB p65)的蛋白表达。放线菌酮(CHX)、蛋白酶体抑制剂MG132处理细胞后,Western blot法检测IκBα的蛋白表达量。结果与对照组相比,HK2细胞过表达TTC36后,炎症介质表达减少;细胞凋亡率降低以及c-caspase-3、BAX表达减弱;细胞增殖加快,PCNA和ZO-1的表达增强;IκBα表达上调,NF-κB p65、p-NF-κB p65表达下调,胞质和胞核中的NF-κB p65表达量均减少。CHX处理后过表达TTC36延长IκBα的半衰期,而MG132可恢复过表达TTC36带来的IκBα的变化。结论过表达TTC36抑制HK2细胞的炎症反应,减少细胞凋亡,促进增殖,加强紧密连接,其机制可能是通过增强IκBα的表达抑制NF-κB信号通路的激活从而减轻炎症反应带来的细胞损伤。

抗菌肽结构改造与人工智能研发策略

抗菌肽是一类广泛存在于生物体内的小分子肽,参与构成生物体先天免疫,可以有效抵抗病原微生物的入侵。抗菌肽具有广谱抗菌活性,且不易产生耐药性等特点,在治疗感染性疾病方面具有独特的优势,有望成为理想的抗感染药物。然而,由于部分抗菌肽尚存在稳定性差、毒性高等问题,限制了抗菌肽的广泛应用。由于人工智能算法能有效合成具有高稳定性、低毒性的抗菌肽,在探索天然抗菌肽中展现了巨大的潜力,因此本文简述了抗菌肽的抗菌机制、结构改造以及利用机器学习和深度学习等人工智能算法进行新型抗菌肽研发的优化策略,以期为抗菌肽结构优化及研发提供新思路。

敲低富含亮氨酸的三角状五肽重复结构蛋白(LRPPRC)促进激素抵抗性前列腺癌细胞凋亡

目的研究富含亮氨酸的三角状五肽重复结构蛋白(LRPPRC)对激素抵抗性前列腺癌细胞凋亡的影响。方法Western blot法检测前列腺癌DU145细胞和LNCaP细胞LRPPRC和雄激素受体(AR)蛋白水平;在DU145细胞中瞬转LRPPRC小干涉RNA(siLRPPRC);反转录PCR检测转染细胞LRPPRC mRNA水平;Western blot法检测LRPPRC蛋白水平;噻唑蓝(MTT)法检测细胞存活率;Hoechst33258法和流式细胞术检测细胞凋亡率;荧光素酶法检测细胞ATP水平;Western blot法检测Bcl2、BAX和胱天蛋白酶3(caspase-3)蛋白水平。结果 LRPPRC在DU145细胞和LNCaP细胞均高表达,但DU145细胞不表达AR。敲低DU145细胞LRPPRC水平后,细胞存活率显著降低、细胞凋亡增加、 ATP水平下降、活化的caspase-3蛋白水平增高、Bcl2蛋白水平降低。结论敲低激素抵抗性前列腺癌DU145细胞LRPPRC促进细胞凋亡。

犬瘟热病毒的结构多肽分析

差速离心和蔗糖密度梯度离心纯化经鸡胚成纤维细胞蚀斑克隆后的犬瘟热毒Ｓ＿８毒株，采用ＳＤＳ－ＰＡＥＧ电泳及Ｗｅｓｔｅｒｎｂｌｏｔ转印技术详细分析了犬瘟热病毒的结构多肽。回收凝胶中１条６３Ｋｄ的蛋白带，经３种不同的蛋白酶消化后，首次证明在犬瘟热病结构多肽中，融合蛋白Ｆ多肽的两个亚单位（Ｆ＿１和Ｆ＿２）是以胰蛋白酶的特异性水解位点精氨酸为桥梁连接形成Ｆ多肽的。试验结果表明，犬瘟热病毒主要包括Ｌ（２００．５Ｋｄ）、ＨＡ（７４Ｋｄ）、Ｐ（６８Ｋｄ）、Ｆ（６３Ｋｄ）、ＮＰ（５６Ｋｄ）、Ｍ（３５Ｋｄ）等６条结构多肽，同时下蛋白可在电泳中裂解成Ｆ＿１（４１Ｋｄ）和Ｆ＿２（２７Ｋｄ）２个亚单位。试验还发现其它３条分子量分别为５２Ｋｄ、４４Ｋｄ、３２Ｋｄ的病毒蛋白成分，它们是否均为病毒的结构多肽仍需深入研究。

豌豆低聚肽中具有发挥功能活性潜力的结构研究

考察了豌豆低聚肽的营养成分和抗外切酶消化结构。结果显示,豌豆低聚肽的蛋白含量为86.27%,低聚肽含量为81.82%,相对分子质量主要集中在140~1000 Da,占总比例的83.61%,必需氨基酸含量为27.61%,占总氨基酸含量的33.37%。谷氨酸含量最高,为16.61%,是形成焦谷氨酸的前体氨基酸。结构鉴定结果显示,焦谷氨酰赖氨酸二肽(pyroglutamyl-lysine,pEK)、焦谷氨酰谷氨酸二肽(pyoglutamyl-glutamate,pEE)和焦谷氨酰精氨酸二肽(pyoglutamyl-arginine,pER)3条序列结构首次在豌豆低聚肽中发现,含量分别为201.85,75.30和110.84 mg/100 g,且经过亮氨酸氨基肽酶和羧肽酶A消化后,含量均有所提高,表明这3条肽段具有抗外切酶消化能力,从而可能在体内发挥功能活性。

兔出血症病毒结构多肽的研究

纯化ＲＨＤＶ 经ＳＤＳＰＡＧＥ、硝酸银染色显示８ 条多肽，分子量分别为８５．１，７１．２，６４．５，６１．４，５７．３，５４．０，２９．２，２８．１ ｋＤ，免疫转印结果确认其中的６ 条多肽为病毒结构多肽，分子量分别为６４．５，６１．４，５７．３，５４．０，２９．２，２８．１ ｋＤ，且其相对百分含量分别为６５．８７，３．１７，３．９７，１０．３２，９．５２，７．１４％ ，表明分子量为６４．５ ｋＤ的多肽为病毒主要结构多肽。

灰斑古毒蛾核型多角体病毒结构多肽及核酸的研究

多角体蛋白结构多肽分析结果表明，ＯｅＮＰＶ多角体中可能有碱性蛋白酶存在；纯化病毒粒子ＳＤＳ－ＰＡＧＥ胶板用考马斯亮蓝和银染法分别检出１８和２２种多肽，分子量范围１．０８×１０４～１２．２×１０４Ｄ，其中５种主要多肽；核衣壳检出５条多肽，主要多肽分子量为３１０００±６５０Ｄ；ＰＡＳ法未检出ＯｅＮ－ＰＶ各结构多肽中有糖蛋白存在；ＯｅＮＰＶ－ＤＮＡ经ＥｃｏＲＩ、ＨｉｎｄⅢ、ＢａｍＨＩ单酶解分别产生９、１２、１０个片段，经ＥｃｏＲＩ／ＨｉｎｄⅢ双酶解产生２０个片段，求得ＯｅＮＰＶ－ＤＮＡ的平均分子量为６５．８×１０６Ｄ，ＯｅＮ－ＰＶ－ＤＮＡ大多呈缠绕卷曲线形分子，少数为环状分子，平均长度１９．７μｍ。

兔出血症病毒主要结构多肽的氨基酸分析

兔出血症病毒主要结构多肽的氨基酸分析王恒安，杜念兴，徐为燕（南京农业大学，南京２１００９５）关键词兔出血症病毒，结构多肽，氨基酸分析有关兔出血症病毒（ＲＨＤＶ）结构多肽的报道很多，有认为只有１条，有报道４条的，也有报道多达６条的。但其主要结构多肽为分...

兔出血症病毒主要结构多肽的纯化及免疫保护性试验

人工感染RHDV -NJ株病死兔肝经 - 5 0℃反复冻融 ,氯仿处理 ,PEG沉淀 ,差速离心 ,Sepharose - 4B柱层析得纯化病毒 ,纯化RHDV经SDS -PAGE、CuCl2 负染色后 ,切取主要结构多肽VP1(6 4.5KD)凝胶带 ,除去CuCl2 和SDS获得VP1,高效液相色谱鉴定只有一个蛋白峰 ,Western -Blotting ,HA和HI结果显示纯化VP1具有良好的抗原表位稳定性。无母源抗体的 3月龄兔 1 2只 ,平均分为 3组 ,阳性对照组每只兔接种 1mL肝组织灭活苗 ,试验组每只兔接种 1mL ,0 .5mg/mL的VP1溶液 ,空白对照组每只兔接种 1mL正常兔肝悬液 ,接种后1 0d攻毒 ,每只兔攻击 1 .5mL1∶1 0稀释的RHDV -NJ株肝毒悬液 ,攻毒保护性试验结果显示阳性对照组和试验组的攻毒保护率均为 1 0 0 % ,空白对照组的 4只兔攻毒后 48h内全部死亡 ,证明VP1为RHDV的保护性抗原。

斑点热群立克次体中国新分离株结构多肽的分析

本文用SDS—PAGE法分析了7个斑点热群立克次体国际标准株和5个斑点热群立克次体中国新分离株的结构蛋白,蛄果表明:7个斑点热群立克次体国标准株的结构蛋白除康氏立克次体Malish7株和India株蛋白图谱一致外,其余各株图谱各不相同。5个斑点热群立克次体中国新分离株的蛄构蛋白除BJ—90株和BJ—93株蛋白图谱一致,IM—TO—85株与国际标准株西伯利亚246株一致外,其余各株图谱各不相同。上述结果提示:结构蛋白图谱可以作为斑点热群立克次体的一个分类依据。

结核分枝杆菌Rv1009结构域多肽的免疫学特性研究

目的探讨结核分枝杆菌Rv1009结构域多肽的免疫学特性。方法选取33只小白鼠按照融合蛋白免疫情况的不同分为Rv1009组、BCG组和生理盐水组,采用酶联免疫吸附法(ELISA)检测方式对三组小白鼠中的血清特异性抗体滴速情况进行观察。分离小白鼠的脾淋巴细胞后采用体外抗原刺激的方式和MTT比色法对小白鼠脾淋巴细胞增殖指数进行观察。采用ELISA方法检测淋巴细胞悬液中鼠源性γ干扰素(IFN-γ)、白细胞介素-10(IL-10)、白细胞介素-12(IL-12)的产生水平。结果经过研究后发现,结核分枝杆菌Rv1009结构域多肽免疫小白鼠血清特异性抗体的滴速为1:13800,淋巴细胞增殖的指数为(2.42±0.17),明显高于生理盐水组小白鼠的淋巴细胞增值指数(P<0.05)。在ELISA检测方面,结核分枝杆菌Rv1009结构域多肽免疫组小白鼠的IFN-γ、IL-10、IL-12产生水平分别为(1422±31)、(502±10)、(310±12)ng/L,明显高于生理盐水组小白鼠的IFN-γ、IL-10、IL-12产生水平(P<0.05)。结论结核分枝杆菌Rv1009结构域多肽在体外实验研究的过程中效果更好,具有极强的临床研究价值。

柞蚕核型多角体病毒结构多肽的分析

本文应用电子显微镜、离心分离沉淀和不连续的垂直板 SDS-PAGE等生物化学的分析方法和技术,对柞蚕核型多角体病毒(Antheraea pemyi NuclearPolyhedrosis Virus 简称 APNPV)的多角体蛋白、病毒粒子的结构多肽进行了分析。结果表明,纯化的多角体形态完整,病毒粒子具有典型的昆虫杆状病毒紫外吸收特征;经 EDTA 和热处理的多角体蛋白仅有一条主带,其分子量为29,500±500d;多角体蛋白的氨基酸组成中富含 Asp 和 Glu,而 His 的含量较低(Cys 和 Met未精确测定);病毒粒子至少有23种结构多肽,其分子量范围在17,000～77,900d之间,其中有5条主要的结构多肽。

兔出血症病毒结构多肽分析

粗提病毒经Ｓｅｐｈａｒｏｓｅ４Ｂ层析后，获得纯化的兔出血症病毒（ＲＨＤＶ）。提纯病毒经过ＳＤＳ－ＰＡＧＥ经考马斯亮蓝染色显示Ａ、Ｂ、Ｃ、Ｄ、Ｅ、Ｆ和Ｇ７条多肽，凝胶扫描显示Ａ为ＲＨＤＶ主要结构多肽。用多抗和单抗作免疫转印分析，证实Ａ、Ｂ、Ｃ、Ｄ、Ｅ、和Ｇ为结构多肽，此６条结构多肽间的抗原关系十分密切。

蜀柏毒蛾核型多角体病毒结构多肽及基因组酶切分析

对蜀柏毒蛾核型多角体病毒 (ParocneriaorientaNuclearpolyhedrovirus,简称PaorNPV)形态结构、结构多肽、限制性内切酶图谱等特性进行了研究。采用不连续系统垂直板SDS PAGE分析了PaorNPV的多角体蛋白、病毒粒子结构多肽。应用 5种限制性内切酶对PaorNPV基因组DNA进行了酶切分析。结果表明 :经热处理的多角体蛋白仅有一条带 ,分子量为 31.5kD ,不经热处理的多角体蛋白有三条带 ,分子量分别为 31.5kD、2 9.1kD、2 8.6kD ;病毒粒子包含有 2 5种结构多肽 ,分子量范围在 17.6 114.6kD之间。PaorNPVDNA经BamHI。EcoRI、HindⅢ、PstI和XhoI酶切分别产生 9、12、12、12和 14条片段。基因组大小平均为 12 4 .6kb。