利用肽配体库分析蛋清中低丰度蛋白质组

利用肽配体库技术(CPLL)研究了蛋清中的低丰度蛋白质组。考察了盐浓度和洗脱顺序差异对CPLL富集效率的影响。结果表明:盐浓度越高,蛋清蛋白质溶液的离子相互作用越强。利用洗脱溶液解离差异,采用先HOS(有机水溶液)后尿素CHAPS(3-[3-(胆酰胺丙基)二甲氨基]-1-丙磺酸内盐)的洗脱顺序,溶菌酶能够得到高效分离。保持蛋清的原p H 8.8,25 mmol/L KH2PO4,150 mmol/L Na Cl,尿素CHAPS洗脱,是CPLL提供高效富集的前提。通过分析CPLL富集前后的十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDSPAGE)条带差异,采用线性离子阱(LTQ)质谱在蛋清中检出45种低丰度蛋白质,其中两种未见报道。对蛋清中低丰度蛋白质亚细胞的定位分析发现,蛋清蛋白质的分泌蛋白居多。研究结果表明,CPLL技术能够实现蛋清中低丰度蛋白质的高效富集,分析深度达到亚细胞水平。

组合肽配体库技术富集蛋白研究进展

低丰度蛋白是生物体中重要的活性物质,参与新陈代谢、转录和翻译等多种生理及病理过程,因此对低丰度蛋白的研究具有重要意义。组合肽配体库技术(CPLL)是富集低丰度蛋白的一种有效方法,通过CPLL富集作用可以实现低丰度蛋白的检测与鉴定。该文总结了CPLL应用于不同领域中(包括人体、动物源、植物源等蛋白研究方面)低丰度蛋白样品的富集研究,可为CPLL的进一步应用提供参考。

用蛋白质组学方法分析先兆子痫孕妇血清差异蛋白表达和急性反应蛋白

目的用蛋白质组学方法寻找先兆子痫患者血清蛋白的差异表达。方法 5例重度先兆子痫患者血清和5例正常妊娠对照血清分别混合。每个混合样本血清用亲水亲脂柱(hydrophilic-lipophilic balance,HLB)和多肽配体库磁珠(peptide ligandlibrary bead,PLLB)方法去除表达丰富蛋白,使低含量蛋白表达,洗脱液用1D胶联合液相色谱质谱串联技术(liquidchromatography tandem mass spectrometry,LC-MS/MS)对蛋白表达进行定量分析;结果 HLB方法共有28种蛋白发生差异表达;PLLB方法共有51种蛋白发生差异表达,包括白介素17F(IL-17F)和铜蓝蛋白(ceruloplasimin,CP)等。结论 PLLB联合1D胶-LC-MS/MS是鉴定血清中差异表达蛋白的一种有效方法;炎性反应因子可能与先兆子痫的发病机制有关。

鸡蛋蛋清中的低丰度蛋白质研究进展

鸡蛋蛋清中含有丰富的蛋白质。近年来,随着研发手段的进步,利用蛋白质组学的方法,蛋清中许多新的低丰度蛋白质被发现。本文综述了该研究领域中重要突破性技术,包括低丰度蛋白质的富集技术以及应用于蛋白质组学中的最新色谱质谱技术方法,并展望了鸡蛋蛋清中低丰度蛋白质研究的方向。

鸡蛋黄中蛋白质研究进展

鸡蛋蛋黄中蕴含丰富的蛋白质,占蛋黄总重量的17%,其种类繁多,并且具有特殊的功能特性。目前最新的鸡蛋蛋黄蛋白质组学研究,通过组合式肽配体库(CPLL)在蛋黄中发现了255种蛋白质[1]。但在蛋黄贮存期间,时间、温度以及理化因素等对蛋黄蛋白质变化的影响,目前报道的还比较少。本文介绍了蛋黄蛋白质组学的研究状况、鲜蛋与贮存蛋的蛋白质在蛋清和蛋黄间的分布情况、鸡胚胎发育期间蛋黄蛋白质含量变化以及辐照对蛋黄的影响等,并对蛋黄蛋白质的研究前景进行了展望。